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高考生物二輪專(zhuān)題復(fù)習(xí) 專(zhuān)題12 現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題課件

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1、,專(zhuān)題12,現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題,,1.基因工程的誕生(A)。 2.基因工程的原理及技術(shù)(A)。 3.基因工程的應(yīng)用(B)。 4.蛋白質(zhì)工程(A)。 5.植物的組織培養(yǎng)(B)。 6.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆(A)。 7.細(xì)胞融合與單克隆抗體(A)。 8.動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程(A)。,直 擊考綱,,9.胚胎工程的理論基礎(chǔ)(A)。 10.胚胎干細(xì)胞的移植(A)。 11.胚胎工程的應(yīng)用(B)。 12.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題(A)。 13.生物武器對(duì)人類(lèi)的威脅(A)。 14.生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題(A)。 15.生態(tài)工程的原理(A)。 16.生態(tài)工程的實(shí)例及應(yīng)用(B)。,直 擊考綱,真題重溫,知能回歸,

2、典題特訓(xùn),,,,基因工程與蛋白質(zhì)工程,判斷下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述 (1)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶,用前者可切割煙草花葉病毒的核酸(2009浙江,3B和2010浙江,2A) () (2)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)(2011浙江,6B) (),,,真 題 重 溫,(3)應(yīng)用DNA探針技術(shù)可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)(2011四川,5D) () (4)自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上,屬于基因工程(2010大綱全國(guó),5D) (),,,(5)從某海洋動(dòng)物中獲得一基因,其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗

3、菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽(2013廣東,3C)() (6)采用蛋白質(zhì)工程進(jìn)一步改造AFB1解毒酶的基本途徑是:從提高酶的活性出發(fā),設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列,找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(2012天津,8節(jié)選) (),,,1.掌握基因工程的主干知識(shí)圖解,,知 能 回 歸,,(1)目的基因的獲,(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因) (3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 導(dǎo)入植物:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法 導(dǎo)入動(dòng)物:顯微注射法導(dǎo)入微生物 導(dǎo)入微生物細(xì)胞:感受

4、態(tài)細(xì)胞法(用Ca2處理),(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定 插入檢測(cè):DNA分子雜交 轉(zhuǎn)錄檢測(cè):DNARNA分子雜交 翻譯檢測(cè):抗原抗體雜交 個(gè)體水平檢測(cè):抗性接種實(shí)驗(yàn),2.基本工具,3.基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程,1.(2014廣東,25)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示,下列敘述正確的是(多選)(),典 題 特 訓(xùn),,A.過(guò)程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶 B.過(guò)程需使用解旋酶和PCR獲取目的基因 C.過(guò)程使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備 D.過(guò)程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體 細(xì)胞,解析A項(xiàng),過(guò)程是通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲取DNA,逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。,B項(xiàng),過(guò)程指的是

5、從cDNA文庫(kù)中獲取目的基因,不需要利用PCR技術(shù),也用不到解旋酶。,C項(xiàng),過(guò)程中使用的感受態(tài)細(xì)胞要用CaCl2溶液制備,而不是用NaCl溶液制備。,D項(xiàng),過(guò)程鑒定目的基因是否已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞,可以用標(biāo)記的目的基因?yàn)樘结榿?lái)檢測(cè)受體細(xì)胞中是否存在目的基因,即利用DNA分子雜交鑒定。,答案AD,2.(2014重慶,4)下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述,正確的是(),A.的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與 B.侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到的染色體上 C.的染色體上若含抗蟲(chóng)基因,則就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀 D.只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異,解析A項(xiàng),為重組T

6、i質(zhì)粒,其構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶參與。,B項(xiàng),含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒上的目的基因整合到受體細(xì)胞()的染色體上,而并非整個(gè)重組Ti質(zhì)粒整合到的染色體上。,答案D,C項(xiàng),目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能進(jìn)行表達(dá),所以抗蟲(chóng)基因?qū)胫参锛?xì)胞后,培育成的植株也不一定具有抗蟲(chóng)性狀。,D項(xiàng),轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株是否培育成功,可以從個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè),即觀察植株是否具有抗蟲(chóng)性狀,如果具有抗蟲(chóng)性狀則說(shuō)明發(fā)生了可遺傳變異(基因重組)。,3.(2014江蘇,23改編)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是(多選) () A.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6 個(gè)核 苷酸序

7、列 B.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為變性、復(fù)性、延伸 創(chuàng)造條件 C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因 D.抗蟲(chóng)基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必 能正常表達(dá),解析A項(xiàng),限制性核酸內(nèi)切酶大多特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列,但也有少數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別4個(gè)、5個(gè)或8個(gè)核苷酸序列。,答案AC,B項(xiàng),PCR反應(yīng)中溫度的周期性變化是為變性、復(fù)性和延伸創(chuàng)造條件。,C項(xiàng),載體質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇,而不是抗生素合成基因。,D項(xiàng),目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能正常表達(dá)。,4.圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序

8、列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?,F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為:CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列分析中正確的是(),A.若用限制酶Msp完全切割圖1中DNA片段,會(huì)破壞2 個(gè)磷酸二酯鍵 B.若圖1所示DNA虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA替換,用 限制酶Sma完全切割后會(huì)產(chǎn)生3種不同的DNA片段 C.若切割圖2中的質(zhì)粒以便拼接目的基因D應(yīng)選擇限制酶 BamH和Mbo D.若用上述條件構(gòu)建含有目的基因D的重組質(zhì)粒并成功導(dǎo) 入細(xì)菌體內(nèi),則此細(xì)菌在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基中 不能存活,解析由題意可知,圖1中

9、的目的基因含有2個(gè)限制酶Msp的切割位點(diǎn),完全切割后會(huì)破壞4個(gè)磷酸二酯鍵,故A錯(cuò)誤;,答案D,若圖中堿基對(duì)被替換后,限制酶Sma的切割位點(diǎn)只有1個(gè),完全切割后能產(chǎn)生2種不同的DNA片段,故B錯(cuò)誤;,若切割圖2中的質(zhì)粒,并且不能破壞目的基因,最好選擇限制酶BamH進(jìn)行切割,故C錯(cuò)誤;,由于插入目的基因后會(huì)破壞抗生素A抗性基因,但沒(méi)破壞抗生素B抗性基因,故在含有抗生素A和抗生素B的培養(yǎng)基中不能存活,D正確。,5.(2014新課標(biāo),40)植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性,其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因,并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。 回答下列問(wèn)題:,(1)理論上,

10、基因組文庫(kù)含有生物的__________基因;而cDNA文庫(kù)中含有生物的________基因。,解析基因組文庫(kù)含有生物的全部基因,而cDNA文庫(kù)中含有生物的部分基因。,答案全部部分,(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因,可首先建立該植物的基因組文庫(kù),再?gòu)闹衉_______出所需的耐旱基因。,解析植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性,其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān),若要從植物甲中獲得耐旱基因,可首先建立該植物的基因組文庫(kù),包含該生物的所有基因,然后再?gòu)闹泻Y選出所需的耐旱基因。,篩選,(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌,并通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物________的體細(xì)胞中,經(jīng)過(guò)一系列的過(guò)程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再

11、生植株中正確表達(dá),應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的____________,如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的__________是否得到提高。,解析若從植物甲中獲得該耐旱基因,并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中,通常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細(xì)胞后,經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá),應(yīng)檢測(cè)該耐旱基因是否合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì),即檢測(cè)此再生植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物,如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,說(shuō)明已經(jīng)合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì),這時(shí)再進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)檢測(cè),即在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的耐旱性是否得到提高。,答案乙表達(dá)產(chǎn)物耐旱性,(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱

12、植株自交,子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為31時(shí),則可推測(cè)該耐旱基因整合到了____________________(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。,解析假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交,子代中耐旱和不耐旱植株的數(shù)量比為31,符合基因的分離定律,說(shuō)明得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合子,因此可推測(cè)該耐旱基因只整合到了同源染色體的一條上。,同源染色體的一條上,6.(2014山東,36)人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白,可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下:,(1)htPA基因與載體用______________________________

13、______切割后,通過(guò)DNA連接酶連接,以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA,可采用_________________________技術(shù)。,解析用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)目的基因和載體進(jìn)行切割,以形成相同的黏性末端。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA,常用DNA分子雜交技術(shù)。,同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限,制酶),DNA分子雜交(或核酸探針),(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞,要對(duì)供體母羊注射促性腺激素,使其_____________。采集的精子需要經(jīng)過(guò)__________,才具備受精能力。,解析對(duì)供體母羊注射促性腺激素可以使其超數(shù)排卵,采集的精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理后才具

14、備受精能力。,超數(shù)排卵,獲能(處理),(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是____________,為了獲得母羊,移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體,這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的________。,解析將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵(動(dòng)物細(xì)胞)常用的方法是顯微注射法。為了獲得母羊,需要對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體,依據(jù)的原理是早期胚胎細(xì)胞的全能性。,顯微注射法,性別鑒定,全能性,(4)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到______________ ________________,說(shuō)明目的基因

15、成功表達(dá)。,解析目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA,即人組織纖溶酶原激活物。,htPA(或人組織,纖溶酶原激活物),7.(2014海南,31)下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),制備“工程菌”的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:,(1)獲得A有兩條途徑:一是以A的mRNA為模板,在________的催化下,合成互補(bǔ)的單鏈DNA,然后在________作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需基因;二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的________序列,推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,推測(cè)其DNA的______________序列,再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。,解析利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的

16、基因的過(guò)程是:以mRNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA,然后在DNA聚合酶的作用下,合成雙鏈DNA分子;根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過(guò)程是:根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測(cè)相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,推測(cè)DNA中脫氧核苷酸的排列順序,通過(guò)化學(xué)方法合成。,答案逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶氨基酸脫氧核苷酸,(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí),需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有_____、________________________、4種脫氧核苷酸和耐熱性的DNA聚合酶,擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成。,解析PCR過(guò)程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。,引物,(目的基

17、因或A基因)模板,(3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為_(kāi)_______________。,解析目的基因和載體結(jié)合,形成基因表達(dá)載體。,基因表達(dá)載體,(4)在基因工程中,常用Ca2處理D,其目的是________ _____________________________________________。,解析在利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí),需要先用Ca2處理,使之成為感受態(tài)細(xì)胞,有利于其吸收重組DNA分子。,使其成為,感受態(tài)細(xì)胞,使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,細(xì)胞工程,判斷下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述 (1)在“羊胎兒皮膚組織塊成纖維細(xì)胞”過(guò)程中,需要用胰蛋白

18、酶處理,在培養(yǎng)過(guò)程中,將成纖維細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定,另外為便于清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液(2012山東,35(2)和2010福建,32(3)整合) (),,真 題 重 溫,(2)不同種植物原生質(zhì)體融合的過(guò)程屬于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程,該技術(shù)可克服生殖隔離的限制,培育遠(yuǎn)緣雜種(2009全國(guó)卷,4AB) () (3)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞,克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變(2010浙江,4AB) (),,,(4)二倍體細(xì)胞和惡性細(xì)胞系一樣傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的(2010

19、浙江,4CD) () (5)二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株,若用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子(2011江蘇,16BC) (),,,1.植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體制備過(guò)程比較,知 能 回 歸,,(1)誘導(dǎo)融合的方法分別有哪些?融合的細(xì)胞類(lèi)型有哪幾種?,提示誘導(dǎo)植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的方法主要有離心、振動(dòng)、電激或用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。 動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒(誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有因素)、電激等。 融合的細(xì)胞類(lèi)型:前者AA、BB、AB。后者瘤瘤、B瘤、BB。,(2)各自的原理分別有哪些? 提示前者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞

20、的全能性,后者有細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖。,2.掌握克隆動(dòng)物培育流程圖,D個(gè)體的性別、性狀與哪個(gè)個(gè)體相同? 提示根據(jù)發(fā)育成新個(gè)體D的重組細(xì)胞核由動(dòng)物B提供,而性別及大多數(shù)遺傳性狀是由核內(nèi)遺傳物質(zhì)決定的,故B、D兩者的性別及大多數(shù)遺傳性狀相同。,1.(2014浙江,3)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是() A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型 B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞 C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆 D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀,典 題 特 訓(xùn),,解析A項(xiàng),連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞一般都培養(yǎng)了多次,二倍體核型發(fā)生了改變,大多數(shù)細(xì)胞具有異倍體核型。,答案

21、B,B項(xiàng),細(xì)胞癌變是由基因突變引起的,如果癌細(xì)胞在一定條件下(如用秋水仙胺等藥物治療),則有可能恢復(fù)成正常細(xì)胞。,C項(xiàng),細(xì)胞克隆的最基本的要求是:必須確定所建立的克隆來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞。,D項(xiàng),未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性。,2.下圖表示四倍體蘭花葉片通過(guò)植物組織培養(yǎng)成植株的過(guò)程,下列相關(guān)敘述中正確的是(多選)(),A.過(guò)程中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂 B.階段需要生長(zhǎng)素而階段僅需要細(xì)胞分裂素 C.階段為脫分化過(guò)程 D.此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得的植株體細(xì)胞有兩個(gè)染色體組,解析過(guò)程均發(fā)生了有絲分裂。植物組織培養(yǎng)的各個(gè)階段均需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素刺激。階段細(xì)胞失去分化狀態(tài)變成愈傷組織,為脫分化過(guò)程。

22、蘭花是四倍體,花粉細(xì)胞含兩個(gè)染色體組,經(jīng)離體培養(yǎng)所得的植株體細(xì)胞含兩個(gè)染色體組。,答案CD,3.如圖為小白鼠的胚胎干細(xì)胞分化示意圖。,直到今天也不能用類(lèi)似________________(某種植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段)的方法直接獲得完整的動(dòng)物個(gè)體。因此,培育“克隆鼠”的過(guò)程,實(shí)際是通過(guò)________來(lái)實(shí)現(xiàn)的。,請(qǐng)回答: (1)圖中分化程度最低的是____________。在體外培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)液中加入________因子,可誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化??茖W(xué)家將小鼠已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核移入卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,培育出“克隆鼠”,這里用卵母細(xì)胞的原因是_________________。

23、,解析圖中分化程度最低的是胚胎干細(xì)胞。在體外培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子,可誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化??茖W(xué)家將小鼠已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核移入卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,培育出“克隆鼠”,這里用卵母細(xì)胞的原因是:卵母細(xì)胞可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境。直到今天也不能用類(lèi)似植物組織培養(yǎng)(某種植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段)的方法直接獲得完整的動(dòng)物個(gè)體。因此,培育“克隆鼠”的過(guò)程,實(shí)際是通過(guò)(動(dòng)物體細(xì)胞)核移植來(lái)實(shí)現(xiàn)的。,答案胚胎干細(xì)胞分化誘導(dǎo)卵母細(xì)胞可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境植物組織培養(yǎng)(動(dòng)物體細(xì)胞)核移植,(2)在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過(guò)程中,人們將關(guān)鍵基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細(xì)胞,使其

24、變成多功能干細(xì)胞。在該技術(shù)中,逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進(jìn)入成纖維細(xì)胞的________,它能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞。,解析在培育轉(zhuǎn)基因鼠的過(guò)程中,人們將關(guān)鍵基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小白鼠的成纖維細(xì)胞,使其變成多功能干細(xì)胞。在該技術(shù)中,逆轉(zhuǎn)錄病毒是關(guān)鍵基因進(jìn)入成纖維細(xì)胞的載體,它能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞。,載體,(3)在制取單克隆抗體過(guò)程中,用________________細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選最終得到能分泌___________的雜交瘤細(xì)胞。,解析在制取單克隆抗體過(guò)程中,用效應(yīng)B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選最終得到能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。,效應(yīng)B淋巴(漿)

25、,特異性抗體,4.(2014新課標(biāo),40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如圖所示。,若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。,回答下列問(wèn)題: (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)____次免疫后才能有符合要求的

26、。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是____小鼠,理由是_________________________。,解析據(jù)圖分析可知,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16 000以上,小鼠Y的血清抗體的效價(jià)最高,最適合用于制備單克隆抗體。,4,Y,Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高,(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有______________________ _____________________________________,體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是_________________________

27、_ _____________。,解析融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的,并且不可能所有細(xì)胞都融合,故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。,B淋巴細(xì)胞相互融合形成,的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞,細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合,率達(dá)不到100%,(3)雜交瘤細(xì)胞中有___個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是________條。,解析動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的是具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目最多為4060100(條)。,1,100,(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是__

28、_____________。,解析正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的,且經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化,不能無(wú)限增殖,而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。,不能無(wú)限增殖,5.科學(xué)家從某無(wú)限增殖的細(xì)胞中分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因(prG),該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答下列問(wèn)題: (1)利用________________________技術(shù)制備單克隆抗體,常用聚乙二醇、________________、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)細(xì)胞融合。再經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的________________細(xì)胞。,解析在利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的過(guò)程中,

29、常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合,融合后的細(xì)胞經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng),最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。,答案動(dòng)物細(xì)胞融合滅活的病毒雜交瘤,(2)有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體,請(qǐng)完成設(shè)計(jì)方案: 取________________細(xì)胞的細(xì)胞核,移植到去核的能夠________的細(xì)胞中,構(gòu)成重組細(xì)胞。(假定移植后細(xì)胞核中基因的表達(dá)狀態(tài)不受影響) 將重組細(xì)胞在________條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠________內(nèi)增殖,以獲得大量單克隆抗體。,解析產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞應(yīng)具有兩個(gè)特點(diǎn):能無(wú)限增殖和產(chǎn)生特定抗體。若用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞首先取特定抗

30、原刺激的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核,移植到去核的能夠無(wú)限增殖的細(xì)胞中,構(gòu)成重組細(xì)胞;然后將重組細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,以獲得大量單克隆抗體。,答案特定抗原刺激的B淋巴無(wú)限增殖體外腹腔,(3)也有人提出,可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因(prG)來(lái)制備單克隆抗體,其思路如圖所示。,酶A是指________________,酶B是指____________。 圖中表示_______________________________,對(duì)進(jìn)行檢測(cè)與鑒定的目的是________________________ _________,具有的特點(diǎn)是_______________________ _

31、________。,解析基因工程中第一步獲取目的基因;第二步用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理供體DNA和質(zhì)粒,獲取基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒);第三步將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞;第四步檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和表達(dá)。,限制性核酸內(nèi)切酶,DNA連接酶,目的基因(無(wú)限增殖調(diào)控基因或prG),檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和,既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生,是否表達(dá),特定抗體,6.我國(guó)科學(xué)家張道遠(yuǎn)先生通過(guò)從耐旱灌木白花檉柳中克隆得到TSOD基因,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化到棉花中,獲得了具備更強(qiáng)抗旱性的T4代轉(zhuǎn)基因棉花株系。下圖為轉(zhuǎn)基因抗旱棉花的培育過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答:,(1)過(guò)程表示用_________擴(kuò)增目的基因的方法。過(guò)程

32、用到的工具酶有________________________________ ________。步驟一般用______________處理農(nóng)桿菌,使其易吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子。,解析過(guò)程表示用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。過(guò)程用到的工具酶有限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)、DNA連接酶。步驟一般用Ca2(或CaCl2)處理農(nóng)桿菌,使其易吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子。,PCR技術(shù),限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)、DNA,Ca2(或CaCl2),連接酶,(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入棉花細(xì)胞除步驟所示的方法外,還可采用________________________。如果受體細(xì)胞是動(dòng)物的受精卵,則一般采用的方法是___

33、___________。,解析將重組質(zhì)粒導(dǎo)入棉花細(xì)胞除步驟所示的方法外,還可采用花粉管通道法(基因槍法)。如果受體細(xì)胞是動(dòng)物的受精卵,則一般采用的方法是顯微注射法。,花粉管通道法(基因槍法),顯微注射法,(3)外植體培養(yǎng)成為試管苗的過(guò)程采用了_____________技術(shù),利用了____________________的原理,步驟表示_______________。,解析外植體培養(yǎng)成為試管苗的過(guò)程采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù),利用了植物細(xì)胞的全能性的原理,步驟表示脫分化、再分化。,植物組織培養(yǎng),植物細(xì)胞的全能性,脫分化、再分化,(4)為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功,可先用放射性同位素標(biāo)記的___

34、_____________________________作探針進(jìn)行分子水平鑒定,再________________進(jìn)行個(gè)體水平鑒定棉花植株的抗旱性。,解析為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功,可先用放射性同位素標(biāo)記的抗旱基因(TSOD基因、目的基因)作探針進(jìn)行分子水平鑒定,再移栽到干旱土地中進(jìn)行個(gè)體水平鑒定棉花植株的抗旱性。,抗旱基因(TSOD基因、目的基因),移栽到干旱土地中,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,胚胎工程,1.判斷下列有關(guān)胚胎工程及其應(yīng)用的敘述 (1)絕大多數(shù)精卵細(xì)胞的識(shí)別具有物種特異性(2012浙江,2A) () (2)卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加(2009

35、江蘇,8A) () (3)早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清(2011江蘇,18C) (),,,真 題 重 溫,,(4)受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植(2011江蘇,18B) () (5)試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)(2011江蘇,18D) () (6)胚胎分割時(shí)需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割(2009江蘇,8B) (),,,,(7)利用胚胎分割技術(shù)可以獲得兩個(gè)基因型完全相同的胚胎(2010江蘇,16C) () (8)胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)(2009江蘇,8C) (),,,2.(2013江蘇,13

36、)軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病,基因型為HH的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者,希望通過(guò)胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法錯(cuò)誤的是() A.首先經(jīng)超排卵處理后進(jìn)行體外受精 B.從囊胚中分離細(xì)胞,培養(yǎng)后檢測(cè)基因型 C.根據(jù)檢測(cè)結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎 D.將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮,解析胚胎移植的時(shí)期是桑椹胚或囊胚,D錯(cuò)誤。,D,3.(2013山東,35節(jié)選)科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS),繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠,流程如下:,(1)圖中2細(xì)胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得,該過(guò)程稱為_(kāi)_____________

37、__;也可以從灰鼠體內(nèi)取出卵子, 通過(guò)__________________后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。 (2)圖中重組囊胚通過(guò)______________技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育,暫不移入的胚胎可使用____________方法保存。,(3)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)可由囊胚的________________分離培養(yǎng)獲得。iPS與ES細(xì)胞同樣具有發(fā)育全能性,有望在對(duì)人類(lèi)iPS細(xì)胞進(jìn)行定向________________后用于疾病的細(xì)胞治療。,解析細(xì)胞胚胎可從灰鼠輸卵管內(nèi)沖卵獲得;重組囊胚通過(guò)胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi),暫不進(jìn)行胚胎移植的胚胎可放入196 的液氮中冷凍保存;胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞

38、,是由早期胚胎或原始性腺分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織,可以作為干細(xì)胞的來(lái)源,iPS與ES細(xì)胞一樣,可通過(guò)誘導(dǎo)定向分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來(lái)治療疾病。,答案(1)沖卵體外受精(2)胚胎移植冷凍(或低溫) (3)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)誘導(dǎo)分化,1.早期胚胎發(fā)育過(guò)程的流程分析,知 能 回 歸,,2.胚胎工程操作流程分析(以牛為例),(1)上述圖示中幾次用到了激素?分別是什么作用?,提示兩次。第一次用促性腺激素對(duì)供體做超數(shù)排卵處理;第二次用激素對(duì)受體和供體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。,(2)胚胎移植過(guò)程進(jìn)行哪兩次檢查?,提示第一次是對(duì)收集的胚胎進(jìn)行檢查;第二次是對(duì)受體母畜是否妊娠進(jìn)行檢查。,(3

39、)胚胎移植所用胚胎是有性生殖還是無(wú)性生殖產(chǎn)生的?,提示是有性生殖還是無(wú)性生殖,取決于胚胎是由受精卵形成,還是通過(guò)核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育而成或胚胎分割形成。其中通過(guò)核移植技術(shù)和胚胎分割形成的胚胎是無(wú)性生殖產(chǎn)生的。,(4)胚胎移植(胚胎能夠移入受體、胚胎收集、胚胎在受體能夠存活、胚胎能夠正常生長(zhǎng)發(fā)育)的生理學(xué)基礎(chǔ)是什么?,提示哺乳動(dòng)物排卵后,同種供受體生殖器官的生理變化是相同的,這是胚胎能夠移入受體的生理基礎(chǔ)。 早期胚胎形成后,未與母體子宮建立聯(lián)系,而是處于游離狀態(tài),這是胚胎收集的生理基礎(chǔ)。,提示 受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這是胚胎在受體內(nèi)能夠存活的生理基礎(chǔ)。 供體胚胎可

40、與受體子宮建立聯(lián)系,且不影響供體胚胎的遺傳特性,這是供體胚胎正常發(fā)育的生理基礎(chǔ)。,3.胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)流程,1.(2014江蘇,2)下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過(guò)程的敘述,正確的是() A.通過(guò)細(xì)胞分裂不斷增加細(xì)胞數(shù)量,并在一定時(shí)期發(fā)生細(xì)胞 分化 B.胚胎發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞不斷分裂,但不發(fā)生凋亡 C.隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加,蛙胚的有機(jī)物總量不斷增加 D.發(fā)育過(guò)程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)逐漸增加,典 題 特 訓(xùn),,解析A項(xiàng),在蛙的胚胎發(fā)育過(guò)程中,通過(guò)細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量,在囊胚期細(xì)胞開(kāi)始分化。,答案A,B項(xiàng),胚胎發(fā)育過(guò)程中,既有細(xì)胞的分裂和分化,也有細(xì)胞的衰老和凋亡。,C項(xiàng),在蛙胚胎發(fā)育的過(guò)程中,

41、由于細(xì)胞呼吸的消耗,有機(jī)物的總量不斷減少。,D項(xiàng),蛙胚胎發(fā)育過(guò)程中需要從環(huán)境中獲得氧氣,但利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是受精卵自身含有的。,2.(2014江蘇,19)杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn),被稱為“鉆石級(jí)”肉用綿羊。 科研工作者通過(guò)胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示,相關(guān)敘述正確的是(),A.為了獲得更多的卵母細(xì)胞,需用雌激素對(duì)雌性杜泊羊進(jìn) 行處理 B.從卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接與獲能的精子進(jìn)行體外 受精 C.為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng),應(yīng)注射免疫 抑制劑 D.為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模,可通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得同 卵雙胎,解析A項(xiàng),超數(shù)排卵時(shí)使用的是促性腺激素,而不是雌激素。

42、,答案D,B項(xiàng),從卵巢中采集的卵母細(xì)胞未發(fā)育成熟,需要經(jīng)過(guò)體外人工培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精。,C項(xiàng),受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),故不需要注射免疫抑制劑。,D項(xiàng),為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模,可通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得基因型相同的同卵雙胎或多胎個(gè)體。,3.轉(zhuǎn)基因克隆豬已經(jīng)在我國(guó)培育成功。研究組首先從豬胎兒皮膚中分離出纖維細(xì)胞,進(jìn)行體外培育。通過(guò)電穿孔的方法將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入纖維細(xì)胞,經(jīng)篩選后將基因纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆。接著,將重組胚胎移入代孕母豬體內(nèi),最終獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。請(qǐng)回答:,(1)在對(duì)纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的________,以防止培

43、養(yǎng)過(guò)程的污染,此外,應(yīng)定期更換________,防止______________________對(duì)細(xì)胞自身造成危害。,(2)篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞時(shí),需要利用基因表達(dá)載體中______的作用。 (3)在進(jìn)行體細(xì)胞克隆前,先要從屠宰場(chǎng)收集豬卵巢,采集________,并在體外培養(yǎng)成熟。然后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞注入到____________中,再經(jīng)過(guò)一系列過(guò)程獲得含有目的基因的重組胚胎。,(4)為了__________________,可以對(duì)處于____________階段的胚胎進(jìn)行均等分割。將重組胚胎移入到受體子宮中,由于受體子宮不會(huì)對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生____________,并能與之建立正常的生理和組織上的聯(lián)

44、系,因此,重組胚胎能在受體子宮中繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因克隆豬。,解析在對(duì)纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防止培養(yǎng)過(guò)程的污染,此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞時(shí),需要利用基因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的作用。,通過(guò)對(duì)囊胚或桑椹胚時(shí)期的胚胎進(jìn)行胚胎分割,可提高對(duì)重組胚胎的利用率。由于受體子宮不會(huì)對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng),并能與之建立正常的生理和組織上的聯(lián)系,因次,重組胚胎能在受體子宮中繼續(xù)發(fā)育。,答案(1)抗生素培養(yǎng)液細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累(2)標(biāo)記基因(3)卵母細(xì)胞去核卵母細(xì)胞(4)提高重組胚胎的利用率桑椹胚或囊胚免疫排斥反應(yīng),4.根據(jù)下列

45、有關(guān)胚胎工程的示意圖,分析回答:,(1)為使A羊超數(shù)排卵,向其注射____________激素,選擇________期的卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精;體外受精前要對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行________處理,常用的方法是________法。,解析本題考查胚胎工程。(1)注射促性腺激素能夠使A羊超數(shù)排卵,發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞能夠進(jìn)行受精作用;精子受精作用前需經(jīng)過(guò)獲能處理,常用的方法是化學(xué)誘導(dǎo)法。,答案促性腺M(fèi)獲能化學(xué)誘導(dǎo),(2)將早期胚胎注入D羊子宮內(nèi)的技術(shù)叫_________,D羊被稱為_(kāi)_____(填“供體”或“受體”);為使D羊的生理狀況更適合完成該技術(shù)操作,要對(duì)D羊進(jìn)行_________處

46、理以提高成功率。,解析將早期胚胎注入D羊子宮內(nèi)的技術(shù)叫做胚胎移植,D羊是受體;為了提高成功率,要對(duì)D羊進(jìn)行同期發(fā)情處理。,胚胎移植,受體,同期發(fā)情,(3)從早期胚胎分離出的ES細(xì)胞可誘導(dǎo)分化出不同的組織細(xì)胞,這是因?yàn)閺墓δ苌螮S細(xì)胞具有____________;若取囊胚階段的胚胎進(jìn)行胚胎分割,要注意將____________均等分割;早期胚胎培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中除營(yíng)養(yǎng)成分外,還需加入________。,解析ES細(xì)胞具有發(fā)育的全能性;胚胎分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割;培養(yǎng)早期胚胎時(shí)培養(yǎng)液中需要加入動(dòng)物血清。,發(fā)育的全能性,內(nèi)細(xì)胞團(tuán),血清,5.下圖為綠色熒光小鼠制備流程圖,Gfp是綠色熒光蛋白基因,

47、請(qǐng)分析回答:,(1)構(gòu)建表達(dá)載體需要的酶是:_____________________ _____________,表達(dá)載體包含綠色熒光蛋白基因Gfp、___________、______、終止子和復(fù)制原點(diǎn)等。,解析構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。完整的基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、終止子等。,限制性核酸內(nèi)切酶、,標(biāo)記基因,啟動(dòng)子,DNA連接酶,(2)圖中載體上的Neo基因是一種抗生素抗性基因,圖中步驟所用的G418是一種抗生素(對(duì)細(xì)胞有毒害作用),添加G418的目的是________________________________。,解析添加G418可以

48、將不抗該抗生素的細(xì)胞殺死,從而選擇出導(dǎo)入目的基因的胚胎干細(xì)胞。,篩選出導(dǎo)入目的基因的胚胎干細(xì)胞,(3)圖中所用的胚胎干細(xì)胞來(lái)自于___________________。,解析胚胎干細(xì)胞是由原始性腺或早期胚胎中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞。,早期胚胎或原始性腺,(4)圖中步驟要將細(xì)胞注射入圖中囊胚的________位置,圖中步驟胚胎移植前要對(duì)代孕母鼠用激素進(jìn)行__________處理。,解析步驟是通過(guò)顯微注射技術(shù)將這些胚胎干細(xì)胞注入囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。胚胎移植前要對(duì)受體母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理。,內(nèi)細(xì)胞團(tuán),同期發(fā)情,(5)可以使用______________方法在蛋白質(zhì)水平上鑒定小鼠是否存在綠色熒光蛋白。,解析鑒

49、定目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá)可采用抗原抗體雜交技術(shù)。,抗原抗體雜交,6.供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問(wèn)題。如何利用現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)解決這一難題成為熱點(diǎn)問(wèn)題。如圖是治療性克隆的過(guò)程圖解,回答下列問(wèn)題:,(1)自體移植供受體為同一個(gè)體,最大的優(yōu)點(diǎn)是______________,但移植器官種類(lèi)受限。利用細(xì)胞工程技術(shù)的治療性克隆,重組細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)除了保證無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境,還需豐富的營(yíng)養(yǎng),通常會(huì)在培養(yǎng)液中加入 ____________等天然成分。核移植的胚胎干細(xì)胞通常只分裂不分化,所以需在培養(yǎng)液中加入________誘導(dǎo)形成相應(yīng)的組織、器官后用于移植。,解析自體移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

50、;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要加入血清,以滿足動(dòng)物細(xì)胞生命活動(dòng)的需要;培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)加入分化誘導(dǎo)因子可以誘導(dǎo)形成相應(yīng)的組織、器官后用于移植。,答案不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)血清分化誘導(dǎo)因子,(2)重組細(xì)胞發(fā)育的過(guò)程中,細(xì)胞開(kāi)始分化發(fā)生在______期,若想獲得基因型完全相同的兩個(gè)胚胎,采用_________技術(shù),并且要注意對(duì)__________進(jìn)行均等分割。與試管嬰兒不同的是該技術(shù)屬于______(有性/無(wú)性)生殖。,解析重組細(xì)胞發(fā)育與受精發(fā)育過(guò)程相同,在囊胚時(shí)期開(kāi)始發(fā)生細(xì)胞的分化;若要獲得基因型完全相同的兩個(gè)胚胎,可以采用胚胎分割技術(shù),并且要注意對(duì)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割。與試管嬰兒不同的是該技術(shù)屬于無(wú)性生殖。,

51、囊胚,胚胎分割,內(nèi)細(xì)胞團(tuán),無(wú)性,(3)目前臨床器官移植多為同種異體移植,患者需要長(zhǎng)期服用________預(yù)防免疫排斥反應(yīng)。為了擴(kuò)大器官供體的來(lái)源,人們嘗試異種移植,試圖利用基因工程手段______抗原決定基因,再利用克隆技術(shù)培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的豬器官,從而解決供體短缺問(wèn)題。獲得該轉(zhuǎn)基因豬的核心步驟是________________。,解析預(yù)防免疫排斥反應(yīng)需要服用免疫抑制藥物;利用基因工程手段可以除去抗原決定基因,再利用克隆技術(shù)培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的豬器官;培育轉(zhuǎn)基因豬的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。,答案免疫抑制藥物抑制(或除去)基因表達(dá)載體的構(gòu)建,7.下圖表示利用胚胎干細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因小

52、鼠的流程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:,(1)過(guò)程所培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)取自囊胚的___________。,解析胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞,如囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。,內(nèi)細(xì)胞團(tuán),(2)過(guò)程中,提取的DNA在水浴加熱的條件下需用______試劑鑒定,基因轉(zhuǎn)入前需要先構(gòu)建____________,其目的是______________________________________。,解析DNA分子在水浴加熱條件下需用二苯胺試劑鑒定,基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞前需先構(gòu)建基因表達(dá)載體,其目的是使基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)。,二苯胺,基因表達(dá)載體,使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá),(3)過(guò)程稱為_(kāi)_____

53、______________________。由于動(dòng)物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入__________。,解析過(guò)程是少量單個(gè)細(xì)胞經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(或早期胚胎培養(yǎng))形成早期胚胎的過(guò)程;由于動(dòng)物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入動(dòng)物血清。,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(早期胚胎培養(yǎng)),動(dòng)物血清,(4)過(guò)程所使用的是__________技術(shù),進(jìn)行該操作前需要對(duì)受體雌鼠進(jìn)行______________。,解析過(guò)程表示胚胎移植,在該操作前為使二者生理環(huán)境相同,需對(duì)受體雌鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理。,胚胎移植,同期發(fā)情處理,,,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,生物技術(shù)的安全性和倫理

54、問(wèn)題,1.判斷下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題的敘述(2012江蘇,13和2010江蘇,18) (1)種植轉(zhuǎn)基因作物應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)隔離 () (2)轉(zhuǎn)基因作物被動(dòng)物食用后,目的基因會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物體細(xì)胞中 () (3)種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳(基因)多樣性 (),,,真 題 重 溫,,(4)轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因,可能通過(guò)花粉傳入環(huán)境中 () (5)轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物,不會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加 () (6)動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá) () (7)如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界,則不存在安全性問(wèn)題 (),,,,,2.(2013江蘇,15)下列關(guān)

55、于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中,錯(cuò)誤的是() A.我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了 產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度 B.國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注 明可能的危害 C.開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因 生物安全的前提 D.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安 全性和環(huán)境安全性上,解析本題用直選法。對(duì)轉(zhuǎn)基因食品只是要求標(biāo)注“轉(zhuǎn)基因**”等字樣,并沒(méi)有在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害,故B錯(cuò)誤。,答案B,1.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題 (1)食品安全方面:可能合成毒蛋白、出現(xiàn)新的過(guò)敏原、改變食物的營(yíng)養(yǎng)成分等。 (2)生物安全方面:有可能造成“基因污染”,危害生物

56、的多樣性。 (3)環(huán)境安全方面:有可能打破物種界限,改變生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)和物質(zhì)循環(huán);造成二次污染或產(chǎn)生危害動(dòng)植物和人類(lèi)的生物或產(chǎn)物。,,知 能 回 歸,,2.生物技術(shù)引發(fā)的倫理問(wèn)題 (1)克隆人技術(shù) 違反人類(lèi)倫理道德。 沖擊現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)倫理道德觀念。 人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人。,(2)設(shè)計(jì)試管嬰兒 把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對(duì)生命的不尊重。 拋棄或殺死配型不合適的多余胚胎,無(wú)異于“謀殺”。 (3)基因檢測(cè) 對(duì)個(gè)人隱私權(quán)提出挑戰(zhàn)。制造基因歧視。,3.正確看待生物技術(shù) (1)正視轉(zhuǎn)基因技術(shù)可能帶來(lái)的安全性問(wèn)題,要趨利避害,不能因噎廢食。 (2)我國(guó)政府

57、支持治療性克隆,反對(duì)任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。,1.供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問(wèn)題,而治療性克隆能最終解決這些問(wèn)題。如圖所示為人類(lèi)“治療性克隆”的大概過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:,典 題 特 訓(xùn),,(1)過(guò)程A表示_____________,是目前實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵技術(shù),該技術(shù)的主要操作是應(yīng)用患者的體細(xì)胞作為核供體,由____________細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì),進(jìn)行人工重組,由此產(chǎn)生的重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自圖中的_________。,解析從圖中可以看出,過(guò)程A是細(xì)胞核移植的過(guò)程,其遺傳物質(zhì)主要來(lái)自供體乙,其中由(次級(jí))卵母細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì)。,細(xì)胞核移植,(次級(jí))卵母,供體乙,(

58、2)過(guò)程B表示的生物技術(shù)是_____________,C表示定向誘導(dǎo)技術(shù),其誘導(dǎo)的對(duì)象是________________細(xì)胞。,解析過(guò)程B是重組細(xì)胞經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)育成胚胎的過(guò)程,過(guò)程C是將從囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲得的胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化形成不同組織、器官的過(guò)程,即治療性克隆過(guò)程。,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(胚胎干),(3)“治療性克隆”的結(jié)果說(shuō)明高度分化的體細(xì)胞的__________________。相同的胚胎干細(xì)胞,“克隆”的結(jié)果多種多樣,如有的是神經(jīng)細(xì)胞,有的是血細(xì)胞,有的是肌肉細(xì)胞,究其本質(zhì)原因是____________________。,解析在現(xiàn)有的條件下,動(dòng)物細(xì)胞的全能性不能得到表達(dá),但是

59、動(dòng)物細(xì)胞核的全能性可以表達(dá)出來(lái);在分化成各種細(xì)胞的過(guò)程中,基因進(jìn)行了選擇性表達(dá)。,細(xì)胞核具有全能性,基因的選擇性表達(dá),(4)中國(guó)政府對(duì)“克隆人”的觀點(diǎn)是___________________________________?!坝幸荒凶踊加邪籽?,經(jīng)醫(yī)生利用其出生時(shí)保留的臍帶血進(jìn)行治療后康復(fù)”,你認(rèn)為這種做法符合倫理道德嗎?為什么?___________________________________________________________________。,解析中國(guó)政府對(duì)“克隆人”的觀點(diǎn)是禁止生殖性克隆人,不反對(duì)治療性克隆。臍帶血不是來(lái)自胚胎,其中的造血干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,所以符合倫

60、理道德。,禁止生殖性克隆人,不反對(duì)治療性克隆,符合,因?yàn)槟殠а皇莵?lái)自胚胎,其中的造血干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,2.治療性克隆是指把患者體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎,體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞,獲得的ES細(xì)胞定向分化成所需的特定類(lèi)型細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞),用于治療。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:,(1)治療性克隆采用的技術(shù)有__________________、早期胚胎培養(yǎng)和__________________。將患者體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞后用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,使其完成____________和發(fā)育進(jìn)程。,解析由題干可知,治療性克隆應(yīng)用了體細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、

61、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。,答案體細(xì)胞核移植胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞分裂,(2)為治療遺傳性糖尿病,可將胰島素基因?qū)隕S細(xì)胞中,再將此重組細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化后,篩選得到能_____________的胰島樣細(xì)胞,并擴(kuò)增培養(yǎng)后輸入患者體內(nèi),這種治療方法稱為_(kāi)_____________。,解析在體外完成基因轉(zhuǎn)移,從而達(dá)到治療疾病的目的,屬于體外基因治療。,分泌胰島素,體外基因治療,(3)中國(guó)政府不反對(duì)治療性克隆,但禁止______________。,解析中國(guó)政府禁止生殖性克隆,但不反對(duì)治療性克隆。,生殖性克隆,(4)若想提取ES細(xì)胞中的DNA,可利用DNA不溶于____________溶液,但細(xì)胞中的脂質(zhì)和某些

62、蛋白質(zhì)易溶于此溶液的原理進(jìn)一步分離。,解析利用DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精的原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步地分離。,酒精(冷酒精),,,真題重溫,知能回歸,典題特訓(xùn),,,,生態(tài)工程的原理,1.(2011新課標(biāo)全國(guó),40)現(xiàn)有一生活污水凈化處理系統(tǒng),處理流程為“厭氧沉淀池曝氣池兼氧池植物池”,其中植物池中生活著水生植物、昆蟲(chóng)、魚(yú)類(lèi)、蛙類(lèi)等生物。污水經(jīng)凈化處理后,可用于澆灌綠地?;卮饐?wèn)題: (1)污水流經(jīng)厭氧沉淀池、曝氣池和兼氧池后得到初步凈化。在這個(gè)過(guò)程中,微生物通過(guò)__________________呼吸將有機(jī)物分解。,真 題 重 溫,解析厭氧沉淀池主要是無(wú)氧呼吸,

63、曝氣池為有氧呼吸,兼氧池兩種方式均有。,答案無(wú)氧和有氧(或細(xì)胞),(2)植物池中,水生植物、昆蟲(chóng)、魚(yú)類(lèi)、蛙類(lèi)和底泥中的微生物共同組成了______(生態(tài)系統(tǒng)、群落、種群)。在植物池的食物網(wǎng)中,植物位于第_____營(yíng)養(yǎng)級(jí)。植物池中所有蛙類(lèi)獲得的能量最終來(lái)源于__________所固定的________能。,解析生物群落是指生活在一定區(qū)域內(nèi)所有生物個(gè)體的總稱,生態(tài)系統(tǒng)還包括無(wú)機(jī)環(huán)境。,群落,一,生產(chǎn)者,太陽(yáng),(3)生態(tài)工程所遵循的基本原理有整體性、協(xié)調(diào)與平衡、_______________和____________等原理。,解析生態(tài)工程的原理包括:整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種

64、多樣性原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。,物質(zhì)循環(huán)再生,物種多樣性,(4)一般來(lái)說(shuō),生態(tài)工程的主要任務(wù)是對(duì)______________________________________進(jìn)行修復(fù),對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善,并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。,已被破壞的生態(tài)環(huán)境(或受損的生態(tài)系統(tǒng)),2.(2011江蘇,29)池塘養(yǎng)殖普遍存在由于餌料、魚(yú)類(lèi)排泄物、換水不及時(shí)等引起的水體污染現(xiàn)象,研究者設(shè)計(jì)了一種循環(huán)水池塘養(yǎng)殖系統(tǒng)(如圖)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:,(1)與自然池塘相比,人工養(yǎng)殖池塘生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)力穩(wěn)定性________。人工養(yǎng)殖池塘水體的N、P含量容易升高,會(huì)引起水體的富營(yíng)養(yǎng)化;藻類(lèi)等浮游生物大量繁

65、殖、加之死亡后被微生物分解,引起水體的溶氧量下降,造成魚(yú)類(lèi)等死亡,進(jìn)一步破壞了生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài),這種調(diào)節(jié)方式稱為_(kāi)_______。,解析與自然池塘相比,人工養(yǎng)殖池塘生態(tài)系統(tǒng)中的組分較少,營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,抵抗力穩(wěn)定性較低,恢復(fù)力穩(wěn)定性較高。生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的維持是正反饋調(diào)節(jié)和負(fù)反饋調(diào)節(jié)共同作用的結(jié)果,正反饋調(diào)節(jié)使生態(tài)系統(tǒng)遠(yuǎn)離平衡狀態(tài),負(fù)反饋調(diào)節(jié)使生態(tài)系統(tǒng)維持在相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。,答案高正反饋,(2)與傳統(tǒng)養(yǎng)殖池塘相比,該養(yǎng)殖系統(tǒng)增加的生態(tài)工程設(shè)施有____________________??梢酝ㄟ^(guò)在這些設(shè)施內(nèi)栽植水生植物、放養(yǎng)濾食動(dòng)物等措施,起到對(duì)水體的_________,有效減少水體中的N、P等含量。,

66、解析該生態(tài)系統(tǒng)屬于人工設(shè)計(jì)的生態(tài)工程,與傳統(tǒng)養(yǎng)殖池塘相比,增加了生態(tài)塘和潛流濕地等設(shè)施。生態(tài)塘和潛流濕地中的水生植物和濾食動(dòng)物能夠有效減少水體中N、P等的含量,起到凈化水體的作用。,生態(tài)塘和潛流濕地,凈化作用,(3)該養(yǎng)殖系統(tǒng)設(shè)計(jì)為前一池塘上層水流入后一池塘底部,實(shí)現(xiàn)水層交換,其目的有________________、______________________。,解析通過(guò)設(shè)備將前一池塘上層水導(dǎo)入下一個(gè)池塘的底部,可以實(shí)現(xiàn)上、下水層的交換,增加水中溶氧量和提高餌料利用率。,增加水的溶氧量,提高餌料的利用率,(4)該養(yǎng)殖系統(tǒng)中串聯(lián)的池塘不宜過(guò)多,因?yàn)開(kāi)_______________________________________。,解析隨著養(yǎng)殖塘中生物體排放的有機(jī)污水的積累,越靠后的養(yǎng)殖塘中微生物分解有機(jī)物產(chǎn)生的N、P含量會(huì)越高,從而造成水體富營(yíng)養(yǎng)化,故該養(yǎng)殖系統(tǒng)中串聯(lián)的池塘不宜過(guò)多。,后面池塘水體中的N和P含量(濃度)越來(lái)越高,(5)保持池塘水體中適當(dāng)?shù)腘、P含量是必要的,該養(yǎng)殖系統(tǒng)可以通過(guò)____________、__________________________進(jìn)行調(diào)控。,解析為

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