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1、 機(jī) 械 消 化 或 者 胰 酶 消 化一 、 動 物 細(xì) 胞 、 組 織 培 養(yǎng)1、 什 么 方 法 取 得 離 體 的 單 個 動 物 細(xì) 胞 ？2、 離 體 的 動 物 細(xì) 胞 能 否 正 常 的 生 活 、 表 現(xiàn) 出 正常 的 生 命 活 動 ？ （ 胰 蛋 白 酶 ）（ 1） 貼 壁 生 長 ： 懸 浮 液 中 分 散 的 細(xì) 胞 緊 貼 培 養(yǎng) 瓶 內(nèi) 壁 才 能 生 長 。（ 2） 接 觸 抑 制 ： 當(dāng) 貼 壁 細(xì) 胞 分 裂 生 長 到 表 面 相 互 接 觸 時 ， 細(xì) 胞 就會 停 止 分 裂 。（ 3） 正 常 的 生 命 活 動 ： 生 長 、 分 裂 、 有 規(guī)

2、律 的 衰 老 、 死 亡 等 現(xiàn) 象 。 2、 適 宜 的 環(huán) 境 條 件無 菌 、 無 毒 環(huán) 境 ： 加 抗 生 素 ， 定 期 更 換 培 養(yǎng) 液適 宜 的 溫 度 和 pH值 ： （ 如 人 體 細(xì) 胞 培 養(yǎng) ） 溫 度 ： 36.5 0.5 pH值 ： 7.2-7.4適 宜 的 氣 體 環(huán) 境 ： O2和 CO2（ 95%空 氣 和 5%CO2）（ 一 ） 培 養(yǎng) 條 件 三 、 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 過 程成 分 ： 無 機(jī) 鹽 、 葡 萄 糖 、 氨 基 酸 、 維 生 素 和 動 物 血 清 等1、 含 全 部 營 養(yǎng) 物 質(zhì) 的 培 養(yǎng) 液 原 代 培 養(yǎng)傳代培養(yǎng) 原

3、代 培 養(yǎng) 物細(xì) 胞 系 ： 可 連 續(xù) 傳 代 的 細(xì) 胞 原 代 培 養(yǎng) 物 在 首 次 傳 代 時 就成 為 細(xì) 胞 系 。能 連 續(xù)培 養(yǎng) 的 連 續(xù) 細(xì) 胞 系 不 能 連 續(xù)培 養(yǎng) 的 有 限 細(xì) 胞 系四 、 細(xì) 胞 系 、 細(xì) 胞 株 （ 二 倍 體 細(xì) 胞 ） （ 異 倍 體 核 型 細(xì) 胞 ）（ 遺 傳 物 質(zhì) 改 變 ， 不 死 性 ） 2、 細(xì) 胞 株 ： 細(xì) 胞 株 一 般 具 有 恒 定 的 染 色 體 組 型 、 同 工 酶 類 型 、病 毒 敏 感 性 和 生 化 特 性 等 。 遺 傳 物 質(zhì) 未 改 變 。連 續(xù) 細(xì) 胞 株 ： 可 連 續(xù) 多 次 傳 代

4、的 細(xì) 胞 株 。有 限 細(xì) 胞 株 ： 傳 代 次 數(shù) 有 限 的 細(xì) 胞 株細(xì) 胞 系 ： 泛 指 可 傳 代 的 細(xì) 胞 。細(xì) 胞 株 : 具 有 特 殊 性 質(zhì) 的 細(xì) 胞 系 。 五 、 克 隆 培 養(yǎng) 法 （ 細(xì) 胞 克 隆 ）1、 概 念 ： 把 一 個 單 細(xì) 胞 從 群 體 中 分 離 出 來 單 獨 培 養(yǎng) ，使 之 繁 衍 成 一 個 新 的 細(xì) 胞 群 體 的 技 術(shù) 。2、 特 點 ：遺 傳 性 狀 均 一 、 表 現(xiàn) 的 性 狀 相 似 ， 便 于 研 究異 質(zhì) 性 細(xì) 胞 系克 隆 培 養(yǎng)純 系 （ 克 隆 ）3、 最 基 本 要 求 :保 證 所 建 成 的 克

5、 隆 來 源 于 單 個 細(xì) 胞 4、 適 合 于 克 隆 的 細(xì) 胞 ： 對 環(huán) 境 有 較 大 適 應(yīng) 范 圍 和 具 有 較 強(qiáng) 獨 立 生 存 能 力 的 細(xì) 胞5、 提 高 細(xì) 胞 克 隆 形 成 率 的 措 施 ：選 擇 適 宜 的 培 養(yǎng) 基添 加 血 清 （ 胎 牛 血 清 ） (能 促 進(jìn) 細(xì) 胞 的 生 長 、 增 殖 和 貼 附 )以 滋 養(yǎng) 細(xì) 胞 支 持 生 長 （ 經(jīng) 射 線 照 射 的 小 鼠 成 纖 維 細(xì) 胞 ）激 素 刺 激 （ 胰 島 素 等 ）使 用 CO 2培 養(yǎng) 箱 ， 調(diào) 節(jié) PH 群 體 細(xì) 胞 單 細(xì) 胞無 限 細(xì) 胞 系 、 轉(zhuǎn) 化 或 腫

6、瘤 細(xì) 胞 原 代 細(xì) 胞 、 有 限 細(xì) 胞 系6、 細(xì) 胞 克 隆 的 主 要 用 途 ： 從 普 通 細(xì) 胞 系 中 分 離 出 缺 乏 特 殊 基 因 的 突 變 細(xì) 胞 系 。 用 于 研 究 細(xì) 胞 的 遺 傳 規(guī) 律 和 生 理 特 性 。 一 、 細(xì) 胞 融 合 與 細(xì) 胞 雜 交 1、 定 義 指 用 自 然 或 人 工 方 法 ,使 兩 個 或 多 個 不 同 的 細(xì)胞 融 合 成 一 個 細(xì) 胞 的 過程 。 不 同 基 因 型 的 細(xì) 胞 之 間的 融 合 就 是 細(xì) 胞 雜 交 。2、 誘 導(dǎo) 方 法 1. 動 物 免 疫2. 分 離 B淋 巴 細(xì) 胞3. 細(xì) 胞 融

7、 合 淋 巴細(xì) 胞 雜 交 瘤 的 制 備4. 雜 交 瘤 細(xì) 胞 的 篩 選5. 雜 交 瘤 細(xì) 胞 的 克 隆6. 單 克 隆 抗 體 的 提 取二 、 單 抗 的 制 備 過 程 一 、 動 物 細(xì) 胞 全 能 性 的 表 現(xiàn) 程 度桑 椹 胚八 分裂 球受 精 卵 二 分裂 球 四 分裂 球 囊 胚原 腸 胚幼 體組 織 、 器 官1、 動 物 的 受 精 卵 ， 卵 裂 球 含 有 2-8個 細(xì) 胞 時 ， 每 個細(xì) 胞 具 有 全 能 性 。2、 隨 著 胚 胎 發(fā) 育 的 繼 續(xù) ， 有 的 細(xì) 胞 只 具 有 分 化 出 各種 組 織 細(xì) 胞 的 潛 能 ， 這 樣 的 細(xì) 胞

8、 叫 多 能 細(xì) 胞 。3、 有 的 細(xì) 胞 只 能 分 化 為 一 種 細(xì) 胞 ， 叫 單 能 細(xì) 胞 。 受 精 卵 胚 胎 細(xì) 胞 多 能 細(xì) 胞 單 能 細(xì) 胞 體 細(xì) 胞2、 低 等 動 物 細(xì) 胞 ： 全 能 性 一 般 容 易 體 現(xiàn) 。1、 高 等 動 物 細(xì) 胞3、 癌 細(xì) 胞 ： 仍 能 逆 轉(zhuǎn) 為 正 常 細(xì) 胞 。 無 論 分 化 還 是 癌 變 ， 變 化 的 都 是 表 現(xiàn) 型 ，基 因 組 成 的 完 整 性 可 以 保 留 。一 、 動 物 細(xì) 胞 全 能 性 的 表 現(xiàn) 程 度為 什 么 動 物 細(xì) 胞 很 難 表 現(xiàn) 出 全 能 性 ？ 二 、 動 物 難

9、以 克 隆 的 根 本 原 因 ： 基 因 表 達(dá) 的 調(diào) 控 使 得 細(xì) 胞 中 合成 了 專 一 的 蛋 白 質(zhì) 。一 類 基 因 是 維 持 生 存 的 ， 在 各 種 細(xì) 胞 中 都 處 于 活動 狀 態(tài) （ 如 呼 吸 氧 化 酶 基 因 等 ） ； 另 一 類 基 因 隨 著 組 織 器 官 和 發(fā) 育 階 段 不 同 而 選 擇 性 表 達(dá) （ 如 胰島 素 基 因 、 血 紅 蛋 白 基 因 等 ） 。 研 究 表 明 ， 各 種 特 化 細(xì) 胞 的 細(xì) 胞 核中 物 種 基 因 組 完 整 ， 具 有 全 能 性 。 但 是 分 化 后 的 動 物 細(xì) 胞 基 因 組 基因

10、的 活 動 不 完 全 三 、 核 移 植 和 動 物 的 克 隆 繁 殖1、 核 移 植 ： 利 用 一 個 細(xì) 胞 的 細(xì) 胞 核 （ 供 體 核 ） ,來 取 代另 一 細(xì) 胞 中 的 細(xì) 胞 核 ， 形 成 一 個 重 建 的 “ 合 子 ”（ 重 組 細(xì) 胞 ） ， 使 發(fā) 育 成 一 個 新 的 個 體 。 胚 胎 細(xì) 胞 核 移 植 成 功 率 遠(yuǎn) 高 于 成 體 細(xì) 胞 核 移 植 。 胚 胎 細(xì) 胞 克 隆 ： 使 用 的 供 體 核 來 自 胚 胎 體 細(xì) 胞 克 隆 ： 使 用 的 供 體 核 來 自 體 細(xì) 胞1952年 ， 羅 伯 特 .布 里 格 斯 ： 豹 蛙 囊

11、 胚 細(xì) 胞 核 +去 核 的 卵 母 細(xì) 胞 發(fā) 育 成 個 體1978年 ， 童 第 周 ： 黑 斑 蛙 成 體 紅 細(xì) 胞 核 去 核 的 卵 細(xì) 胞 中 發(fā) 育 成 蝌 蚪2、 動 物 克 隆 繁 殖 ： 多 莉 的 培 育 用 到 了 哪 些 技 術(shù) ?核 移 植 、 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 、 胚 胎 移 植 1.閱 讀 課 本 P39-37， 找 出 體 細(xì) 胞 羊 的 克 隆 成 功 的 證 明 了 什 么 ？克 隆 羊 成 功 的 部 分 原 因克 隆 動 植 物 的 應(yīng) 用2.在 體 細(xì) 胞 核 移 植 過 程 中 選 擇 卵 細(xì) 胞 作 為 受 體 細(xì) 胞 的原 因 ：卵

12、 細(xì) 胞 大 易 操 作 ， 細(xì) 胞 質(zhì) 中 缺 少 阻 止 核 基 因表 達(dá) 的 調(diào) 節(jié) 蛋 白在 體 細(xì) 胞 核 移 植 過 程 中 選 擇 卵 細(xì) 胞 作 為 受 體 細(xì) 胞 的原 因 ：細(xì) 胞 質(zhì) 中 具 有 有 效 調(diào) 控 細(xì) 胞 核 發(fā) 育 的 蛋 白 因子 ， 卵 細(xì) 胞 大 易 操 作 ， 營 養(yǎng) 豐 富 體 細(xì) 胞 克 隆 羊 的 培 育 成 功 ， 證 明 了 什 么 ？ 高 度 分 化 細(xì) 胞 經(jīng) 一 定 技 術(shù) 處 理 ， 也 可 回 復(fù)到 類 似 受 精 卵 時 期 的 功 能 。在 胚 胎 和 個 體 發(fā) 育 中 ， 細(xì) 胞 質(zhì) 具 有 調(diào) 控 細(xì)胞 核 （ 包 括

13、 異 源 的 細(xì) 胞 核 ） 發(fā) 育 的 作 用 。 同 時 也 證 明 了 動 物 的 細(xì) 胞 核 具 有 全 能 性 體 細(xì) 胞 克 隆 羊 成 功 的 分 子 細(xì) 胞 生 物 學(xué) 機(jī) 理 ：1、 核 移 植 前 對 乳 腺 細(xì) 胞 的 營 養(yǎng) 限 制 性 培 養(yǎng) （ 調(diào) 節(jié)牛 血 清 濃 度 ） 和 電 脈 沖 細(xì) 胞 融 合 技 術(shù) ， 有 利 于 核的 變 化 和 細(xì) 胞 融 合 后 基 因 表 達(dá) 分 子 開 關(guān) 啟 動 。2、 重 組 卵 細(xì) 胞 最 初 分 裂 時 ， 轉(zhuǎn) 錄 并 未 開 始 。3、 重 組 卵 細(xì) 胞 的 供 體 核 DNA丟 失 了 來 源 于 乳 腺 細(xì)胞

14、 的 阻 止 核 基 因 表 達(dá) 的 調(diào) 節(jié) 蛋 白 。4、 開 始 第 三 次 分 裂 時 ， 原 乳 腺 細(xì) 胞 的 調(diào) 節(jié) 蛋 白 全部 被 卵 細(xì) 胞 質(zhì) 中 的 蛋 白 因 子 替 換 了 ， 核 DNA被 重 新編 排 ， 胚 細(xì) 胞 開 始 表 達(dá) 自 己 的 基 因 。 動 物 克 隆 的 應(yīng) 用 ：（ 1） 有 利 于 遺 傳 疾 病 的 治 療 ， 優(yōu) 良 品 種 的 培 育（ 2） 對 物 種 的 優(yōu) 化 、 瀕 危 動 物 的 保 護(hù) 和 轉(zhuǎn) 基 因 動 物的 擴(kuò) 群 有 重 要 意 義（ 3） 豐 富 人 們 的 物 質(zhì) 生 活 ， 降 低 畜 牧 業(yè) 的 成 本 ，

15、 縮短 育 種 年 限 ， 提 高 生 產(chǎn) 效 率在 體 細(xì) 胞 核 移 植 過 程 中 選 擇 卵 細(xì) 胞 作 為受 體 細(xì) 胞 的 原 因 ：細(xì) 胞 質(zhì) 中 具 有 有 效 調(diào) 控 細(xì) 胞 核 發(fā) 育 的 蛋 白 因 子 ， 卵 細(xì)胞 大 易 操 作 ， 營 養(yǎng) 豐 富 體 細(xì) 胞 核 移 植 技 術(shù) 存 在 的 問 題 ： 許 多 克 隆 動 物 表 現(xiàn) 出 遺 傳 和 生 理 缺陷 ， 如 體 型 過 大 ， 異 常 肥 胖 ， 發(fā) 育 困 難 ，臟 器 缺 陷 ， 免 疫 失 調(diào) 等 。 3、 動 物 克 隆 成 功 的 條 件 ： （ 1） 具 有 包 含 本 物 種 完 整 基

16、因 組 的 細(xì) 胞 核 的 活 細(xì) 胞 如 ： 乳 腺 上 皮 細(xì) 胞 ；（ 2） 能 有 效 調(diào) 控 細(xì) 胞 核 發(fā) 育 的 細(xì) 胞 質(zhì) 物 質(zhì) 如 ： 去 核 卵 的 細(xì) 胞 質(zhì) ；（ 3） 完 成 胚 胎 發(fā) 育 的 必 要 的 環(huán) 境 條 件 如 ： 誘 導(dǎo) 重 組 細(xì) 胞 生 長 、 分 化 的 實 驗 條 件 和 懷 胎 母體 的 子 宮 環(huán) 境 1、 用 于 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 的 組 織 和 細(xì) 胞 大 都 取 自 胚 胎或 出 生 不 久 的 幼 齡 動 物 的 器 官 或 組 織 ， 其 主 要 原 因是 這 樣 的 組 織 細(xì) 胞 （ ） A、 容 易 產(chǎn) 生 各 種

17、 變 異 B、 具 有 更 強(qiáng) 的 全 能 性 C、 取 材 十 分 方 便 D、 分 裂 增 殖 的 能 力 強(qiáng)D 2、 下 列 為 有 關(guān) 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 的 敘 述 ， 其 中 不 正 確 的 是A 用 于 培 養(yǎng) 的 細(xì) 胞 大 都 取 自 胚 胎 或 幼 齡 動 物 的 器 官 或組 織B 將 所 取 的 組 織 先 用 胰 蛋 白 酶 等 進(jìn) 行 處 理 使 其 分 散 成單 個 細(xì) 胞C 在 培 養(yǎng) 瓶 中 要 定 期 用 胰 蛋 白 酶 使 細(xì) 胞 從 瓶 壁 上 脫 離， 制 成 懸 浮 液D 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 只 能 傳 50代 左 右 ， 所 培 養(yǎng) 的 細(xì)

18、 胞 全 部衰 老 死 亡 D 2、 用 動 、 植 物 成 體 的 體 細(xì) 胞 進(jìn) 行 離 體 培 養(yǎng) ， 下 列 敘 述正 確 的 是A 都 需 用 CO2培 養(yǎng) 箱 B 都 須 用 液 體 培 養(yǎng) 基 C 都 要 在 無 菌 條 件 下 進(jìn) 行 D 都 可 體 現(xiàn) 細(xì) 胞 的 全 能 性3、 動 物 細(xì) 胞 克 隆 是 指 A 一 個 單 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 成 一 個 新 的 細(xì) 胞 群 的 技 術(shù) B 一 個 重 組 細(xì) 胞 經(jīng) 分 裂 、 分 化 發(fā) 育 成 一 個 動 物 個 體的 技 術(shù) C 幾 個 同 種 動 物 的 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 成 一 個 新 的 細(xì) 胞 群 的 技術(shù) D

19、一 個 卵 裂 球 經(jīng) 胚 胎 分 割 發(fā) 育 成 四 個 細(xì) 胞 群 的 技 術(shù)CA 4、 某 研 究 小 組 為 測 定 藥 物 對 體 外 培 養(yǎng) 細(xì) 胞 的 毒 性 ，準(zhǔn) 備 對 某 種 動 物 的 肝 腫 瘤 細(xì) 胞 (甲 )和 正 常 肝 細(xì) 胞 (乙 )進(jìn) 行 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 。 下 列 說 法 正 確 的 是 ( )A.在 利 用 兩 種 肝 組 織 塊 制 備 肝 細(xì) 胞 懸 液 時 ， 也 可 用胃 蛋 白 酶 處 理B.細(xì) 胞 培 養(yǎng) 應(yīng) 在 含 5%CO2的 恒 溫 培 養(yǎng) 箱 中 進(jìn) 行 ， CO2的作 用 是 刺 激 細(xì) 胞 的 呼 吸C.甲 、 乙 細(xì) 胞

20、 在 持 續(xù) 的 原 代 培 養(yǎng) 過 程 中 ， 乙 會 出 現(xiàn)停 止 增 殖 的 現(xiàn) 象D.僅 用 該 培 養(yǎng) 液 也 能 用 來 培 養(yǎng) 乙 肝 病 毒 C 5.下 列 關(guān) 于 動 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 的 敘 述 ， 正 確 的 是 ( )A.培 養(yǎng) 中 的 人 效 應(yīng) T細(xì) 胞 能 產(chǎn) 生 單 克 隆 抗 體B.培 養(yǎng) 中 的 人 B細(xì) 胞 能 夠 無 限 地 增 殖C.人 的 成 熟 紅 細(xì) 胞 經(jīng) 過 培 養(yǎng) 能 形 成 細(xì) 胞 株D.用 胰 蛋 白 酶 處 理 肝 組 織 可 獲 得 單 個 肝 細(xì) 胞 D 世 界 上 第 一 只 克 隆 綿 羊 “ 多 莉 ” 的 培 育 等 程

21、 序 如 圖 所 示 。 請仔 細(xì) 看 圖 后 回 答 問 題 ： b 圖 中 過 程 為 。 通 過 過 程 形 成的 重 組 細(xì) 胞 核 遺 傳 物 質(zhì) 與 質(zhì) 遺 傳 物 質(zhì) 各 來 自 哪 里 ？ 實 施 時 ， 所 需 的 受 體 細(xì) 胞 大 多 采 用 動 物 卵 細(xì) 胞 的 原因 是 ： 。 b過 程 細(xì) 胞 分 裂 的 方 式 是 ， 此 過 程 是 否 進(jìn) 行細(xì) 胞 分 化 ？ （ 答 “ 有 ” 或 “ 無 ” ） 圖 中 c所 指 過 程 為 ， 圖 中 d指 的 是 克 隆 綿 羊“ 多 莉 ” 經(jīng) 過 在 母 體 子 宮 內(nèi) 后 。 “ 多 莉 ” 面 部 的 毛 色

22、 和 性 別 與 綿 羊 相 同 ， 請 根據(jù) 遺 傳 學(xué) 原 理 說 明 判 斷 依 據(jù) ： 。 若 不 考 慮 環(huán) 境 因 素 影 響 ， 多 莉 的 性 狀 是 否 全 部 像 以 上 綿 羊 ？為 什 么 ？（ 7） 植 物 組 織 培 養(yǎng) 之 后 ， 克 隆 綿 羊 培 育 成 功 ， 證 明 動物 。 黑 面 綿 羊 去核 卵 細(xì) 胞 白 面 綿 羊 卵腺 細(xì) 胞 核重 組 細(xì) 胞早 期 胚 胎另 一 頭 母 綿 羊 子 宮克 隆 綿 羊 多 莉abcd細(xì) 胞 核 移 植具 有 調(diào) 控 細(xì) 胞 核 發(fā) 育 的 細(xì) 胞 質(zhì) 物 質(zhì) 有 絲 分 裂有 胚 胎 移 植 妊 娠 出 生白

23、面“ 多 莉 ” 綿 羊 的 核 基 因 和 性 染 色 體 全 部 來 自 白 面 綿 羊細(xì) 胞 核 也 具 有 全 能 性卵 細(xì) 胞 細(xì) 胞 質(zhì) 的 遺 傳 物 質(zhì) 也 能 控 制 某 些 性 狀 6、 若 不 考 慮 環(huán) 境 因 素 影 響 ， 克 隆 羊的 性 狀 全 部 像 白 面 綿 羊 嗎 ？ 原 因 是 ？ 右 圖 技 術(shù) 具 有 多 種 用 途 ， 但 是 不 能 （ ）A.有 選 擇 地 繁 殖 某 一 性 別 的 家 畜B.繁 殖 家 畜 中 的 優(yōu) 良 個 體C.用 于 保 存 物 種D.改 變 動 物 的 核 基 因 在 現(xiàn) 有 技 術(shù) 條 件 下 ， 還 不 能 將

24、 從 動 物體 內(nèi) 分 離 出 來 的 成 熟 的 體 細(xì) 胞 直 接 培 養(yǎng) 成一 個 新 個 體 ， 而 是 必 須 將 體 細(xì) 胞 的 細(xì) 胞 核 移 植 到 去 核 的 卵 細(xì) 胞 中 才 能 發(fā) 育 成 新 個 體 ， 你 認(rèn) 為 原 因 最 可 能 是 （ ）A.卵 細(xì) 胞 大 ， 便 于 操 作B.卵 細(xì) 胞 含 有 的 營 養(yǎng) 物 質(zhì) 多C.卵 細(xì) 胞 的 細(xì) 胞 質(zhì) 可 使 體 細(xì) 胞 核 全 能 性 得 到 表 達(dá)D.重 組 細(xì) 胞 才 具 有 全 能 性 D C卵 細(xì) 胞 細(xì) 胞 質(zhì) 的 遺 傳 物 質(zhì) 也 能 控 制 某 些 性 狀 細(xì) 胞 貼 壁 過 程 細(xì) 胞 在 貼 壁 生 長過 程 中 ,隨 著 細(xì) 胞 分 裂 ,數(shù) 量 不 斷 增 加 ,最 后 形成 一 個 單 層 ,此 時 細(xì) 胞間 相 互 接 觸 ,細(xì) 胞 分 裂和 生 長 停 止 。接 觸 抑 制