《2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 高考真題分類(lèi)題庫(kù) 2014年知識(shí)點(diǎn)20 生物技術(shù)實(shí)踐（含解析）》由會(huì)員分享，可在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)《2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 高考真題分類(lèi)題庫(kù) 2014年知識(shí)點(diǎn)20 生物技術(shù)實(shí)踐（含解析）（13頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、知識(shí)點(diǎn)20　生物技術(shù)實(shí)踐 1.(2014·江蘇高考·T16)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯(cuò)誤的是　 (　　) A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水 C.向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?可見(jiàn)玻棒上有白色絮狀物 D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán) 【解題指南】關(guān)鍵知識(shí):DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低,隨著NaCl溶液濃度增大或降低,DNA在其中的溶解度增大。 【解析】選C。本題考查“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的選材、步驟和鑒定。原則上含DNA的生物材

2、料都能作為提取DNA的材料,但是DNA含量高的材料,實(shí)驗(yàn)成功的可能性更大,所以酵母和菜花可作為提取DNA的材料,故A正確;DNA在2mol/L NaCl溶液和蒸餾水中,溶解度較大,故B正確;向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?雞血細(xì)胞會(huì)破裂,因DNA在蒸餾水中溶解度較大,故不會(huì)析出,C項(xiàng)錯(cuò)誤;DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán),故D正確。 2.(2014·江蘇高考·T18)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,正確的是　(　　) A.高溫易使酶失活,因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好 B.洗衣粉中表面活性劑對(duì)堿性蛋白酶活性有一定的促進(jìn)作用 C.在pH低于7.0的自來(lái)水中,堿性蛋白酶依然能起作用

3、 D.洗衣粉中酶主要是通過(guò)快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用 【解題指南】關(guān)鍵知識(shí):(1)加酶洗衣粉適宜的洗滌溫度和pH。 (2)加酶洗衣粉去污原理是利用酶的催化作用使污漬分解成可溶物。 【解析】選C。本題考查加酶洗衣粉的使用。加酶洗衣粉中的酶在水溫45～ 60℃時(shí),能充分發(fā)揮洗滌作用。水溫高于60℃時(shí),堿性蛋白酶失去活性,水溫低于15℃時(shí),酶的活性迅速下降,影響洗滌效果,所以A錯(cuò)誤;表面活性劑能影響堿性蛋白酶的活性,可能會(huì)使酶失活,因此B錯(cuò)誤;堿性蛋白酶適宜的pH為6.0～8.5,故C正確;洗衣粉中的酶能把衣物上的油脂、蛋白質(zhì)等分解成可溶性的小分子物質(zhì),從而使其很容易被洗去,因而D錯(cuò)誤。

4、 3.(2014·江蘇高考·T24)某同學(xué)設(shè)計(jì)了如圖所示的發(fā)酵裝置,下列有關(guān)敘述正確的是(多選)　(　　) A.該裝置可阻止空氣進(jìn)入,用于果酒發(fā)酵 B.該裝置便于果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體排出 C.去除彎管中的水,該裝置可滿(mǎn)足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸 D.去除彎管中的水后,該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似 【解題指南】(1)圖示信息:彎管沒(méi)有插入葡萄汁的液面下,且未通入無(wú)菌空氣,所以不能給底層的微生物提供氧氣。 (2)關(guān)鍵知識(shí):果酒和果醋發(fā)酵的原理、條件。 【解析】選A、B、D。本題考查果酒、果醋的制備。該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進(jìn)入,能用于果酒發(fā)酵,A正確;果酒發(fā)

5、酵產(chǎn)生的CO2可溶解在彎管的水中,進(jìn)一步通過(guò)水排出,B正確;醋酸菌是好氧菌,因彎管沒(méi)有插入裝置底部,且未通入無(wú)菌空氣,去除彎管中的水后也不能滿(mǎn)足底層發(fā)酵液中醋酸菌的呼吸需求,C錯(cuò)誤;去除彎管中的水后,該裝置的彎管部分也能防止空氣中的微生物進(jìn)入,與巴斯德的鵝頸瓶作用類(lèi)似,D正確。 4.(2014·廣東高考·T4)下列敘述錯(cuò)誤的是　(　　) A.醋酸菌在無(wú)氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸 B.酵母菌在無(wú)氧條件下利用葡萄汁產(chǎn)生酒精 C.泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵 D.腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶 【解題指南】(1)關(guān)鍵知識(shí):細(xì)胞呼吸原理和生物技術(shù)

6、在食品加工方面的應(yīng)用。 (2)隱含信息:有氧呼吸和無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物應(yīng)用。 【解析】選A。本題考查細(xì)胞呼吸原理和生物技術(shù)在生產(chǎn)應(yīng)用中的相關(guān)知識(shí)。A項(xiàng)中,醋酸菌釀醋時(shí)需要持續(xù)通氣,即利用醋酸菌的有氧呼吸,故錯(cuò)誤。B項(xiàng)中,酵母菌是單細(xì)胞真核生物,在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸,無(wú)氧條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸,可以將有機(jī)物不徹底分解生成酒精和二氧化碳,并釋放少量的能量,從而可利用葡萄汁產(chǎn)生酒精,故正確。C項(xiàng)中,乳酸菌屬于厭氧型細(xì)菌,進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸,可用于泡菜腌制,故正確。D項(xiàng)中,腐乳是豆腐在毛霉等微生物的作用下形成的,由于毛霉等微生物能產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶,可將豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成肽、氨基酸和甘油、脂肪

7、酸等小分子物質(zhì),故正確。 5.(2014·山東高考·T35)玉米是重要的糧食作物,經(jīng)深加工可生產(chǎn)酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下: (1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物可被酵母菌利用發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)酵母菌時(shí),該水解產(chǎn)物為酵母菌的生長(zhǎng)提供　　 　 　　　　　　　　　。發(fā)酵過(guò)程中檢測(cè)酵母菌數(shù)量可采用　　　　法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)。 (2)玉米胚芽油不易揮發(fā),宜選用　　　　　法或　　　　　法從玉米胚芽中提取。 (3)玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)化成果糖。利用 　　　　　技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用,從而降低

8、生產(chǎn)成本。 (4)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增葡萄糖異構(gòu)酶基因時(shí),需用耐高溫的　　　　　催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、　　　　　和　　　　三步。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“玉米秸稈”“玉米胚芽”和“玉米淀粉”。 (2)關(guān)鍵知識(shí):①所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基,其含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等; ②PCR技術(shù)與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的最大區(qū)別是需要耐高溫的DNA聚合酶。 【解析】本題主要考查微生物的培養(yǎng)和PCR技術(shù)。 (1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)水解后的產(chǎn)物為葡萄糖,葡萄糖可為酵母菌的生長(zhǎng)提供碳源。酵母菌可用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)。 (2)玉米胚芽油不

9、易揮發(fā),因此不宜選用蒸餾法提取,可用壓榨法或萃取法提取。 (3)利用固定化酶技術(shù)可使酶重復(fù)利用,從而降低生產(chǎn)成本。 (4)PCR技術(shù)中應(yīng)選用耐高溫的DNA聚合酶催化,PCR的每次循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三步。 答案:(1)碳源　顯微鏡直接計(jì)數(shù) (2)壓榨　萃取(注:兩空可顛倒) (3)固定化酶　(4)(Taq)DNA聚合酶　(低溫)復(fù)性(或退火)　(中溫)延伸 6.(2014·浙江·自選模塊·T17)“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊 下面是關(guān)于固定化酶和細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題,請(qǐng)回答: (1)某興趣小組欲利用固定化酶進(jìn)行酶解淀粉的實(shí)驗(yàn),分組見(jiàn)下表。 組別 固定化酶柱長(zhǎng)度(cm) 淀粉溶液

10、的流速(mL·min-1) 甲 10 0.3 乙 10 0.5 丙 15 0.3 丁 15 0.5 將吸附了α-淀粉酶的石英砂裝入柱中后,需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱,以除去　　　　　　　　　　　。按上表分組,將配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液進(jìn)行KI-I2檢測(cè)。若流出液呈紅色,表明有 　　　　　　　　生成,若各組呈現(xiàn)的顏色有顯著差異,則流出液中淀粉水解產(chǎn)物濃度最高的是　　　　　　組。 (2)下列關(guān)于上述固定化酶實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是　　 　。 A.固定化酶柱長(zhǎng)度和淀粉溶液流速?zèng)Q定了酶柱中酶的含量

11、B.淀粉溶液流速過(guò)快會(huì)導(dǎo)致流出液中含有淀粉 C.各組實(shí)驗(yàn)所用的淀粉溶液濃度應(yīng)相同 D.淀粉溶液的pH對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響 (3)現(xiàn)有一份污水樣品,某興趣小組欲檢測(cè)其中的細(xì)菌數(shù),進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。將一定量的污水樣品進(jìn)行濃度梯度稀釋。取適量不同稀釋度的稀釋液,用　　　　　　 法分別接種于固體平面培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意,接種前,從盛有　　　　　　　　的容器中將玻璃刮刀取出,放在酒精燈火焰上灼燒,冷卻后待用;分組時(shí),需用　　　　　　作為對(duì)照。 (4)在上述細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)計(jì)數(shù)的是接種了　　 　。 A.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基

12、上的細(xì)菌數(shù) B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù) C.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù) D.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù) 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“固定化酶”“細(xì)菌培養(yǎng)”“接種”“計(jì)數(shù)”。 (2)隱含信息:酶濃度對(duì)淀粉水解反應(yīng)的影響、pH等環(huán)境因素對(duì)酶活性的影響、底物淀粉與酶接觸面積對(duì)反應(yīng)速率的影響、微生物培養(yǎng)時(shí)防止雜菌污染的方法等。 【解析】本題主要考查固定化酶應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)。 (1)題表中固定化酶柱長(zhǎng)度代表所用固定化酶濃度的大小,長(zhǎng)度越大酶柱中所含酶越多;淀粉溶液的流速?zèng)Q定了反應(yīng)物與酶柱中酶相互接觸的時(shí)間長(zhǎng)短,流速越小,淀粉與酶越能充分接觸而反應(yīng)。淀

13、粉遇KI-I2試劑顯藍(lán)色,而流出液中顯示紅色,說(shuō)明大分子淀粉在酶的作用下水解。從表中可知,丙中酶柱較長(zhǎng),淀粉流速較小,最適合酶促反應(yīng),反應(yīng)速率最快。 (2)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對(duì)照原則、單因子變量原則,所以每組實(shí)驗(yàn)中淀粉溶液濃度應(yīng)相同、溶液的pH均應(yīng)保持在淀粉酶的最適pH條件下,所以C、D項(xiàng)正確。淀粉溶液流速過(guò)快,酶與底物不能充分反應(yīng),流出的可能是沒(méi)有水解的淀粉,故B項(xiàng)正確。酶柱中酶的含量由酶柱長(zhǎng)度決定,但是酶在反應(yīng)前后保持不變,所以淀粉溶液流速不能決定酶的含量,因此A項(xiàng)錯(cuò)誤。 (3)本實(shí)驗(yàn)所接種細(xì)菌為不同稀釋度的菌液,而不是挑取菌落接種,應(yīng)用涂布分離法。微生物培養(yǎng)為防止雜菌污染需在無(wú)菌條件下進(jìn)

14、行,常用的消毒滅菌方法有①消毒法:煮沸、巴氏消毒法、化學(xué)試劑消毒法(70%酒精);②滅菌法:灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。 (4)測(cè)定微生物數(shù)量的方法:①直接計(jì)數(shù)法,此法利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量,但不能區(qū)分細(xì)菌死活;②間接計(jì)數(shù)法,常用的是稀釋平板計(jì)數(shù)法,此法在含菌數(shù)較少的情況下,也可計(jì)數(shù),但需將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中微生物細(xì)胞分散開(kāi),為防止偶然性,應(yīng)計(jì)數(shù)合理稀釋度樣品培養(yǎng)基上的菌落數(shù),菌落易于觀察。通過(guò)以上分析,故D項(xiàng)正確。 答案:(1)未吸附的α-淀粉酶　糊精　丙 (2)A　(3)涂布分離　70%酒精　　未接種的

15、培養(yǎng)基　(4)D 7.[生物——選修1:生物技術(shù)實(shí)踐](2014·新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ·T39) 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問(wèn)題: (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將　　　　　分解成　　　　　。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí),CR可與纖維素形成　　　　　色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí),培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的　　　　　　。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表): 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖

16、維 素粉 瓊脂 CR 溶液 水 培養(yǎng) 基甲 + + + + - + + 培養(yǎng) 基乙 + + + - + + + 注:“+”表示有,“-”表示無(wú)。 據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲　　　　(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是　　　　　　　　　　　;培養(yǎng)基乙　　　　(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 　 　　　　 　。 【解題指南】(1)題干關(guān)

17、鍵詞:“纖維素酶”“剛果紅”。 (2)隱含信息:兩種培養(yǎng)基中有瓊脂的為固體培養(yǎng)基,無(wú)瓊脂的為液體培養(yǎng)基;淀粉是微生物的碳源,不含纖維素粉不能作為分離和鑒別纖維素分解菌實(shí)驗(yàn)的選擇培養(yǎng)基。 (3)關(guān)鍵知識(shí):土壤中某些微生物的分解作用和篩選纖維素分解菌的方法。 【解析】本題主要考查纖維素酶的作用、剛果紅染色法、分離和鑒別纖維素分解菌的方法。 (1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)。纖維素能被纖維素酶分解為葡萄糖,如圖: 纖維素纖維二糖葡萄糖 (2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無(wú)法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的

18、透明圈,可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 (3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,且需要以纖維素為唯一碳源。 答案:(1)纖維二糖　葡萄糖 (2)紅　透明圈 (3)不能　液體培養(yǎng)基不能分離單菌落　不能　培養(yǎng)基乙中沒(méi)有纖維素,不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 8.[生物——選修1:生物技術(shù)實(shí)踐](2014·新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅱ·T39) 為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題: (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平

19、板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為　　　　　　。 (2)該小組采用平板劃線(xiàn)法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過(guò)　　　　　 滅菌,在第二次及以后的劃線(xiàn)時(shí),總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn),這樣做的目的是 　 。 (3)示意圖A和B中,　　　　　　　表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到

20、的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中　　　　　 的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高　　　　　的利用率。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“先行培養(yǎng)”“振蕩培養(yǎng)”。 (2)隱含信息:A圖中菌落是采用平板劃線(xiàn)法培養(yǎng)的結(jié)果,B圖中菌落分布相對(duì)均勻,為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果。 (3)關(guān)鍵知識(shí):稀釋涂布平板法檢測(cè)細(xì)菌含量、平板劃線(xiàn)法分離細(xì)菌。 【解析】本題考查微生物培養(yǎng)、細(xì)菌分離的相關(guān)知識(shí)。 (1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)

21、照:隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成;利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù): (2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌;在第二次及以后劃線(xiàn)時(shí),總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn),這樣做的目的是通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加,使每次劃線(xiàn)時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少,以便得到單個(gè)菌落。 (3)根據(jù)示意圖A和B中生長(zhǎng)出的菌落形態(tài),判定B圖中為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果(菌落分布相對(duì)均勻)。 (4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量,促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng);另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。 答案:(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×10

22、7 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 (3)B (4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 9.(2014·四川高考·T10)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。 (1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、　　　　　四類(lèi),該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是　 。 (2)

23、與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和　　　　　,這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成　　　　　保存?zhèn)溆谩? (3)純化菌株時(shí),通常使用的劃線(xiàn)工具是　　　　　。劃線(xiàn)的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)上都不間斷地長(zhǎng)滿(mǎn)了菌,第二劃線(xiàn)區(qū)域所劃的第一條線(xiàn)上無(wú)菌落,其他劃線(xiàn)上有菌落。造成劃線(xiàn)無(wú)菌落可能的操作失誤有　 。 (4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制,將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心,取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是　　　　　　

24、　　　　　　　　　　,該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理?為什么?　 。 【解題指南】(1)圖示信息:利用選擇培養(yǎng)基分離降解苯磺隆的菌株,取菌株產(chǎn)生的蛋白酶分解苯磺隆。 (2)關(guān)鍵知識(shí):微生物的培養(yǎng)基成分、植物組織培養(yǎng)、微生物的接種、對(duì)照原則。 【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)及對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)原則。 (1)微生物的培養(yǎng)基主要含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽四類(lèi)營(yíng)養(yǎng);選擇培養(yǎng)基只允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng),又要抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng),因而必須以苯磺隆為唯一碳源,只讓目的菌株生長(zhǎng)繁殖。 (2)植物組織培養(yǎng)中啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素是生

25、長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,為了避免每次配制時(shí)都要稱(chēng)量,可將植物激素先配成母液。 (3)接種環(huán)在平板內(nèi)的第二次劃線(xiàn)起,都要先灼燒滅菌冷卻后劃線(xiàn),而且要從上一次劃線(xiàn)末端而非空白處劃線(xiàn),不冷卻會(huì)燙死上一次劃線(xiàn)末端的菌株,從空白處劃線(xiàn)會(huì)無(wú)菌株。 (4)從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知,蛋白酶是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的,由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì),但是還需設(shè)計(jì)不加入蛋白酶的對(duì)照組。 答案:(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽　只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖 (2)細(xì)胞分裂素　母液 (3)接種環(huán)?、俳臃N環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線(xiàn)未從第一區(qū)域末端開(kāi)始劃線(xiàn) (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的

26、蛋白質(zhì)　不合理,缺少空白對(duì)照 10.(2014·江蘇高考·T29)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為　　　　　。 (2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細(xì)胞干重在12 d后下降的原因有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是　　　　　　、　　　　　　　　。 (3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)　　　　　處理,會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和　

27、　　　 　酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是　　　　　　　　　、　　　　　　　　　。 (4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細(xì)胞固定化類(lèi)似。下列說(shuō)法正確的有　　　　　　(填序號(hào))。 ①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋 ②必須在光照條件下培養(yǎng) ③培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣 ④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢 【解題指南】(1)題干中有文字“在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化”,從而推斷圖中曲線(xiàn)的含義。 (2)關(guān)鍵知識(shí):植物組織培養(yǎng)、染色體變異及細(xì)胞固定化。 【

28、解析】本題考查植物組織培養(yǎng)、誘導(dǎo)染色體加倍、有絲分裂、酶的固定化技術(shù)。 (1)外植體在人工、無(wú)菌條件下,經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。 (2)由圖蔗糖濃度下降可知,外植體離體培養(yǎng)過(guò)程中需要消耗蔗糖,12天后蔗糖濃度較低;pH下降會(huì)影響酶的活性,愈傷組織細(xì)胞對(duì)物質(zhì)的合成少于分解,細(xì)胞干重下降。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,蔗糖既能維持一定的滲透壓,又能提供植物細(xì)胞生命活動(dòng)必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(能量)。 (3)一定濃度的秋水仙素或低溫都可抑制紡錘體的形成,使子染色體不能移向兩極,從而使細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍。植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠,可通過(guò)纖維素酶、果膠酶破壞細(xì)胞壁,從而使愈傷組織細(xì)胞分離。在用秋水仙素或

29、低溫處理后,會(huì)出現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細(xì)胞,4n的細(xì)胞在有絲分裂后期著絲點(diǎn)分裂,染色體數(shù)目加倍至8n;8n的細(xì)胞在有絲分裂中期能清晰看出8n條染色體。 (4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,應(yīng)選用生長(zhǎng)旺盛的愈傷組織細(xì)胞。愈傷組織不能進(jìn)行光合作用,因此要通入無(wú)菌空氣確保其正常的生命活動(dòng)。細(xì)胞的固定化通常使用包埋法,由于包埋材料的影響,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴(kuò)散都受到一定的限制,所以固定化細(xì)胞生長(zhǎng)速度會(huì)變慢。 答案:(1)脫分化 (2)蔗糖濃度下降,pH降低　提供能源　調(diào)節(jié)滲透壓 (3)秋水仙素(低溫)　果膠　經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期　經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期 (4)①

30、③④ 11.(2014·江蘇高考·T30)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開(kāi)展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是　　　　　　　;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應(yīng)該　　　　　　　　　。 (2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是　　　　　　　　。 (3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是　　　　　。(填序號(hào)) ①安全閥、放氣閥、壓力表 ②放氣閥、安全閥、壓力表 ③安全閥、放氣閥、溫度表 ④放氣閥、安全閥、溫度表 (4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線(xiàn)

31、,結(jié)果其中一塊平板的各劃線(xiàn)區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng),最可能的原因是　 。 (5)為增加β-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細(xì)胞時(shí),添加石英砂的目的是　　　　　　　　　　　　　;研磨時(shí)　　　　　　　　(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是　　　　　　　　　　。 【解題指南】(1)圖示信息:滅菌鍋及其局部剖面示意圖,從而推斷甲、乙、丙指示的結(jié)構(gòu)名稱(chēng)。 (2)關(guān)鍵知識(shí):微生物的培養(yǎng)與分離純化、色素的提取。 【解析】本題考查微生物培養(yǎng)中的滅菌、接種技術(shù)、滅菌鍋的構(gòu)造、色素提取的

32、操作。 (1)滅菌常用方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌等,培養(yǎng)皿常用高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌。將培養(yǎng)皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報(bào)紙包扎避免滅菌后的再次污染。 (2)青霉素能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌的繁殖期起殺菌作用,因此添加青霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。 (3)乙連接軟管為排(放)氣閥,甲為安全閥,丙是壓力表。 (4)3塊平板有兩塊平板長(zhǎng)有菌落,說(shuō)明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長(zhǎng);而其中一塊未見(jiàn)菌落,說(shuō)明菌株死亡,最可能的原因是接種過(guò)程中接種環(huán)灼燒后未冷卻或未足夠冷卻,使菌株因溫度過(guò)高被殺死。 (5)石英砂有助于研磨充分。CaCO3用于中和酸性物質(zhì),β-胡蘿卜素較耐酸,因此不需添加Ca

33、CO3。 答案:(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)　用牛皮紙(報(bào)紙)包扎器皿 (2)抑制細(xì)菌(放線(xiàn)菌)生長(zhǎng) (3)①　(4)接種環(huán)溫度過(guò)高,菌被殺死 (5)有助于研磨充分　不需要　β-胡蘿卜素較耐酸 12.(2014·海南高考·T30)[生物——選修1:生物技術(shù)實(shí)踐]已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)間有關(guān)。為了測(cè)定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量,某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括:刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。回答相關(guān)問(wèn)題: (1)請(qǐng)完善下列實(shí)驗(yàn)步驟。 ①標(biāo)準(zhǔn)管的制備:用　　　　　　　　　　和顯色劑制

34、成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。 ②樣品管的制備:用刻度移液管分別吸取一定量的　　　　,加到不同的比色管中,然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色,得到樣品管。 ③將每個(gè)　　　　分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較,找出與樣品管顏色深淺　　　　 的標(biāo)準(zhǔn)管,該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量,記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。 (2)下圖表示的是泡菜中　　　　趨勢(shì)。 (3)泡菜制作過(guò)程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是　　　　(填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”)。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)間有關(guān)”。 (2)關(guān)鍵知識(shí):亞硝酸鹽含量的測(cè)定、泡菜的制作原理。 【解析】本題主要

35、考查泡菜制作原理及亞硝酸鹽含量測(cè)定的相關(guān)知識(shí)。 (1)在亞硝酸鹽的含量測(cè)定中,用不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管;用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液,加到不同的比色管中,然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色,得到樣品管;將每個(gè)樣品管分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較,找出與樣品管顏色深淺相近的標(biāo)準(zhǔn)管,該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量,記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。 (2)據(jù)圖可知,該圖表示亞硝酸鹽的含量隨發(fā)酵時(shí)間的變化曲線(xiàn)。 (3)制泡菜時(shí)使用的微生物是乳酸菌。 答案:(1)①不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液?、诓煌葜铺鞌?shù)的泡菜濾液?、蹣悠饭堋∠嗤?相近) (2)亞硝酸鹽含量的變化　(3)乳酸菌 13