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1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),*,非洲豬瘟的分子病毒學(xué),非洲豬瘟的分子病毒學(xué),非洲豬瘟病總列數(shù),確診時(shí)間,發(fā)生省份,發(fā)生地點(diǎn),發(fā)病頭數(shù),死亡頭數(shù),撲殺數(shù),1,8,月,3,日,遼寧省,沈陽(yáng)市沈北,8116,2,8,月,16,日,河南省,鄭州,30,30,1362,3,8,月,19,日,江蘇省,連云港海川,88,14577,4,8,月,23,日,浙江省,溫州市樂(lè)青,340,1332,5,8,月,30,日,安徽省,蕪湖市南陵縣,185,80,1264,6,9,月,2,日,安徽省,宣城市宣州五星鄉(xiāng),94,725,7,9,月,2,日,安徽省,宣城市宣
2、州古泉鎮(zhèn),40,8,9,月,3,日,安徽省,宣城市金壩,152,8,9,9,月,3,日,江蘇省,無(wú)錫市宜興,12,9,97,10,9,月,5,日,黑龍江省,佳木斯長(zhǎng)青鄉(xiāng),39,12,11,9,月,6,日,安徽省,滁州市鳳陽(yáng)縣,62,22,12,9,月,6,日,黑龍江省,佳木斯向陽(yáng)區(qū),26,10,13,9,月,6,日,安徽省,蕪湖市南陵縣許鎮(zhèn),13,4,14,9,月,6,日,安徽省,宣城市宣州區(qū)天湖,15,15,15,9,月,10,日,安徽省,銅陵市義安區(qū),63,23,16,9,月,14,日,內(nèi)蒙古,阿巴嘎旗,17,9,月,14,日,河南省,獲嘉縣,非洲豬瘟病總列數(shù)確診時(shí)間發(fā)生省份發(fā)生地點(diǎn)發(fā)病頭
3、數(shù)死亡頭數(shù)撲殺,科技日?qǐng)?bào),2018,年,8,月,22,日?qǐng)?bào)道,我國(guó)發(fā)生非洲豬瘟的病毒基因測(cè)序初步結(jié)果顯示,引起我國(guó)本次非洲豬瘟疫情的毒株為,基因,型,,部分基因序列與,格魯吉亞,2007,株,和,俄羅斯伊爾庫(kù)茨克,2017,株,的相應(yīng)序列完全一致。,科技日?qǐng)?bào)2018年8月22日?qǐng)?bào)道我國(guó)發(fā)生非洲豬瘟的病毒基因測(cè),提要,ABSTRACT,01/,病毒的簡(jiǎn)述,02/,分類學(xué)地位,03/,形態(tài)學(xué)特征,04/,病毒穩(wěn)定性,05/,基因組特征,06/,主要的蛋白,提要01/病毒的簡(jiǎn)述02/分類學(xué)地位03/形態(tài)學(xué),非洲豬瘟,非洲豬瘟(,African Swine fever,,,ASF,)是一種急性,發(fā)熱傳
4、染性很高的濾過(guò)性病毒所引起的豬病,其特征是發(fā)病過(guò)程短,但死亡率高,臨床表現(xiàn)為發(fā)熱(達(dá),4042,),心跳加快,呼吸困難,部分咳嗽,眼、鼻有漿液性或粘液性膿性分泌物,皮膚發(fā)紺,淋巴結(jié)、腎、胃腸粘膜明顯出血;,非洲豬瘟在臨床癥狀上與典型豬瘟極為相似,,以高熱、高死亡率、全身廣泛性出血、呼吸障礙以及神經(jīng)功能紊亂為主要特征。,非洲豬瘟非洲豬瘟(African Swine fever,A,聯(lián)系,區(qū)別,病毒分類,CSF,是黃病毒科瘟病毒屬,單鏈,RNA,病毒,可分為,3,種基因型,,11,個(gè)亞型,,1,個(gè)血清型,ASF,是非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬,雙鏈,DNA,病毒,根據(jù)編碼,p72,蛋白的,B646
5、L,核酸序列,非洲豬瘟可分為,23,個(gè)基因型,,1,個(gè)血清型,毒株特點(diǎn),不同毒株毒力差異大,CSF,在中國(guó)流行主要是基因,2.1b,亞型的中等毒力毒株,ASF,強(qiáng)毒株感染,4-10,天后,100%,死亡,中等毒株死亡率,30%-50%,,低毒株僅少量死亡,傳播特點(diǎn),CSF,與,ASF,都可通過(guò)接觸傳播或由于接觸污染的媒介物傳播,發(fā)病無(wú)季節(jié)性,歐洲野豬與家豬比較容易被,ASFV,感染,有三種非洲野豬(疣豬、巨林豬、叢林豬)不表現(xiàn)出癥狀,隱性帶毒,成為病毒的貯存器。,ASFV,是唯一的蟲(chóng)媒,DNA,病毒,,可通過(guò)軟蜱傳播,病毒在其體內(nèi)保持感染性造成持續(xù)傳播,,ASFV,在蜱和野豬感染圈中長(zhǎng)期存在,
6、難以根除,并在一定條件下感染家豬,引起暴發(fā),聯(lián)系區(qū)別病毒分類CSF是黃病毒科瘟病毒屬,單鏈RNA病毒,可,聯(lián)系,區(qū)別,臨床癥狀,+,剖檢病變,臨床癥狀和剖檢病變整體相似性很高,肉眼無(wú)法鑒別,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是診斷最可靠、最準(zhǔn)確的方法,CSF,剖檢病變脾臟腫大不明顯,邊緣梗死灶明顯,肺臟病變主要以出血性病變?yōu)橹?ASF,剖檢病變脾臟腫大,梗死灶不多見(jiàn),肺臟表現(xiàn)水腫,ASF,死亡前,48h,體溫下降為其特征同時(shí)臨床癥狀直到體溫下降才顯示出來(lái),與,CSF,體溫升高時(shí)癥狀就出現(xiàn)不同,宿主免疫,不感染人,不是人獸共患病,預(yù)防,CSF,最有效的方法就是接種豬瘟疫苗,ASFV,強(qiáng)毒株基因組可編碼多種蛋白質(zhì),用以干
7、擾宿主的天然免疫系統(tǒng),從而抑制和逃避宿主的免疫應(yīng)答反應(yīng),為自身的增殖、擴(kuò)散創(chuàng)造有利條件,,ASFV,擁有龐大的基因組結(jié)構(gòu)和復(fù)雜的免疫逃逸機(jī)制,為疫苗研發(fā)工作帶來(lái)諸多困難,防控手段,具有高度的傳染性與致死性,易大面積發(fā)病感染,CSF,:接種豬瘟疫苗,免疫后可完全保護(hù),不會(huì)再出現(xiàn)大面積發(fā)病,疫情較容易控制,ASF,:無(wú)有效疫苗,以撲殺為主并進(jìn)行無(wú)害化處理,聯(lián)系區(qū)別臨床癥狀+剖檢病變CSF剖檢病變脾臟腫大不明顯,邊緣,分類學(xué)地位,國(guó)際病毒分類委員會(huì)第四次報(bào)告將其歸類于虹彩病毒科,(粒子結(jié)構(gòu)),國(guó)際病毒分類委員會(huì)第五次報(bào)告將其歸類于痘病毒科,(基因結(jié)構(gòu)、復(fù)制,方式),國(guó)際病毒分類委員會(huì)第六次報(bào)告增加了
8、非洲豬瘟科,將其列入非洲,豬瘟屬,,是其中的唯一成員,(分子生物學(xué)發(fā)展),分類學(xué)地位國(guó)際病毒分類委員會(huì)第四次報(bào)告將其歸類于虹彩病毒科(,形態(tài)學(xué)特征,ASFV,是有囊膜包裹的的正二十面體病毒。毒粒,外周,包裹有六角形的囊膜,,外部,是直徑為,170-200nm,的二十面體衣殼,對(duì)應(yīng),2000,個(gè)左右衣殼粒,衣殼粒長(zhǎng)約,13nm,,寬約,5-6nm,,衣殼粒間距離為,7.4-8.1nm,,呈中間有孔的六邊形棱柱體。粒子的,內(nèi)部,是直徑為,70-100nm,的病毒核心,由包含基因組核酸的核蛋白以及類核結(jié)構(gòu)組成。,病毒從外至內(nèi)由,5,個(gè)部分組成:,外囊膜,、,病毒衣殼,、,內(nèi)囊膜,、,核殼,、,類核,
9、形態(tài)學(xué)特征ASFV是有囊膜包裹的的正二十面體病毒。毒粒外周包,DNA,外囊膜,病毒衣殼,內(nèi)囊膜,核殼,類核,形態(tài)學(xué)特征,DNA外囊膜病毒衣殼內(nèi)囊膜核殼類核形態(tài)學(xué)特征,病毒穩(wěn)定性,ASFV,具有很強(qiáng)的致病性,對(duì)外界不同的極端環(huán)境有很好的抗性,。,56,下加熱,70 min,或,60,下加熱,20 min,可使病毒失活。在,pH 4-10,的條件下,病毒仍可保持活性。將豬肉自然風(fēng)干制成的臘腸,或者,32-49,下煙熏,12 h,,然后自然風(fēng)干,25-30,天制成火腿,豬肉中攜帶的非洲豬瘟病毒也無(wú)法被全部殺死,仍然具有感染活性。,病毒穩(wěn)定性ASFV具有很強(qiáng)的致病性,對(duì)外界不同的極端環(huán)境有很,基因組特
10、征,ASFV,的基因組為具有末端共價(jià)閉合特點(diǎn)的單分子線狀雙鏈,DNA,,大小為,170-190Kb,,兩末端部分堿基配對(duì)形成發(fā)夾環(huán),,中間區(qū)域較為保守,長(zhǎng)度約,125Kb,,是一段高度保守的基因序列,。兩端靠近發(fā)夾環(huán)部位有末端重復(fù)序列和可變區(qū),,可變區(qū)分別命名為,VL,(,38-47Kb,)與,VR,(,13-16Kb,),是不同病毒毒株之間基因組差異主要的部分,與病毒的變異、逃避宿主防御系統(tǒng)等機(jī)制密切相關(guān),,ASFV,基因組大小變化由可變區(qū)決定,。整個(gè)基因組含有約,150,個(gè)開(kāi)放閱讀框(,ORFs,),可編碼,150-200,種蛋白質(zhì)。,基因組特征ASFV的基因組為具有末端共價(jià)閉合特點(diǎn)的單分
11、子線狀,基因組特征,截止目前,完成全基因組測(cè)序的毒株共有,20,株,其中,適應(yīng),Vero,細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)毒力,BA71V,毒株,是廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室研究的毒株。,毒株名稱,基因組大小(,kb,),毒株名稱,基因組大?。?kb,),BA71V,170,Warmaths,191,L60,182,Tengani 62,186,BA71,180,Pretorisukop_96-4,190,NHV,172,Mkuzi 1979,193,Kenya 1950,194,Malawi Lil-20-1 1983,188,Kenya 05/TK1,191,47/Ss/2008,185,Ken 06.Bus,184,
12、Benin 97/1,182,26544/OG1O Italy,183,OURT 88/3,172,Odintsovo_02/14,189,E75,181,Warthog,187,Georgia 2007/1,189,基因組特征截止目前,完成全基因組測(cè)序的毒株共有20株,其中,,病毒蛋白質(zhì),非結(jié)構(gòu)蛋白,結(jié)構(gòu)蛋白,病毒基因組編碼的,在病毒復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生并,具有一定功能,但并不結(jié)合于毒粒中的蛋白質(zhì),構(gòu)成一個(gè)形態(tài)成熟的具有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì),(,衣殼蛋白,,,囊膜蛋白,,,存在于毒粒中的酶,),主要的蛋白,病毒蛋白質(zhì)非結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白病毒基因組編碼的,在病毒復(fù)制過(guò)程,DNA,外囊膜,病毒
13、衣殼,內(nèi)囊膜,核殼,類核,p12,(,O61R,),p24,CD2v,(,EP402R,),p14,(,E120R,),p49,(,B438L,),p72,(,B646L,),p150,p37,p34,p14,p5,p35,p15,p8,pp220,pp62,Protease,p12,(,O61R,),p17,(,D117L,),p22,p54,(,E183L,),pE248R,pH108R,pE199L,RP1 RP5,RP2 RP6,RP3 RP7,pD1133L pQ706L,pG1340L pB962L,Poly(A)pol Capping enzyme,Methyltransferase,p10,pA104R,RNA,聚合酶亞基,轉(zhuǎn)錄因子,RNA,修飾酶,與,DNA,結(jié)合的主要結(jié)構(gòu)蛋白,DNA pol X DNA ligase,AP endonuclease,堿基切除修復(fù),DNA外囊膜病毒衣殼內(nèi)囊膜核殼類核p12(O61R)p14,