紫杉醇及其脂質體的研究紫杉醇及其脂質體的研究1優(yōu)秀課件紫杉醇Taxol,泰素，紫素，Anzatax,安泰素，簡稱PTX。從紫杉樹皮中分離提取具有抗腫瘤活性的二萜類天然化合物。除了帶含氧四環(huán)的紫杉烷環(huán)以外,在C13 位置上尚有一必需酯側鏈?；瘜W名為 5,20-環(huán)氧-1.2.-,4,7,13-六羥基紫杉烷-11-烯-酮-4，10-二乙酸酯-2 苯甲酸酯-13-(2R,3,R)-N 苯基異絲氨酸酯分子式為 C47 H51N014,分子量 853.92性狀：具有高度親脂性,不溶于水,熔點大約216-2172優(yōu)秀課件紫杉醇的發(fā)現(xiàn)l1963 年,從太平洋西北岸的短葉紫杉樹皮中發(fā)現(xiàn)對許多腫瘤有細胞毒性作用的天然物質。l 1971 年提取了其中的活性成分紫杉醇,初篩有抗腫瘤作用。l1979 年美國國立癌癥研究所對數千種植物的天然提取物的抗腫瘤活性進行了篩選,發(fā)現(xiàn)紫杉醇是其中最具抗腫瘤活性的物質,且具有獨特的作用機制。3優(yōu)秀課件紫杉醇的作用機制l特異地結合到小管的位上,l導致微管聚合成團塊和束狀并使其穩(wěn)定,l這些作用能抑制微管網的正常重組。4優(yōu)秀課件紫杉醇的代謝l紫杉醇能與98%血漿蛋白廣泛結合。l基礎研究表明,24 小時給藥方案抑制白細胞遠較3 小時給藥為重。l紫杉醇主要在肝臟代謝,隨膽汁進入腸道,經糞便排出體外。l經腎清除只占總清除的 1%-8%,腎功能不全者一般不影響紫杉醇的使用。5優(yōu)秀課件紫杉醇的藥物相互作用l對藥物相互作用的研究表明,先用 DDP 會加重紫杉醇的主要毒性反應l可能由于 DDP 對細胞色素 P450 酶的調節(jié)作用,導致紫杉醇的血漿清除率下降l體外實驗證實,先用紫杉醇后用DDP,毒性作用較小,對腫瘤細胞的殺傷作用較大 6優(yōu)秀課件紫杉醇的適應癥l卵巢癌和乳腺癌的一線或二線化療。l肺癌。l頭頸部癌。l其他腫瘤:對晚期食管癌、胃癌、膀胱癌、精原細胞瘤、黑色素瘤、復發(fā)性非霍奇金淋巴瘤等有效。7優(yōu)秀課件紫杉醇的紫杉醇的用法用法l防止病人發(fā)生過敏反應,應在紫杉醇治療前 12 小時口服地塞米松 10mg,治療前 3 小時再用地塞米松 10mg 口服 l治療前 30-60 分鐘給予苯海拉明(或其他類似物)肌注 40mgl 靜注西咪替丁 300mg 或雷尼替丁 50mg 8優(yōu)秀課件紫杉醇的劑量紫杉醇的劑量l單藥劑量一般為 175mg/m2,配合用 G-CSF 時,劑量可達 250mg/m2,聯(lián)合用藥時劑量酌減。l一般將紫杉醇用生理鹽水或 5%葡萄糖液或 5%葡萄糖鹽水稀釋至終濃度為 0.3-1.2mg/ml 后,靜滴 3 小時。l聯(lián)合用藥劑量為 135-175mg/m2,3-4 周重復。l在國外,聯(lián)合用藥時,一般用 175mg/m2,靜滴 3 小時;或 135-150mg/m2,靜滴24小時。l紫杉醇每周給藥方案:一般用量為 60-100mg/m2,靜脈滴注 3 小時,每周 1 次,連用 3 周,停 1 周為 1 周期;或每周 1 次,連用 6 周,停 2 周為 1 周期。9優(yōu)秀課件紫杉醇的紫杉醇的不良反應不良反應l過敏反應:發(fā)生率為 39%,其中嚴重過敏反應發(fā)生率 2%，國內報告過敏反應發(fā)生率為 11%-20%,多數為 I 型變態(tài)反應,表現(xiàn)為支氣管痊攣性呼吸困難、蕁麻疹和低血壓。幾乎所有的反應都發(fā)生在用藥后最初 10 分鐘內,嚴重反應常發(fā)生在用紫杉醇后 2-3 分鐘。l骨髓抑制:為主要劑量限制性毒性,表現(xiàn)為中性粒細胞減少,血小板減少較少見,一般在用藥后 8-10 日發(fā)生,15-21 日恢復。在用推薦劑量時,嚴重的中性粒細胞減少（0.5 109/L)見于 47%的病人,持續(xù)時間一般少于 5 日。整個療程的發(fā)熱發(fā)生率約為 19%,只有 5%的病人血小板計數低于 50 109/L,貧血(Hb110g/L）則見于 90%的病人。值得注意的是,應用 G-CSF 可降低骨髓抑制發(fā)生率。10優(yōu)秀課件紫杉醇的紫杉醇的不良反應不良反應l神經毒性:周圍神經病變表現(xiàn)為輕度麻木及感覺異常。此外,尚可發(fā)生以閃光暗點為特征的視神經障礙。紫杉醇劑量 170mg/m2 時,治療 2-5 日后會發(fā)生瞬間肌痛；劑量250mg/m2,且與 DDP 配伍時多有肌病發(fā)生。l心血管毒性:可有低血壓和無癥狀的短時間心動過緩,后者發(fā)生率約 29%。ECG 異常見于 30%病例。l關節(jié)痛及肌肉痛:見于 55%病例,累計手臂和腿的關節(jié),其癥狀輕微,常出現(xiàn)與用藥后的 2-3 日內,數日內恢復。其發(fā)生率和嚴重性成明顯劑量依賴性,且在接受 G-CSF 的病人中更為常見。11優(yōu)秀課件紫杉醇的紫杉醇的不良反應不良反應l胃腸道反應:惡心和嘔吐、腹瀉和粘膜炎的發(fā)生率分別為 59%、43%和 39%,一般為輕至中度。l肝臟毒性:表現(xiàn)為膽紅素、AKP、AST 和 ALT 升高,與紫杉醇劑量相關。l脫發(fā):可見于80%以上病例,且隨著累積治療,經常有全身體毛的脫落。l輸注藥物的靜脈周圍和藥物外滲局部,偶爾有局部炎癥反應,既往照射野可能有炎癥性皮膚反應。12優(yōu)秀課件l國外I期和期臨床試驗報道,中性粒細胞減少是紫杉醇主要的劑量限制性毒性。當紫杉醇劑量達到 200-250mg/m2 時,中性粒細胞絕對數(ANC)通常低于500/mm3,需要G-CSF支持治療。在沒有血細胞生長因子支持的情況下,紫杉醇的最大耐受劑量為175-200 mg/m2。l早期應用紫杉醇所遇的最嚴重問題是急性過敏反應(HSRs),有研究報道其發(fā)生率高達 25%-30%。主要表現(xiàn)為低血壓、支氣管痙攣和全身性蕁麻疹,這可能與組織胺的釋放有關。紫杉醇的紫杉醇的不良反應不良反應13優(yōu)秀課件紫杉醇的紫杉醇的注意事項注意事項l治療前應先采用腎上腺皮質激素(如 DXM)、苯海拉明和 H2 受體拮抗劑(如西咪替丁或雷尼替丁)治療。l未稀釋的濃縮藥液不應接觸聚氯乙烯塑料(PVC)器械或設備,且不能用于藥物的滴注。稀釋的藥液應貯存于瓶內(玻璃、聚丙烯)或塑料袋(聚丙烯、聚烯烴類),并采用聚乙烯類給藥設備滴注。l給藥期間應注意有無過敏癥狀及生命體征的變化。14優(yōu)秀課件脂質體(Liposome)的提出l英國 AD Banghman1965 年首先提出脂質體概念，并闡述磷脂分散在水中能形成多層封閉小囊泡(Vesicals),且每一層均由脂質雙分子層構成。l1971 年 Ryman 又首先提出利用小泡囊作為藥物載體,以提高藥物靶向性降低藥物副作用。l近 30 年來世界各國科學工作者在這一領域進行了大量的基礎研究,引人注目的是在醫(yī)藥領域的研究與開發(fā)(R&D)15優(yōu)秀課件脂質體(Liposome)的進展l1995 年在英國倫敦由英國生物技術生物科學協(xié)會主辦紀念脂質體誕生三十周年科學討論會(A Liposome Birthday Conference 19651995)l簡要敘述脂質體釋藥系統(tǒng)的新進展 l AD Banghman論文報告中主要包括脂質體作為藥物載體、脂質體在基因治療中的應用,脂質體在診斷和免疫治療中的應用,脂質體在生物技術藥品及在局部治療中的應用等 16優(yōu)秀課件脂質體(Liposome)的進展l1994 年 6 月在瑞典己上市第一個甲肝疫苗脂質體,之后流感疫苗脂質體上市;l美國脂質體公司:正在進行紫杉醇及其衍生物脂質體研究;抗愛滋病AZT脂質體可以降低 AZT 骨髓毒性,提高抗病毒活性;TNF脂質體可以降低TNF 的毒性,提高療效;IL-2 脂質體可以延長 Tl/2,與DC合用，療效提高。降低嚴重的毛細血管自漏綜合癥，并用 DSC 技術證明 IL2 與脂膜能相互作用。l80 年代美國相繼成立了不少專營脂質體的公司,如脂質體公司 17優(yōu)秀課件兩性霉素 B 脂質體l1988年美國 Squibb 公司與 TLC 公司聯(lián)合開發(fā)抗深部真菌藥兩性霉素 B 脂質體，l我國亦進行了兩性霉素 B 脂質體的研究l脂質體主要降低兩性霉素B的嚴重腎毒性。18優(yōu)秀課件各類脂質體l美國 TLC 公司的阿霉素脂質體于 1995 年批準上市。lNexetar 公司的丁胺卡那脂質體。l日本 1994 年熊本等研究的亞硝脲(BCNU)脂質體能選擇性地殺傷腦腫瘤細胞。l三菱化學公司開發(fā)了將胃癌細胞的人型抗體與脂質體結合,通過利用脂質體與細胞融合的特點,使組裝有抗體的脂質體識別胃癌細胞,從而通過細胞融合達到選擇性釋放藥物。19優(yōu)秀課件ADM脂質體l美國 Sequus 公司開發(fā)的 DOXILR 等由阿霉素與合成磷脂組成的脂質體于 1995 年上市,l它系用 MPEG-DSPE 修飾脂質體表面而形成的一種長循環(huán)脂質體（20mg/支）。l在臨床治療艾滋病病人卡波氏肉瘤,提高療效降低毒性,延長半衰期達 50hr，而常規(guī)阿霉素僅數十分鐘。l國內不少高校與研究機構早在 90 年代初就進行大量實驗研究,均未見產品上市。20優(yōu)秀課件ADM脂質體的實驗研究l范健等，研究阿霉素(F-ADM)和脂質體阿霉素(L-ADM)對正常 NIH 小鼠和肝癌腹水型(HcAC)小鼠的毒性。l結果：l 脂質體組動物體重和器官失重明顯減輕；l 血生化變化相對減小，外周血白細胞下降幅度減小,恢復加快；l 心、腎、胃腸道病理損害減輕；21優(yōu)秀課件ADM脂質體的實驗研究l脂質體組有較好療效,生存期有所延長。l脂質體載藥后可降低阿霉素的毒性并保留藥物的抗腫瘤活性。22優(yōu)秀課件ADM脂質體可能機理lADM可與細胞膜或線粒體膜的磷脂分子及Fe3+形成三元絡合物。使細胞膜“鈍化”，功能及能量代謝受損。而脂質體載藥后明顯減少藥物與膜結合，減輕膜功能損害。l脂質體在體內主要由吞噬細胞攝取,大大減輕了功能細胞的直接損害。由于心肌細胞的吞噬能力很弱，載藥后較少進入心肌，減少心肌病發(fā)生。l脂質體載藥后藥物在體內重新分布,主要分布在網狀巨噬系統(tǒng)器官內,使心、腎、胃腸內藥物濃度明顯減少,降低了藥物毒性。23優(yōu)秀課件紫杉醇注射液的不足l水中溶解度僅為0.006 mg/ml,所以國內外上市的紫杉醇是聚氧乙基代蓖麻油及無水乙醇(50/50)的復合溶媒制成的粘稠性針劑。但 l(1)聚氧乙基代蓖麻油進入人體內降解,導致大量組織胺釋放，會發(fā)生嚴重過敏反應。盡管采取了預防措施,仍有41%的病人發(fā)生程度不等的過敏反應。l(2)紫杉醇本事亦有與其它化療藥物一樣的毒性，如血液學毒性。l(3)紫杉醇注射液在注射前用生理鹽水或 5%葡萄糖稀釋后會析出沉淀（結晶）,故還需接 0.22m微孔過濾器,以保用藥安全,臨床應用較為不便。24優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體的研究l國外有關文獻報道曾有人將紫杉醇做成乳劑、微球劑、混合膠束、環(huán)糊精包合物等,以期能減小紫杉醇注射劑的過敏反應及毒副作用,但都不甚理想。l紫杉醇脂質體從 90 年代初進行的基礎研究至目前臨床前研究取得了有意義及實用價值的結果。25優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體lRobert 等(1993)報道l紫杉醇脂質體的動物體內毒性明顯小于紫杉醇注射液l前者 i.v 給藥最大耐受量達 200mg/kg,而后者最大耐受量 30mg/kgl同時報道紫杉醇脂質體對耐藥細胞株亦有效。26優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體lSharma等(1996)報道l小鼠靜脈給紫杉醇注射劑(即市售 Paclitaxel),其 LD5035mg/kg,l而注射紫杉醇脂質體的 LD5070mg/kg,l靜注毒性降低一倍。27優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體lCabanes 等l比較了紫杉醇注射液與紫杉醇脂質體在正常小鼠體內毒性及荷 L1210 小鼠的抗癌性。l結果表明以相同劑量 32.5mg/kg 靜脈連續(xù)三天給紫杉醇注射液,結果注射液組小鼠 100%死亡,而紫杉醇脂質體組無死亡,而相等劑量賦形劑聚氧乙基代離麻油與乙醇(1:1 V:V)組死亡率為 30%。l紫杉醇注射劑及脂質體兩種劑型對 L1210 荷瘤小鼠具有近似的抗腫瘤活性。28優(yōu)秀課件紫杉醇注射液的腹腔給藥l紫杉醇注射液在一期臨床試驗腹腔給藥治療腔內惡性腫瘤可以保持較長時間(24-48 小時)藥物濃度,但病人有嚴重腹痛。l分析認為可能是賦形劑(聚氧乙基代蓖麻油及無水乙醇)的影響。lBicher 等亦報道注射部位軟組織損傷及毒性反應。l上述情況限制了臨床進一步治療方案的實施29優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體的腹腔給藥lSharma 報道l用荷 P388DBA-2 小鼠腹腔給予紫杉醇脂質體治療,結果表明與市售紫杉醇注射液具有相似療效,l但耐受性前者明顯優(yōu)于后者l提示紫杉醇脂質體有可能為臨床提供降低毒性及改變紫杉醇的給藥途徑以提高治療效果的新劑型。30優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體毒性試驗毒性試驗l急性毒性試驗首先比較了注射用紫杉醇脂質體與市售紫杉醇注射劑對小鼠靜脈注射的急性毒性,l結果:本品靜脈注射 LD50 為 69.8mg/kg,而紫杉醇注射液 LD50 為 33.0mg/kg。l且靜脈注射 2 分鐘后動物出現(xiàn)不斷抬頭、甩頭、呼吸困難急促,抖毛等反應,直至死亡。l并隨劑量增大,死亡動物數增多,反應程度增強。l注射用紫杉醇脂質體腹腔注射 LD5067.78mg/kg。31優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體藥效學試驗藥效學試驗l比較了注射用紫杉醇脂質體與陽性對照藥市售紫杉醇注射液對荷瘤小鼠的藥效。l荷瘤鼠分別接種艾氏癌實體型及小鼠肉瘤-180(S-180),本品分別用三個劑量組:20mg/kg、14mg/kg、9.8mg/kg,市售紫杉醇注射液用兩個劑量組 14mg/kg、9.8mg/kg(因大劑量動物死亡,無法用大劑量),l二劑型均有效,且療效近似(P 0.05),l結果可見市售紫杉醇注射液抑制骨髓細胞,可使粒細胞成熟障礙,對紅細胞起抑制作用。l注射用紫杉醇脂質體組可明顯減輕紫杉醇對骨髓的抑制作用,主要表現(xiàn)在早期粒細胞增加程度減輕,成熟紅細胞減少程度較輕,與市售紫杉醇注射液比較 P 0.05 或 P 0.01。32優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體的療效與毒性l注射用紫杉醇脂質體對小鼠艾氏癌實體型(EC)和小鼠肉瘤(S-180)均有明顯的治療作用。l與同劑量市售紫杉醇注射液比較,抗腫瘤作用基本一致(P O.05),l 但注射用紫杉醇脂質體與市售紫杉醇注射液相比小鼠靜脈給藥的急性毒性 LD50 降低一倍,且前者能明顯減輕紫杉醇注射液對外周白細胞減少的程度 P 0.01;并明顯減少骨髓抑制,減輕早幼細胞增加,成熟紅細胞減少程度分別為 P 0.05、P 0.01。l另外,紫杉醇脂質體還減輕了動物血清轉氨酶和堿性磷酸酶升高的程度。33優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體安全性試驗l1.刺激性試驗:注射用紫杉醇脂質體對兔耳緣靜脈注射 7.0mg/kg的劑量,未見明顯刺激性。l2.溶血試驗:注射用紫杉醇脂質體的試管內加濃度為 0.l mg/ml 時對家兔紅血球無溶血作用。l3.過敏試驗:注射用紫杉醇脂質體給豚鼠 0.2ml/只(0.6mg/kg)皮下注射致敏,攻擊劑量為 0.8ml/只(7.2mg/kg),結果陰性。34優(yōu)秀課件紫杉醇脂質體總結l解決了紫杉醇的溶解性問題;l提高了紫杉醇在溶液中的穩(wěn)定性;l避免過敏反應而不影響抗腫瘤活性;l減少病人對紫杉醇產生耐藥性;l提高了機體對紫杉醇的耐受性,有可能提高給藥劑量,進而提高療效；l可縮短滴注時間,使用方便；l另外,紫杉醇脂質體還具有腹腔給藥的可能性。35優(yōu)秀課件36優(yōu)秀課件