《藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（20頁珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),2018/9/7,,?#?,藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則,,1,參考,2014,年,5,月,13,日起草且已頒布的,《,藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則,》,。,給出與,《,藥品注冊(cè)工作指南,》,（,2005,年,3,月頒布的指導(dǎo)原則）的區(qū)別之處。,,2,主要內(nèi)容,（一）,概述,,（二）試驗(yàn)設(shè)計(jì),總體,要求,生物,樣品的分析,方法,研究項(xiàng)目,,3,概述,定義：,通過,體外和動(dòng)物體內(nèi)的研究方法,，揭示藥物在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，獲得藥物的,基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),，闡明,藥物的吸收、分布、代謝和排泄,（,A

2、DME,）的,過程,和,特征,。,,研究意義：,評(píng)價(jià),藥物制劑,特性和質(zhì)量的重要依據(jù),。,闡明,藥物作用機(jī)制,，是,藥效和毒理研究,動(dòng)物選擇的依據(jù),之一,。,藥物,或活性代謝產(chǎn)物濃度數(shù)據(jù),及藥,代動(dòng)力學(xué)參數(shù)是產(chǎn)生、決定或闡明,藥效或毒性,大小的基礎(chǔ)，可提供藥物對(duì),靶器官效應(yīng)（藥效或,毒性,）,。,為,設(shè)計(jì)和優(yōu)化,臨床試驗(yàn),給藥方案,提供參考,信息。,,,4,（一）總體,要求,1,受試物：,采用,工藝相對(duì)穩(wěn)定、純度和雜質(zhì)含量能,反映臨床試驗(yàn)擬用樣品和,/,或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品,。名稱、來源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告,。,2,試驗(yàn)動(dòng)物：,成年,

3、和,健康,。,常用動(dòng)物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型豬和猴等,。,動(dòng)物選擇原則：,（,1,）,首選動(dòng)物：在考慮與人體藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)相關(guān)性的前提下，盡可能選擇,與毒理學(xué)和藥效學(xué)研究相同的動(dòng)物,。,（,體外模型比較動(dòng)物與人代謝的種屬差異性,）,（,2,）,盡量在動(dòng)物清醒狀態(tài)下進(jìn)行試驗(yàn)，,最好從同一動(dòng)物多次采樣獲取藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),。,（,3,）,創(chuàng)新性藥物應(yīng)選用兩種或兩種以上的,動(dòng)物,（嚙齒類,+,非嚙齒類）,。,其他,藥物,，可選用一種動(dòng)物，建議首選非嚙齒類動(dòng)物,。,（,4,）,經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類,動(dòng)物,。,3,劑量選擇,：,動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少,三個(gè)劑量組,，,低劑量與動(dòng)物

4、最低有效劑量基本一致，中、高劑量按一定比例增加,。,（書：高劑量最好接近最大耐受劑量，中小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范圍選取）,4,給藥途徑,：,盡可能,與臨床用藥一致，,也要兼顧藥效學(xué)研究和毒理研究的給藥途徑,。,,,,,5,（二）,生物樣品的分析方法,色譜法、放射性同位素標(biāo)記法、微生物 學(xué)方法、,免疫學(xué),方法。,方法,學(xué),驗(yàn)證是,生物樣品分析的基礎(chǔ),。,包括,準(zhǔn)確度,、精密度、特異性、靈敏度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性,等,研究,；,制備,隨行,標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對(duì)質(zhì)控樣品進(jìn)行測(cè)定，確保生物樣品分析的可靠性,。,,6,指導(dǎo)原則對(duì)“,生物樣品的分析,”修改部分,基本概念,

5、1.,靈敏度：,主要通過測(cè)定定量下限樣品的準(zhǔn)確度和精密度來表征。,（書：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線表征，主要包括定量下限和濃度,-,響應(yīng)函數(shù)）,2.,介質(zhì)改成為,基質(zhì)：基質(zhì)組分、生物基質(zhì)、基質(zhì)效應(yīng)。,分析方法驗(yàn)證,1.,特異性：,對(duì)于色譜法至少要考察,6,個(gè)不同個(gè)體空白生物樣品色譜圖、空白生物樣品外加對(duì)照物質(zhì)色譜圖（注明濃度）及用藥后的生物樣品,（注明樣品來源基質(zhì)、用藥后的時(shí)間）,色譜圖,。,2.,精密度,：,為獲得批間精密度，應(yīng),至少,3,個(gè)分析批,合格,。（書：連續(xù),3,個(gè)分析批）,3.,稀釋可靠性：,樣品稀釋不應(yīng)影響準(zhǔn)確度和精密度,。準(zhǔn)確度,和精密度應(yīng)在,±,15%,之內(nèi)。稀釋的可靠性應(yīng)該覆蓋試驗(yàn)樣品

6、所用的稀釋倍數(shù),。,4.,殘留,：,方法開發(fā)期間應(yīng)使殘留最小化。方法驗(yàn)證期間應(yīng)通過檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量上限濃度后測(cè)定空白樣品來確定其殘留，通常殘留應(yīng),不大于定量下限的,20%,。生物樣品分析期間也應(yīng)進(jìn)行殘留檢測(cè)，如在測(cè)定高濃度樣品后和分析下一個(gè)樣品之前測(cè)定空白樣品,。,5.,組織分布,樣品,：,組織分布樣品由于每種組織樣本數(shù)目少，所以其分析方法只需驗(yàn)證選擇性、日內(nèi)精密度和準(zhǔn)確度等。,通常選擇一兩種代表性組織進(jìn)行分析方法驗(yàn)證,。,,,,,7,生物樣品分析方法的,應(yīng)用,每個(gè)分析批應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，隨行測(cè)定高、中、低,3,個(gè)濃度的質(zhì)控樣品，每個(gè)濃度至少雙樣本，并應(yīng)均勻分布在未知樣品測(cè)試順序中。當(dāng)一個(gè)分析批

7、中未知樣品數(shù)目較多時(shí)，應(yīng)增加各濃度質(zhì)控樣品數(shù)，使,質(zhì)控樣品數(shù)大于未知樣品總數(shù)的,5%,。質(zhì)控樣品測(cè)定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于,15,%,（書：低濃度點(diǎn)偏差一般應(yīng)小于,20%,）,，,最多允許,1/3,質(zhì)控樣品的結(jié)果超限，但不能在同一濃度中出現(xiàn),。,同,一天內(nèi)進(jìn)行不同組織樣品測(cè)試時(shí)，用代表性組織作為基質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，但質(zhì)控樣品應(yīng)采用目標(biāo)空白組織制備。根據(jù)當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算質(zhì)控樣品的濃度，若相對(duì)偏差在,?,15%,之內(nèi)，則可共用一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，否則采用與待測(cè)組織樣品相同的空白組織建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。,,8,,指導(dǎo)原則對(duì)“,生物樣品的分析,”修改部分,（三）,研究項(xiàng)目,血藥濃度,-,時(shí),間曲線,吸收,分布,排泄,

8、與血漿蛋白的,結(jié)合,生物轉(zhuǎn)化,藥物代謝酶及轉(zhuǎn)運(yùn)體,研究,物質(zhì)平衡,,,,,,9,,創(chuàng)新型藥物,,（三）,研究項(xiàng)目,血藥濃度,-,時(shí),間曲線,1.1,受試動(dòng)物數(shù)：,以藥,-,時(shí)曲線,的每個(gè),采樣點(diǎn),不,少于,5,個(gè),數(shù)據(jù),計(jì)算,所需動(dòng)物數(shù),。受,試動(dòng)物采用,雌雄各半,。,（,書：最好從同一受試動(dòng)物個(gè)體取樣，如由多只動(dòng)物的數(shù)據(jù)共同構(gòu)成一條血藥濃度,-,時(shí)間曲線，需增加動(dòng)物數(shù)，以反映個(gè)體差異對(duì)結(jié)果的影響,）,,1.2,采樣點(diǎn),*,：,（,1,）,給,藥前,需采血,作為空白樣品,。,（,2,）,采樣時(shí)間,點(diǎn)的設(shè)計(jì)應(yīng)兼顧藥物的,吸收相、平衡相（,峰濃度,C,max,附近,）和消除相,。,一般在,吸收相至

9、少需要,2~3,個(gè)采樣點(diǎn),，,對(duì)于,吸收快的血管外給藥藥物,，避免,第一個(gè)點(diǎn),是,C,max,；,在,C,max,附近需要,3,個(gè)時(shí)間,點(diǎn),；,消除相需要,4~6,個(gè)采樣點(diǎn),。,（,3,）,整個(gè),采樣時(shí)間應(yīng)持續(xù)到,3~5,個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為,C,max,的,1/10~1/20,。,（,4,）,注意,采血途徑和整個(gè)試驗(yàn)周期的采血總量不影響動(dòng)物的正常生理功能和血液動(dòng)力學(xué)，一般不超過動(dòng)物總血量的,15,％,~20%,。例如，每只大鼠,24?h,內(nèi)采血總量不宜超過,2 mL,。在采血方式上，同時(shí)也要兼顧動(dòng)物,福利。,10,（三）,研究項(xiàng)目,1.3,口服,給藥,：給,藥前應(yīng),禁食,12,小時(shí)以

10、上,，以排除食物對(duì)藥物吸收的影響,。,1.4,,多次,（重復(fù)）給藥,對(duì)于臨床需長(zhǎng)期給藥或有蓄積傾向的藥物，應(yīng)考慮進(jìn)行多次（重復(fù)）給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究。,多次給藥試驗(yàn)時(shí),,,一般可選用一個(gè)劑量,(,有效劑量,),。,1.5,血藥濃度測(cè)定,1.6,,藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),靜脈注射,給,藥,：,消除,半衰期（,t,1/2,）、表觀分布容積（,Vd,）,、藥,-,時(shí)曲線,下面積（,AUC,）、清除率（,CL,）等參數(shù),值,。,血管,外給,藥,：,上述參數(shù),、,峰濃度,（,C,max,）和達(dá)峰時(shí)間（,T,max,）,等，,以反映藥物吸收、消除的規(guī)律,。,統(tǒng)計(jì),矩參數(shù)，如,:,平均滯留時(shí)間（,MRT,）、,AU

11、C,(0-t),和,AUC,(0-∞),等,，,以,描述,藥物藥代動(dòng)力學(xué),特征,。,,11,（三）,研究項(xiàng)目,1.7,應(yīng)提供的,數(shù)據(jù),,1.7.1,單次給藥,各個(gè)受試動(dòng)物,的藥,-,時(shí)數(shù)據(jù),及曲線和各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及曲線。,各個(gè)受試動(dòng)物的主要藥代,動(dòng)力學(xué)參數(shù)及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。,對(duì)受試物單次給藥非臨床藥代動(dòng)力學(xué)的規(guī)律和特點(diǎn)進(jìn)行討論和評(píng)價(jià)。,,1.7.2,多次（重復(fù)）給藥,各個(gè),受試動(dòng)物首次給藥后,的藥,-,時(shí)數(shù)據(jù),及曲線和主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及,各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和曲線,。,各個(gè)受試動(dòng)物的,3,次穩(wěn)態(tài)谷濃度數(shù)據(jù)及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差,。,各個(gè)受試動(dòng)物血藥濃度達(dá)穩(wěn)態(tài)后末次給藥,的藥,-,時(shí)數(shù)據(jù),

12、和曲線和主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，及各組平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和曲線。,比較首次與末次給藥,的藥,-,時(shí)曲線,和有關(guān)參數(shù)。,對(duì)受試物多次給藥非臨床藥代動(dòng)力學(xué)的規(guī)律和特點(diǎn)進(jìn)行討論和評(píng)價(jià)。,,12,（三,）,研究項(xiàng)目,2.,吸收,經(jīng)口,給藥,的新藥，進(jìn)行整體動(dòng)物試驗(yàn)時(shí)應(yīng)盡可能同時(shí)進(jìn)行血管內(nèi)給藥的試驗(yàn)，提供,絕對(duì)生物利用度,。,如,有必要，,可進(jìn)行體外細(xì)胞試驗(yàn),、在體或離體腸道吸收試驗(yàn)等以闡述藥物的吸收特性。,對(duì)于,其他血管外給藥,的藥物及,某些改變劑型的藥物,，應(yīng)根據(jù)立題目的，,提供絕對(duì)生物利用度或相對(duì)生物利用度,。,建議采用非嚙齒類,動(dòng)物自身,交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，用同一受試動(dòng)物比較生物利用度,。,,生物利用度,：指

13、藥物制劑被機(jī)體吸收的速率和吸收程度的一種度量,。,絕對(duì)生物利用度：用非血管途徑給藥的藥時(shí)曲線下面積與該藥參比制劑靜注給藥的,AUC,的比值，以百分率,表示,。,相對(duì)生物利用度：用相同途徑給藥的試驗(yàn)制劑與參比制劑的藥時(shí)曲線下面積的比值。,13,（三）,研究項(xiàng)目,3.,分布,大,鼠或,小鼠,，,必要時(shí)可,選擇,非,嚙齒類,動(dòng)物,（書：選用大鼠或小鼠做組織分布試驗(yàn)較為方便）,選擇,一個(gè)劑量,（有效劑量）,給,藥后，至少測(cè)定藥物及,主要代謝產(chǎn)物,在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的,濃度,。,必要時(shí)建立和說明血藥濃度與靶組織藥物濃度的關(guān)系。,參考藥,-,時(shí)曲線的變化趨勢(shì)，選擇

14、至少,3,個(gè)時(shí)間點(diǎn),分別代表吸收相、平衡相和消除相的藥物分布。若某組織的藥物或,代謝產(chǎn)物濃度較高,，應(yīng)增加觀測(cè)點(diǎn)，進(jìn)一步研究該組織中藥物消除的情況。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，一般應(yīng)有,6,個(gè)動(dòng)物,（雌雄各半）,的數(shù)據(jù)。,可,考慮進(jìn)行多次給藥后特定組織的藥物濃度研究：,進(jìn)行,組織分布試驗(yàn)，必須注意取樣的代表性和一致性。,14,（三）,研究項(xiàng)目,4.,排泄,同時(shí),提供嚙齒類和非嚙齒類動(dòng)物的排泄數(shù)據(jù)，嚙齒,類每個(gè),性別,3,只動(dòng)物，非嚙齒,類每個(gè),性別,2~3,只,動(dòng)物,。（書：大鼠或小鼠）,4.1,尿和糞的藥物排泄：將動(dòng)物放入代謝籠內(nèi)，選定一個(gè)有效劑量給藥后，按一定的時(shí)間間隔分段收集尿或糞的全部樣品，直至收集到

15、的樣品中藥物和,主要代謝產(chǎn)物,低于,定量下限或小于給藥量的,1%,。糞樣品收集后按一定比例制成勻漿，記錄,總重量,或體積，取部分尿或糞樣品進(jìn)行藥物和,主要代謝產(chǎn)物濃度,測(cè)定或,代謝產(chǎn)物,譜分析,，計(jì)算藥物和,主要代謝產(chǎn)物,經(jīng)此途徑排泄的速率及排泄量,。每個(gè)時(shí)間段至少有,5,只,動(dòng)物的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。,采樣時(shí)間點(diǎn)：采取給藥前尿及糞樣，參考預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，設(shè)計(jì)給藥后收集樣品的時(shí)間點(diǎn)，包括藥從尿或糞中開始排泄、排泄高峰及排泄結(jié)束的全過程）,4.2,膽汁排泄：一般在動(dòng)物麻醉下作膽管插管引流，待動(dòng)物清醒,且手術(shù)完全恢復(fù)后,給藥，并以合適的時(shí)間間隔分段收集膽汁，進(jìn)行藥物和,主要代謝產(chǎn)物,測(cè)定,。,（書：大鼠在乙醚

16、麻醉下）,4.3,記錄藥物及,主要代謝產(chǎn)物,自糞、尿、膽汁排出的速度及總排出量（占總給藥量的百分比），提供物質(zhì)平衡的數(shù)據(jù)。,15,（三）,研究項(xiàng)目,5.,與血漿蛋白的,結(jié)合,建議,根據(jù)藥理毒理研究所采用的動(dòng)物種屬,，進(jìn)行動(dòng)物與人血漿蛋白結(jié)合率比較,試驗(yàn)。,采用,方法：,平衡,透析法、超過濾法、分配平衡法、凝膠過濾法、,色譜法,等,?？?選擇使用一種方法進(jìn)行,至少,3,個(gè)濃度（包括有效濃度）,的血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)，每個(gè)濃度至少重復(fù)試驗(yàn),３次,，以了解藥物與血漿蛋白結(jié)合率以及可能存在的濃度依賴性和血漿蛋白結(jié)合率的種屬差異。,對(duì)血漿蛋白結(jié)合率高，且安全范圍窄的藥物,，,（書：對(duì)蛋白結(jié)合率高于,90%,

17、的藥物）,建議,開展,體外藥物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,試驗(yàn)，即選擇臨床上有可能合并使用的高蛋白結(jié)合率藥物，考察對(duì)所研究藥物蛋白結(jié)合率的影響,。,16,（三）,研究項(xiàng)目,6.,生物轉(zhuǎn)化,-,創(chuàng)新型藥物,臨床前,可先采用,色譜方法,或,放射性同位素標(biāo)記方法,分析和分離可能存在的代謝產(chǎn)物，并用色譜,-,質(zhì)譜聯(lián)用等方法初步推測(cè)其結(jié)構(gòu),。,體內(nèi),藥物生物轉(zhuǎn)化可考慮,與藥,-,時(shí)曲線,和排泄試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，應(yīng)用這些試驗(yàn)采集的樣品進(jìn)行代謝產(chǎn)物的鑒定及濃度測(cè)定。,建議,在早期非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，進(jìn)行藥物,體外,代謝試驗(yàn)。,盡早考察藥效和毒性試驗(yàn)所用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人體代謝的差異?？紤]這種代謝的種屬差異是否會(huì)影響到其藥效和毒性

18、，并以此作為藥效和毒性試驗(yàn)動(dòng)物選擇的依據(jù)。,,,17,（三）,研究項(xiàng)目,7.,藥物代謝酶及轉(zhuǎn)運(yùn)體,研究,-,創(chuàng)新型藥物,體外試驗(yàn),體系,是評(píng)價(jià)藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體作用,機(jī)制，,結(jié)合,體內(nèi)試驗(yàn),，綜合評(píng)價(jià)藥物的處置過程,。,非臨床,ADME,研究應(yīng)主要采用人源化材料（如：人肝微粒體、肝,S9,、原代肝細(xì)胞及,P450,重組酶等），鑒定藥物是否是代謝酶的底物或抑制劑,。,具有重要臨床意義的外排和攝入轉(zhuǎn)運(yùn)體主要包括,P-gp,、,BCRP,、,OATP1B1,、,OATP1B3,、,OAT1,、,OAT3,和,OCT2,等,，建議針對(duì),這些轉(zhuǎn)運(yùn)體進(jìn)行研究,。,考慮,代謝,酶與轉(zhuǎn)運(yùn)體,之間的相互影響及潛

19、在的相互作用、人特異性代謝產(chǎn)物的評(píng)估等。,18,（三）,研究項(xiàng)目,8.,物質(zhì),平衡,-,創(chuàng)新型藥物,臨床前,和臨床,早期，毒性,劑量和有效治療劑量范圍,確定,時(shí)，,運(yùn)用,放射性標(biāo)記化合物,，,收集,動(dòng)物和人體糞、尿以及膽汁,以研究藥物的物質(zhì)平衡,。,這些,研究能夠,獲得化合物的排泄途徑和排泄速率等信息,，而且有助于,代謝產(chǎn)物的性質(zhì)鑒定,，并通過有限的數(shù)據(jù),比較它們的體內(nèi)吸收和分布特點(diǎn),。,,19,研究項(xiàng)目：,（,1,）,血藥濃度,-,時(shí),間曲線,：,不少于,5,個(gè),、,雌雄,各,半,、,同一受試動(dòng)物個(gè)體,取樣；,采樣點(diǎn),*,；,給藥劑量。,（,2,）吸收：,提供絕對(duì)生物利用度或相對(duì)生物利用度,

20、。,建議采用非嚙齒類動(dòng)物自身交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，用同一受試動(dòng)物比較生物利用度,。,（,3,）分布：,大鼠或小鼠,，,必要時(shí)可,選擇,非嚙齒類動(dòng)物（書：選用大鼠或小鼠做組織分布試驗(yàn)較為方便,）,；,主要,代謝產(chǎn)物,。,（,4,）排泄：,同時(shí)提供嚙齒類和非嚙齒類動(dòng)物的排泄數(shù)據(jù)，嚙齒類每個(gè)性別,3,只動(dòng)物，非嚙齒類每個(gè)性別,2~3,只,動(dòng)物,（,書：大鼠或小鼠,）；,主要,代謝產(chǎn)物,。,體外,模型：動(dòng)物選擇、吸收、,生物轉(zhuǎn)化,、,與血漿蛋白的,結(jié)合,、,藥物代謝酶,及轉(zhuǎn)運(yùn)體,研究,。,藥理、毒理學(xué)研究：,動(dòng)物選擇,、,劑量選擇,、,給藥途徑,、,分布,、,與血漿,蛋白結(jié)合,。,,,,,20,重要內(nèi)容小結(jié),