《2019-2020年高中生物《動(dòng)物細(xì)胞工程》教案1 新人教版選修3》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2019-2020年高中生物《動(dòng)物細(xì)胞工程》教案1 新人教版選修3（27頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、2019-2020年高中生物《動(dòng)物細(xì)胞工程》教案1新人教版選修3 一、教學(xué)目標(biāo) 1. 簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用。 2. 簡(jiǎn)述通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程和應(yīng)用前景。 3. 舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原理和應(yīng)用。 二、教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn) 1. 教學(xué)重點(diǎn) （1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件。 （2）用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程。 （3）單克隆抗體的制備和應(yīng)用。 2. 教學(xué)難點(diǎn) （1）用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程。 （2）單克隆抗體的制備過(guò)程。 三、教學(xué)策略 有了第一節(jié)的基礎(chǔ)，學(xué)生對(duì)本節(jié)內(nèi)容易于理解。因此，本節(jié)教學(xué)采用講授、自學(xué)、討論等

2、相結(jié)合的教學(xué)方法。具體建議如下。 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的教學(xué)中，可把這部分內(nèi)容歸納成三個(gè)問(wèn)題：（1）為什么要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)？（2）什么是動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)？（3）怎樣進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)？第三個(gè)問(wèn)題是本節(jié)課的重點(diǎn)。關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程，教師可參照教材中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖進(jìn)行講解，講解中要注意區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)這兩個(gè)概念。對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，則要從學(xué)生已有的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)出發(fā)，啟發(fā)學(xué)生自己動(dòng)腦思考這個(gè)問(wèn)題，以加深對(duì)培養(yǎng)條件的理解。 在動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)及克隆動(dòng)物的教學(xué)中，可首先讓學(xué)生列舉所知道的克隆動(dòng)物，調(diào)動(dòng)學(xué)生已有的知識(shí)。隨后可向?qū)W生提問(wèn)：克隆動(dòng)物的方法與植物組織培養(yǎng)一樣嗎？然后向

3、學(xué)生說(shuō)明目前動(dòng)物體細(xì)胞克隆是通過(guò)核移植技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)的，以引入本節(jié)課的主題。關(guān)于核移植技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)史，可讓學(xué)生在課堂上閱讀，本節(jié)課的重點(diǎn)和難點(diǎn)是在動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)過(guò)程，教材中選用了一個(gè)非常好的素材一以誕生在我國(guó)的高產(chǎn)克隆奶牛為例，來(lái)說(shuō)明體細(xì)胞核移植的過(guò)程。教師應(yīng)充分利用和挖掘教材內(nèi)容，帶領(lǐng)學(xué)生一步步弄清動(dòng)物體細(xì)胞核移植技考與探究”中的有關(guān)問(wèn)題，以及“拓展視野”中的有關(guān)克隆羊多利的早衰問(wèn)題等，讓學(xué)生討論。在細(xì)胞融合和單克隆抗體的教學(xué)中，教師可先啟發(fā)學(xué)生回顧植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的過(guò)程，再通過(guò)動(dòng)植物細(xì)胞異同點(diǎn)的對(duì)比，引導(dǎo)學(xué)生大膽推測(cè)出動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理及方法基本相同，以培養(yǎng)學(xué)生的知識(shí)遷

4、移能力。隨后通過(guò)教材上的用滅活病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程的示意圖，重點(diǎn)講解為什么滅活的病毒可用來(lái)做誘導(dǎo)物，并指出動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞。最后教師要講明動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用，以便自然過(guò)渡到單克隆抗體上來(lái)。 關(guān)于單克隆抗體的教學(xué)，教師要利用好教材提供的材料，突出從問(wèn)題入手的思路，先介紹醫(yī)療實(shí)踐中僅靠細(xì)胞培養(yǎng)難以獲得大量抗體，然后，一步一步啟發(fā)學(xué)生討論怎樣解決這個(gè)問(wèn)題。要把科學(xué)家在研制單克隆抗體過(guò)程中，通過(guò)大膽的想像，創(chuàng)造性地解決問(wèn)題的過(guò)程作為本節(jié)教學(xué)的重點(diǎn)和亮點(diǎn)，使學(xué)生在獲得單克隆抗體知識(shí)的同時(shí)，受到創(chuàng)新精神的教育。 四、答案和提

5、示 2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) （一）思考與探究 1. 幼齡與老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比較，分化程度低的與分化程度高的組織細(xì)胞比較，哪一種更易于培養(yǎng)？思考一下，這是什么道理？ 提示：細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系，細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，老齡動(dòng)物則相反。所以，一般來(lái)說(shuō)幼年動(dòng)物的組織細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細(xì)胞的分化程度越低，則增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)。 2. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過(guò)脫分化的過(guò)程嗎？為什么？ 提示：脫分化又稱(chēng)去分化，是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過(guò)程。植物的任何一部

6、分，甚至單個(gè)細(xì)胞都具有長(zhǎng)成完整植株的能力。但要發(fā)育成完整植株，必須先脫分化，脫分化的細(xì)胞具有發(fā)育成任何組織的能力，然后進(jìn)行再分化，形成完整植株。植物細(xì)胞培養(yǎng)主要用于農(nóng)林生產(chǎn)中的作物、苗木育種，快速繁育種苗、培育無(wú)病毒植株等，這就要求植物的組織或細(xì)胞先進(jìn)行脫分化。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)有各種用途，一般而言，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。因高度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力，所以，動(dòng)物細(xì)胞也就沒(méi)有類(lèi)似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過(guò)程了。要想 /士_L?r*占人—丄/UnAmD/n宀八八"Wm宀、斗口-*-LH*An十AmD/n/士廿八八"亠r：r*TFFTAA/,口An—4^口

7、口 3.1997年，美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（Lucinda）的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8t,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3?4to （1）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說(shuō)明理由。 提示：可以用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)。盧辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高，說(shuō)明它有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來(lái)自該奶牛，其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ)，如果精心培育和飼養(yǎng)，有可能在世界范圍內(nèi)推廣，克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖，可得到很多高產(chǎn)的后代，從而加快奶牛改

8、良進(jìn)程。 但同時(shí)需注意，該克隆牛不能無(wú)限制地推廣，其數(shù)量不宜過(guò)多，尤其是在小范圍內(nèi)不能無(wú)限的繁殖，以避免奶牛群出現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。 （2）如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何對(duì)它進(jìn)行克?。刻崾荆菏紫葟谋R辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活體上容易?。┥霞羧∫恍K組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織（如軟骨組織）的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢，抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核，再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過(guò)程。核移植胚胎在體外短

9、時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。 4. 體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問(wèn)題？請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。 提示：在研究方面，克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問(wèn)題。這些問(wèn)題尚在研究中。 在應(yīng)用上，生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。 （二）正文中討論題 【討論1】多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考并討論以下問(wèn)題： 1. 體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？ 提示：充足的營(yíng)養(yǎng)供給、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境。 【討論2】

10、 1. 在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？提示：為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹? 2. 用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？ 提示：培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10?50代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞。 3. 你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植

11、方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？ 提示：克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA是來(lái)自于受體卵母細(xì)胞。所以，用教材中所述的方法克隆的動(dòng)物不是供核動(dòng)物完全相同的復(fù)制。 此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系，核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同，從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。 （三）尋根問(wèn)底 胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？ 提示：胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外

12、，長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白，對(duì)細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間。 （四）旁欄思考題 1. 進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？ 提示：用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時(shí)，胃蛋白酶就會(huì)失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2?8.4。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒(méi)有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的消化。 2. 為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加血清？ +1=1 42豐亠人-缶

13、宀B甘曲空 廿亠缶宀BTFFTal亠7ZR宀-Crt-r4xXR宀 為必需氨基酸），必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長(zhǎng)激素等及多種生長(zhǎng)因子（如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子等）；血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì)，能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。因此，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞能夠順利生長(zhǎng)和增殖，一般需添加10%?20%的血清。 2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 思考與探究 1.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同？提示：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后再融合；動(dòng)

14、物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直接融合。 2?制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？ 提示：哺乳動(dòng)物感染抗原后，其體內(nèi)會(huì)形成相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞能分泌相應(yīng)的抗體凝聚或殺死這些抗原。動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過(guò)程中，每一種B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能分泌該單一抗體的B淋巴細(xì)胞大量增殖。B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外增殖；骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，它能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。因此，把一種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特f―-體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)

15、生出某種特異性的抗體。 五、知識(shí)拓展 1?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是如何發(fā)展起來(lái)的？ 1907年，哈里森（Harrison）在無(wú)菌條件下用淋巴液作培養(yǎng)基，培養(yǎng)蛙胚神經(jīng)組織存活數(shù)周，并觀察到神經(jīng)細(xì)胞突起的生長(zhǎng)過(guò)程，由此創(chuàng)建了蓋片覆蓋凹窩玻璃懸滴培養(yǎng)法，奠定了動(dòng)物組織體外培養(yǎng)的基礎(chǔ)。之后，又有人將懸滴培養(yǎng)法改良為雙蓋片培養(yǎng)，提高了傳代效率并減少了污染。1923年，卡雷爾（Carrel）設(shè)計(jì)了卡氏瓶培養(yǎng)法，擴(kuò)大了組織生存空間。1951年，厄爾（Earle）發(fā)明了體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的人工合成培養(yǎng)基。1951年，波米拉（Pomerat）設(shè)計(jì)了灌流小室，使細(xì)胞生活在不斷更新的培養(yǎng)液中，便于作顯微攝影和細(xì)胞代謝

16、的研究。1957年，格拉夫（Graff）用灌流技術(shù)進(jìn)一步提高了細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的效率。1957年，杜爾貝科 （Dulbecco）等人采用胰蛋白酶消化處理和應(yīng)用液體培養(yǎng)基的方法，獲得了單層細(xì)胞培養(yǎng)。單層培養(yǎng)法的出現(xiàn)，對(duì)組織培養(yǎng)的發(fā)展起了很大的推動(dòng)作用。此后單層培養(yǎng)成為組織培養(yǎng)普、凸r-^HFAA4-4-I.xcnt【L厶一rcnZI>匚二—丄7>m□上iI.4-rvT-k±i*4-4-I.x~T~C上人-4*-fr1、缶r1FFPcnt【L生物制藥及其他許多技術(shù)的基礎(chǔ)，在現(xiàn)代生物技術(shù)中發(fā)揮著重要的作用。 2. 為什么動(dòng)物細(xì)胞要分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)？用酶消化的是什么物質(zhì)？細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)可以分散成單個(gè)

17、細(xì)胞培養(yǎng)，也可以用細(xì)胞群（團(tuán)）、組織塊培養(yǎng)，經(jīng)傳代培養(yǎng)后，最終都為細(xì)胞培養(yǎng)。 分散成單個(gè)細(xì)胞、細(xì)胞群（團(tuán)）后容易培養(yǎng)，細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出；而用大塊組織培養(yǎng)時(shí)，內(nèi)部細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢物的排出都較困難，因此，這些細(xì)胞在體外長(zhǎng)時(shí)間的生存和生長(zhǎng)就較困難。同時(shí)，分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)，可使得在細(xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。 用酶消化的是細(xì)胞間基質(zhì)，細(xì)胞間基質(zhì)主要成分有膠原蛋白、層粘連蛋白、纖粘連蛋白、彈性蛋白等成分。用蛋白酶可使其消化，從而使細(xì)胞相互分離。 3. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液是由哪些化學(xué)成分組成的？糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。 4?體細(xì)胞核移植技術(shù)為什

18、么要選擇Mil期的卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞？ 細(xì)胞核移植技術(shù)中能用作受體細(xì)胞的通常有MII期卵母細(xì)胞和受精卵（合子）。早期核移植技術(shù)中常用受精卵，后來(lái)基本上用Mil期卵母細(xì)胞取代了受精卵，主要因?yàn)閮烧叩募?xì)胞質(zhì)環(huán)境不同。有人認(rèn)為重組需要的因子存在于Mil期卵母細(xì)胞的胞質(zhì)中，而在原核形成時(shí)這些因子已被降解或用光，因此，原核擴(kuò)張后受精卵去核可引起胞質(zhì)中重組因子缺乏。成熟促進(jìn)因子（MPF）是卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中重要的胞質(zhì)影響因子，MPF的活性在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的Ml期和Mil期達(dá)到最高，受精或激活后，MPF迅速滅活，因此，Mil期卵母細(xì)胞中MPF活性高，而受精卵中MPF活性低。MPF水平的高低可影響供體核染色

19、質(zhì)的狀態(tài)和復(fù)制。Mil期卵母細(xì)胞細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)已成熟，而Ml卵母細(xì)胞細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)尚未成熟，其細(xì)胞質(zhì)不能支持胚胎的全程發(fā)育，因此，盡管Ml期卵母細(xì)胞MPF活性也高，但不能用作受體卵母細(xì)胞。 也有人認(rèn)為用去核合子做受體時(shí)，可能由于合子去核時(shí)一些早期發(fā)育必需的因子隨原核的去除而被去掉了，而使去核受精卵缺乏發(fā)育能力。 因此，目前廣泛采用Mll期卵母細(xì)胞做受體。 5?已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例還有哪些？ 生物種類(lèi) 細(xì)胞來(lái)源 成功年代 酵母菌一雞 原生質(zhì)體一血紅細(xì)胞 1975年 人一胡蘿卜 腹水癌細(xì)胞一原生質(zhì)體 1976年 要知道更多的實(shí)例，需經(jīng)常查閱更多科研報(bào)道。 6.為什么

20、不用兩個(gè)而要用多個(gè)細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞間的融合？ 就目前常用的細(xì)胞融合方法來(lái)看，不管是用物理的、化學(xué)的方法，還是生物的方法，其融合率都不可能是100%。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得到融合細(xì)胞。更重要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，但并不一定是研究者期望得到的細(xì)胞類(lèi)型。目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是單克隆抗體的制備。我們以制備單克隆抗體為例來(lái)說(shuō)明這一問(wèn)題。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類(lèi)可多達(dá)百萬(wàn)種以上，但是每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個(gè)脾細(xì)胞（含B淋巴細(xì)胞）和一個(gè)瘤細(xì)胞雜交，我們不能確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；若用大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融

21、合，就可以從融合細(xì)胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。 7.如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測(cè)及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用“有限稀釋法”來(lái)選擇。將雜交瘤細(xì)胞稀釋?zhuān)枚嗫准?xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過(guò)一個(gè)，通過(guò)培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體（常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法），那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。陽(yáng)性孔中的細(xì)胞還不能保證是來(lái)自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽(yáng)性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋?zhuān)话阈柽M(jìn)行3?4次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。該過(guò)程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。

22、 2019-2020年高中生物《動(dòng)物細(xì)胞工程》教案4新人教版選修3 一、［教學(xué)目標(biāo)］ 1. 簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用。 2. 簡(jiǎn)述通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程和應(yīng)用前景 3. 舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原理和應(yīng)用。 二、［教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn)］ 1.［教學(xué)重點(diǎn)］ （1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件。 （2）用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程。 （3）單克隆抗體的制備和應(yīng)用。 2.［教學(xué)難點(diǎn)］ （1）用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程。 （2）單克隆抗體的制備過(guò)程。 2．2．1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)（2課時(shí)） 三、［教學(xué)教程］ 教學(xué)過(guò)程

23、教學(xué)內(nèi)容 教學(xué)手段和方法 預(yù)期目標(biāo) 1、回顧植物 師：同學(xué)們，前面我們一起學(xué)習(xí)了植物 閱讀并筆注，要求學(xué) 讓學(xué)生了 細(xì)胞工程的 細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，請(qǐng)大家來(lái)回顧一 生注意動(dòng)物細(xì)胞培 解動(dòng)物細(xì) 技術(shù)手段， 下其涉及的主要技術(shù)手段。 養(yǎng)，不能說(shuō)成動(dòng)物組 胞工程的 引入動(dòng)物細(xì) 生：有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜父 織培養(yǎng)；而植物組織 技術(shù)手段， 胞工程內(nèi)容 等。 培養(yǎng)不能說(shuō)成植物細(xì) 激發(fā)其求 的學(xué)習(xí) 師；今天我們開(kāi)始一起來(lái)學(xué)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞 胞培養(yǎng)。 知欲望 工程的內(nèi)容，請(qǐng)大家閱讀課本P44引 板書(shū)或投影標(biāo)題2,2 言，介紹動(dòng)物細(xì)胞工

24、程的常用技術(shù)手 動(dòng)物細(xì)胞工程 段：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植技術(shù)、動(dòng)物 細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等，其中動(dòng) 板書(shū)或投影標(biāo)題2。 物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是基礎(chǔ)技術(shù)。現(xiàn)在先來(lái) 2。1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和 學(xué)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) 核移植技術(shù) 2、學(xué)習(xí)新 師：為什么要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？ 可結(jié)合課本插圖或用 激發(fā)學(xué)生 課：一、動(dòng) 生：(沉默) 投影補(bǔ)充一些有關(guān)這 熱愛(ài)科學(xué)、 物細(xì)胞培養(yǎng) 師：我們一起來(lái)看課文本小節(jié)的引言的 方面的例子 關(guān)注科學(xué) 兩個(gè)實(shí)例。 的意識(shí) 師：同學(xué)們，要解決這些問(wèn)題，離不開(kāi) (1)概念

25、 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。那么什么是動(dòng)物細(xì) 胞培養(yǎng)呢？ 生：(情緒高漲)從動(dòng)物機(jī)體中取出相 可在學(xué)生閱讀自學(xué) 通過(guò)剖析， 關(guān)組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在 后，讓學(xué)生拋開(kāi)書(shū)本， 旨在培養(yǎng) 適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁 口述，教師簡(jiǎn)明地板 學(xué)生分析 殖。 書(shū)，帶領(lǐng)學(xué)生體會(huì)和 和解決問(wèn) (2)原理 師：很好！從概念中我們不難看出，該 剖析要點(diǎn)，領(lǐng)略大概 題的能力， 技術(shù)實(shí)施的原理是什么？ 過(guò)程。 也有助學(xué) 生：細(xì)胞增殖。 生審題能 力的加強(qiáng)。 (3)過(guò)程 師：怎樣進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)？

26、需要哪 這是本節(jié)學(xué)習(xí)的重 通過(guò)比較 些條件？ 點(diǎn)，關(guān)于培養(yǎng)過(guò)程， 弄清概念 指導(dǎo)學(xué)生閱讀P44-46內(nèi)容，結(jié)合插 可參照課本P45示意 間的本質(zhì) 圖或投影過(guò)程示意圖，最好能制成動(dòng) 圖講解，注意兩個(gè)培 差異和內(nèi) 畫(huà)。師生共同歸納過(guò)程： 養(yǎng)概念的區(qū)分。 在聯(lián)系。培 取材-分散-配制懸液-原代培養(yǎng)-傳 養(yǎng)學(xué)生的 代培養(yǎng)。在各個(gè)箭頭上注明處理方法。 注意與植物組織培養(yǎng) 求異和求 注意：原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng) 的比較。 同思維能 原代培養(yǎng)：取材水解后的初次培養(yǎng)； 力。 傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)后再處理后的后續(xù)

27、 培養(yǎng)。兩者先后關(guān)系，不能倒置，其原 理相同。后者一般至10代，也有至 40-50代，但細(xì)胞核型可能會(huì)改變，從 而癌變。 師：大家想一想，目前使用的或冷凍保 存的細(xì)胞常常是10代以?xún)?nèi)，是什么道 理？ 生：以保證細(xì)胞正常的二倍體核型。 師生討論P(yáng)44的兩個(gè)旁欄思考題 難度不大，讓學(xué)生回 通過(guò)思考， 答，相互修正完善。 培養(yǎng)知識(shí) 的遷移能 力 (4)條件 復(fù)習(xí)：內(nèi)環(huán)境及其穩(wěn)態(tài)知識(shí)，并思考和 師生歸納小結(jié)，教師 討論以下問(wèn)題： 板書(shū)

28、 體外細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)？需 要怎樣的合適環(huán)境條件？ (閱讀討論后) (1)環(huán)境條件：火菌處理、抗生素、 注意與植物組織培養(yǎng) 關(guān)注科學(xué) 定期更換培養(yǎng)基 比較，把知識(shí)學(xué)通、 技術(shù)的不 (2)營(yíng)養(yǎng)條件：與體內(nèi)基本相同， 學(xué)活?？闪斜肀容^， 同，培養(yǎng)學(xué) 有糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、必需 讓學(xué)生一目了然。 生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)? 元素、血清、血漿等 讓學(xué)生同時(shí)思考P46 科學(xué)態(tài)度。 (3)溫度和PH:接近體溫，PH7。 旁欄題，閱讀下面的 2-7。4 小知識(shí)卡片。 (4)氣體環(huán)境：02和CO2

29、(5%) (5)應(yīng)用 師：物細(xì)胞培養(yǎng)能否象植物組織培養(yǎng)那 指導(dǎo)學(xué)生閱讀并學(xué)會(huì) 通過(guò)這樣 樣獲得克隆個(gè)體？ 歸納有哪幾個(gè)方面的 的提問(wèn)，能 生：眾說(shuō)紛紜。 師：不能，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞的全能性受到分化程度的限制，發(fā)育成個(gè)體的潛能漸弱。那么這項(xiàng)技術(shù)有哪些用途呢？ (1)生產(chǎn)生物制品 (2) 提供基因工程的受體細(xì)胞 (3) 檢測(cè)有毒物質(zhì)的毒性 (4) 用于病理、生理、藥理研究 用途 引起學(xué)生 的共鳴。 3、學(xué)習(xí)新 比較：培養(yǎng)基的狀態(tài)、成分；技術(shù)依據(jù)的原理；過(guò)程；結(jié)果等方面。 師：剛才我們講過(guò)利用上述技術(shù)無(wú)法克 用預(yù)先準(zhǔn)備好的小黑板或投影出示。

30、學(xué)生會(huì)迅速閱讀教 激趣誘思 課：二、動(dòng) 隆動(dòng)物個(gè)體，那么能否克隆？有沒(méi)有別 材，引發(fā)新的內(nèi)容的 物體細(xì)胞核 的方法？ 學(xué)習(xí) 移植技術(shù)和 克隆動(dòng)物 (1)概念 生：有(聲音洪亮) 師：大家說(shuō)得對(duì)！什么方法？生：動(dòng)物核移植技術(shù)。 板書(shū)概念內(nèi)容(略) 讓學(xué)生分析大體思路 讓學(xué)生認(rèn) (2)分類(lèi) 師：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植， 回顧所學(xué)知識(shí)誘發(fā)學(xué) 同科學(xué)不 后者難度較大。我們來(lái)學(xué)習(xí)后者。 生思考原因 斷發(fā)展、不 (3)原理 體細(xì)胞核的全能性 斷創(chuàng)新。 (4)過(guò)程 教師板畫(huà)過(guò)程圖： 這是重點(diǎn)與難點(diǎn)，結(jié) 有助于理 取材-

31、培養(yǎng)-顯微注射到去核的次級(jí)卵 合演示(多媒體)，理 解，效果好 母細(xì)胞-重組細(xì)胞-重組胚胎-受體雌 解技術(shù)要領(lǐng)和關(guān)鍵所 培養(yǎng)了能 性動(dòng)物-克隆動(dòng)物。 在。嘗試讓學(xué)生畫(huà)圖。 力。 討論：P49的三個(gè)思考題，初步理解技 術(shù)的局限性。 (5)應(yīng)用 (1)改良動(dòng)物，提高繁殖率 學(xué)生筆注 理解STS (2)保護(hù)瀕危物種 間的關(guān)系 (3)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品；治療疾病等 (6)局限 (1)成功率低。 結(jié)合“多利羊”實(shí)例，讓 激發(fā)學(xué)生 (2)有待改進(jìn)。 學(xué)生暢所欲言。 立志獻(xiàn)身 (3)健康問(wèn)題。 科

32、學(xué)的情 (4)安全問(wèn)題 感態(tài)度。 4、小結(jié) 師：本節(jié)課我們學(xué)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核 提出本節(jié) 移植技術(shù)，大家要能說(shuō)出原理、過(guò)程和 課的最終 應(yīng)用(結(jié)果)，體驗(yàn)到科學(xué)的偉大力量。 學(xué)習(xí)目標(biāo) 5、作業(yè)或活 教材P50思考與探究4道題，上網(wǎng)查閱 課后完成，待講評(píng)。 動(dòng) 資料 ［基礎(chǔ)試題訓(xùn)練］ 選擇題 1．下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是 （） A?培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清 B?原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右便會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯 C?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般能夠傳到40~50代，但其遺傳物質(zhì)

33、發(fā)生了改變 D?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞 2．生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復(fù)生”野驢的方法是（） A?將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體 B?將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體 C?取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體 D?將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體 3．一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次分裂，再植入第 三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有

34、多種用途，但是不能（） A?有選擇地繁殖某一性別的家畜B?繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體 C?用于保存物種D?改變動(dòng)物的基因型 ［教學(xué)反思］ 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體（2課時(shí)） 教學(xué) 過(guò)程 教學(xué) 內(nèi)容 教學(xué)手段 和方法 預(yù)期 目標(biāo) 1?實(shí)例引入新課—細(xì)胞融合。 2.復(fù)習(xí)提問(wèn)。 3.學(xué)習(xí)新課--細(xì)胞融合。 (1)動(dòng)物細(xì)胞融合的概念。 師:1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子是運(yùn)動(dòng)的。那么，如何實(shí)現(xiàn)人一鼠細(xì)胞的融合，以及動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？這就是今天我們這節(jié)課要學(xué)習(xí)的內(nèi)容。師：由于動(dòng)物細(xì)胞融合與刖面所學(xué)的植物體細(xì)胞雜交技

35、術(shù)相似，所以我們通過(guò)兩個(gè)問(wèn)題，來(lái)回顧一下有關(guān)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的基本知識(shí)。第一個(gè)問(wèn)題是：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的過(guò)程是怎樣的？ 生：先用酶去除兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使之成為原生質(zhì)體，再用物理或化學(xué)的方法，誘導(dǎo)兩種原生質(zhì)體融合成雜種細(xì)胞最后用植物組織培養(yǎng)的方法把雜種細(xì)胞培育成新的植物體。 師：第二個(gè)問(wèn)題是：動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？ 投影人一鼠細(xì)胞融合過(guò)程的圖片，教師按圖講解，以引入新課，寫(xiě)出或投影本節(jié)課的標(biāo)題一2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體。如果學(xué)生回答不全，則可投影植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖。 教師講解和學(xué)生討論的方法相結(jié)合，以突出本節(jié)課的重點(diǎn)。 師生一起閱讀教材，教師按教材上的概

36、念給學(xué)生講解。 激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣。 復(fù)習(xí)舊知識(shí)，為學(xué)習(xí)新知識(shí)奠定基礎(chǔ)。 了解動(dòng)物細(xì)胞融合的概念。 (2)動(dòng)物 生：動(dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁、無(wú)明顯的液 培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用已 細(xì)胞融合 泡、無(wú)質(zhì)體。 有知識(shí)解決新問(wèn) 的過(guò)程。 師：有了以上的基本知識(shí)，首先讓我 題的能力。 們一起來(lái)看看有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合的概念。請(qǐng)大家翻開(kāi)課本P52，閱讀第二自然段。 師：動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同？ 了解動(dòng)物細(xì)胞融 合的過(guò)程。 生：應(yīng)該相同。 師：對(duì)，動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì) 培養(yǎng)學(xué)生的閱讀 體融合的基本原理相同

37、，那么動(dòng)物細(xì)胞融合 能力及自主解決 的具體過(guò)程是否也和植物原生質(zhì)體融合的 問(wèn)題的能力。培 過(guò)程一樣呢？ 養(yǎng)思維的廣闊 生：應(yīng)該基本一樣吧？ 投影用滅活病毒誘導(dǎo)動(dòng) 性。 師：對(duì)，下面我們以火活病毒誘導(dǎo)動(dòng) 物細(xì)胞融合過(guò)程的示意 物細(xì)胞融合過(guò)程為例，來(lái)理解動(dòng)物細(xì)胞融合 圖。 的過(guò)程。 誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原 生質(zhì)體融合的方法類(lèi)似，但動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí) 可用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑，你們知道這是 為什么嗎？請(qǐng)閱讀課本P52的生物技術(shù)資學(xué)生閱讀生物技術(shù)資料料卡，思考并回答下面問(wèn)題

38、：卡，思考并回答問(wèn)題。 為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？ 生：因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的 蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi) 細(xì)胞發(fā)生融合。 師：對(duì)，那么不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？ 生：不能，因?yàn)椴粶缁畹牟《緯?huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 師：回答得非常好！從示意圖中我們 可以看出，把兩個(gè)不同的動(dòng)物細(xì)胞放在一起，用滅活的病毒處理細(xì)胞后，它們就先質(zhì)融合，再核融合，進(jìn)而形成雜交細(xì)胞，這個(gè) 讓學(xué)生再次回顧植物體細(xì)胞雜交過(guò)程，思考并回答問(wèn)題。 細(xì)胞有絲分裂后仍能形成兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞。 （3）動(dòng)物 想一想，在動(dòng)物細(xì)胞融合的實(shí)際操作過(guò)程中，是只用單個(gè)的兩種細(xì)胞來(lái)融合嗎？

39、細(xì)胞融合請(qǐng)你們?cè)俅谓Y(jié)合植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程，思 的意義和 考這個(gè)問(wèn)題。 聯(lián)系舊知識(shí)，提 應(yīng)用。 生：我記得在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的 供一個(gè)比較的對(duì) 實(shí)際操作過(guò)程中，是把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一 象，以此達(dá)到知 起，讓它們?nèi)诤系摹? 識(shí)遷移的目的。 師：回答正確。 生：為什么在進(jìn)行兩種細(xì)胞融合時(shí)必 須用多個(gè)細(xì)胞呢？ 師：這個(gè)問(wèn)題問(wèn)得很好，請(qǐng)同學(xué)們課 給學(xué)生留下更多地思維 下思考并討論這個(gè)問(wèn)題。如果能查閱到有關(guān) 空間。 培養(yǎng)學(xué)生父流的 資料，你們就能更全面地回答這個(gè)問(wèn)題。 能力及查閱相關(guān)

40、 4?學(xué)習(xí)新課 在弄清楚動(dòng)物細(xì)胞融合的原理和過(guò) 資料的能力。 --單克隆 程后，還需說(shuō)明的是任何一項(xiàng)技術(shù)的發(fā)現(xiàn) 抗體。 都不是憑空產(chǎn)生的，必定有一個(gè)發(fā)展的過(guò) 讓學(xué)生自己閱讀動(dòng)物細(xì) 程，下面我們來(lái)閱讀課本P52中的小字， 胞融合技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn) 了解一下動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展簡(jiǎn)史。 史。 從動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)史的資 體驗(yàn)科學(xué)技術(shù)是 料中，我們能切實(shí)體驗(yàn)到這個(gè)技術(shù)是在不斷 —個(gè)不斷發(fā)展的 發(fā)展的，那么，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞融合有什么意 過(guò)程。 義呢？ (1)單克 大家都知道，物種間由于存在生殖隔

41、離使得有性雜交方法有局限性，而細(xì)胞融合技術(shù)能打破生殖隔離，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。具體成功的實(shí)例見(jiàn)大屏幕。 正因?yàn)槿绱?，?xì)胞融合技術(shù)已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)及生物新品種培育等領(lǐng)域，但此技術(shù)還有一個(gè)十分重要的用途，就是制備單克隆抗體。有同學(xué)聽(tīng)說(shuō)過(guò)單克隆抗體一詞嗎？ 生：(大多數(shù)同學(xué)回答不出來(lái)。) 師：在弄清什么是單克隆抗體之前我們先來(lái)了解以下兩個(gè)問(wèn)題： 第一個(gè)問(wèn)題傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？請(qǐng)同學(xué)們?cè)陂喿x課本P52的最后一自然段的基礎(chǔ)上，討論這個(gè)問(wèn)題。 生:傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物血清中分離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量

42、和純度都很低而且制備 把教參上的已成功的動(dòng) 物細(xì)胞融合實(shí)例打在大 屏幕上。 學(xué)生閱讀和討論相結(jié) 自然過(guò)渡到單克隆抗體的內(nèi)容。 把本節(jié)課的難點(diǎn)問(wèn)題分解成問(wèn)題串逐一討論解決。 隆抗體的 的抗體特異性差。 合，以突破本節(jié)課的難 概念。 師：回答得很好！下面我們?cè)賮?lái)討論 點(diǎn)。 第二個(gè)問(wèn)題：B淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)？請(qǐng)同 (2)單克 學(xué)們繼續(xù)閱讀課本P53第一自然段，討論 隆抗體的 并回答這個(gè)問(wèn)題。 生產(chǎn)過(guò)程。 生：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，但每一 個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。 了解單克隆抗體 師：很好

43、！正是由于B淋巴細(xì)胞的 的概念。 這個(gè)特點(diǎn)，所以要想獲得大量的單一抗體 必須用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，也 由于教材上沒(méi)有單克隆 就是通過(guò)克隆形成細(xì)胞群這樣的細(xì)胞群就 抗體的概念，所以應(yīng)在 有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗 黑板上寫(xiě)出或投影在大 提出問(wèn)題，誘導(dǎo) 體，即單克隆抗體，這就是單克隆抗體的概 屏幕上。 思考，步步深入 念 地了解單克隆抗 可遺憾的是，在體外培養(yǎng)的條件下 先讓學(xué)生閱讀教材，再 體的生產(chǎn)過(guò)程。 —個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的，那 采用師生共同討論的方 么，科學(xué)家

44、是怎樣解決這一問(wèn)題的呢？想一 法學(xué)習(xí)此部分內(nèi)容。 想，能利用細(xì)胞融合技術(shù)來(lái)制備單克隆抗體 嗎？請(qǐng)大家先閱讀課本P53?54單克隆抗 (3)克隆抗體的應(yīng)用。 5. 小結(jié)。 6. 布置作業(yè)或?qū)嵺`活動(dòng)。 體制備的文字及示意圖，再思考回答問(wèn)題。 師：兩位科學(xué)家極富創(chuàng)造性的設(shè)想是什么？ 生：如果把一種B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合所得到的融合細(xì)胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。 師：對(duì)，正是科學(xué)家先有了這個(gè)極富創(chuàng)造性的設(shè)想，然后再鍥而不舍地把設(shè)想變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)，才創(chuàng)造出單克隆抗體。想一想，如果把B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞放在一起時(shí)會(huì)有

45、幾種融合方式？ 生：有B淋巴細(xì)胞間的融合、骨髓瘤細(xì)胞間的融合以及B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞間的融合。 師：回答得非常好！那么，B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞間融合所形成的能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞是如何篩選出來(lái)的？ 生：先用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜種細(xì) 此問(wèn)題對(duì)學(xué)生來(lái)講稍難些，教師可提醒學(xué)生看圖或相應(yīng)的文字。 學(xué)生閱讀教材，討論，教師可投影有關(guān)應(yīng)用的資料。 培養(yǎng)學(xué)生的閱讀及識(shí)圖能力，使學(xué)生體驗(yàn)到科學(xué)是一個(gè)探究過(guò)程，科學(xué)研究需要?jiǎng)?chuàng)新的意識(shí)和合作精神。 了解單克隆抗體的應(yīng)用，體驗(yàn)科學(xué)、技術(shù)、社會(huì)三者間的關(guān)系。 提出本節(jié)課最終 的學(xué)習(xí)目標(biāo)。 胞，再進(jìn)行抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)就能得到課后完成，下節(jié)課

46、由學(xué)雜交瘤細(xì)胞。生回答。 師：對(duì)，基本的過(guò)程就是這樣。那么 科學(xué)家又是如何利用雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)抗 體的呢？ 生：第一種方法是：將雜交瘤細(xì)胞在 體外大規(guī)模培養(yǎng)從細(xì)胞培養(yǎng)液中就能提取大量的單克隆抗體；第二種方法是：把雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，再?gòu)男∈蟾骨恢刑崛慰寺】贵w。 師：完全正確。正是由于這兩位科學(xué) 家的杰出貢獻(xiàn)，他們于1984年雙雙獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。有關(guān)單克隆抗體的應(yīng)用。請(qǐng)大家閱讀課本P54?55的內(nèi)容，閱讀后，請(qǐng)一位同學(xué)歸納一下單克隆抗體有哪些主要的用途。最好能結(jié)合其中的一個(gè)用途如“生物導(dǎo)彈”問(wèn)題，談一談你對(duì)其應(yīng)用前景的認(rèn)識(shí)。 師：課后作業(yè)為課本P55“思考

47、與 探究”的三道題，如有條件，可按課本中實(shí)踐活動(dòng)的要求組織學(xué)生完成。 ［基礎(chǔ)試題訓(xùn)練］ 選擇題 1（XX，天津、山西理綜卷）科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（） A?經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞B?不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 C?經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D?不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 2（xx年，全國(guó)）用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是（） A?將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 B. 用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞 C?用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合 D?篩選雜交資金積累細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 3．只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（） A．PEGB．滅活的病毒C．電刺激D．離心 4．單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的（） A.B淋巴細(xì)胞B.T淋巴細(xì)胞C.骨髓瘤細(xì)胞D.雜交瘤細(xì)胞 5．用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其 主要原因是這樣的組織細(xì)胞（） A.容易產(chǎn)生各種變異B?具有更強(qiáng)的全能性 C. 取材十分方便D?分裂增殖的能力強(qiáng) ［教學(xué)反思］