2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過關(guān)練 考點(diǎn)47 動物細(xì)胞工程
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1、2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過關(guān)練 考點(diǎn)47 動物細(xì)胞工程 1.[xx·浙江高考]下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( ) A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型 B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞 C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆 D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀 解析:連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞其核型已發(fā)生改變;一個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群才為一個(gè)克隆;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞可能是不同細(xì)胞分裂形成的,其性狀可能不同。 答案:B 2.[xx·浙江高考]實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
2、 A.甲過程需要對實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒 B.乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化 C.丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型 D.丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性 解析:A進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)前需要對細(xì)胞進(jìn)行消毒,A正確;B進(jìn)行培養(yǎng)的組織細(xì)胞用胰蛋白酶消化分散成單個(gè)細(xì)胞,B正確;C丙過程屬于原代培養(yǎng),細(xì)胞的核型穩(wěn)定,C錯(cuò)誤;D丁過程屬于傳代培養(yǎng),期間部分細(xì)胞會出現(xiàn)異質(zhì)性,D正確; 答案:C 3.[xx·重慶高考]如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是( ) A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞 B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成 C.③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨
3、髓瘤細(xì)胞的特性 D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群 解析:①是獲得已經(jīng)免疫的B細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;胰蛋白酶使得組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;③同時(shí)具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性,C項(xiàng)錯(cuò)誤;④經(jīng)篩選后獲得能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,D項(xiàng)正確。 答案:D 4.[xx·課標(biāo)全國卷Ⅰ]某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目
4、60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問題: (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠,理由是_______________ ____________________________________________________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外
5、,可能還有___________________________________________________________________________, 體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是______________________________________ ____________________________________________________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是____________
6、________________________________________________________________。 解析:(1)據(jù)圖分析,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上,小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高,最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物,由于細(xì)胞膜具有流動性,且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性,故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后,小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會融合形成一個(gè)細(xì)胞核。小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)和骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目
7、60條)融合后,染色體可達(dá)100條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞,同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的。 答案:(1)四 Y Y小鼠的抗體效價(jià)最高 (2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100% (3)1 100 (4)不能無限增殖 5.[xx·海南高考] 單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)可引起水皰性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-Ⅰ的單克隆抗體可快速檢測HSV-Ⅰ。 回答下列問題: (1)在制備抗HSV-Ⅰ的單克隆抗體的過程中,先給小鼠注射一種純化的HSV-Ⅰ蛋白,一段時(shí)間后,若小鼠
8、血清中抗HSV-Ⅰ的抗體檢測呈陽性,說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了________反應(yīng),再從小鼠的________中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的________細(xì)胞融合,再經(jīng)過篩選、檢測,最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞,該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是________________________________________________________________________。 (2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體,可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的________中使其增殖,再從 ________中提取、純化獲得。 (3)通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識別這種HSV-Ⅰ蛋白,其原因是該抗
9、體具有________和________等特性。 解析:(1)由題意可知,單純皰疹病毒Ⅰ型可引起水泡性口唇炎,病毒蛋白HSV-Ⅰ可以作為一種抗原刺激機(jī)體通過免疫反應(yīng)產(chǎn)生特異性抗體。在單克隆抗體的制備過程中,首先應(yīng)注射純化的HSV-Ⅰ蛋白作為抗原,一段時(shí)間后對小鼠血清進(jìn)行檢測,如果抗HSV-Ⅰ蛋白的抗體檢測為陽性,說明小鼠體內(nèi)通過體液免疫產(chǎn)生了特異性抗體。此時(shí)可以從小鼠的免疫器官中,如脾臟、骨髓、淋巴結(jié)等部位獲取已免疫的B淋巴細(xì)胞,與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)過篩選檢測獲得能穩(wěn)定的產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。已免疫的B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生特異性抗體的特點(diǎn),而骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,因此獲得的雜交瘤細(xì)胞
10、具有既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體(抗HSV-Ⅰ蛋白的抗體)的特點(diǎn)。(2)獲得大量單克隆抗體的途徑有兩種:體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)。體外培養(yǎng)即通過動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量的雜交瘤細(xì)胞,進(jìn)而產(chǎn)生大量的單克隆抗體;體內(nèi)培養(yǎng)即將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中增殖,最后從小鼠的腹水中提取、純化單克隆抗體。(3)單克隆抗體是通過細(xì)胞融合技術(shù)將單一的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而獲得的,因此融合后的細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體,所制備的單克隆抗體具有特異性強(qiáng),靈敏度高的特點(diǎn)。 答案:(1)免疫 免疫器官 骨髓瘤 既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 (2)腹腔 腹水 (3)特異性強(qiáng) 靈敏度高 1.[xx·浙江嘉
11、興一模]與植物體細(xì)胞雜交相比,動物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是( ) A.細(xì)胞膜的流動性、離心 B.細(xì)胞膜的流動性、滅活的病毒 C.細(xì)胞的全能性、電激 D.細(xì)胞的全能性、滅活的病毒 解析:植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性,動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性;動物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因子有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等,其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子,而聚乙二醇、電激均可用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交。 答案:B 2.[xx·浙江嘉興測試]下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是( ) A.惡性腫瘤細(xì)胞系具有不死性和失去接觸抑制等特性 B.利用液體培養(yǎng)基和CO
12、2培養(yǎng)箱,模擬動物體的內(nèi)環(huán)境 C.因細(xì)胞具有相互依存關(guān)系,細(xì)胞克隆需滋養(yǎng)層細(xì)胞支持生長 D.細(xì)胞株沒有差異性,在連續(xù)傳代過程中遺傳性狀始終保持穩(wěn)定 解析:動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程,是細(xì)胞有絲分裂的過程,在分裂過程中,由于基因突變或染色體變異會造成遺傳物質(zhì)的改變。 答案:D 3.[xx·洛陽統(tǒng)考]下列有關(guān)生物細(xì)胞工程的敘述正確的是( ) A.動物細(xì)胞工程技術(shù)中,胚胎移植、胚胎分割、核移植和動物細(xì)胞培養(yǎng)均可獲得動物個(gè)體 B.用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是以單克隆抗體作為抗癌藥物定向殺死癌細(xì)胞 C.動物細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的癌變發(fā)生于傳代培養(yǎng)過程中 D.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比,依據(jù)
13、的原理、誘導(dǎo)融合的方法都相同,且獲得的融合細(xì)胞都具有雙親的遺傳特性 解析:胚胎移植和胚胎分割屬于胚胎工程,動物細(xì)胞培養(yǎng)不能獲得動物個(gè)體;“生物導(dǎo)彈”中的單克隆抗體不是抗癌藥物,它可攜帶抗癌藥物定向殺死癌細(xì)胞;動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比,二者誘導(dǎo)融合的方法不完全相同,動物細(xì)胞融合可借助滅活的病毒,植物體細(xì)胞雜交則不能。 答案:C 4.[xx·北京石景山期末]對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)。下列說法不正確的是( ) A.在利用肝腫瘤組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí),可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理 B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸 C.為了防止
14、細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素 D.在合成培養(yǎng)基中,通常需加入血清、血漿等天然成分 解析:本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)過程的知識,主要考查對基礎(chǔ)知識的理解和識記能力。胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊,分解細(xì)胞間的黏著物,分散開制備細(xì)胞懸液;細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的PH;為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素;在合成培養(yǎng)基中,通常需加入血清、血漿等天然成分。 答案:B 5.[xx·江蘇南通期末]下列關(guān)于動物細(xì)胞工程的敘述,正確的是( ) A.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中更換培養(yǎng)液的目的僅是為了補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì) B
15、.雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),可獲得單克隆抗體 C.雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng),可獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎 D.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,用胃蛋白酶處理組織使細(xì)胞分散 解析:本題考查動物細(xì)胞工程的知識,主要考查對基礎(chǔ)知識的理解和識記能力。動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中更換培養(yǎng)液的目的是為了補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì),和清除代謝產(chǎn)物;雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)也可以在小鼠體內(nèi)增殖,可獲得單克隆抗體;動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,用胰蛋白酶處理組織使細(xì)胞分散。 答案:B 6.[xx·北京市海淀區(qū)高三期中]對下面制備單克隆抗體的過程示意圖的敘述不正確的是( ) A.①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B.④中的篩
16、選是通過抗原、抗體反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的 C.②促進(jìn)細(xì)胞融合的過程可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D.⑤可以無限增殖 解析:①表示提取過程,指的是從小鼠的脾臟內(nèi)提取B淋巴細(xì)胞,從骨髓中提取骨髓瘤細(xì)胞。 答案:A 7.[xx·北京西城期末]某小鼠生活過程中被多種病原體感染過,科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料,利用單克隆抗體技術(shù),獲得了抗某種病原體的高純度單克隆抗體。下列敘述不正確的是( ) A.被多種病原體感染過的小鼠體內(nèi)會產(chǎn)生多種效應(yīng)B細(xì)胞 B.經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體 C.用“抗原—抗體檢測法”可篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 D.單克隆抗體的制備過程中使用了細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)
17、胞融合技術(shù) 解析:經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。 答案:B 8.[xx·江蘇無錫期末]人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān),抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測出HPV,從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生,以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程,請據(jù)圖回答: (1)上述單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有 ________________________________________________________________________。 (2)雜交瘤細(xì)胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是________,
18、在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括________(填下列序號) ①無抗體分泌的細(xì)胞②抗HPV抗體的分泌細(xì)胞③其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞 (3)對于抗體檢測呈________性的雜交細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀釋法,即稀釋細(xì)胞到3~10個(gè)細(xì)胞/mL,每孔加入細(xì)胞稀釋液________mL(0.1/1/10),使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞,達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。 (4)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體,理由是________________________________________________________________________。 (5)科
19、學(xué)家從某些無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG),該基因能激發(fā)動物細(xì)胞分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外,請?jiān)俸喴獙懗鲆环N制備單克隆抗體的思路____________________ ____________________________________________________________________________。 解析:本題考查單克隆抗體制備過程的知識,主要考查對基礎(chǔ)知識的理解和識記能力。(1)圖中單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合。(2)雜交瘤細(xì)胞是兩個(gè)細(xì)胞融合得到,染色
20、體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是染色體數(shù)目加倍,在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括無抗體分泌的細(xì)胞、抗HPV抗體的分泌細(xì)胞、其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞。(3)對于抗體檢測呈陽性的雜交克隆應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀釋法,即稀釋細(xì)胞到3~10個(gè)細(xì)胞/mL,每孔加入細(xì)胞稀釋液0.1 mL,使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞,達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。(4)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體,因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原,存在著排異反應(yīng)。(5)制備單克隆抗體的新思路是通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中。 答案:(1)動物細(xì)
21、胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合 (2)染色體數(shù)目加倍?、佗冖? (3)陽 0.1 (4)因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原,存在著排異反應(yīng) (5)通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中(答對其一即可) 9.[xx·浙江寧波期末]下圖為動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線(圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)),請據(jù)圖回答下列問題: (1)OB段的培養(yǎng)稱為________培養(yǎng),AB段可能發(fā)生了________現(xiàn)象,使增殖速率減緩,用________酶可使組織細(xì)胞分散開來,分裝到多個(gè)卡氏瓶中進(jìn)行________培養(yǎng)。 (2)B點(diǎn)的細(xì)
22、胞群體稱為________。B點(diǎn)時(shí)篩選出一個(gè)細(xì)胞,通過________方法單獨(dú)培養(yǎng)使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體,該細(xì)胞群體稱為________。 (3)E點(diǎn)后的細(xì)胞大多數(shù)具有________核型,從而可連續(xù)傳代。 解析:本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)過程的知識,主要考查對基礎(chǔ)知識的理解和識記能力。(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)過程,10代以內(nèi)的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),此時(shí)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象,用胰蛋白酶可使組織細(xì)胞分散開來,分裝到多個(gè)卡氏瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(2)B點(diǎn)的細(xì)胞群體稱為細(xì)胞系,B點(diǎn)時(shí)篩選出一個(gè)細(xì)胞,通過克隆培養(yǎng)法單獨(dú)培養(yǎng)使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體,該細(xì)胞群體稱為細(xì)胞株。(3)E點(diǎn)后的細(xì)胞
23、發(fā)生了基因突變,大多數(shù)具有異倍體核型,從而可連續(xù)傳代。 答案:(1)原代 接觸抑制 胰蛋白 傳代 (2)細(xì)胞系 克隆培養(yǎng) 細(xì)胞株 (3)異倍體 10.[xx·東城區(qū)普通校聯(lián)考]克隆豬成功率較低,與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因,用PCR技術(shù)可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系??寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如圖。 請回答: (1)圖中①過程采用的技術(shù)手段稱做________技術(shù)。 (2)②過程所用的培養(yǎng)液與植物組織的培養(yǎng)基從成分上主要區(qū)別是前者必須含有________。 (3)在PCR過程中可檢測出cDNA中
24、Bcl-2 cDNA的分子數(shù),進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl-2 mRNA的分子數(shù),從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。 ①圖中X表示________過程。 ②從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl-2 mRNA的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成2種________用于PCR擴(kuò)增,除此以外在PCR反應(yīng)體系中還應(yīng)包含的主要成分有擴(kuò)增緩沖液、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及________。 ③PCR擴(kuò)增過程第一輪循環(huán)的模板是________。 (4)克隆豬的成功培育說明_____________________________________________。 解析:本題主要考查單克隆抗體制備的
25、過程的知識;意在考查考生識記和理解能力。(1)①是體細(xì)胞和去核的卵母細(xì)胞形成重組細(xì)胞,該過程的技術(shù)為體細(xì)胞核移植。(2)②動物細(xì)胞培養(yǎng)過程培養(yǎng)液中需添加血清。(3)由mRNA獲得cDNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄。PCR擴(kuò)增過程中需2種引物。擴(kuò)增過程中需TaqDNA聚合酶。PCR擴(kuò)增過程第一輪循環(huán)的模板是逆轉(zhuǎn)錄形成的Bcl-2 cDNA。(4)克隆豬的成功說明了高度分化的動物細(xì)胞核具有全能性。 答案:(1)體細(xì)胞核移植 (2)動物(豬)血清 (3)①逆轉(zhuǎn)錄?、谝铩aqDNA聚合酶(耐高溫DNA聚合酶)?、跙cl-2 cDNA (4)高度分化的動物細(xì)胞核具有全能性 11.[xx·甘肅蘭州第一次
26、診斷]下圖可表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程,請據(jù)圖回答: (1)若A、B細(xì)胞為動物細(xì)胞,A、B融合為C的過程說明了細(xì)胞膜具有________。若A、B到C的過程是體外受精過程,則精子必須進(jìn)行________處理,卵子必須發(fā)育到________期,用________處理,可以獲得較多的卵子。 (2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了________,這種酶可能是________酶。A、B到C細(xì)胞的過程中,常用的物理方法是________;融合完成的標(biāo)志是__________________________;形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用________技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。培養(yǎng)過程
27、中,所用的固體培養(yǎng)基除了添加水、無機(jī)鹽、糖等營養(yǎng)物質(zhì),還必須加入________和細(xì)胞分裂素等調(diào)節(jié)物質(zhì)。 (3)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞,B細(xì)胞為能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為________細(xì)胞,這種細(xì)胞既能無限繁殖,又能產(chǎn)生_______________________________。 (4)若該過程是制備單克隆抗體的過程,在A、B到C的過程中,所形成的C有________種(僅限于兩個(gè)細(xì)胞的融合),用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是________。從中選擇出它的方法是在特定的________培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 解析:本題考查細(xì)胞工程的應(yīng)用知識,主要考查對基礎(chǔ)知識的理解和識記能力。(1)細(xì)胞
28、融合過程說明了細(xì)胞膜具有流動性,體外受精過程精子必須進(jìn)行獲能處理,卵子必須發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期,用促性腺激素處理,可以獲得較多的卵子。(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解去除了細(xì)胞壁,常用的酶是纖維素酶和果膠酶,誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的物理方法是離心、振動、電刺激,融合完成的標(biāo)志是形成了新的細(xì)胞壁,形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成植株,所用的固體培養(yǎng)基除了添加水、無機(jī)鹽、糖等營養(yǎng)物質(zhì),還必須加入生長素和細(xì)胞分裂素等調(diào)節(jié)物質(zhì)。(3)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,特點(diǎn)是這種細(xì)胞既能無限繁殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體。(4)若該過程是制備單克隆抗體的過程,骨髓瘤細(xì)胞
29、和B淋巴細(xì)胞融合會出現(xiàn)AA融合、BB融合、AB融合3種細(xì)胞,進(jìn)行培養(yǎng)的是融合的雜交瘤細(xì)胞,從中選出它的方法是在特定的選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 答案:(1)流動性 獲能 減數(shù)第二次分裂中 促性腺激素 (2)細(xì)胞壁 纖維素酶和果膠 離心、振動、電刺激 形成了新的細(xì)胞壁 植物組織培養(yǎng) 生長素 (3)雜交瘤細(xì)胞 單克隆抗體(特異性抗體) (4)3 融合的雜交瘤細(xì)胞 選擇性 12.[xx·河北唐山一模]某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究,請據(jù)圖回答下列問題。 (1)與纖維母細(xì)胞相比,過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較________。 (2)過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞中基因________的結(jié)果。 (
30、3)過程③需要用________性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,得到的Z細(xì)胞還需進(jìn)行________培養(yǎng)和________,經(jīng)多次篩選,就可以得到足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。 (4)科學(xué)家找到一種“無限增殖調(diào)控基因”能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂,通過基因工程技術(shù)將該基因?qū)氪ǖ腳_______細(xì)胞(填細(xì)胞名稱),來制備單克隆抗體,基因?qū)氩⒊晒Ρ磉_(dá)后,受體細(xì)胞將具有______________________________________________________ 的特點(diǎn),在上述操作中用到了PCR擴(kuò)增儀,其作用是_________________________ __________________
31、__________________________________________________________。 解析:(1)纖維母細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,誘導(dǎo)干細(xì)胞分化程度較低,所以誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性要比纖維母細(xì)胞的全能性高。 (2)由誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、上皮細(xì)胞等體細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。 (3)X細(xì)胞、Y細(xì)胞的融合有X細(xì)胞與X細(xì)胞的融合、Y細(xì)胞與Y細(xì)胞的融合、X細(xì)胞和Y細(xì)胞的融合,需要用選擇培養(yǎng)基對此培養(yǎng)篩選出X細(xì)胞和Y細(xì)胞的融合體,然后進(jìn)行克隆化培養(yǎng),專一抗體檢測,呈陽性后方能大規(guī)模培養(yǎng)。 (4)能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞,制備單克隆抗體的細(xì)胞應(yīng)具有不斷增殖
32、的能力和產(chǎn)生抗體的能力,PCR擴(kuò)增儀能夠快速大量復(fù)制DNA片段。 答案:(1)高 (2)選擇性表達(dá) (3)選擇 克隆化 抗體檢測 (4)漿(受體) 既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一的抗體 大量獲得目的基因 下圖為利用人成纖維細(xì)胞(具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活)和小鼠骨髓瘤細(xì)胞(具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活)進(jìn)行人類基因定位的操作示意圖,請回答相關(guān)問題。 (1)圖示方法是________________技術(shù)的應(yīng)用,該技術(shù)的基礎(chǔ)是________________技術(shù)。 (2)操作所用的成纖維細(xì)胞應(yīng)傳________代以內(nèi),誘導(dǎo)融合時(shí)需要加入的促融劑是_______
33、_。 (3)人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過細(xì)胞膜融合形成________________________細(xì)胞,再經(jīng)過一次__________________,形成單核細(xì)胞。 (4) HAT培養(yǎng)基起________培養(yǎng)作用,培養(yǎng)時(shí)溫度應(yīng)為________℃,操作中加入烏本苷的目的是________________________________。 (5)下表所示為雜交細(xì)胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4種酶(“+”表示存在,“-”表示不存在),這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生,據(jù)表判斷,編碼________酶的基因位于染色體2上,排列方式呈________。 雜交細(xì)胞 A B C 人類
34、 染色體 1 - + + 2 + - + 3 + + - 酶 m + - + n - + + p + - + q - + + 解析:(1)圖示骨髓瘤細(xì)胞與成纖維細(xì)胞通過動物細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞,此技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)通常為10代以內(nèi),可以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)人、鼠細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞膜融合會成為多核細(xì)胞,再經(jīng)過一次有絲分裂,形成單核細(xì)胞。(4)據(jù)題干信息,人成纖維細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上存活,而小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活,則HAT培養(yǎng)基起選擇作用,篩選出人成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞,操作中加入烏本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞,篩選出雜交細(xì)胞。(5)雜交細(xì)胞A和C中都有染色體2,細(xì)胞A和C中均有酶m和p,即編碼m和p酶的基因位于染色體2上;該基因在染色體上呈線性排列。 答案:(1)動物細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) (2)10 PEG(或滅活病毒) (3)多核 有絲分裂 (4)選擇 36.5±0.5 除去成纖維細(xì)胞 (5)m和p 線性
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