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2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 高考真題分類題庫 2014年知識點21 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)

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1、知識點21 現(xiàn)代生物科技專題 1.(2014·江蘇高考·T2)下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述,正確的是 (  ) A.通過細胞分裂不斷增加細胞數(shù)量,并在一定時期發(fā)生細胞分化 B.胚胎發(fā)育過程中細胞不斷分裂,但不發(fā)生凋亡 C.隨著細胞分裂次數(shù)的增加,蛙胚的有機物總量不斷增加 D.發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加 【解題指南】關(guān)鍵知識:蛙是卵生動物,胚胎發(fā)育需要的營養(yǎng)物質(zhì)只來自受精卵,不從外界獲取。 【解析】選A。本題考查動物胚胎發(fā)育的過程。受精卵通過細胞分裂增加細胞數(shù)量,囊胚期細胞開始出現(xiàn)分化,到原腸胚的時候,細胞分化達到最大程度,所以A正確;胚胎發(fā)育過程中細胞不

2、斷分裂,也會發(fā)生細胞的凋亡,因此B錯誤;隨著細胞分裂次數(shù)的增加,蛙胚的有機物總量不斷減少,所以C錯誤;發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得氧氣,但是營養(yǎng)物質(zhì)全部來自受精卵,所以營養(yǎng)物質(zhì)逐漸減少,故D錯誤。 2.(2014·江蘇高考·T19)杜泊羊以其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點,被稱為“鉆石級”肉用綿羊??蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示,相關(guān)敘述正確的是 (  ) A.為了獲得更多的卵母細胞,需用雌激素對雌性杜泊羊進行處理 B.從卵巢中采集的卵母細胞可直接與獲能的精子進行體外受精 C.為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng),應(yīng)注射免疫抑制劑 D.為了進一步擴大繁殖規(guī)模,可通過

3、胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎 【解題指南】(1)圖示信息:圖解表示的是通過體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)獲得試管動物的過程。 (2)關(guān)鍵知識:人工獲取的卵母細胞是否需要進行成熟培養(yǎng)要根據(jù)采集部位而定,如果是從輸卵管采集的卵母細胞,可直接與獲能的精子在體外受精;如果是從卵巢采集的卵母細胞,要經(jīng)過體外人工培養(yǎng),成熟后才能與獲能的精子受精。 【解析】選D。本題考查胚胎移植過程和胚胎分割移植的應(yīng)用。用促性腺激素促進雌性個體超數(shù)排卵,而不是雌激素,故A錯誤;從卵巢中采集的卵母細胞,未發(fā)育成熟,需要經(jīng)過體外人工培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精,故B錯誤;受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反

4、應(yīng),故C錯誤;為了進一步擴大繁殖規(guī)模,可通過胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎或多胎,故D正確。 3.(2014·江蘇高考·T23)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,錯誤的是(多選)  (  ) A.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識別6個核苷酸序列 B.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng) C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因 D.抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達 【解題指南】關(guān)鍵知識:PCR反應(yīng)中加熱至90℃以上時,DNA解鏈→冷卻到50℃左右,引物結(jié)合到互補DNA鏈→加熱至72℃左右,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的

5、合成。 【解析】選A、B、C。本題考查基因工程技術(shù)。限制性核酸內(nèi)切酶大多是特異性識別6個核苷酸序列,但也有些限制性核酸內(nèi)切酶能識別由4、5或8個核苷酸組成的序列,A錯誤;PCR中耐高溫的DNA聚合酶只是在延伸階段發(fā)揮催化作用,B錯誤;載體質(zhì)粒上抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇,不是抗生素合成基因,C錯誤;目的基因?qū)肓耸荏w細胞不一定都能正常表達,D正確。 4.(2014·重慶高考·T2)生物技術(shù)安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點。下列敘述,錯誤的是 (  ) A.應(yīng)嚴格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因,避免產(chǎn)生對人類有害的物質(zhì) B.當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗,但不

6、反對治療性克隆 C.反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒 D.生物武器是用微生物、毒素、干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力 【解題指南】(1)隱含信息:生物武器具有有害性,無害的干擾素不屬于生物武器。 (2)關(guān)鍵知識:克隆人違背倫理道德,選擇性設(shè)計嬰兒會造成性別比例失調(diào)。 【解析】選D。本題考查生物技術(shù)的安全性和倫理問題。A項,在轉(zhuǎn)基因過程中,避免基因污染和對人類的影響,必須嚴格選擇目的基因,故正確;B項,人們普遍不反對治療性克隆,堅決反對生殖性克隆,故正確;C項,反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒,會造成性別比例失調(diào)等,故正確;D項,生物武器是指

7、利用微生物、毒素、重組致病菌等侵襲人、畜或農(nóng)作物等目標(biāo),干擾素為淋巴因子,對人無害,故錯誤。 5.(2014·重慶高考·T4)下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述,正確的是 (  ) A.②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與 B.③侵染植物細胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上 C.④的染色體上若含抗蟲基因,則⑤就表現(xiàn)出抗蟲性狀 D.⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異 【解題指南】(1)圖示信息:將目的基因連接在載體上→將基因表達載體導(dǎo)入受體細胞→植物組織培養(yǎng)。 (2)關(guān)鍵知識:基因工程的工具酶、目的基因的檢測和表達。 【解析】選D。本

8、題考查基因工程。構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶,故A項錯誤;③侵染植物細胞后,重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到④的染色體DNA上,故B項錯誤;染色體上含有目的基因,但目的基因也可能不表達,或者表達的蛋白質(zhì)不具有生物活性,故C項錯誤;植株表現(xiàn)出抗蟲性狀,說明含有目的基因,屬于基因重組,為可遺傳變異,故D項正確。 6.(2014·天津高考·T4)為達到相應(yīng)目的,必須通過分子檢測的是 (  ) A.攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選 B.產(chǎn)生抗人白細胞介素-8抗體的雜交瘤細胞的篩選 C.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定 D.21三體綜合征的診斷 【解題指

9、南】(1)題干關(guān)鍵詞:“分子檢測”。 (2)關(guān)鍵知識:篩選產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細胞屬于分子水平,篩選受體菌和診斷21三體綜合征屬于細胞水平,鑒定抗蟲棉植株抗蟲效果屬于個體水平。 【解析】選B。本題考查基因工程、細胞工程和人類遺傳病的檢測??赏ㄟ^將受體菌接種在含鏈霉素的培養(yǎng)基中篩選攜帶鏈霉素抗性基因的受體菌,故A項錯誤;產(chǎn)生抗人白細胞介素-8抗體的雜交瘤細胞應(yīng)通過抗原-抗體雜交技術(shù)篩選,故B項正確;在棉花田中人工放入害蟲可檢驗轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株的抗蟲效果,故C項錯誤;可用顯微鏡觀察體細胞的染色體數(shù)目,確定21三體綜合征,故D項錯誤。 7.(2014·廣東高考·T25)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯

10、酶(CarE)制劑的流程如圖所示,下列敘述正確的是(雙選) (  ) A.過程①需使用逆(反)轉(zhuǎn)錄酶 B.過程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因 C.過程③使用的感受態(tài)細胞可用NaCl溶液制備 D.過程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細胞 【解題指南】(1)圖示信息:通過反轉(zhuǎn)錄合成目的基因,構(gòu)建重組表達載體,導(dǎo)入大腸桿菌表達出CarE制劑。 (2)關(guān)鍵知識:基因工程的基本操作程序。 【解析】選A、D。過程①是以mRNA為模板合成DNA的過程,即反轉(zhuǎn)錄過程,需要反轉(zhuǎn)錄酶的催化,故A項正確。過程②表示利用PCR擴增目的基因,在PCR過程中不需要解旋酶,而是通過控制

11、溫度來達到解旋的目的,故B項錯誤。利用Ca2+處理大腸桿菌,使之成為感受態(tài)細胞,故C項錯誤??捎肈NA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細胞,故D項正確。 8.(2014·浙江高考·T3)下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是 (  ) A.連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型 B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞 C.由多個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆 D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀 【解題指南】(1)關(guān)鍵知識:細胞系的概念及特點、克隆的概念、細胞癌變的機理。 (2)隱含信息:細胞癌變具有可逆性的特點;由一個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆;動物細胞培

12、養(yǎng)至細胞系時遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,性狀也會發(fā)生改變。 【解析】選B。本題主要考查動物細胞培養(yǎng)及細胞癌變知識。A項中,連續(xù)細胞系是指獲得無限繁殖能力的細胞系,無限細胞系大多已發(fā)生異倍化(即改變了原有的二倍體核型),具異倍體核型,故A項錯誤。B項中,癌細胞的發(fā)病機理是基因突變,那么某些適宜條件下,突變了的基因也有可能再突變?yōu)樵瓉淼恼;?故B項正確。C項中一個克隆是指由一個細胞經(jīng)培養(yǎng)形成的一群細胞,故C項錯誤。未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞可能來源于多個不同的細胞,因此不一定具有相同的性狀,故D項錯誤。 9.[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題](2014·新課標(biāo)全國卷Ⅱ·T40)植物甲具有極強的耐旱性,其

13、耐旱性與某個基因有關(guān),若從該植物中獲得該耐旱基因,并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。 回答下列問題: (1)理論上,基因組文庫含有生物的      基因;而cDNA文庫含有生物的      基因。 (2)若要從植物甲中獲得耐旱基因,可首先建立該植物的基因組文庫,再從中      出所需的耐旱基因。 (3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌,并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物      的體細胞中,經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達,應(yīng)檢測此再生植株中該基因的      ,如果檢測結(jié)果呈陽性,再在田間試驗中檢測植株的      是否得到提高。

14、 (4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交,子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1時,則可推測該耐旱基因整合到了     (填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”) 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“自交”“子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1”。 (2)關(guān)鍵知識:基因文庫類型、基因工程操作流程。 【解析】本題考查基因工程的相關(guān)知識。 (1)基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫,基因組文庫包含生物基因組的全部基因,cDNA文庫是以mRNA反轉(zhuǎn)錄后構(gòu)建的,只含有已經(jīng)表達的基因(并不是所有基因都會表達),即部分基因。 (2)從基因文庫中獲取目的基因需要進行篩選。 (3)要提

15、高植物乙的耐旱性,需要利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細胞中。要檢測目的基因(耐旱基因)是否表達應(yīng)該用抗原抗體雜交法檢測目的基因(耐旱基因)的表達產(chǎn)物(即耐旱的相關(guān)蛋白質(zhì));個體水平檢測可以通過田間試驗,觀察檢測其耐旱情況。 (4)如果耐旱基因整合到同源染色體的一條上,則轉(zhuǎn)基因植株的基因型可以用A_表示(A表示耐旱基因,_表示另一條染色體上沒有相應(yīng)的基因),A_自交后代基因型為AA∶A_∶_ _=1∶2∶1,所以耐旱∶不耐旱=3∶1,與題意相符;如果耐旱基因整合到同源染色體的兩條上,則子代將全部表現(xiàn)耐旱,不會出現(xiàn)性狀分離。 答案:(1)全部 部分 (2)篩選 (3)乙 表達產(chǎn)物

16、 耐旱性 (4)同源染色體的一條上 10.(2014·福建高考·T33)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞??蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如圖: (1)步驟①中,在核移植前應(yīng)去除卵母細胞的       。 (2)步驟②中,重組胚胎培養(yǎng)到     期時,可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞。 (3)步驟③中,需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達載體。可以根據(jù)Rag2基因的     設(shè)計引物,利用PCR技術(shù)擴增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體,所選擇的表

17、達載體上應(yīng)具有     酶的酶切位點。 (4)為檢測Rag2基因的表達情況,可提取治療后小鼠骨髓細胞的     ,用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。 【解題指南】(1)關(guān)鍵知識:檢測目的基因表達的方法是抗原-抗體雜交(免疫)法。 (2)圖示信息:過程①利用了動物細胞核移植技術(shù);過程②利用了胚胎工程技術(shù);過程③利用了基因工程的相關(guān)技術(shù)。 【解析】本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程技術(shù)。 (1)步驟①是核移植過程。體細胞核移植前要除去受體卵母細胞的細胞核,原因是若不去掉卵母細胞的細胞核,就會造成細胞里面有兩個細胞核,使得遺傳物質(zhì)不穩(wěn)定。 (2)ES細胞是由早期胚胎(囊胚)的內(nèi)細胞團

18、分離出來的一類細胞。 (3)步驟③為獲取目的基因,并把目的基因?qū)胧荏w細胞的過程。在生物體外可通過PCR技術(shù)擴增目的基因,其條件是模板DNA、根據(jù)Rag2基因的核苷酸序列設(shè)計的引物、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶等,另外根據(jù)題干可知,獲得Rag2基因需要用HindⅢ和PstⅠ限制酶,所以在構(gòu)建表達載體時,所選擇的表達載體上應(yīng)具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位點。 (4)檢測目的基因是否翻譯相應(yīng)蛋白質(zhì)時,應(yīng)采用抗原—抗體雜交(免疫)法,即提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進行抗原—抗體雜交,看是否有雜交帶。 答案:(1)細胞核 (2)囊胚 (3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白質(zhì)

19、 11.(16分)(2014·廣東高考·T29)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下: 新生營養(yǎng)芽PLBsPLBs實驗結(jié)果 在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示,請回答下列問題: (1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是            ,誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱      。 (2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在              ,             , 

20、    。 (3)脫落酸(ABA)能提高生物堿含量,但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng),推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實驗驗證該推測,在設(shè)計實驗方案時探討了以下問題: ①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個ABA處理組,1個空白對照組,3次重復(fù)。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基      后按比例加入。 ②實驗進程和取樣:實驗50天完成,每10天取樣,將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后再測定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為     。 ③依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃

21、度和培養(yǎng)時間:當(dāng)某3個樣品(重復(fù)樣)的          時,其對應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對應(yīng)的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。 【解題指南】(1)圖示信息:實驗流程中形成PLBs,聯(lián)系由植物離體組織形成愈傷組織的過程;坐標(biāo)曲線圖中曲線的走勢表示生物堿含量和PLBs重量變化情況,光照影響PLBs重量。 (2)隱含知識:脫落酸的作用、細胞的全能性、脫分化、影響PLBs的因素。 【解析】本題考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識及讀圖析圖能力、分析實驗?zāi)芰Α? (1)新生營養(yǎng)芽細胞分化程度低,容易形成PLBs;根據(jù)題干可知,PLBs類似愈傷組織,外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。 (2)據(jù)圖分析可知,光照下

22、PLBs的重量高于黑暗條件下,原因可能是光照有利于細胞增殖、葉綠素的形成和進行光合作用制造有機物。 (3)①由于ABA受熱易分解,所以各組液體培養(yǎng)基滅菌后冷卻,再加入ABA。②根據(jù)題干信息可知,實驗中4組ABA處理組加1組對照組,3次重復(fù),測定10、20、30、40、50天共5組數(shù)據(jù),共計75組樣品。③適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量,當(dāng)樣品中生物堿含量的平均值最大時,所對應(yīng)的ABA濃度和培養(yǎng)時間為最適。 答案:(1)細胞分化程度低,容易形成PLBs 脫分化 (2)增殖明顯 有利于葉綠素的形成 進行光合作用制造有機物 (3)①滅菌冷卻 ②75?、凵飰A平均含量最大 12.[生物——選

23、修3:現(xiàn)代生物科技專題](2014·新課標(biāo)全國卷Ⅰ·T40) 某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如右圖所示。 若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目40條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。 回答下列問題: (1)制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過   

24、  次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的是   小鼠,理由是 。 (2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有                ,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是 。 (3)雜交瘤細胞中有    個細胞核,染色體數(shù)目最多是    條。 (4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是 

25、 。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“效價”“雜交瘤細胞”“傳代培養(yǎng)”。 (2)隱含信息:柱形圖中效價越高,能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)越大,說明免疫后小鼠的B淋巴細胞產(chǎn)生抗體能力越強。 (3)關(guān)鍵知識:制備單克隆抗體的技術(shù)流程和動物細胞體外培養(yǎng)的過程。 【解析】本題考查制備單克隆抗體的相關(guān)知識。 (1)據(jù)圖中數(shù)據(jù)分析,第四次注射后Y、Z小鼠的血清抗體效價均達到16 000以上,免疫后小鼠Y的B淋巴細胞產(chǎn)生抗體效價最高,最適用于制備單克隆抗體。 (2)B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合在一起時,可能發(fā)生B淋巴細胞之

26、間的融合,骨髓瘤細胞之間的融合和B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。 (3)雜交瘤細胞形成后,小鼠的B淋巴細胞核與其骨髓瘤細胞核會融合形成一個細胞核。染色體可達100條,有絲分裂后期染色體數(shù)目最多為200條。 (4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是能惡性增殖的細胞,分裂次數(shù)是有限的。 答案:(1)四 Y Y小鼠的抗體效價最高 (2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞,骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞 細胞融合是隨機的,沒有特異性且融合率達不到100% (3)1 200 (4)不能無限增殖 13.(2014·山東高考·T36)人組織纖溶酶原激活物(htP

27、A)是一種重要的藥用蛋白,可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下: (1)htPA基因與載體用             切割后,通過DNA連接酶連接,以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA,可采用         技術(shù)。 (2)為獲取更多的卵(母)細胞,要對供體母羊注射促性腺激素,使其     。采集的精子需要經(jīng)過     ,才具備受精能力。 (3)將重組表達載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是     。為了獲得母羊,移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行     。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體,這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的     。 (4)若在轉(zhuǎn)h

28、tPA基因母羊的羊乳中檢測到         ,說明目的基因成功表達。 【解題指南】(1)圖示信息:轉(zhuǎn)htPA基因母羊羊乳的獲得過程。 (2)關(guān)鍵知識:用同種限制酶切割目的基因與載體,獲得相同的黏性末端,才能進行堿基互補配對。 【解析】本題主要考查基因工程和胚胎工程。 (1)為保證切割后的載體與切出的目的基因具有相同的黏性末端,應(yīng)用同種限制酶切割目的基因和載體。 (2)為獲取更多的卵(母)細胞,需要對供體母羊進行超數(shù)排卵處理。采集的精子需要經(jīng)過獲能處理后,才具備受精能力。 (3)將目的基因?qū)雱游锛毎某S梅椒ㄊ秋@微注射法。為獲得某一性別的動物,在胚胎移植前需進行性別鑒定。胚胎分割

29、技術(shù)可看作克隆,這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的全能性。 (4)目的基因成功表達的標(biāo)志是檢測到相應(yīng)的目的基因控制合成的產(chǎn)物。 答案:(1)同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交(或核酸探針) (2)超數(shù)排卵 獲能(處理) (3)顯微注射法 性別鑒定 全能性 (4)htPA(或人組織纖溶酶原激活物) 14.(2014·天津高考·T8)嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶,為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用,開展了以下試驗: Ⅰ.利用大腸桿菌表達BglB酶 (1)PCR擴增bglB基因時,選用     基因組DNA作模板。 (2)右圖為質(zhì)粒限制酶酶切

30、圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識別序列。為使PCR擴增的bglB基因重組進該質(zhì)粒,擴增的bglB基因兩端需分別引入     和     不同限制酶的識別序列。 (3)大腸桿菌不能降解纖維素,但轉(zhuǎn)入上述構(gòu)建好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力,這是因為 。 Ⅱ.溫度對BglB酶活性的影響 (4)據(jù)圖1、2可知,80℃保溫30分鐘后,BglB酶會      ;為高效利用BglB酶降解纖維素,反應(yīng)溫度最好控制在     (單選)。 A.50℃   B.60℃   C.70℃   D.80℃

31、 Ⅲ.利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性 在PCR擴增bglB基因的過程中,加入誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過篩選,可獲得能表達出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。 (5)與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞桿菌相比,上述育種技術(shù)獲取熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR過程中   (多選)。 A.僅針對bglB基因進行誘變 B.bglB基因產(chǎn)生了定向突變 C.bglB基因可快速累積突變 D.bglB基因突變不會導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變 【解題指南】(1)圖示信息:Ⅰ.質(zhì)粒作為載體,應(yīng)具備的結(jié)構(gòu)有限制酶切割位點、啟動子、終止

32、子和標(biāo)記基因等。Ⅱ.圖1表示溫度對酶活性的影響,圖2表示不同溫度下酶的熱穩(wěn)定性的大小。 (2)關(guān)鍵知識:獲取目的基因、基因表達載體的構(gòu)建、酶的活性和熱穩(wěn)定性、誘變育種的原理。 【解析】本題考查基因工程、酶的活性和變異的相關(guān)知識。 (1)bglB基因存在于嗜熱土壤芽胞桿菌基因組中,故應(yīng)以該菌的基因組DNA為模板進行PCR擴增。 (2)目的基因與質(zhì)粒進行重組時,需將目的基因插入啟動子和終止子之間,且應(yīng)靠近啟動子和終止子,結(jié)合示意圖可知,應(yīng)在擴增的bglB基因兩端分別引入NdeⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識別序列。 (3)該基因表達載體中含有bglB基因,其可表達產(chǎn)生β-葡萄糖苷酶,可分解纖

33、維素,這樣大腸桿菌就獲得了分解纖維素的能力。 (4)由圖2可知,BglB酶在80℃保溫30分鐘后,就會失活;由圖1可知,當(dāng)溫度為60℃~70℃時,酶活性較高,而由圖2可知,70℃保溫30分鐘,酶活性會減弱,而60℃保溫30分鐘后酶活性基本不發(fā)生變化,由此可知為高效利用BglB酶降解纖維素,反應(yīng)溫度最好控制在60℃。 (5)在bglB基因擴增過程中加入誘變劑進行誘變處理,相比于誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞桿菌,針對性更強;基因突變是不定向的;由于PCR過程中基因擴增即DNA復(fù)制快速進行,發(fā)生突變后可進行快速累積,進而便于篩選;基因突變可能導(dǎo)致氨基酸數(shù)目的改變,如突變后的密碼子變?yōu)榻K止密碼子,可

34、導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成提前終止,進而導(dǎo)致氨基酸數(shù)目變少。 答案:(1)嗜熱土壤芽胞桿菌 (2)NdeⅠ BamHⅠ (3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶 (4)失活 B (5)A、C 15.(2014·江蘇高考·T28)某研究者用非洲爪蟾性腺為材料進行了下列實驗。請回答下列問題: (1)對非洲爪蟾的精巢切片進行顯微觀察,繪制了以下示意圖。 上圖中甲、乙、丙、丁細胞含有同源染色體的有     ;稱為初級精母細胞的有     。丁細胞中染色體的互換區(qū)段內(nèi)同一位點上的基因      (填“相同”、“不相同”或“不一定相同”)。 (2)如對卵巢切片進行

35、顯微觀察,無法看到和乙細胞同時期的細胞,其原因是         。 (3)該研究者進行了一系列“誘導(dǎo)早期卵母細胞成熟的物質(zhì)”實驗,結(jié)果如下: 由實驗一可得出推論:     含有可以誘導(dǎo)卵母細胞成熟的物質(zhì)。 由實驗二可得出推論:這種誘導(dǎo)早期卵母細胞成熟的“促成熟因子”的化學(xué)成分是     ;孕酮在實驗二中的作用是       。 【解題指南】(1)關(guān)鍵知識:非洲爪蟾的精巢中既有進行有絲分裂的細胞,也有進行減數(shù)分裂的細胞。 (2)圖示信息:能識別有絲分裂和減數(shù)分裂各時期的圖像。 【解析】本題考查細胞分裂圖像的識別、減數(shù)分裂過程、早期卵母細胞的培養(yǎng)。 (1)根據(jù)有絲分裂和減數(shù)分裂

36、的特征可以判斷:甲為減數(shù)第一次分裂的中期、乙為減數(shù)第二次分裂的后期、丙為有絲分裂的后期、丁為減數(shù)第一次分裂的后期。二倍體生物有絲分裂(圖丙)和減數(shù)第一次分裂(圖甲、圖丁)有同源染色體,減數(shù)第二次分裂(圖乙)無同源染色體;雄性生物減數(shù)第一次分裂的細胞均稱為初級精母細胞。丁中同源染色體的姐妹染色單體之間交叉互換,互換區(qū)段內(nèi)同一位點上的基因是否相同與同源染色體相同位置含的基因有關(guān),如果同源染色體上含相同基因,則互換區(qū)段內(nèi)同一位點仍是相同基因,如果同源染色體上含等位基因,則互換區(qū)段內(nèi)同一位點是不同基因。 (2)排卵排出的卵子先在輸卵管中發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期,只有在受精的過程中才能繼續(xù)進行減數(shù)第

37、二次分裂,發(fā)生圖乙的減數(shù)第二次分裂后期。因此在卵巢中觀察不到和乙細胞同時期的細胞。 (3)通過實驗一的相互對照可知,含有成熟卵細胞的細胞質(zhì)才能使早期卵母細胞發(fā)育成成熟卵細胞,說明成熟卵細胞的細胞質(zhì)中含有可以誘導(dǎo)卵母細胞成熟的物質(zhì)。由實驗二孕酮處理組,可以得出孕酮有誘導(dǎo)早期卵母細胞成熟的功能;當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成抑制劑與孕酮同時處理時,早期卵母細胞就不能發(fā)育成熟,說明蛋白質(zhì)的合成與促進早期卵母細胞成熟有關(guān)。由此可以推測:誘導(dǎo)早期卵母細胞成熟的“促成熟因子”的化學(xué)成分是蛋白質(zhì);孕酮誘導(dǎo)早期卵母細胞合成“促成熟因子”從而促進其發(fā)育成熟。 答案:(1)甲、丙、丁 甲、丁 不一定相同 (2)卵母細胞在

38、卵巢中不能分裂到該時期 (3)成熟卵細胞的細胞質(zhì) 蛋白質(zhì) 誘導(dǎo)早期卵母細胞合成“促成熟因子” 16.(2014·海南高考·T31)[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題]下圖是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),制備“工程菌”的示意圖。 據(jù)圖回答: (1)獲得A有兩條途徑:一是以A的mRNA為模板,在      酶的催化下,合成互補的單鏈DNA,然后在     的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需基因;二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的      序列,推測出相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補配對原則,推測其DNA的    序列,再通過化學(xué)方法合成所需基因。 (2)利用PCR技術(shù)擴增DNA時,需要在

39、反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有    、    、4種脫氧核糖核苷三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶,擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。 (3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為    。 (4)在基因工程中,常用Ca2+處理D,其目的是                            。 【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)”。 (2)關(guān)鍵知識:基因工程的原理和技術(shù)、蛋白質(zhì)工程和PCR技術(shù)的應(yīng)用。 【解析】本題主要考查基因工程及PCR技術(shù)應(yīng)用的相關(guān)知識。 (1)利用反

40、轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是:以mRNA為模板,在逆(反)轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA,然后在DNA聚合酶的作用下,合成雙鏈DNA分子;根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是:根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補配對原則,推測DNA中脫氧核苷酸的排列順序,通過化學(xué)方法合成。 (2)PCR過程中需要酶、底物、模板、引物等條件。 (3)目的基因和載體結(jié)合,形成基因表達載體。 (4)在利用大腸桿菌做受體細胞時,需要先用Ca2+處理,使之成為感受態(tài)細胞,有利于其吸收重組DNA分子。 答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄 DNA聚合酶 氨基酸 脫氧核苷酸 (2)引物 模板(A基因) (3)基因表達載體 (4)使其成為感受態(tài)細胞,有利于吸收重組DNA分子 15

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