發(fā)酵罐基本知識.ppt
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1、1,生物工程設備,設備的原理、結構、功能 設備的計算、選型 設備的搭配實例,液體發(fā)酵設備 培養(yǎng)基制備與滅菌設備 固液分離設備 無菌空氣制備設備 萃取設備 層析與離子交換設備 蒸發(fā)、結晶設備 精餾設備 干燥設備,2,參考書,生物工程設備,陳國豪,化學工業(yè)出版社,2007 生物工程設備,段開紅,科學出版社,2007 生物工程設備,梁世中,中國輕工業(yè)出版社,2002 生物工程設備,鄭裕國,化學工業(yè)出版社,2007 抗生素生產設備,俞俊棠,化學工業(yè)出版社,1984 生物工程設備,高平,化學工業(yè)出版社,2006,3,每次課后,課件均會發(fā)往: 密碼:gjxy05 (即國際學院05) 大家可去下載,4,第一
2、章液體發(fā)酵設備,,5,提綱,第一節(jié)機械攪拌通風發(fā)酵罐 發(fā)酵罐的結構與功能 計算:數(shù)量、尺寸、換熱面積、攪拌功率 發(fā)酵罐中的氧傳遞 發(fā)酵罐的放大設計 第二節(jié)其它類型的通風發(fā)酵罐 第三節(jié)厭氧發(fā)酵設備,6,,,室驗室用發(fā)酵罐 1 L--50L 中試用發(fā)酵罐 50L--5000L,發(fā)酵罐的 大小的大致概念,7,生產用發(fā)酵罐的大小,抗生素發(fā)酵罐的容積以80200 米3 為主 氨基酸、檸檬酸的發(fā)酵罐較普遍使用150300 米3 國際上最大標準式發(fā)酵罐為美國ADM 公司賴氨酸發(fā)酵罐, 折合公稱容積為380 米3 越來越多的啤酒生產廠家采用 400m3 和600m3 大罐,甚至 800m3 大罐。 新建的酒精
3、生產企業(yè),其發(fā)酵罐單罐容積一般在1000-2000米3之間,,8,表 小型發(fā)酵罐技術參數(shù),,9,表 大中型發(fā)酵罐技術參數(shù),,10,發(fā)酵罐應該滿足什么功能?,可反復滅菌 (耐壓性能 ,材料要求) 不易染菌 (設備簡單,少死角 ) 供氧 混合 (通氣、攪拌設備) 加熱和冷卻功能(傳熱設備 ) 加料、補料、放料 (附屬管道、閥門 ) 參數(shù)檢測 (溫度、pH、溶氧電極 ),也有些要求相對簡單的液體培養(yǎng)設備,11,多種設計結構均可完成上述功能,按供氧方式 分: 機械攪拌通風式 氣升式 自吸式,還可按攪拌方式 分: 上攪拌 下攪拌,12,軸封 消泡器 聯(lián)軸器 攪拌器 中間軸承 擋板 空氣分布管 換熱裝置
4、 人孔以及管路等 小罐與大罐有不同的設計,一、結構,第一節(jié)機械攪拌通風發(fā)酵罐,13,哪個是小罐?,,14,物料罐,,,臺面 空間 布置,,15,,,16,發(fā)酵罐的幾種工作狀態(tài),空消 裝料 實消 接種 發(fā)酵 放罐 清洗,空氣 蒸汽 冷卻水 物料、補料管 接種管 取樣、放料管,壓力 溫度 pH 溶氧 攪拌速度,17,與不同工作狀態(tài)相應的,是各種管道和閥門的開、關不僅注意罐的結構,更要注意管道與罐的連接,18,1 罐體,罐為一個受壓容器,通常滅菌的壓力為2.5公斤/厘米2(絕對壓力)。 由 圓柱體 + 橢圓形或碟形封頭 焊接而成 對于大型發(fā)酵罐可用襯不銹鋼板,襯里用的不銹鋼板厚為23毫米,其它材料的
5、液體發(fā)酵設備?,表壓?,19,,,,,20,大小罐的結構區(qū)別,罐徑在1米以下的小型發(fā)酵罐,罐頂和罐身采用法蘭連接 大中型發(fā)酵罐:整體焊接。 5噸以下罐,用夾套加熱和冷卻 5噸以上罐,用罐內的蛇管加熱和冷卻,21,發(fā)酵罐:是 薄壁壓力容器,操作不當,會造成失穩(wěn),原因較多,下面舉例說明,22,內筒不銹鋼,外夾套普通碳素鋼,23,某廠曾因蒸汽實罐滅菌后,罐體長時間處于密封狀態(tài), 蒸汽冷凝后罐內成真空, 最后導致罐體成外壓失穩(wěn)。,一,24,二,湖南衡陽市,25,26,27,28,罐體的尺寸比例:以罐體直徑D、攪拌器直徑d為基準,通用發(fā)酵罐通常取值系數(shù)范圍 攪拌器直徑d =1/3D1/21/3 罐筒身高
6、H0 =2 D 1.73 擋板寬度B =0.1D1/81/12 攪拌器間距S=2d1.52.5 下攪拌器距底間距C= d0.81.0 HL裝料的液面高度 ha 封頭凸出部分的高度,標準橢圓封頭有: ha 0.25D Hb封頭直邊高度,據(jù)壁厚一般取25、 40、 50mm,29,,,,,30,橢圓封頭的容積計算公式:,化工設備設計手冊 在忽略hb后,有:,,,因標準橢圓封頭,ha=1/4 D,31,公稱容積:V0,V0定義為:罐圓筒部分容積底封頭容積 能裝液的體積 罐中實際裝料體積:V 則有:v/v0=0.7-0.8,即裝料系數(shù) 標準橢圓封頭時, 取,再取D/H=2時,有
7、,,,,32,H/D的大小會影響。。。,隨著罐體高度和液層增高,氧氣的利用率增加, 但增長不是線性關系,隨著罐體增高, 增長速率隨之減慢。,液柱增高,進罐要求的空氣壓力必須提高,空壓機的能耗增加 在罐底氣泡受壓后體積縮小,氣液界面的面積減小 過高的液柱高度,雖增加了O2的分壓,但同樣增加CO2分壓,增加了二氧化碳濃度,可能抑制某些發(fā)酵菌種 而且罐體的高度,同廠房高度密切相關。,過高會如何?,33,例1.1 發(fā)酵罐數(shù)量與尺寸的計算,現(xiàn)設計一年產量為400噸的鏈霉素車間,成品效價要求為740單位/毫克,平均發(fā)酵水平為22000單位/毫升,包括輔助時間在內的發(fā)酵周期為8天,若發(fā)酵液收率為95%,提煉
8、總收率為65%,發(fā)酵罐總臺數(shù)為16臺,裝料系數(shù)為75%,年工作日以300天計,求 1.每個工作日所需處理的成熟發(fā)酵液的量? 2.發(fā)酵罐的公稱容積及主要尺寸。,,,,,34,解: 每年產的鏈霉素總單位數(shù)為u 每年所需的發(fā)酵液體積為m3 則每個生產日所需的發(fā)酵液體積為 共16個罐,8天一個發(fā)酵周期,則每天發(fā)酵完成16/8=2罐 則,每罐的公稱體積為 取為50立方米,若取高徑比為2,則有 取3.1m,則H=2D=6.2m。其它參數(shù)計算代入公式。。。,,,,,35,2.攪拌器,攪拌器的作用是: 產生強大的總體流動:宏觀均勻翻動 產生強烈的湍動:微觀均勻剪切 攪拌產生三種基本流型: 切向流、 軸向流、
9、徑向流。 三種基本流型,同時存在。 其中,軸向流與徑向流對混合起主要作用 而切向流應加以抑制,可通過加入擋板來削弱。,36,流型,徑向流(流體流動的方向垂直于攪拌軸,沿徑向流動,碰到容器壁面分成兩股流體分別向上、向下流動,再回到葉端,不穿過葉片,形成上、下兩個循環(huán)流動。) 軸向流(流體流動方向平行于攪拌軸,流體由槳葉推動,使流體向下流動,遇到容器底面再翻上,形成上下循環(huán)流) 切向流(無擋板的容器內,流體繞軸作旋轉運動,流速高時液體表面會形成旋渦,此時流體從漿葉周圍周向卷吸至槳葉區(qū)的流量很小,混合效果很差。),37,徑向式攪拌器,渦輪式攪拌器分為:平葉式、彎葉式、箭葉式三種 渦輪攪拌器要安一個圓
10、盤 為了避免氣泡在阻力較小的攪拌器中心部分沿軸上升,38,相同半徑、轉速時,功率消耗: 平葉彎葉箭葉 相同攪拌功率下,三者的粉碎氣泡的能力: 平葉彎葉箭葉 相同攪拌功率下,三者翻動流體的能力: 平葉彎葉箭葉,微觀湍動,宏觀翻動,39,軸向式攪拌器 槳葉式 旋槳式 Lightnin式,40,工廠多采用在同一攪拌軸上安裝不同葉形的攪拌器 上層:以混合為主的軸流型或箭葉攪拌器, 下層:以粉碎氣泡為主的平葉渦輪攪拌器。,以三層攪拌器為例,最下層仍采用徑向型的渦輪攪拌器,其余兩層改用軸向流型攪拌器時,與三層均采用徑向流攪拌器相比,功率消耗可降低1530。 國內醫(yī)藥行業(yè)在50m3發(fā)酵罐內,上兩檔改裝軸流向
11、型攪拌器,作土霉素發(fā)酵試驗表明,不但消耗功率下降,發(fā)酵指數(shù)也提高了近15。,41,3. 擋板,擋板的作用:改變液流的方向,將切向流改為軸向流,防止產生漩渦 數(shù)目通常為46塊,其寬度為0.10.12 D 全擋板條件:是指在攪拌罐中再增加擋板或其它附件時,攪拌功率不再增加。(消除液面漩渦的最低條件)。,式中 D罐的直徑(mm) Z擋板數(shù) W擋板寬度(mm) 用來校驗檔板數(shù)是否夠,42,,一般具有冷卻列管或排管的發(fā)酵罐內不另設擋板。但冷卻管為盤管時,則應設擋板。 擋板的長度自液面起到罐底為止。 擋板與罐壁之間的距離為(1/51/8)D,避免形成死角,防止物料與菌體堆積。,43,4
12、.軸封,軸封的作用:使罐頂或罐底與軸之間的縫隙加以密封,防止泄露和污染雜菌。 形式:填料函軸封、機械軸封兩種。 填料函軸封是由填料箱體,填料底襯套,填料壓蓋和壓緊螺栓等零件構成,使旋轉軸達到密封的效果。,發(fā)酵罐內是正壓還是負壓?,44,填料函式軸封的優(yōu)點是結構簡單。 用于發(fā)酵罐,它的缺點是: 死角多,很難徹底滅菌,容易滲漏及染菌; 軸的磨損情況較嚴重; 填料壓緊后摩擦功率消耗大; 壽命短,經常維修,耗工時多。 故在發(fā)酵罐上,多數(shù)不用 但在后續(xù)章節(jié),其它設備中,它會出現(xiàn),45,機械軸封,又稱端面軸封,由彈性元件、動環(huán)和靜環(huán)組成。 動環(huán)固定在軸上,隨軸一起轉動。靜環(huán)裝在殼體上。動環(huán)依靠彈簧的壓力與
13、靜環(huán)緊密接觸,阻止流體泄漏。 由兩個環(huán)的端面互相密切貼合而達密封目的。,46,機械軸封的密封原理:見flashmechanical_seal.swf,依靠三個密封點達到完全密封: 1動環(huán)與靜環(huán): 在相對運動的動環(huán)和靜環(huán)之間的的接觸面 (端面) 兩端面必須高度光潔平直,這是相對旋轉密封。 端面間有層極薄的液體,起密封作用,,,,,,,,,47,機械軸封的密封原理,2靜環(huán)與壓蓋之間的密封: 用有彈性的輔助密封圈來防止液體從靜環(huán)與壓蓋之間泄漏。 這是一靜密封。 3動環(huán)與軸之間的密封: 也是用輔助密封圈來防止液體從動環(huán)與軸之間泄漏。 這也是一個相對靜止的密封。,48,,動環(huán)的硬度應比靜環(huán)大。 動環(huán)的材
14、料可用鑄鐵、硬質合金、高合金鋼等 靜環(huán)最常用浸漬石墨或填充聚四氟乙烯。,49,請看FLASH動畫 1234.swf,這是一個虛擬發(fā)酵罐內機械軸封組裝試驗的Flash動畫。你能把它組裝起來嗎?,50,機械軸封與填料函軸封相比:,軸不受磨損。 為什么? 摩擦功率耗損少,約為填料函密封的1050 密封可靠,長期使用很少泄漏。 無死角,可以防止雜菌污染。 對軸的精度和光潔度沒有填料函要求嚴格。 其缺點是:結構復雜,需要一定的加工精度和安裝技術。,51,5.聯(lián)軸器及軸承,大型發(fā)酵罐攪拌軸較長,常分為二至三段加工,再用聯(lián)軸器組成牢固的剛性聯(lián)接。 小型的發(fā)酵罐可采用法蘭將攪拌軸連接,軸的連接應垂直,中心線對
15、正。,52,53,,,54,作用:對軸固定,防止擺動,同時又不影響轉動 罐內軸承接觸處的軸頸極易磨損,尤可以在與軸承接觸處的軸上增加一 個軸套。,軸承結構,55,其它安裝形式的攪拌器,,也有通風攪拌發(fā)酵罐的攪拌為下伸式 不以供氧為目的時,也有側向攪拌,56,6.變速裝置,需要變速的原因: 電機的轉速大于攪拌器所需轉速。 電機分四級,轉速分別約為: 800、1000、1400、1600 rpm; 而攪拌轉速則一般為90-110 rpm。 發(fā)酵罐常用的變速裝置有三角皮帶傳動。,57,一般攪拌器如三角皮帶輪攪拌器,轉速固定; 但是,發(fā)酵時,是否需要攪拌轉速有變化呢?,在發(fā)酵中期,微生物旺盛生長,對
16、氧的需要量較高,而在初期和后期微生物的需氧量較低 在大型發(fā)酵罐如果培養(yǎng)基采用實罐滅菌時,為了使滅菌時培養(yǎng)基的傳熱較為理想,因而需要開動攪拌,但此時往往不通入空氣,因而使攪拌功率上升,如果操作不當,就有可能損壞電機。,58,目前發(fā)酵罐設計時,推薦使用多極電機,可以在實消時低速攪拌,在正常發(fā)酵時攪拌全速運行,目前這種雙速馬達已使用于發(fā)酵過程中滿足不同需氧量的攪拌操作。,59,7.空氣分布器,空氣分布裝置的作用是吹入無菌空氣,并使空氣均勻分布。 分布裝置的形式有單管及環(huán)形管等。 常用的分布裝置是單管式,單管式管口對正罐底中央,裝于最低一擋攪拌器下面,噴口朝下,管口與罐低的距離約40mm 通常通風管的
17、空氣流速取20米/秒。為了防止吹管吹入的空氣直接噴擊罐底,加速罐底腐蝕,在空氣分布器下部罐底上加焊一塊不銹鋼補強??裳娱L罐底壽命,叫補強板。,,60,環(huán)形管的分布裝置 噴孔直徑向下,噴孔的總截面積約等于通風管的截面積。 空氣分散效果不及單管式分布裝置。同時由于噴孔容易被堵塞,已很少采用。,通風量在0.020.5ml/sec時,氣泡的直徑與空氣噴口直徑的1/3次方成正比。也就是說,噴口直徑越小,氣泡直徑也越小。 但是生產實際的通風量均超過上述范圍,因此氣泡直徑僅與通風量有關,而與噴口直徑無關。,61,8.消泡裝置,泡沫形成的原因 發(fā)酵液中含有蛋白質等發(fā)泡物質。 由外界引進的氣流被機械地分散形成(
18、通風、攪拌) 危害 降低發(fā)酵設備的利用率 增加了菌群的非均一性 增加了染菌的機會 導致產物的損失 消泡劑會給后提取工序帶來困難,62,,物理消泡法:靠機械力引起強烈振動或者壓力變化,促使泡沫破裂。 消泡器安裝在發(fā)酵罐內轉動軸的上部或安裝在發(fā)酵罐排氣系統(tǒng)上的,可將泡沫打破、分離成液態(tài)和氣態(tài)兩相的裝置。,化學消泡法:加入消泡劑,使泡沫失穩(wěn),發(fā)酵時多用豆油。,63,64,安裝在罐內的消泡裝置,安裝在發(fā)酵罐內、轉動軸的上部,齒面略高于液面,直徑為0.8-0.9D。 若其由攪拌軸帶動,則轉速不高,效果不佳。 下圖為耙式消泡器。,65,安裝在罐外的消泡裝置接于罐的排氣口,旋風式消泡器 其工作原理與旋風分離
19、器相同。 右圖為改進的旋風式消泡器,它可以和消泡劑盒配合使用,并根據(jù)發(fā)酵罐內的泡沫情況自動添加消泡劑,,66,,,例:,67,離心式消泡器 是一種離心式氣液分離裝置。離心式消泡器裝于排氣口上,夾帶液沫的氣流以切線方向進入分離器中,由于離心力的作用,液滴被甩向器壁,經回流管返回發(fā)酵罐,氣體則自中間管排出。,68,刮板式消泡器,工作原理:刮板旋轉時轉速為10001400轉/分,使泡沫產生離心力被甩向殼體四周。消泡后的液體及部分泡沫集中于殼體的下端,經回流管返回發(fā)酵罐,而被分離后的氣體則通過氣體出口排出。,,69,碟片式消泡器,碟片式消泡器裝在發(fā)酵罐的頂部,轉軸通過兩個軸封與發(fā)酵罐及排氣管連接。 當
20、泡沫溢上與碟片式消泡器接觸時,泡沫受高速旋轉離心碟的離心力作用,將泡沫破碎分離成液態(tài)及氣態(tài)兩相,氣相通過通氣孔沿空心軸向上排出,液體則補甩回發(fā)酵罐中。,70,罐外消泡器總結,可分為: 無動力,泡沫切線進入: 旋風式消泡器 離心式消泡器 外加動力(電機): 刮板式消泡器 碟片式消泡器,71,發(fā)酵罐的冷卻,主要是考慮: 微生物發(fā)酵過程的發(fā)酵熱 機械攪拌消耗的功率移送給培養(yǎng)基的熱量 此外還要考慮,發(fā)酵罐空消、實消后的冷卻時間。,9.傳熱系統(tǒng)(發(fā)酵罐需加熱還是冷卻?),72,換熱夾套:在小型罐中往往應用夾套換熱裝置,優(yōu)點是結構簡單,加工方便,易清洗。 換熱系數(shù)較低,
21、故只用于5m3以下的小罐。夾套的換熱系數(shù)在400600kJ(m2h)之間。,,73,立式蛇管:在罐內設4組或8組蛇管。其優(yōu)點為:管內水的流速大,傳熱系數(shù)高,在12004000kJ(m2h)之間。 可兼起檔板的作用。 缺點:罐內立式蛇管體積約占發(fā)酵罐的1.5 %容積,蛇管一旦發(fā)生泄漏,將造成整個罐批的發(fā)酵液染菌,且罐內蛇管也給罐體清洗帶來了不便。,74,近來新型發(fā)酵罐的冷卻面移至罐外,采用半圓形外蛇管 優(yōu)點 罐體容易清洗 增強罐體強度,因而可大大降低罐體壁厚,使整個發(fā)酵罐造價降低 提高了發(fā)酵罐的容積,增大放罐體積,75,10 測量儀表,發(fā)酵罐檢測參數(shù)有:攪拌速度、罐內壓力、溫度、空氣流量、泡沫度
22、,此外還有pH 值、溶氧值、氧化還原電位等 這些檢測元件必須能滿足蒸汽滅菌和不能對發(fā)酵液產生污染 儀表的測量點的位置應根據(jù)罐內發(fā)酵液的流型進行合理的布點,76,pH電極,溶氧電極,77,11.發(fā)酵罐的管路、接口,罐體上的通道口一般有: 進料口放料口接種口取樣口 消泡劑口補料口進氣口排氣口,發(fā)酵罐的工作周期 空消實消降溫、通氣接種、補料、取樣放料清洗,進料管路有時配在罐體上封頭,有時位于罐體下部與放料管路共用一個管口 有時取樣、放料、接種使用一個口,有沒有蒸汽進口?,78,,實罐滅菌: “三路進汽”、 “非進即出” “三路進汽”就是在對培養(yǎng)基滅菌時,讓蒸汽從空氣進口、排料口、取樣口進入罐內,由于
23、這三個管都是插入到發(fā)酵醪中,若不進蒸汽就會形成滅菌死角。 所有進入發(fā)酵罐的管道在滅菌過程中如果不進入蒸汽就一定要進行排氣,使所有管道都被蒸汽(或二次蒸汽)通過。,79,,蒸汽管路的分支: A :滅罐:三路進氣 通氣管、取樣管、放料管 B:滅分空氣過濾器 C:滅旋風分離消泡器 D:滅與罐相連的管道 E:滅菌過程的預熱:通入夾套,80,無菌空氣管道分支: A:發(fā)酵罐的通氧 注意:止回閥(安裝位置) B:對已經滅菌的管道進行壓力保持,81,其它細節(jié) A:空氣流量計 B:壓力表 C:取樣口 每次取樣均需滅菌,82,11.發(fā)酵罐的管路配置、滲漏與死角的排除,盡量減少管路 止回閥 消滅死角小辮子(在主閥
24、門底部焊上,專門做排氣用) 閥門反裝 消滅滲漏 滅菌時各蒸汽進口壓力均一 冷凝水及時排出、蒸汽管道保溫 滅菌后的管道應汽封或無菌空氣保壓,83,閥門,發(fā)酵工業(yè)中由于使用高溫蒸汽對發(fā)酵設備進行滅菌, 因此閥門要求是蒸汽級密封。 截止閥 發(fā)酵用閥門開啟頻繁, 并經常受介質腐蝕、沖刷和氣蝕的損害。因此對發(fā)酵工業(yè), 閥門閥體材料用不銹鋼, 軟密封關閉件用可更換的聚四氟乙烯墊片,84,85,止回閥注意:止回閥沒有調節(jié)流量的需要,只是確保流向,86,止回閥,,隔膜閥,截止閥,87,閥門安裝,與發(fā)酵罐接觸的截止閥,應保證閥座與罐相連。以防閥桿處瀉露造成污染,安裝于一般容器的進料閥方向,安裝于發(fā)酵罐時的方向,88,對截止閥的加工:抗生素閥,發(fā)酵對接觸發(fā)酵液的管道、閥門要求無菌, 因此要求對這類管道、閥門滅菌時要保持蒸汽流通,,89,90,發(fā)酵罐的基本條件,(1) 發(fā)酵罐應具有適宜的徑高比。罐身越高,氧的利用率越高。 (2) 發(fā)酵罐能承受一定的壓力。 (3)要保證發(fā)酵液必須的溶解氧。 (4)發(fā)酵罐應具有足夠的冷卻面積。 (5) 發(fā)酵罐內應盡量減少死角,避免藏垢積污,滅菌能徹底,避免染菌。 (6) 攪拌器的軸封應嚴密,減少泄漏。,
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