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1、會計學1胚胎工程技術(shù): 胚胎移植 體外受精 胚胎分割 胚胎干細胞培養(yǎng)目前應(yīng)用較多的是: 胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)。第1頁/共41頁 你能說出胚胎移植的概念嗎? 1.概念: 將雌性動物的早期胚胎,或者通過其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術(shù)。第2頁/共41頁胚胎的來源: 雌性動物的早期胚胎或體外受精及其他方式得到的胚胎。供體: 提供胚胎的個體。受體: 接受胚胎的個體。受體的條件: 同種、生理狀態(tài)相同。第3頁/共41頁 胚胎移植實際上是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程。在 胚胎工程中通過任何一項技術(shù),如轉(zhuǎn)基因、核移植
2、,或體外受精等技術(shù)獲得的胚胎,都必須移植給受體才能獲得后代。因此,胚胎移植又是胚胎工程其他技術(shù)的最后一道“工序”。第4頁/共41頁2.胚胎移植的現(xiàn)狀和意義1)加速育種工作和品種改良;2)大量節(jié)省購買種畜的費用;3)一胎多產(chǎn);4)保存品種資源和瀕危物種;5)可充分發(fā)揮優(yōu)秀個體的繁殖潛能縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量。第5頁/共41頁3.胚胎移植的生理學基礎(chǔ)1)供體和受體相同的生理環(huán)境;2)早期胚胎處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能;3)受體對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥;4)胚胎與受體建立正常的聯(lián)系,但遺傳物質(zhì)沒有改變。第6頁/共41頁思考與討論: 1、在胚胎移植操作中,怎樣才能使
3、胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致?例如,供、受體的發(fā)情時間要一致嗎?供體胚胎移入受體子宮的位置,應(yīng)與在供體內(nèi)的位置相同后相似嗎?第7頁/共41頁答案:應(yīng)對供體和受體母畜進行同期發(fā)情處理,使它們的生理條件達到同步后一致,這樣才能使供體的胚胎移入受體后有相同或相似的生存條件,這是胚胎移植成功與否的關(guān)鍵。因此,必須做到供、受體母畜的發(fā)情時間一致。同時還要做到移入受體子宮胚胎的位置應(yīng)該與其在供體內(nèi)的位置相同或相似,移入胚胎一側(cè)的受體子宮對應(yīng)的卵巢必須有黃體存在。第8頁/共41頁2、胚胎移植實質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。你認為這樣的概括正確嗎? 正確。第9頁/共41頁4、胚胎移
4、植的基本程序 閱讀課本,思考胚胎移植的基本程序包括哪幾個步驟?(1)供體、受體的選擇和處理(2)配種或進行人工授精(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4)胚胎移植(5)移植后的檢查第10頁/共41頁(1)對供體、受體進行選擇供體: 遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個體;受體: 健康和正常繁殖能力的個體處理: 同期發(fā)情具體做法: 注射相關(guān)激素。第11頁/共41頁(2)采集卵母細胞方法: 超數(shù)排卵具體做法: 注射促性腺激素第12頁/共41頁(3)配種或人工授精精子來源: 同種優(yōu)良的雄性動物。第13頁/共41頁(4)胚胎的收集 在配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來。 為什么
5、在第7天進行沖卵?第14頁/共41頁(5)對胚胎進行質(zhì)量檢查 你知道檢查的目的嗎? 此時胚胎處于什么時期?第15頁/共41頁(6)胚胎的保存或移植胚胎保存的條件是什么?胚胎為什么要保存?第16頁/共41頁(7)胚胎的移植方法一:手術(shù)法具體做法:引出受體子宮和卵巢,將胚胎注入子宮角,縫合創(chuàng)口。方法二:非手術(shù)法將裝有胚胎的移植管送入受體母牛子宮的相應(yīng)部位,注入胚胎。第17頁/共41頁(8)對受體母牛進行是否妊娠的檢查第18頁/共41頁(9)受體母牛產(chǎn)下胚胎移植的犢牛第19頁/共41頁選擇供體母牛受體母牛同期發(fā)情處理超數(shù)排卵供體公牛配種沖卵質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)總結(jié):第
6、20頁/共41頁二、胚胎分割 閱讀課本,思考以下問題:(1)胚胎分割的概念(2)胚胎分割特點(3)胚胎分割的理論基礎(chǔ)(4)胚胎分割操作過程第21頁/共41頁1.概念: 采用顯微手術(shù)(機械方法)的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術(shù)。第22頁/共41頁2.特點: 后代具有相同的遺傳物質(zhì), 因此胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。3、理論基礎(chǔ) 動物胚胎細胞的全能性。 所以胚胎分割的時期為: 囊胚或桑椹胚。第23頁/共41頁4、選擇的胚胎: 發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要儀器: 實體顯微鏡和顯微操作儀。6
7、、具體操作 用分割針或分割刀片將胚胎切開,吸出其中的半個胚胎,注入預(yù)先準備好的空透明帶中,或直接將裸半胚移植給受體。第24頁/共41頁胚胎分割移植的顯微操作第25頁/共41頁7、操作注意事項: 對囊胚階段的胚胎進行分割時,要將內(nèi)細胞團均等分割。 原因:內(nèi)細胞團一般到囊胚階段才出現(xiàn),它是發(fā)育為胚胎本身的基礎(chǔ)細胞,其他細胞為滋養(yǎng)細胞,只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營養(yǎng)。若分割時不能將內(nèi)細胞團均等分割,會出現(xiàn)含內(nèi)細胞團多的部分正常發(fā)育的能力強,少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育等問題。第26頁/共41頁胚胎分割的份數(shù)越多,操作的難度會越大,移植的成功率也越低。早期胚胎的體積很小,只有在顯微鏡下才能看到
8、;再者,細胞數(shù)目是有限的。分割的份數(shù)越多,不但難以做到均等分割,每一份的細胞數(shù)會越少,而且作為囊胚期的胚胎內(nèi)細胞團細胞所受的影響會更大。因此,分割的份數(shù)越多,技術(shù)的難度會越大,移植后的恢復和發(fā)育的難度會越大,移植成功率自然會降低。第27頁/共41頁8、胚胎分割技術(shù)的缺陷(1)剛出生動物的體重偏低,毛色和斑紋還存在差異;(2)采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎的可能性是有限的。第28頁/共41頁9、胚胎分割技術(shù)的應(yīng)用: 為轉(zhuǎn)基因技術(shù)、性別控制技術(shù)提供活胚材料。第29頁/共41頁A第30頁/共41頁B第31頁/共41頁A第32頁/共41頁閱讀課本,思考以下問題:(1)什么是胚胎干細胞? 簡稱是什么?(2
9、)胚胎干細胞的來源。(3)胚胎干細胞的特性。(4)胚胎干細胞的應(yīng)用。第33頁/共41頁1.概念: 簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。 干細胞的分類: (1)全能干細胞 (2)多能干細胞 (3)專能干細胞第34頁/共41頁2.特點:(1)形態(tài): 體積小.細胞核大,核仁明顯;(2)功能: 具有發(fā)育的全能性.可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞.體外培養(yǎng)可增殖不分化;(3)在體外培養(yǎng)的條件下,ES細胞可以增殖而不發(fā)生分化。對它可以進行冷凍保存,也可以進行遺傳改造。第35頁/共41頁 3.主要用途 閱讀課本相關(guān)內(nèi)容,說說胚胎干細胞有什么具體用途?第36頁/共41頁(1)治療人類的某些頑癥。 人類由于細胞壞死、退化或功能異常引起的疾病,如帕金森綜合癥、少年糖尿病和老年癡呆癥等,已成為醫(yī)學上尚未攻克的頑癥。利用ES細胞可以誘導分化形成新的組織 細胞的特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復并恢復正常功能。目前,在動物實驗方面,用ES細胞誘導分化出的某些組織細胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑難病癥。第37頁/共41頁第38頁/共41頁(3)ES細胞也是研究體外細胞分化的理想材料。 ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上,或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中,能夠維持不分化的狀態(tài)。誘導因子:誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化。第39頁/共41頁C第40頁/共41頁