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1、2009Central Laboratory of Biology實(shí)驗(yàn)一 玻璃器皿的包扎及滅菌微 生 物 學(xué) 實(shí) 驗(yàn) Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 課前預(yù)習(xí)與目的要求l【課前預(yù)習(xí)】1. 高壓蒸汽滅菌原理。2. 上海申安LDZX-50KBS滅菌鍋的使用方法。l【目的要求】1. 學(xué)習(xí)并掌握玻璃器皿的包扎方法。2. 掌握高壓蒸汽滅菌的基本原理及操作方法。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei

2、 Normal University 基本原理微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)所用的器皿，大多數(shù)要進(jìn)行消毒、滅菌，才能用來(lái)培養(yǎng)微生物。玻璃器皿的包裝方法正確合理，在使用過(guò)程中才能有效防止雜菌的污染。玻璃器皿包裝好后，一般用高壓蒸氣滅菌法進(jìn)行滅菌。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 基本原理高壓蒸氣滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過(guò)加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸氣。待水蒸氣急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內(nèi)的

3、壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 實(shí)驗(yàn)用品棉花，試管，培養(yǎng)皿，紗布，三角瓶，橡皮筋，量筒，牛皮紙（或舊報(bào)紙），LDZX-50KBS立式高壓蒸氣滅菌鍋等。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 方法步驟1. 熟悉微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的結(jié)構(gòu)與功能。2. 清洗試管、三角瓶，培養(yǎng)皿等玻

4、璃器具，烘干。 3. 制作試管棉塞及三角瓶棉塞（參照微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)）。4. 用量筒或吸管取適量自來(lái)水于三角瓶和試管中，包裝好以制備無(wú)菌水。5. 包裝空培養(yǎng)皿，移液管。6. 滅菌（參照）。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 玻璃器皿清洗方法l玻璃器皿在使用過(guò)程中確保干凈，用過(guò)的器皿應(yīng)及時(shí)清洗。l器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗潔凈清洗。l瓊脂培養(yǎng)基的器皿應(yīng)先將培養(yǎng)基刮去。l瓊脂和固體物不能丟棄到水池中，以免堵塞管道。l清洗方法詳見(jiàn)。 Central Laborato

5、ry of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 棉塞的制作棉塞的作用有二：一是防止雜菌污染，二是保證通氣良好。形狀，大小，松緊適度。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 培養(yǎng)皿的包裝培養(yǎng)皿常用舊報(bào)紙緊緊包裹，一包710套，包好后干熱或濕熱滅菌。也可用金屬筒包裝。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal

6、University 移液管的包裝作用：以免使用時(shí)將雜菌吹入其中，或不慎將微生物吸出管外。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 試管和三角瓶的包裝試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞；用二層報(bào)紙包扎好（如有牛皮紙，效果更好），進(jìn)行干熱或濕熱滅菌。試管較多時(shí)，一般7個(gè)或10個(gè)一組，再用雙層報(bào)紙包扎。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 上海申安LDZX-50

7、KBS滅菌鍋的使用 1）打開(kāi)電源與開(kāi)關(guān)，檢查水位顯示燈；2）加滅菌物品；3）蓋緊； 4）設(shè)定溫度和時(shí)間；5）查看排氣（水）閥旋至排氣處；6）排氣；7）結(jié)束后取物。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄自己制作的實(shí)驗(yàn)用品（含無(wú)菌水）名稱的規(guī)格與數(shù)量。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 注意事項(xiàng)1. 實(shí)驗(yàn)前，熟悉實(shí)驗(yàn)室平面布局圖，了解實(shí)驗(yàn)儀器用

8、品擺放規(guī)律及用途。2. 制備無(wú)菌水時(shí)，試管裝水量要超過(guò)試管高度的1/5，三角瓶裝水量不要超過(guò)規(guī)格容量的1/2（裝量過(guò)多，滅菌過(guò)程中易噴出或潤(rùn)濕棉塞）；3. 滅菌鍋的操作安全。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 實(shí)驗(yàn)報(bào)告1. 高壓蒸氣滅菌開(kāi)始之前，為什么要將鍋內(nèi)冷空氣排盡滅菌完畢后，為什么待壓力降低“0”時(shí)才能打開(kāi)排氣閥，開(kāi)蓋取物。2. 在使用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌時(shí)，怎樣杜絕一切不安全的因素。3. 滅菌在微生物實(shí)驗(yàn)操作中有何重要意義。 Central laboratory of Biology 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心 Thanks for your attention!