2019-2020學年高中生物 專題2 微生物的培養(yǎng)與應用 課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)練習 新人教版選修1
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1、課題1 微生物的實驗室培養(yǎng) [隨堂鞏固] 1.細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌 A.接種針、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種針 C.培養(yǎng)基、手、接種針 D.接種針、手、高壓鍋 解析 試題分析:高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備,通常用于培養(yǎng)基的滅菌;用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法;火焰灼燒,可以迅速徹底地滅菌,適用于微生物的接種工具,如接種針、接種環(huán)等金屬用具,所以選C。 答案 C 2.有關微生物營養(yǎng)物質(zhì)敘述正確的是 A.無機氮源不可能提供能量 B.無機碳源不可能提供能量 C.除水以外的無機物只提供無機
2、鹽 D.是氮源的物質(zhì)不可能同時是碳源 解析 無機氮提供能量的情況還是存在的,如NH3可為硝化細菌提供能量和氮源,A錯誤;有機碳源才能提供能量,B正確;除水以外的無機物種類繁多、功能也多樣.如CO2,可作自養(yǎng)型微生物的碳源;NH4HCO3可作自養(yǎng)型生物的碳源和無機鹽;而NaCl則只能提供無機鹽,C錯誤;有的氮源可同時是碳源,如NH4HCO3,D錯誤。 答案 B 3.關于菌種保藏敘述不正確的是 A.對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法 B.長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法 C.臨時保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異,因此保存時間不長 D.對于需要長期保存的菌種,可以采用4
3、℃冰箱中保藏的方法 解析 對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法,在固體斜面培養(yǎng)基上菌落長成后,放入冰箱低溫保藏,A正確;對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法,采用-20 ℃冰箱中保藏,B正確,D錯誤;臨時保藏的菌種由于頻繁轉(zhuǎn)種,容易被污染或產(chǎn)生變異,C正確。 答案 D 4.下面四種菌落分布圖中,不可能是用稀釋涂布平板法得到的是 解析 對微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進行接種,將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這一過程是稀釋涂布平板法。據(jù)圖分析:A、B、C屬于稀釋涂布平板法接種得到的平板,D平板有明顯的劃線痕跡
4、,故D符合題意。 答案 D 5.(2018·全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關的問題: (1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用__________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應采用________滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是_______________________。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進________________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進________________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。 (3)制作面包時,為
5、使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是______________________________________________ ________________________。 解析 (1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基含糖量高,更適合酵母菌培養(yǎng);該培養(yǎng)基應采用高壓蒸汽滅菌法滅菌;若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2,釋放能量多,菌體增殖快;若進行厭氧培養(yǎng),進行無氧呼吸,產(chǎn)生乙醇和CO2,釋放能量少,菌體增殖慢。 (3)制作面包
6、時,在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,產(chǎn)生CO2,CO2是氣體,遇熱膨脹而形成小孔,使得面包松軟多孔。 答案 (1)麥芽汁瓊脂 高壓蒸汽 由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體 (2)菌體快速增殖 乙醇產(chǎn)生 (3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟 [限時檢測] [時間45分鐘,滿分80分] 一、選擇題(每小題5分,共50分) 1.(2018·江陰期中)將大腸桿菌接種在徹底滅菌的培養(yǎng)基表面時,關于接種環(huán)劃線的操作,下列敘述不正確的是 A.劃線前灼燒接種環(huán) B.將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連 C.每區(qū)劃三至五條平行線 D.不要劃破培養(yǎng)基
7、 解析 平板劃線法中,為了防止雜菌污染,劃線前灼燒接種環(huán),A正確;劃線時不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連,B錯誤;每區(qū)劃三至五條平行線,C正確;劃線時不要劃破培養(yǎng)基,否則不能分離得到單菌落,D正確。 答案 B 2.用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用和培養(yǎng)基是否被污染需要設置的對照分別是 ①未接種的該選擇培養(yǎng)基?、诮臃N了的該選擇培養(yǎng)基?、劢臃N了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基?、芪唇臃N的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 A.③① B.④② C.②① D.③② 解析 用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用,自變量是培養(yǎng)基的不同,對照組應為沒有選擇作用的接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
8、,實驗組為接種了的該選擇培養(yǎng)基;若判斷選擇培養(yǎng)基是否被污染,自變量為是否接種培養(yǎng)物,對照組應為未接種的該選擇培養(yǎng)基,實驗組為接種了的該選擇培養(yǎng)基。綜上分析,A項正確,B、C、D三項均錯誤。 答案 A 3.獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是 A.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌 B.接種純種細菌 C.適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) D.防止外來雜菌的入侵 解析 要獲得純凈的培養(yǎng)物,必須防止外來雜菌的污染。 答案 D 4.甲、乙、丙是三種微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖;甲能在Ⅰ中正常生長繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生長繁
9、殖,甲、丙都不能。下列說法正確的是 粉狀硫 10 g K2HPO4 4 g FeSO4 0.5 g 蔗糖 10 g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl2 0.5 g Ⅰ + + + + - + + + Ⅱ + + + - + + + + Ⅲ + + + + + + + + 注:“+”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì),“-”表示培養(yǎng)基中沒有加入這種物質(zhì)。 A.甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物 B.甲、乙都是自養(yǎng)型微生物,丙是異養(yǎng)型微生物 C.甲是異養(yǎng)型微生物
10、、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)型微生物 D.甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)型微生物、丙是異養(yǎng)型微生物 解析 根據(jù)題意可知,甲能在Ⅰ中正常生長繁殖,而乙和丙都不能,而Ⅰ培養(yǎng)基缺氮,說明甲能夠自身固氮,屬于固氮微生物;乙能在Ⅱ中正常生長繁殖,而甲和丙都不能,Ⅱ培養(yǎng)基中沒有有機碳源,說明乙能夠合成有機物,屬于自養(yǎng)微生物;而丙不能在Ⅰ培養(yǎng)基生長,說明不能固氮;又不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長,說明不能合成有機物,只能在Ⅲ培養(yǎng)基中生長,說明屬于異養(yǎng)微生物,故D正確。 答案 D 5.(2018·太原期中)將大腸桿菌菌種從菌種試管接種到另一支試管的操作,下列說法有誤的一項是 A.整個接種過程都要在酒精燈的火焰附近進行
11、 B.接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒之后即可伸入菌種試管挑取少許菌種 C.菌種試管口和待接種的試管口接種前后都要通過酒精燈火焰2至3次 D.帶菌的接種環(huán)應在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“S”型曲線 解析 為了防止雜菌污染,整個接種過程都要在酒精燈的火焰附近進行,A項正確;接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒、待接種環(huán)在火焰旁冷卻后才可伸入菌種試管挑取少許菌種,B項錯誤;菌種試管口和待接種的試管口接種前后都要通過酒精燈火焰2至3次,以防止雜菌污染,C項正確;接種時,帶菌的接種環(huán)應在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“S”型曲線,D項正確。 答案 B 6.在稀釋涂布平板法對微生物進行計數(shù)時的錯誤操作是
12、A.將1 mL樣品稀釋10倍,需加入10 mL無菌水 B.吸取菌液的移液管需要干熱滅菌避免雜菌污染 C.將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃 D.每一個稀釋度涂布多個平板,計算各組平均值 解析 將1 mL樣品稀釋10倍,需加入9 mL無菌水,A錯誤;吸取菌液的移液管需要干熱滅菌避免雜菌污染,B正確;涂布器滅菌時,將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后,冷卻8~10 s再用,C正確;每一個稀釋度涂布多個平板,計算各組平均值,D正確。 答案 A 7.產(chǎn)生標準形態(tài)菌落的細菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是 A.一個細菌、液體培養(yǎng)基 B.許多細菌、液體培養(yǎng)基 C.一個細菌、固體培
13、養(yǎng)基 D.許多細菌、固體培養(yǎng)基 解析 菌落是一個細菌或幾個細菌的子細胞群體,形成于固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結構,肉眼可見。由一個細菌形成的菌落,形態(tài)結構是一定的。由許多細菌形成的菌落,可能不會有比較標準的形態(tài)。 答案 C 8.關于倒平板操作,敘述錯誤的是 A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞 B.右手拿錐形瓶,使瓶口迅速通過火焰 C.用左手將培養(yǎng)皿打開,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手緩慢蓋上皿蓋 D.等待平板冷卻凝固后,將平板倒過來放置 解析 將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,防止培養(yǎng)皿被污染,A正確;使打開的錐形瓶瓶口迅速
14、通過火焰,對錐形瓶的瓶口處進行灼燒滅菌,防止空氣中的雜菌污染,B正確;用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20 mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,而不能打開皿蓋,C錯誤;倒平板后冷卻需要倒過來放置,防止皿蓋上的水珠滴落到培養(yǎng)基上,D正確。 答案 C 9.利用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌,經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)多種菌落,不可能的原因是 A.培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染 B.使用涂布器時未將菌液涂布均勻 C.接種過程中,無菌操作不符合要求 D.系列稀釋時,未在酒精燈火焰附近操作 解析 出現(xiàn)雜菌污染的可能原因有:培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染;接
15、種過程中,無菌操作不符合要求;系列稀釋時,無菌操作不符合要求等,ACD正確;使用涂布器時涂布不均勻會導致菌落分布比較集中,不會導致雜菌污染,B錯誤。 答案 B 10.漆酶屬于木質(zhì)降解酶類,下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的部分過程,相關敘述正確的是 A.在涂布平板上長出的菌落,不能通過劃線進一步純化 B.生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 C.試管固體斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株 D.選擇培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特征選出產(chǎn)漆酶的菌落 解析 在涂布平板上長出的菌落,可以通過劃線或稀釋涂布平板法進一步純化,A錯誤;生活污水中含有大
16、量微生物,但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株,B錯誤;斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在低溫下長期保存菌株,C錯誤;篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落,從而獲得漆酶菌株,D正確。 答案 D 二、非選擇題(共3小題,共30分) 11.(10分)(2018·課標全國Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。 回答下列問題: (1)在實驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是_____________
17、____________________________________。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能________________。在照射前,適量噴灑________,可強化消毒效果。 (4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度,最可能的原因是 _______________________________________________________________。 解析 能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃
18、器皿和金屬用具可以采用干熱滅菌法滅菌。(2)用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法對牛奶消毒,可以殺死牛奶中的微生物,并且使牛奶的營養(yǎng)成分損失較少,而煮沸消毒法會破壞牛奶的營養(yǎng)成分。(3)紫外線照射可以破壞DNA結構,殺死物體表面或空氣中的微生物;在照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以加強消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。(5)高壓蒸汽滅菌時,若不排盡鍋內(nèi)的冷空氣,會使鍋內(nèi)溫度不達標。 答案 (1)可以 (2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少 (3)破壞DNA結構 消毒液 (4)氯氣 (5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 12.(10分)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患
19、傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。 (1)細菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。 (2)細菌鑒定:實驗流程如圖所示: ①對配制的液體培養(yǎng)基等需采取________________滅菌法;實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為_______________________________________________________ (填“無機碳”或“有機碳”)。 ②挑選可疑菌落制片后,用________________觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 ③接種可疑菌后,35 ℃培養(yǎng)24 h,液體培
20、養(yǎng)基變渾濁,原因是________________。對照組試管中應加入________________,與實驗組同時培養(yǎng)6 h時,若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組________(填“高”或“低”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。 ④對排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機體產(chǎn)生相應抗體,與產(chǎn)生抗體相關的細胞除T細胞、B細胞外,還有___________________________________________________________________。 解析 (2)①培養(yǎng)基應用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。炭疽桿菌同化類型為異養(yǎng)型,應選有機碳作為其碳源
21、。②微生物個體小,肉眼觀察不到,必須借助顯微鏡才能觀察到菌體特征。③在液體培養(yǎng)基中,細菌大量繁殖會導致培養(yǎng)液變渾濁;該實驗中實驗變量為是否加入噬菌體,所以對照組除不加噬菌體外,其他處理都應該和實驗組保持一致(即應加入不含噬菌體的等量生理鹽水)。噬菌體可破壞細菌細胞,從而使培養(yǎng)液變清。④在特異性免疫的感應階段,吞噬細胞參與了對抗原的攝取、處理和呈遞,效應B(漿)細胞是直接產(chǎn)生抗體的細胞。 答案 (2)①高壓蒸汽 有機碳?、陲@微鏡 ③細菌大量繁殖 等量生理鹽水 低?、芡淌杉毎⌒狟(漿)細胞 13.(10分)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、
22、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題: (1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是____________________,這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的__________________。實驗需要振蕩幾次進行培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是____________。 (3)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時,常采用平板劃線的方法進行接種,在進行下一區(qū)域劃線前要將接種環(huán)________________________。 (4)研究人員統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總
23、數(shù),選用10-4、10-5、10-6稀釋液進行涂布平板,每種稀釋液都設置了3個培養(yǎng)皿。從設計實驗的角度看,還應設置的一組對照實驗是__________________________,此對照實驗的目的是__________________________________。 (5)研究人員采用平板劃線法純化水樣中分離出的細菌。操作時,在第二次及以后的劃線,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是___________________________________________________________________。 劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的平行線上都不間斷地長
24、滿了菌落,第二劃線區(qū)域所劃的第一條平行線上無菌落,其他平行線上有菌落。造成第一條平行線無菌落可能的操作失誤有_____________________________________。 (6)在示意圖A和圖B中,____________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。 解析 閱讀題干和題圖可知,本題是利用微生物培養(yǎng)的知識分離高效降解化合物A的細菌,先分析題圖了解分離高效降解化合物A的細菌的過程,然后根據(jù)問題的具體內(nèi)容梳理相關知識點分析解答,圖A是平板劃線法,圖B是稀釋涂布平板法。 (1)培養(yǎng)基中加入化合物A是為分解化合物A的微生物提供碳源和氮源,分離出能分解化合物A的微
25、生物;這種培養(yǎng)基從功能上分屬于選擇培養(yǎng)基。(2)分析培養(yǎng)基的配方可知,該培養(yǎng)基由化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成,因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源;目的菌是需氧微生物,因此在培養(yǎng)過程中應該震蕩培養(yǎng),增加培養(yǎng)液中的溶氧量滿足微生物對氧氣的需求。 (3)平板劃線操作的工具是接種環(huán),對于接種環(huán)的滅菌方法應該是灼燒滅菌。 (4)實驗設計過程應遵循對照原則,該實驗還應增設一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照,以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染。 (5)對接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌;在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是:將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。接種環(huán)在使用前和每一次劃線后要進行灼燒滅菌,造成劃線無菌落可能的操作失誤是:接種環(huán)灼燒后未冷卻而燙死菌種或劃線未從第一區(qū)域末端開始。 (6)分析題圖可知,A培養(yǎng)皿采用的接種方法是平板劃線法,B培養(yǎng)皿采用的接種方法是稀釋涂布平板法。 答案 (1)篩選目的菌 選擇 (2)化合物A 異養(yǎng)需氧型 (3)灼燒并冷卻 (4)不接種的空白培養(yǎng)基 檢驗培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染 (5)將聚集的菌種逐步稀釋以便獲得單個菌落 接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一劃線區(qū)域末端開始 (6)B 11
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