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1、微生物標(biāo)本的采集與運(yùn)送,1,在臨床微生物檢驗(yàn)工作中，標(biāo)本的正確選擇、采集和運(yùn)送是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，是實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)確和有效的基本前提。,早期、無(wú)菌、合格,2,標(biāo)本,規(guī)范化采集,不符合要求,污染的標(biāo)本,提供重要臨床感染信息,結(jié)果無(wú)意義,誤導(dǎo)臨床,3,常見(jiàn)標(biāo)本的分類,4,一、血液標(biāo)本的采集,5,1、不明原因的發(fā)熱（大于38或低于36） 2、寒戰(zhàn)、休克、僵直 3、嚴(yán)重的局部感染（腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、腹部術(shù)后感染等） 4、白細(xì)胞增多（特別是核左移，未成熟或桿狀核） 5、粒細(xì)胞減少、血小板減少 6、皮膚粘膜出血、多器官衰竭等 7、CRP、PCT升高,（一）采集指征,6,1、抗生素治療之

2、前 若已使用抗生素者，應(yīng)在下次用藥前或血藥濃度最低時(shí)采集標(biāo)本。 2、患者寒戰(zhàn)時(shí) 3、發(fā)熱初期或高峰時(shí) 超過(guò)發(fā)熱峰值后，病原菌會(huì)逐漸被機(jī)體免疫系統(tǒng)清除，從而減低檢出率。,（二）采集時(shí)間：,發(fā)熱要做血培養(yǎng)， 雙側(cè)雙瓶少漏網(wǎng)； 何時(shí)采血要記清， 寒戰(zhàn)前后菌量深；,7,采集前非常關(guān)鍵的一步： 皮膚和瓶子的消毒,特別提示：,8,1、需氧瓶+厭氧瓶 為 一套 注意：每一套血培養(yǎng)應(yīng)當(dāng)從身體的不同部位采集 2、成人： 810ml/瓶 兒童： 35ml/瓶 嬰幼兒： 12ml/瓶 注意：采集靜脈血,（三）采集血量：,9,1、急性感染：分別從兩臂采血，每臂采1套。 2、急性心內(nèi)膜炎：在抗生素治療前1-2h內(nèi)，于3

3、個(gè)不同部位采集3套 3、亞急性心內(nèi)膜炎，第1天24h內(nèi)，相隔1h分3個(gè)不同部位，連續(xù)采集3套血培養(yǎng)標(biāo)本，若24-48h全部陰性，再采集2-3套血培養(yǎng)標(biāo)本,（四）采集頻率,通常情況,10,4、對(duì)于已進(jìn)行抗生素治療的心內(nèi)膜炎患者，每日采集2套血液標(biāo)本，連續(xù)3天 5、不明原因發(fā)熱，于發(fā)熱期內(nèi)多次采血，如果24h培養(yǎng)為陰性結(jié)果，應(yīng)繼續(xù)采集2-3套或更多套血培養(yǎng)標(biāo)本。,11,血循環(huán)中的細(xì)菌有“暫時(shí)性”、“持續(xù)性” 一過(guò)性的菌血癥，細(xì)菌僅在外周血中持續(xù)數(shù)秒 共生菌、復(fù)數(shù)菌 提高檢出率、減少漏檢、判斷病原,為何要多次采血,？,？,？,12,采血套數(shù)與檢出率 J C lin Microbiol.2007;45

4、:3546-3548,13,標(biāo)本不夠時(shí)，先滿足需氧瓶,（五）采集順序：,需氧瓶,厭氧瓶,采血試管,14,1、 已采集的血培養(yǎng)標(biāo)本必須立即送檢， 2、 如不能立即送檢，可室溫放置，但不超過(guò)2小時(shí)，不可放冰箱。,（六）運(yùn)送要求：,取后不能及時(shí)送， 常溫放置忌冰凍。,15,二、尿液標(biāo)本的采集,16,1、中段尿 2、導(dǎo)管尿（不能取尿袋內(nèi)的尿液） 3、膀胱穿刺尿 常用：中段尿（晨尿或在膀胱內(nèi)停留4h以上的尿液）,（一）尿標(biāo)本種類：,17,1、采集：采樣前，應(yīng)先清潔外陰及尿道口周圍，自然排尿，不間停，截留中段尿，置于無(wú)菌尿杯中，一般留取10ml左右 2、運(yùn)送：常溫下2小時(shí)內(nèi)送達(dá)微生物室，4保存不超過(guò)24h

5、,（二）中段尿的留取：,尿液培養(yǎng)要計(jì)算， 清洗外陰留中段； 培養(yǎng)長(zhǎng)出多種菌， 辨清污染重新送。,18,三、糞便標(biāo)本的采集,19,1、腹泄、大便3次，糞便性狀異常，如稀便、水樣便、膿血便、血便，可伴惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等。盡量在用藥前采集 2、傷寒患者于發(fā)病2周后采集糞便 3、懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。 4、糞便涂片鏡檢WBC 5個(gè)/HP,（一）采集指征,20,1、自然排便法：自然排便后，挑取膿血、黏液 便2-3g作常規(guī)性病原菌培養(yǎng)；液狀糞便取絮狀物2- 3ml，直接放入無(wú)菌杯內(nèi)送檢。 2、直腸拭子法 難以獲得糞便、排便困難者及幼兒用此法,（二）采集方法與送檢：,21,直

6、腸拭子法：將無(wú)菌拭子用無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)后插入肛門2-4cm，柔和地旋轉(zhuǎn)拭子采集糞便標(biāo)本。一般不推薦使用拭子做腹瀉病菌的培養(yǎng)。 3、送檢：1小時(shí)內(nèi)送達(dá)，志賀菌30分鐘內(nèi)送達(dá) 懷疑弧菌，立即送檢。,大便要取膿血處， 志賀沙門需關(guān)注。,22,四、呼吸道標(biāo)本的采集,23,1、咽拭子采樣：患者先用清水漱口，將患者 的舌頭向外輕拉，用無(wú)菌拭子越過(guò)舌根到咽后壁或懸 雍垂的后側(cè)（肉眼可見(jiàn)的紅腫或白膜部位）反復(fù)涂抹 數(shù)次，拭子要避免接觸到口腔和舌黏膜。 2、鼻拭子采樣：用無(wú)菌拭子伸入鼻腔至少深1cm在鼻內(nèi)病灶邊緣部分，先用力旋轉(zhuǎn)拭子，停留10-15s后取出，插入無(wú)菌管中。 3、口腔潰瘍：先用一個(gè)拭子拭去潰瘍或創(chuàng)

7、面淺表分泌物，再用第二個(gè)拭子采集潰瘍邊緣或底部的標(biāo)本。,（一）上呼吸道標(biāo)本：,24,咳出痰、誘導(dǎo)痰、吸出痰、支氣管肺泡灌洗液、支氣管保護(hù)性毛刷、 肺穿刺組織 下面僅介紹：咳出痰 1、抗生素使用前，一般以晨痰為好。,（二）下呼吸道標(biāo)本,25,2、告知患者在留痰前，先用冷開(kāi)水或無(wú)菌生理鹽水反復(fù)漱口，然后再用力咳出深處痰液（可輕拍背部），吐入無(wú)菌痰杯中送檢。 3、常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本兩小時(shí)內(nèi)送檢，疑為流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌時(shí)立即送檢 注意：標(biāo)本內(nèi)切勿混入唾液及鼻咽分泌物,26,4、合格的痰液標(biāo)本： 平均每低倍視野鱗狀上皮細(xì)胞數(shù) 10個(gè) 對(duì)于不合格痰標(biāo)本，檢驗(yàn)科應(yīng)在拒收系統(tǒng)中注明原因，并且打電話臨床科室

8、，重新采樣,痰液培養(yǎng)雜菌多， 清晨漱口要深咯， 涂片合格繼續(xù)做， 正常致病必掌握。,27,（一）體液標(biāo)本包括：心包液、關(guān)節(jié)液、胸水、腹水、羊膜液、后穹隆等穿刺液 （二）容器：可直接注入血培養(yǎng)瓶，以提高陽(yáng)性率，可同時(shí)用需氧和厭氧瓶。 （三）標(biāo)本量： 1ml，盡量不使用引流液 （四）運(yùn)送：室溫，15分鐘內(nèi)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,五、體液標(biāo)本的采集,28,（一）采集時(shí)間：使用抗生素前 （二）采集方法：采用腰椎穿刺術(shù)無(wú)菌采集 （三）采集量與容器：12ml，直接注入血培養(yǎng) （四）運(yùn)送：常溫下立即送檢，一般是15min內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。若培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌時(shí)，應(yīng)35保溫送檢或床旁接種。,六、腦脊液標(biāo)

9、本的采集,胸水腹水腦脊液， 放入血瓶陽(yáng)性多， 條件限制無(wú)血瓶， 接種平皿亦認(rèn)可。,29,（一）常用女性生殖道標(biāo)本： 陰道后穹隆、盆腔穿刺液、陰道拭子、子宮頸拭子、前庭大腺吸出液 （二）常用男性生殖道標(biāo)本： 陰囊穿刺液、前列腺按摩液、水皰液、尿道分泌物 以上標(biāo)本均由?？漆t(yī)師采集，2小時(shí)內(nèi)送檢,七、生殖道標(biāo)本,30,1、結(jié)膜標(biāo)本：濕拭子，滾動(dòng)采集 2、眼角膜標(biāo)本：在麻醉下，刮取 3、耳部拭子：外耳炎 4、穿刺液：鼓膜穿孔，穿刺抽取深部分泌物 以上標(biāo)本由專科醫(yī)師采集，2小時(shí)內(nèi)送檢，室溫保存不超過(guò)24小時(shí)。,八、眼耳標(biāo)本,31,（一）標(biāo)本采集 1、開(kāi)放性傷口：先以無(wú)菌生理鹽水或75%乙醇沖洗擦去表面滲

10、出物，用拭子采集深部傷口或潰瘍基底部分泌物，或剪取深部病損邊緣組織。 燒傷創(chuàng)面，多部位取樣。,九、傷口、膿液及組織標(biāo)本,32,2、封閉性膿腫：消毒膿腫局部皮膚或黏膜表面后，用注射器穿刺抽取膿液3-10ml注入無(wú)菌試管內(nèi)送檢。 3、組織：經(jīng)穿刺或手術(shù)活檢獲得標(biāo)本，穿刺組織可放入1.5ml無(wú)菌離心管中；,33,4、體表傷口可接收細(xì)菌培養(yǎng)的條件： 鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)10個(gè)/低倍視野，并有多形核白細(xì)胞存在 （二）送檢：立即送檢，建議不超過(guò)1小時(shí)送達(dá),34,（一）導(dǎo)管頭： 采用無(wú)菌性技術(shù)，獲取插入患者體內(nèi)最遠(yuǎn)端的導(dǎo)管段約5cm，置于無(wú)菌容器送檢；不能置于生理鹽水或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中運(yùn)送。 但，單獨(dú)導(dǎo)管頭培養(yǎng)意義不大，通常送檢導(dǎo)管頭應(yīng)同時(shí)送外周血培養(yǎng)。,十、導(dǎo)管標(biāo)本,35,（二）血液標(biāo)本 對(duì)懷疑導(dǎo)管相關(guān)血流感染，又需保留導(dǎo)管的患者： 1份通過(guò)外周靜脈采集 采集2份血液標(biāo)本 1份通過(guò)導(dǎo)管采集。,36,早期采集、無(wú)菌觀念 正確足量、 及時(shí)送檢,小 結(jié),37,細(xì)菌培養(yǎng)鑒定難， 標(biāo)本留取是關(guān)鍵， 醫(yī)護(hù)人員齊挑擔(dān)， 合理用藥百姓贊。,38,謝謝您的聆聽(tīng)！,39,