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(浙江選考)2021版新高考生物一輪復習 專題11 生物技術(shù)實踐 第32講 酶的應用 植物的組織培養(yǎng)教學案 新人教版

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1、第32講 酶的應用 植物的組織培養(yǎng) 知識內(nèi)容 考試要求 知識內(nèi)容 考試要求 1.果汁中的果膠和果膠酶 實驗與探究能力 3.植物的組織培養(yǎng) 實驗與探究能力 2.α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測 實驗與探究能力  果膠和果膠酶 1.果膠:果膠是植物細胞壁的主要成分,由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成。鑒別果膠的簡易方法是用乙醇。 2.果膠酶 (1)來源:黑曲霉、蘋果青霉。 (2)組成:果膠酶并不是特指某一種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱,主要包括果膠酶和果膠甲酯酶。 (3)作用:將果膠分解成可溶性的分子,使出汁率提高,也使渾濁的果汁變得澄清。 3.

2、探究利用蘋果或山楂勻漿制作果汁的最佳條件的實驗 (1)實驗原理 ①果膠半乳糖醛酸+半乳糖醛酸甲酯。 ②果膠酶的活性受溫度(或pH)的影響,處于最適溫度(或pH)時活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正相關。 ③果膠不溶于乙醇。 (2)實驗流程設計 (3)實驗結(jié)論:果膠酶能分解果膠,提高果汁的澄清度。 (1)果膠由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成(√) (2)鑒別果膠最簡便的方法是加入乙醇(√) (3)黑曲霉和蘋果青霉屬于原核生物,可用于生產(chǎn)果膠酶(×) (4)果膠酶和果膠甲酯酶均可水解果膠,與制備果汁有關(√) (5)通過出汁率和澄清度分析可判

3、斷果膠酶的活性(√) (6)果膠酶常存在于動物細胞,用于消化纖維素等營養(yǎng)成分(×) 關于果膠酶的三個實驗的變量分析 實驗名稱(目的) 自變量 因變量 注意事項 探究溫度對果膠酶活性的影響 溫度 果汁量(澄清度) ①底物和酶在混合時的溫度是相同的; ②溫度梯度越小,實驗結(jié)果越精確; ③果泥和果膠酶用量在各個試管中應相同; ④pH應為最適pH 探究pH對果膠酶活性的影響 pH 果汁量(澄清度) ①溫度應為最適溫度; ②pH梯度可用NaOH和鹽酸調(diào)節(jié); ③用玻璃棒攪拌使反應充分進行 探究果膠酶的用量 果膠酶的用量 果汁量(澄清度) ①制備蘋果勻漿后迅

4、速加熱,使蘋果勻漿中果膠酶變性; ②溫度、pH應為最適且保持不變 [題組沖關] 1.如圖表示某研究小組在探究果膠酶的用量時的實驗結(jié)果。下列有關說法不正確的是(  ) A.在AB段限制反應速率的主要因素是酶的用量 B.在BC段限制反應速率的因素可以是溫度、pH、底物濃度 C.在AC段增加底物濃度,可以明顯加快反應速率 D.在該實驗給定條件下,果膠酶的最佳用量是B點對應的值 解析:選C。應從酶的用量和活性、底物的濃度兩方面進行分析。由曲線圖可以看出,在AB段,隨著酶的用量的增大,酶促反應速率加快,說明此階段限制反應速率的主要因素是酶的用量;此時增加底物濃度,反應速率不會明顯加

5、快。在BC段,隨著酶的用量的增大,酶促反應速率不再加快,此時底物濃度成為限制反應速率的因素之一,增加底物濃度,反應速率會加快。 2.工業(yè)生產(chǎn)果汁時,常常利用果膠酶破除果肉細胞壁以提高水果的出汁率,為研究溫度對果膠酶活性的影響,某同學設計了如下實驗: ①將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管,在10 ℃水浴中恒溫處理10 min(如圖甲)。 ②將步驟①處理后的果膠酶和蘋果泥混合后,再次在10 ℃ 水浴中恒溫處理10 min(如圖乙)。 ③將步驟②處理后的混合物過濾,收集濾液,測量果汁量(如圖丙)。 ④在不同溫度條件下重復以上實驗步驟,并記錄果汁量,結(jié)果如表所示: 溫度/℃ 10 20

6、 30 40 50 60 70 80 果汁量/mL 8 13 15 25 15 12 11 10 根據(jù)上述實驗,請分析回答下列問題: (1)果膠酶能破除細胞壁,是因為果膠酶可以促進細胞壁中________的水解。 (2)實驗結(jié)果表明,當溫度為________左右時,果汁量最多,此時果膠酶的活性________。當溫度再升高時,果汁量降低,說明________________。 (3)實驗步驟①的目的是____________________________________________________ ________________________。

7、 解析:(1)植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一是果膠,而果膠酶則是水解果膠的一類酶的總稱。(2)通過表中數(shù)據(jù)可知:在40 ℃時,產(chǎn)生的果汁量最多,在題中所給的溫度范圍內(nèi),40 ℃時酶活性最高。當溫度再升高時,出汁量降低,酶的催化活性降低。(3)因為酶具有高效性,使底物與酶的溫度都達到預定值后再混合,避免它們事先發(fā)生反應,而引起結(jié)果不準確。 答案:(1)果膠 (2)40 ℃ 最高 酶活性降低  (3)避免果汁和果膠酶混合時影響混合物溫度,從而影響果膠酶活性  α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測 1.固定化酶的概念和方法 (1)概念:將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某

8、種介質(zhì)上,使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。 (2)方法:吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。 2. α-淀粉酶的固定化、淀粉水解的測定實驗 (1)α-淀粉酶的固定化原理 ①α-淀粉酶作用的最適條件:最適pH為5.5~7.5,最適溫度為50~75__℃。 ②方法:吸附法。 ③介質(zhì):石英砂。 (2)淀粉水解的檢測原理 淀粉糊精麥芽糖葡萄糖 遇碘顯藍色 遇碘顯紅色 遇碘不顯色 (3)實驗過程 固定化α-淀粉酶,裝入注射器中 ↓ 以0.3 mL/min的流速滴加淀粉溶液過柱 ↓ 流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液 ↓ 滴加KI-I2溶液,觀察顏色,用水

9、稀釋1倍后再觀察顏色 ↓ 以10倍柱體積的蒸餾水洗滌固定化柱,放置在4 ℃冰箱中,幾天后重復實驗 (4)實驗結(jié)果 對照組 實驗組 0.5 mL淀粉溶液 0.5 mL流出液 幾天后重復實驗中0.5 mL流出液 加KI-I2 變藍 紅色 紅色 再加水稀釋1倍 淺藍 淺紅色 淺紅色 (5)實驗結(jié)論:固定化α-淀粉酶能將淀粉水解成糊精。 (1)固定化酶是通過物理或化學的方法將非水溶性的酶固定在某種介質(zhì)上,使之成為可重復使用的酶制劑(×) (2)酶分子被固定化后不再具有酶的專一性(×) (3)酶分子被固定化后穩(wěn)定性較酶在水溶液中穩(wěn)定(√) (4)α-淀

10、粉酶分解淀粉為糊精,糊精遇碘液變紫色(×) (5)固定化酶技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)酶的永久利用,在工業(yè)生產(chǎn)中具有極大的推廣價值(×) (6)固定化酶的方法有吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法(√) (7)制備固定化柱時,用10倍體積蒸餾水洗滌的目的是洗去未吸附的α-淀粉酶(√) (8)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測”實驗中,采用的是枯草桿菌的α-淀粉酶,其最適pH為5.5~7.5,最適溫度為50~75 ℃(√) (9)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測”實驗結(jié)束后,需要將固定化酶柱置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中,以保證酶的活性(×) 1.酶的固定化方法及適用對象 名稱 原理

11、 圖示 包埋法 將微生物細胞均勻地包埋在不溶于水的多孔性載體中 化學結(jié)合法 利用共價鍵、離子鍵將酶分子或細胞相互結(jié)合,或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上 物理吸附法 通過物理吸附作用,把酶固定在纖維素、瓊脂糖、多孔玻璃或離子交換樹脂等載體上 2.兩次用10倍體積的蒸餾水洗滌注射器的目的比較 洗滌過程 目的 在固定α-淀粉酶后,用10倍體積的蒸餾水洗滌注射器 除去未吸附的游離α-淀粉酶 實驗結(jié)束后,用10倍體積的蒸餾水洗滌注射器 洗去殘留的淀粉溶液和產(chǎn)物 3.證明洗滌固定化淀粉酶柱的流出液中沒有淀粉酶的方法 在試管中加入1 mL可溶性淀粉,再加入幾滴洗滌固定化淀粉酶柱的

12、流出液,混合后用手握住試管增加溫度,幾分 鐘(充分反應)后加1~2滴KI-I2指示劑,如仍顯藍色,說明流出液中沒有淀粉酶。 [題組沖關] 1.下列關于α-淀粉酶的固定化過程的敘述,錯誤的是(  ) A.首先要在燒杯中將5 mg α-淀粉酶溶于4 mL蒸餾水中 B.再將5 g石英砂加入上述燒杯中,不時攪拌30 min C.隨后將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門心但并不封住的注射器中 D.最后用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器,除去那些未吸附的游離淀粉酶 解析:選C。α-淀粉酶的固定化酶的制備應該是將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門心并用夾子封住的注射器中,而不是不封住的注射器中。

13、 2.(2020·浙江模擬)在20世紀50年代,酶已經(jīng)大規(guī)模地應用于各個生產(chǎn)領域,到了70年代又發(fā)明了固定化酶技術(shù)。請回答下列相關問題: (1)固定化酶技術(shù)將酶固定在____________上,使酶既能與____________接觸,又能與____________分離,同時固定在載體上的酶還能____________。常用的固定方法有吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。 (2)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測實驗”中: A.α-淀粉酶固定在____________上,使用了圖中方法____________(填出號碼及名稱)。 B.實驗中,用滴管滴加淀粉溶液時,使淀粉溶液以

14、____________的流速過固定化酶柱,目的是__________________________。 C.灌注了固定化酶的注射器在使用完后要____________此柱,并放置在____________中保存。 解析:(1)固定化酶技術(shù)將酶固定在不溶于水的載體上,使酶既能與反應物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時固定在載體上的酶還能反復利用。(2)A.α-淀粉酶固定在石英砂上,使用了圖中方法乙(吸附法)。B.實驗中,用滴管滴加淀粉溶液時,使淀粉溶液以0.3 mL/min的流速過固定化酶柱,目的是使淀粉充分與酶接觸。C.灌注了固定化酶的注射器在使用完后要用10倍體積的蒸餾水洗滌此柱,并放置在4

15、℃冰箱保存。 答案:(1)不溶于水的載體 反應物 產(chǎn)物 反復利用 (2)A.石英砂 乙(吸附法) B.0.3 mL/min 使淀粉充分與酶接觸 C.用10倍體積的蒸餾水洗滌 4 ℃冰箱  植物的組織培養(yǎng) 1.植物組織培養(yǎng)的原理 (1)理論基礎:植物細胞具有全能性。 (2)植物組織培養(yǎng)的基本過程 (3)植物組織培養(yǎng)影響因素 ①選材:不同植物組織或同一植物組織的不同部分,培養(yǎng)的難易程度差別很大,菊花的組織培養(yǎng),一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。 ②培養(yǎng)基:植物組織培養(yǎng)需要適宜的培養(yǎng)基,常用的是MS培養(yǎng)基,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加生長素和細胞分裂素兩種植物激素。

16、實驗中使用的生長素類似物是萘乙酸(NAA),細胞分裂素類似物是芐基腺嘌呤(BA)。 ③其他條件:pH、溫度和光照等條件對植物組織培養(yǎng)也很重要。 2.菊花組織培養(yǎng)過程 (1)制備MS固體培養(yǎng)基:配制好的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌。 (2)外植體消毒:自然生長的莖離體→用70%的乙醇浸泡10 min→再用5%的次氯酸鈉浸泡5 min→再用另一5%的次氯酸鈉浸泡5 min→最后用無菌水清洗。 (3)接種:始終在酒精燈火焰旁進行,對接種工具要用灼燒滅菌。 (4)生芽培養(yǎng) ①培養(yǎng)基:發(fā)芽培養(yǎng)基(MS+BA+NAA); ②培養(yǎng)條件:溫度為18~25 ℃;光照≥14.5 h/d;pH為5.8~6

17、.0; ③培養(yǎng)標準:健壯的叢狀苗。 (5)生根培養(yǎng) ①培養(yǎng)基:生根培養(yǎng)基(MS+NAA); ②培養(yǎng)條件與發(fā)芽培養(yǎng)相同。 (6)煉苗 ①培養(yǎng)基:草炭土或蛭石; ②培養(yǎng)條件:2~3 d內(nèi)濕度控制為80%;2~3 d后逐漸降低濕度至自然濕度。 (7)移栽(定植) (1)植物組織培養(yǎng)最常用的培養(yǎng)基是LB培養(yǎng)基(×) (2)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素等激素的種類和摩爾濃度可以誘導器官進行不同的分化(×) (3)以菊花為材料進行組織培養(yǎng),首先在生根培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上獲得叢狀苗(×) (4)萘乙酸和芐基腺嘌呤分別是生長素和細胞分裂素類似物(√) (5)配制

18、母液可以減少某些元素因量小而造成的誤差(√) (6)使用時,萘乙酸一般用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解,芐基腺嘌呤需用少量0.1 mol/L鹽酸溶解(√) (7)菊花切段進行組培時,每個切段上必須保留一個頂芽(×) (8)植物組培的最適溫度是18~25 ℃,每天的光照不少于14.5 h(√) (9)生根的叢狀苗需要移到草炭土或蛭石上進行濕度鍛煉,直至降至自然濕度(√) (10)使用自然莖段進行組織培養(yǎng),一般先在70%乙醇中浸泡,再放入5%次氯酸鈉中浸泡兩次,然后用無菌水清洗后,將其培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中(√) 1.MS培養(yǎng)基的成分及各成分的作用 成分 作用 微量元素和大量

19、元素 提供植物細胞生活所必需的無機鹽 蔗糖 提供碳源,維持細胞滲透壓 甘氨酸、維生素、 煙酸、肌醇 滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求 2.脫分化和再分化的比較 過程 特點 條件 脫分化 外植體成為愈傷組織 排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞團 離體、營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素和其他適宜條件 再分化 愈傷組織成為叢芽或胚狀體結(jié)構(gòu) 有根、芽或有生根發(fā)芽的能力 3.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的作用 生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素,其作用及特點如表所示。 激素使用 實驗結(jié)果 使用順序 先使用生長素

20、,后使用細胞分裂素 有利于細胞分裂,但細胞不分化 先使用細胞分裂素,后使用生長素 細胞既分裂又分化 同時使用 分化頻率提高 生長素用 量和細胞 分裂素用 量的比例 比值高 利于根的分化、抑制芽的形成 比值低 利于芽的分化、抑制根的形成 比值適中 促進愈傷組織的生長 植物組織培養(yǎng)實驗操作的易錯點 (1)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實驗中,應選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。 (2)外植體消毒:所用消毒劑為70%的酒精和5%的次氯酸鈉溶液,所使用的清洗液是無菌水。 (3)組織培養(yǎng)時不用天然激素而是用人工合成的激素,是因為植物中存在相應的分解天然激素的酶而沒

21、有分解相應的人工合成激素的酶,所以天然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時間短,人工合成激素作用和存在的時間長,效果明顯?!? [題組沖關] 1.下列關于植物組織培養(yǎng)的說法,錯誤的是(  ) A.植物細胞進行組織培養(yǎng)時需要無機養(yǎng)料 B.植物細胞進行組織培養(yǎng)時不需要有機養(yǎng)料 C.離體的植物組織細胞的脫分化和再分化主要受激素的影響 D.溫度、培養(yǎng)基的滲透壓等也影響植物組織培養(yǎng) 解析:選B。植物組織培養(yǎng)過程中,離體的植物組織和細胞,對營養(yǎng)、環(huán)境等條件要求相對特殊,除需要無機養(yǎng)料和生長調(diào)節(jié)物質(zhì)外,還需要有機養(yǎng)料,如蔗糖等,并且需要一定的外界條件。 2.菊花組織培養(yǎng)的部分過程如下圖所示。據(jù)圖回答

22、下列問題: (1)過程①利用________(填“較高”或“較低”)滲透壓,使原生質(zhì)體產(chǎn)量大幅度提高,但存活率卻因此而降低,分析降低的原因可能是________________________。過程②細胞壁形成后,可逐漸__________滲透壓。 (2)幼苗莖段帶葉,就會帶有________,也就有了分生組織,所以不通過____________________階段就可直接形成叢狀苗。過程③應在______________(從具體功能角度)培養(yǎng)基中進行,全過程對光照要求是________。 A.早期每天24 h光照,后期每天24 h黑暗 B.每天一定時長的光照 C.早期每天24

23、h黑暗,后期每天24 h光照 D.每天24 h黑暗 解析:(1)過程①為由菊花幼苗莖切段得到原生質(zhì)體,可以利用較高的滲透壓,但滲透壓較高,會導致細胞過度失水損傷、死亡,從而使原生質(zhì)體產(chǎn)量大幅度提高,但存活率卻因此而降低。因此過程②細胞壁形成后,可逐漸降低滲透壓。 (2)幼苗莖段帶葉,就會帶有腋芽、芽,也就有了分生組織,所以不通過愈傷組織階段就可以直接形成叢狀苗。過程③應在發(fā)芽培養(yǎng)基中進行,全過程對光照的要求是每天一定時長的光照。 答案:(1)較高 細胞過度失水損傷、死亡 降低 (2)腋芽、芽 愈傷組織、脫分化 發(fā)芽(生芽) B 1.下列關于果膠酶的說法,不正確的是(  )

24、A.果膠酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì) B.果膠酶并不是唯一能水解果膠的酶 C.有些微生物可用于生產(chǎn)果膠酶 D.果膠酶是一種能完全水解果膠的酶 解析:選D。果膠酶的化學本質(zhì)為蛋白質(zhì);果膠不是只能被果膠酶水解,果膠甲酯酶也能水解果膠,二者共同作用才能使果膠完全降解。由于微生物代謝旺盛,繁殖快,培養(yǎng)方便,因此常被利用進行大規(guī)模生產(chǎn)果膠,生產(chǎn)果膠酶的微生物主要是霉菌,如黑曲霉、蘋果青霉等。 2.用吸附法將α-淀粉酶固定在石英砂上,當一定濃度的淀粉溶液流過固定化酶柱后,柱底端收集到的溶液中,加入KI-I2溶液,其顏色變化為(  ) A.顯藍色 B.顯紅色 C.不顯色 D.流出液中因含淀粉酶,使

25、得溶液顏色顯紫色 解析:選B。一定濃度的淀粉溶液流過固定化α-淀粉酶酶柱后,淀粉可轉(zhuǎn)化為糊精,糊精遇KI-I2溶液顯紅色,酶經(jīng)固定化后,不能從柱底端流出。 3.用菊花的莖尖組織培養(yǎng)可培育出試管苗。下面關于這一過程的說法正確的是(  ) A.進行培養(yǎng)時,一次性加足營養(yǎng)物質(zhì)以防止污染 B.整個培養(yǎng)過程應在光下進行,有利于長葉 C.要根據(jù)培養(yǎng)過程的實際情況,更換培養(yǎng)基 D.整個培養(yǎng)過程都應在密閉條件下進行,以免雜菌的污染 解析:選C。一般來說,從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織時,由于培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分已接近耗盡,必須更換培養(yǎng)基。脫分化培養(yǎng)時不必見光,因為在無光條件下愈傷組織長得更快。再分化時

26、可見光,試管苗應該進行見光培養(yǎng)。 4.(2019·浙江4月選考)回答與果膠和果膠酶有關的問題: (1)通常從腐爛的水果上分離產(chǎn)果膠酶的微生物,其原因除水果中果膠含量較高外,還因為________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)為了獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落,通常對分離或誘變后的微生物懸液進行_______________________

27、_________________________________________________。 (3)在某種果汁生產(chǎn)中,用果膠酶處理顯著增加了產(chǎn)量,其主要原因是果膠酶水解果膠使__________________________。果汁生產(chǎn)中的殘渣、果皮等用于果膠生產(chǎn),通常將其提取液濃縮后再加入________使之形成絮狀物,然后通過離心、真空干燥等步驟獲得果膠制品。 (4)常用固定化果膠酶處理含果膠的污水,其主要優(yōu)點有________________________和可連續(xù)處理等。在建立和優(yōu)化固定化果膠酶處理工藝時,除考慮果膠酶的活性和用量、酶反應的溫度、pH、作用時間等環(huán)境因素外,

28、還需考慮的主要有________________和____________________。 答案:(1)腐爛的水果中含產(chǎn)果膠酶的微生物較多 (2)涂布分離(或劃線分離) (3)水果組織軟化疏松及細胞受損 95%乙醇 (4)提高果膠酶的穩(wěn)定性 固定化的方法 固定化所用的介質(zhì) 5.下面是植物組織培養(yǎng)過程示意圖,請回答有關問題: 外植體愈傷組織長出叢芽生根移栽成活 (1)外植體若是菊花莖段組織,則在配制MS固體培養(yǎng)基時,________(填“必須”或“不必”)添加植物激素。 (2)外植體若是月季的花藥,則圖中的①過程________(填“需要”或“不需要”)光照,而經(jīng)②③④過程培養(yǎng)

29、出的植物一般稱為________植株。 (3)外植體若是菊花的根尖組織,則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是________,這個過程體現(xiàn)了植物細胞具有________。 (4)植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂和分化的關鍵性激素,在植物組織培養(yǎng)過程中: ①若先使用細胞分裂素,后使用生長素,實驗結(jié)果是細胞__________________。 ②當同時使用這兩種激素時,生長素用量與細胞分裂素用量的比值________(填“高”“低”或“適中”)時,促進愈傷組織的形成。 解析:(1)由于菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易,因此不必添加植物激素。(2)月季的花藥培養(yǎng)初期不需要光照

30、,幼小植株形成后才需要光照?;ㄋ庪x體培養(yǎng)得到的植株為單倍體植株,也稱花粉植株。(3)植物組織培養(yǎng)獲得的植株是正常的植株,無論外植體取自植物的何種組織器官,因為這些細胞均具有全能性,所以利用菊花的根尖組織在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是綠色。(4)植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂和分化的關鍵性激素,在植物組織培養(yǎng)過程中,若先使用細胞分裂素,后使用生長素,則細胞既分裂也分化。當同時使用這兩種激素時,生長素用量與細胞分裂素用量的比值適中時,促進愈傷組織的形成。 答案:(1)不必 (2)不需要 單倍體(花粉) (3)綠色 全能性 (4)①既分裂也分化?、谶m中 1.某植物富含

31、果膠、淀粉、蛋白質(zhì)和纖維素等成分。某小組開展了該植物綜合利用的研究?;卮鹣铝信c果膠、淀粉等提取和利用有關的問題: (1)果膠提取工藝研究結(jié)果表明,原料先經(jīng)過一段時間沸水漂洗的果膠得率(提取得到的果膠占原料質(zhì)量的百分率)顯著高于常溫水漂洗的果膠得率,最主要原因是沸水漂洗________(A.有助于清洗雜質(zhì)和去除可溶性糖 B.使植物組織變得松散 C.使有關酶失活 D.有利于細胞破裂和原料粉碎制漿)。 (2)在淀粉分離生產(chǎn)工藝研究中,為促進淀粉絮凝沉降,添加生物絮凝劑(乳酸菌菌液),其菌株起重要作用。為了消除絮凝劑中的雜菌,通常將生產(chǎn)上使用的菌液,采用________________,進行單菌落

32、分離,然后將其____________,并進行特性鑒定,篩選得到純的菌株。 (3)在用以上提取過果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中,將剩渣制成的汁液經(jīng)蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后,發(fā)現(xiàn)仍存在渾濁和沉淀問題。可添加________________使果膠徹底分解成半乳糖醛酸,再添加________________,以解決汁液渾濁和沉淀問題。 (4)在建立和優(yōu)化固定化酶反應器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中,通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的活性,然后主要優(yōu)化各固定化酶反應器中的__________________________________(答出2點)、反應液的pH和酶反應時間等因素。其中,酶

33、反應時間可通過________________來調(diào)節(jié)。 解析:(1)植物體中存在果膠酶,果膠酶能催化果膠的水解,沸水漂洗后會使果膠酶失去活性,所以先經(jīng)過一段時間沸水漂洗的果膠得率顯著高于常溫水漂洗的果膠得率。(2)純化菌種常使用劃線分離法或涂布分離法,通過擴大培養(yǎng)進行特性鑒定,篩選得到純的菌株。(3)果膠酶和果膠甲酯酶能使果膠徹底分解成半乳糖醛酸,淀粉在水中的溶解度比較小,也是造成汁液渾濁的原因,所以可用淀粉酶催化淀粉的水解。(4)本題考查連續(xù)生產(chǎn)工藝,反應器中底物的量、酶制劑的量、反應液的溫度、反應液的pH、酶反應時間等都會影響產(chǎn)物的生成率。單位時間內(nèi)流經(jīng)反應器的液體流量越大,反應時間就越

34、短,反之則長。 答案:(1)C (2)劃線分離法(或涂布分離法) 擴大培養(yǎng) (3)果膠酶和果膠甲酯酶 淀粉酶使淀粉分解 (4)固定化酶的量、反應液溫度 控制反應器液體流量(或體積) 2.(2020·浙江黃巖選考模擬)獼猴桃被譽為“水果之王”。如圖是利用獼猴桃進行深加工的過程圖,請分析回答: (1)圖中過程①加入果膠酶的主要作用是分解____________________________中的果膠,使榨取果汁變得容易。 (2)為了保持果膠酶催化的高活性和高效率,必要的條件是保持______________________,同時還必須做到施加的果膠酶________。 (3)產(chǎn)果膠

35、酶的菌株一般可從腐爛的果蔬或果園泥土中分離,利用以________為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基篩選。 (4)圖中菌種X、Y分別是________、________。 解析:(1)果膠酶能夠分解細胞壁和胞間層中的果膠,使榨取果汁變得容易。 (2)溫度和pH均能影響酶的活性,因此為了保持果膠酶的催化活性最高,需要保持適宜的溫度和pH;為了提高生產(chǎn)效率,還要做到施加的果膠酶適量。 (3)為了篩選能夠高效生產(chǎn)果膠酶的菌種,應利用以果膠為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。 (4)酒精發(fā)酵的菌種為酵母菌,醋酸發(fā)酵的菌種為醋桿菌。 答案:(1)細胞壁和胞間層 (2)適宜的溫度和pH 適量 (3)果

36、膠 (4)酵母菌 醋桿菌 3.生產(chǎn)果汁時,用果膠酶處理果泥可提高果汁的出汁量。回答下列相關問題: (1)某同學用三種不同的果膠酶進行三組實驗,各組實驗除酶的來源不同外,其他條件都相同,測定各組的出汁量,據(jù)此計算各組果膠酶的活性的平均值并進行比較。這一實驗的目的是______________________。 (2)現(xiàn)有一種新分離出來的果膠酶,為探究其最適溫度,某同學設計了如下實驗:取試管16支,分別加入等量的果泥、果膠酶、緩沖液,混勻,平均分為4組,分別置于0 ℃、5 ℃、10 ℃、40 ℃下保溫相同時間,然后,測定各試管中的出汁量并計算各組出汁量平均值。該實驗溫度設置的不足之處有___

37、_____________________和________________________。 (3)某同學取5組試管(A~E)分別加入等量的同種果泥,在A、B、C、D 4個實驗組的試管中分別加入等量的緩沖液和不同量的同種果膠酶,然后,補充蒸餾水使4組試管內(nèi)液體體積相同;E組加入蒸餾水使試管中液體體積與實驗組相同。將5組試管置于適宜溫度下保溫一定時間后,測定各組的出汁量。通過A~D組實驗可比較不同實驗組出汁量的差異。本實驗中,若要檢測加入酶的量等于0而其他條件均與實驗組相同時的出汁量,E組設計________(填“能”或“不能”)達到目的,其原因是______________________

38、__________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:(1)根據(jù)題意,用三種不同的果膠酶進行三組實驗,各組實驗除酶的來源不同外,其他條件都相同,測定各組的出汁量,據(jù)此計算各組果膠酶的活性的平均值并進行比較,可見實驗的自變量是果膠酶的來源不同,因變量是果膠酶的活性,所以該實驗目的是探究不同來源果膠酶的活性。 (2)根據(jù)實驗設計可知,該實驗是探究果膠酶的最適溫度,所以自變量是溫度,因變量是果膠

39、酶的活性,用出汁量進行衡量,出汁量越多則果膠酶活性越高。該實驗方案中,溫度應該在常溫范圍內(nèi)設置系列溫度梯度且梯度差值相等,所以4組的溫度應分別設置為15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃;另外探究溫度對酶活性的影響時,應保證酶促反應只能在設定的溫度下進行,同一實驗組的反應溫度只能是一個,所以實驗操作應該是將各組盛有果膠酶的試管與盛有果泥的試管分別在設定溫度下處理一定時間后再將兩支試管混合,才能保證實驗在設定的溫度下進行。 (3)根據(jù)題意,本實驗的自變量是果膠酶的量,因變量是出汁量,對照實驗的設計應遵循單一變量原則和對照原則,根據(jù)實驗設置,通過A~D組實驗可比較不同實驗組出汁量的差異。若要檢測

40、加入酶的量等于0而其他條件均與實驗組相同時的出汁量,則E組應加入緩沖液而不是蒸餾水,使試管中液體體積與實驗組相同,才符合實驗設計應遵循的單一變量原則。 答案:(1)探究不同來源果膠酶的活性 (2)4組的溫度設置不合適 各組的酶促反應受兩個不同溫度影響(每一設定溫度的兩支試管應先達到預定溫度,然后再混合)(其他答案合理也可) (3)不能 E組加入蒸餾水而不是緩沖液違背了單一變量原則 4.乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,具有重要應用價值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下: (1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L時,宜用________作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作用是________

41、。從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于____________。 (2)培養(yǎng)微生物L前,宜采用________方法對接種環(huán)進行滅菌。 (3)乳糖酶宜采用化學結(jié)合法(共價鍵結(jié)合法)進行固定化,可通過檢測固定化乳糖酶的________確定其應用價值。除化學結(jié)合法外,酶的固定化方法還包括________、______________________、離子吸附法及交聯(lián)法等。 解析:(1)若要篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物,需要利用以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基,不能利用乳糖的微生物在此培養(yǎng)基上不能存活,從而起到篩選作用。 (2)對接種環(huán)滅菌常用的方法是灼燒滅菌。 (3)固定化乳糖酶的應用價值主要與其活性有關。酶的固定

42、化方法除化學結(jié)合法外,還包括包埋法和物理吸附法等。 答案:(1)乳糖 凝固劑 選擇培養(yǎng)基 (2)灼燒 (3)(酶)活性[或:(酶)活力] 包埋法 物理吸附法(注:兩空可顛倒) 5.(2020·杭州模擬)酶經(jīng)過固定化后,不僅能提高酶的穩(wěn)定性,而且容易與產(chǎn)物分開,具有可反復使用等優(yōu)點。如圖為利用枯草桿菌生產(chǎn)α-淀粉酶及酶固定化實驗流程圖,回答有關問題: (1)篩選高表達菌株的最簡便方法之一是____________。一般通過________________、______________兩種手段實現(xiàn)。篩選出的菌株在發(fā)酵生產(chǎn)之前還需利用________培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)。 (2)利用物理

43、或化學的方法將α-淀粉酶固定在________的介質(zhì)上成為固定化酶。 (3)如圖是實驗室中α-淀粉酶的固定化裝置示意圖。實驗過程涉及兩次蒸餾水洗滌反應柱的操作,所用的蒸餾水體積為裝填體積的________,第二次洗滌的目的是除去________________________。 (4)若如圖中的液體X為淀粉溶液,從反應柱下端接取少量流出液進行KI-I2顏色測試,結(jié)果未呈現(xiàn)紅色。下列有關此現(xiàn)象的解釋錯誤的是(  ) A.反應柱中沒有α-淀粉酶被固定 B.流速過快淀粉未被水解 C.接取的流出液是蒸餾水 D.流速過慢淀粉被水解成葡萄糖 答案:(1)單菌落分離 劃線分離 (稀釋)涂布

44、分離 液體 (2)非水溶性 (3)10倍 殘留的淀粉溶液 (4)D 6.(2020·浙江吳越聯(lián)盟高三第二次聯(lián)考)草莓汁酸甜可口,深受大眾喜愛,加工草莓汁時,草莓中的果膠易導致果汁渾濁,影響品質(zhì),為探究制作果汁的最佳條件,研究人員進行了實驗,結(jié)果如下表所示。 組別 果膠酶用 量(mL/kg) pH 溫度(℃) 草莓汁透光率(%) 1 0.025 2.5 35 24.55 2 0.035 4.5 35 96.47 3 0.035 2.5 45 22.70 4 0.045 3.5 35 96.47 5 0.045 2.5 55 1

45、3.12 請回答: (1)草莓細胞中,去掉果膠,會使植物組織變得松散,這是因為果膠具有______________________的作用。果膠酶通過________________________作用促進果膠的水解反應,使草莓細胞彼此容易分開。 (2)生產(chǎn)過程中,既可獲得澄清度高的草莓汁,又可減少酶的用量,降低成本的條件組合是第____________組。為測定該組條件下處理后的草莓汁中是否還有果膠,可取一定量的草莓汁與等量的________________________混合。 (3)果膠酶可從某些微生物如__________________中提取,為提高生產(chǎn)效率,可將此酶固定在

46、適宜介質(zhì)上制成______________________。 (4)在合適條件下,將果膠酶與海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對酶進行____________。 A.吸附         B.包埋 C.裝柱 D.洗滌 解析:(1)植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠,其中果膠具有將植物細胞粘合在一起的作用,所以根據(jù)酶的專一性,應該用果膠酶催化果膠水解,去掉草莓細胞中的果膠,使得細胞彼此分離。 (2)根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析,第2組用的酶比較少,草莓汁透光率高,可大大降低成本,提高品質(zhì)。 (3)果膠酶可從某些微生物如黑曲霉(或蘋果青霉)中提取,

47、為提高生產(chǎn)效率,可將此酶固定在適宜介質(zhì)上制成固定化酶。 (4)將酶與海藻酸鈉融合,形成凝膠珠的方法是包埋法。 答案:(1)將植物細胞粘合在一起 催化 (2)2 95%的乙醇 (3)黑曲霉(或蘋果青霉) 固定化酶 (4)B 7.我國植物學家將名貴蘭花的莖尖細胞放進培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),最終發(fā)育成完整的新植株。如圖是組織培養(yǎng)形成蘭花植株的示意圖,請據(jù)圖回答下列問題: (1)用此技術(shù)培養(yǎng)形成蘭花植株依據(jù)的原理是______________________________ ________。 (2)在培養(yǎng)過程中,要促進細胞分裂生長,培養(yǎng)基中應有營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素,營養(yǎng)物質(zhì)包括無機物和小分子

48、的有機物,植物激素包括________________和________________兩類植物激素。 (3)在培養(yǎng)過程中,除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,成功的另一個關鍵是操作過程必須保證________________________________________________________。 (4)過程③~④進行的細胞分裂方式是____________________________________, 過程④~⑤除了細胞分裂外,還進行細胞____________等過程。 (5)從育種的角度來看,植物組織培養(yǎng)與有性繁殖相比,優(yōu)勢主要有(列舉兩條):___________

49、_____________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:該技術(shù)依據(jù)的是植物細胞的全能性,實現(xiàn)細胞全能性的首要條件是離體、無菌,然后要給予一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和適宜的外界條件。在培養(yǎng)過程中,細胞以有絲分裂的方式增殖,經(jīng)過細胞分裂、分化最終形成植株。植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖,具有保持親本優(yōu)良性狀、能快速大量繁殖種苗等優(yōu)點。 答案:(1)植物細胞的全能性 (2)生長素 細胞

50、分裂素 (3)無菌 (4)有絲分裂 分化 (5)能保持母本的優(yōu)良性狀;培養(yǎng)周期短,繁殖效率高(或快速繁殖);能培育無病毒植物等(列出兩條即可) 8.(2020·浙江黃巖選考模擬)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染病毒傳播給后代,導致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如圖,請回答下列問題: 外植體愈傷組織芽、根植株 (1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時,一般選取________作為外植體,其依據(jù)是________________________________________________________________________。

51、(2)在過程①中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和________,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加________________,有利于外植體啟動細胞分裂形成愈傷組織,接種后2~5 d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是____________________。 (3)在過程②中,愈傷組織在誘導生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是________________________________________________________________________ _________________________________________

52、_______________________________。 解析:(1)因莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒,所以常用其作為外植體培育無病毒植株。(2)在植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中,除了添加植物必需的礦質(zhì)元素外,還要添加有機物,添加植物激素有利于啟動細胞分裂實現(xiàn)脫分化形成愈傷組織并且可誘導愈傷組織細胞再分化過程。若對外植體消毒不徹底,會造成外植體邊緣局部污染。(3)在培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的用量比值不同,誘導生根發(fā)芽結(jié)果不同,當比值低時,有利于發(fā)芽,比值高時,有利于生根。 答案:(1)莖尖(或根尖) 莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒 (2)有機物 植物激素 外植體消毒不徹底 (3)培養(yǎng)基中生長素類物質(zhì)用量與細胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低 18

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