甘肅省武威市高中生物 第4章 酶的研究與應(yīng)用 4.1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用課件1 新人教版選修1 .ppt
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1、(一)酶的基礎(chǔ)知識(shí),1、酶的概念,酶是活細(xì)胞所產(chǎn)生的具有生物催化作用的一類特殊的有機(jī)物,絕大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA,2、酶的本質(zhì),3、酶的功能,催化各種化學(xué)反應(yīng),一、基礎(chǔ)知識(shí),高效性:酶的催化效率是無(wú)要催化劑的107 1013倍,專一性:一種酶只能催化一種化合物或一類化合物的化學(xué)反應(yīng),需要適宜的條件:適宜的溫度、適宜的PH值,4、酶的特性,(二)果膠酶的作用,1、果膠:是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物,不溶于水,2、果膠對(duì)果汁制作的影響:,3、果膠酶:是分解果膠的一類酶的總稱,包括半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶等,4、果膠酶的來(lái)源 :
2、P43,影響果汁的出汁率,還會(huì)使果汁渾濁,(三)酶的活性與影響酶活性的因素:,1、酶的活性,2、酶催化能力的標(biāo)準(zhǔn):,指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力,在一定的條件下,酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度,酶反應(yīng)速度用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來(lái)表示,3、影響酶活性的因素:,溫度,果膠酶的最適溫度為45500C,在較低溫度時(shí),隨著溫度的升高,酶的活性也逐漸提高,達(dá)到最適溫度時(shí),酶的催化能力最高,但高于最適溫度后,酶的催化能力迅速下降,最后完全失去催化能力,A、溫度對(duì)酶的影響,B、果膠酶的最適溫度,C、討論:高溫使酶的活性喪失后,酶的活性可否恢復(fù)?為什么?,不能恢復(fù),因高溫破壞了酶的
3、分子結(jié)構(gòu),高溫對(duì)酶造成不可逆的破壞。但低溫使酶的活性喪失后,緩慢恢復(fù)其溫度活性仍可恢復(fù)。,分別用00C和1000C的溫度處理某種酶后,酶都沒(méi)有活性,但( ),A,A、經(jīng)過(guò)00C處理的酶活性能夠恢復(fù) B、經(jīng)過(guò)1000C處理的酶活性能夠恢復(fù) C、經(jīng)過(guò)00C處理的酶的空間結(jié)構(gòu)遭破壞 D、經(jīng)過(guò)1000C處理的酶被水解成了氨基酸, pH:,果膠酶的最適pH范圍為3.06.0,酶的催化能力的發(fā)揮有一個(gè)最適pH ,在低于最適pH時(shí),隨著pH的升高,酶的催化能力也相應(yīng)升高,高于最適pH時(shí),隨著pH的升高,酶的活性逐漸下降,pH過(guò)高或過(guò)低會(huì)使蛋白質(zhì)變性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)變性后,酶也就完全喪失了活性,A、 pH對(duì)酶的影
4、響,B、果膠酶的最適pH,將乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和適量的水混合裝入一個(gè)容器內(nèi),調(diào)整pH至2.0,保存于370C的水浴鍋內(nèi)。過(guò)一段時(shí)間后,容器內(nèi)剩余的物質(zhì)是( ),A、淀粉、胃蛋白酶、多肽、水 B、唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水 C、唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水 D、唾液淀粉酶、麥芽糖、胃蛋白酶、多肽、水,A,唾液淀粉酶最適pH6.8,其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),酶的抑制劑:Fe3、Ca2、Zn2等金屬離子對(duì)果膠酶有抑制作用,(四)果膠酶的用量,果膠酶并不特指某一種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱,包括 、 和 等。,酶的活性指酶 一定化學(xué)反應(yīng)的
5、能力。酶反應(yīng)速度用單位時(shí)間內(nèi)單位體積中 或 來(lái)表示. 酶的活性受 、 和 的影響,在生產(chǎn)果汁時(shí),為了使果膠酶得到充分利用,節(jié)約成本,需要控制好酶的用量,用量多少常通過(guò) 的手段進(jìn)行探究。,溫度,多聚半乳糖醛酸酶,果膠分解酶,果膠脂酶,反應(yīng)物的減少量,生成物的增加量,催化,PH,酶抑制劑,實(shí)驗(yàn),復(fù)習(xí)!,課題 1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用,二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三個(gè)基本原則:,1、對(duì)照原則,2、單因子變量原則,3、等量原則,果膠酶的活性受溫度影響。處于最適溫度時(shí),活性最高。高于或低于此值時(shí)活性均下降。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正比
6、,(一)探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響,1、實(shí)驗(yàn)原理,提示:必修1中已研究過(guò)溫度對(duì)唾液淀粉酶活性的影響,掌握了在一恒定的PH下通過(guò)設(shè)置溫度梯度來(lái)確定酶催化反應(yīng)的最適溫度的方法。,如何通過(guò)實(shí)驗(yàn)獲知最適溫度?,,你將如何設(shè)置溫度梯度呢?你能設(shè)計(jì)出具體的實(shí)驗(yàn)操作步驟嗎?,2、實(shí)驗(yàn)操作流程(步驟),攪拌器攪拌制成蘋果泥,,均分裝入,9支試管,果膠酶水溶液,,等量,9支試管,,,將分別裝有蘋果泥和果膠酶的試管9組分別放入300C、350C、400C、450C、500C、550C、600C、650C和700C的恒溫水箱中保溫,,試管內(nèi)溫度穩(wěn)定后,將果膠酶加入相同溫度的蘋果泥內(nèi)恒溫保持10分鐘,,過(guò)濾果汁,用量
7、筒測(cè)量果汁的量,填入表格,,,,,,,, 設(shè)計(jì)記錄數(shù)據(jù)的表格 結(jié)果分析與評(píng)價(jià): A、根據(jù)表中數(shù)據(jù)畫曲線圖;P45 B、據(jù)曲線說(shuō)明溫度是如何影響酶的活性的?如果你繪制的曲線圖中無(wú)法判斷出最適溫度,你將如何改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法?,,,例1工業(yè)生產(chǎn)果汁時(shí),常常利用果膠酶破除果肉細(xì)胞壁以提高出果汁率,為研究溫度對(duì)果膠酶活性的影響某學(xué)生設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):(10分),將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管,在10水浴中恒溫處理10分鐘(如圖A),,將步驟處理后的混合物過(guò)濾,收集濾液,測(cè)量果汁量(如圖C)。 在不同溫度條件下重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)步驟,并記錄果汁量,結(jié)果如下表:,將步驟處理后的果膠酶和蘋果泥混合,再次在10水浴中恒
8、溫處理10分鐘(如圖B)。,根據(jù)上述實(shí)驗(yàn),請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題: (1)果膠酶能破除細(xì)胞壁,是因?yàn)楣z酶可以促進(jìn)細(xì)胞壁中________的水解。 (2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)溫度為_(kāi)_______時(shí)果汁量最多,此時(shí)果膠酶的活性________。當(dāng)溫度再升高時(shí),果汁量降低,說(shuō)明,________。 (3)實(shí)驗(yàn)步驟的目的是:________。,果膠,40,最高,溫度升高,降低了酶的活性,使得酶與果泥處于同一溫度條件下,(二)探究pH對(duì)果膠酶活性的影響,果膠酶的活性受pH影響,處于最適pH,酶的活性最高,高于或低于此值活性均下降。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正比,1、實(shí)驗(yàn)原理,2、實(shí)驗(yàn)操作
9、步驟,試一試,,將分別裝有蘋果泥和果膠酶的試管在同一恒溫水箱中恒溫加熱,,,過(guò)濾果汁,用量筒測(cè)量果汁的量,填入表格,確定最適pH并畫曲線圖,將5組試管的蘋果泥和果膠酶的PH分別調(diào)到5.0、6.0、7.0、8.0、9.0,再把pH相等的果膠酶溶液和蘋果泥相混合,保持恒溫一段時(shí)間,攪拌器攪拌制成蘋果泥,,均分裝入,5支試管,果膠酶水溶液,,等量,5支試管,,,,,,,,?,,結(jié)果分析與評(píng)價(jià),(三)探究果膠酶的用量,實(shí)驗(yàn)原理,在一定的條件下,隨著酶濃度的增加,果汁的體積增加;當(dāng)酶濃度達(dá)到某一數(shù)值后,在增加酶的用量,果汁的體積不再改變,此值即是酶的最適用量,探究果膠酶的用量是建立在探究最適溫度和pH對(duì)
10、果膠酶活性影響的基礎(chǔ)之上的。此時(shí),研究的變量是 ,其他因素都應(yīng) 。,果膠酶的用量,保持不變,實(shí)驗(yàn)提示:可以配制不同濃度的果膠酶溶液,也可以只配制一種濃度的果膠酶溶液,然后使用不同的體積即可。 需要注意的是,反應(yīng)液的pH必須相同,否則將影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。,作業(yè):實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)----探究果膠酶的用量,,2、實(shí)驗(yàn)操作,(1)配制不同濃度的果膠酶溶液和制備水果泥,配制不同濃度的果膠酶溶液 準(zhǔn)確稱取純的果膠酶1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg,配制成相等體積的水溶液,取等量放入9支試管中,并編號(hào)19。,制備水果泥 攪拌器攪拌制成蘋果泥并稱45g,等量
11、裝入9支試管中,并編號(hào)19。,(2)將上述試管放入恒溫水浴加熱一段時(shí)間。,(3)將不同濃度的果膠酶分別迅速與各試管的蘋果泥混合,然后再放入恒溫水箱中。,(4)恒溫水浴約20分鐘,(5)過(guò)濾后測(cè)量果汁的體積并填寫表格,一般為50mg/l左右,因?yàn)橛么藵舛忍幚砉?4小時(shí)后果汁率增加10后不再增加。,在最適溫度和pH條件下制作1升蘋果汁,使用多少果膠酶最合適?,(6)結(jié)果分析與評(píng)價(jià),在實(shí)際的操作過(guò)程中,還需要注意下列事項(xiàng):,1與其他工業(yè)用酶基本相同,果膠酶的適宜溫度范圍也比較寬泛,因此,可以選用10 作為溫度梯度,設(shè)置的具體溫度為10 、20 、30 、40 、50 和60 等,也可以嘗試以5 作
12、為溫度梯度。 2蘋果、橙子和葡萄等水果都可以作為反應(yīng)物,水果不用去皮。如用蘋果為原材料,一般可按每個(gè)中等大小的蘋果加水100200 mL的比例進(jìn)行攪拌,獲得稀的蘋果泥。,3果泥的用量可以采用5 mL左右,果膠酶的用量可采用質(zhì)量濃度為2%的果膠酶溶液2 mL。 4水浴時(shí)間可以為2030 min。 5過(guò)濾果汁時(shí),漏斗中應(yīng)放置濾紙。 6探究pH對(duì)果膠酶活性的影響,只須將溫度梯度改成pH梯度,并選定一個(gè)適宜的溫度進(jìn)行水浴加熱。反應(yīng)液中的pH可以通過(guò)體積分?jǐn)?shù)為0.1%的氫氧化鈉或鹽酸溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。,練習(xí):,1.有兩次瞬間高溫滅菌; 2.酶處理的時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng); 3.有離心分離步驟和濃縮步驟。,1、關(guān)于酶的
13、說(shuō)法正確的是: A、果膠酶可以分解細(xì)胞壁的主要成分纖維素 B、果膠酶是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物 C、果膠酶不特指某種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱 D、果膠酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA,C,2、下列不是果膠酶成分的是: A、纖維素酶 B、果膠分解酶 C、多聚半乳糖醛酸酶 D、果膠酯酶,A,3、下列敘述中對(duì)果膠酶的作用敘述錯(cuò)誤的是: A、果膠酶是一種催化劑,可改變反應(yīng)速度 B、果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層 C、在果汁中加入果膠酶后可使果汁變得澄清 D、果膠酶能將乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸,D,4、下列與酶的活性有關(guān)的說(shuō)法不準(zhǔn)確的是: A、酶的活性是由蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定的,
14、不受外界條件的影響 B、酶的活性是指酶催化一定的化學(xué)反應(yīng)的能力 C、酶的活性受溫度、PH等因素的影響 D、酶活性高低與反應(yīng)物濃度無(wú)關(guān),A,,5、下圖縱軸為酶反應(yīng)速度,橫軸為底物濃度,其中能正確表示酶量增加1倍時(shí),底物濃度和反應(yīng)速度關(guān)系的是,B,6、下圖中,橫軸表示酶的反應(yīng)條件,縱軸表示酶的反應(yīng)速度,能正確反映溫度、pH、時(shí)間和底物濃度與酶反應(yīng)速度關(guān)系的是 : A甲、乙、丙、丁 B甲、甲、丙、丁 C甲、丁、乙、丙 D甲、甲、乙、丁,D,,討論:為什么在混合蘋果泥和果膠酶之前,要將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理?,將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理,可以保證底物和酶在混合時(shí)的溫度是
15、相同的,避免了果泥和果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度,從而影響果膠酶活性的問(wèn)題,在探究溫度的影響時(shí),是否需要設(shè)置對(duì)照?如果需要,又應(yīng)該如何設(shè)置?為什么?,需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn),不同的溫度梯度之間就可以作為對(duì)照,這種對(duì)照稱為相互對(duì)照。,該實(shí)驗(yàn)中,哪個(gè)因素作為自變量?控制哪些因素不變?為什么要作這樣的處理?,溫度作為變量。 控制不變的量有:蘋果泥的用量、果膠酶的用量和濃度、水浴的時(shí)間、反應(yīng)的時(shí)間、混合物的PH和過(guò)濾的時(shí)間等。 只有保證一個(gè)自變量,結(jié)果才能說(shuō)明問(wèn)題,想一想,為什么能夠通過(guò)測(cè)定濾出的蘋果汁的體積大小來(lái)判斷果膠酶活性的高低?,果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì),小分子物質(zhì)可以通過(guò)濾紙,因此蘋果汁的體積大小反應(yīng)了果膠酶的催化分解果膠的能力。在不同的溫度下,果膠酶的活性越大,蘋果汁的體積就越大。,能夠確保酶的反應(yīng)環(huán)境從一開(kāi)始達(dá)到實(shí)驗(yàn)預(yù)設(shè)的pH(或“方法一的操作會(huì)在達(dá)到預(yù)定pH之前就發(fā)生了酶的催化反應(yīng)”),
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