《生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件（42頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),*,*,第二章生物制藥基本技術(shù),生物制藥是把生物體內(nèi)的具有生物活性的基本物質(zhì),保持原來(lái)的結(jié)構(gòu)和功能,又能在含有多種物質(zhì)的液相,或固相中較高純度的分離出來(lái)。它是一項(xiàng)嚴(yán)格、細(xì)致、,復(fù)雜的工藝過(guò)程,涉及物理、化學(xué)、生物學(xué)、工程等,方面的知識(shí)和操作技術(shù),問(wèn)題:1、標(biāo)準(zhǔn)化方法?2、如何發(fā)現(xiàn)或研制新藥?,對(duì)于一個(gè)新研制的生物藥物,從查閱文獻(xiàn)開(kāi)始,到,探索實(shí)驗(yàn)、條件考察(記錄客觀)、總結(jié)制定工藝規(guī),程、制定分析鑒定方法,再進(jìn)行中試放大,全面考察,工藝是否成熟,是否穩(wěn)定等。,第二章生物制藥基本技術(shù),1,基本制造方法,1、提取法

2、(Extraction,2、發(fā)酵法(Zymotechnics),3、化學(xué)合成(Chemical synthesize),組織培養(yǎng)法(Tissue culture),5、現(xiàn)代生物技術(shù)(Modern biotechnics):,Gene engineering,Enzyme engineering,Cell engineering,protein Engineering,Fermentation engineering,基本制造方法,2,生化制藥的六個(gè)階段,1.原料的選擇和預(yù)處理,2固液分離,3.提取:從原料中經(jīng)溶劑分離有效成分,制成粗品的工,藝過(guò)程,4.精制純化:粗制品經(jīng)鹽析、有機(jī)溶劑沉淀、吸附

3、、層析,透析、超離心、膜分離、結(jié)晶等步驟進(jìn)行精制的工藝過(guò)程。,5,成品加工/濃縮、干燥及保存、制劑:原料藥(精制品),經(jīng)精細(xì)加工制成片劑、針劑、凍干劑、粉劑等供臨床應(yīng)用的,各種劑型,生化制藥的六個(gè)階段,3,、原料選擇和預(yù)處理,(Raw Material Selecting and Pretreatment),原料選擇的基本準(zhǔn)則:,1、在大量的信息資料和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇目標(biāo)原料。,2、選擇有效成分含量高的新鮮材料;,3、來(lái)源豐富易得,4、制造工藝簡(jiǎn)單易行;,5、成本比較低;,6、原料的采集不破壞生態(tài)環(huán)境,選擇對(duì)環(huán)境友好的原材料資,源,防止生物入侵。,、原料選擇和預(yù)處理,4,預(yù)處理方法,1、

4、動(dòng)物組織先要剔除結(jié)締組織、脂肪組織等非活性部分,植物種子去殼除脂;微生物要進(jìn)行菌體與發(fā)酵液分離等,基本操作。便于貯存和運(yùn)輸。,2、冷凍法預(yù)處理:有些材料要冷凍保存或低溫保存,以便,抑制微生物和酶的作用。,3、有機(jī)溶劑除去部分水分:用丙酮或乙醇進(jìn)行脫水和脫脂,有利于貯存。,預(yù)處理方法,5,原料的粉碎:在提取前先將大塊的原料粉碎或,絞碎成適度的粒度,或?qū)⒓?xì)胞破碎,使胞內(nèi)活,性物質(zhì)充分釋放到溶液中,有利于提取或吸附,動(dòng)物臟器組織:常用絞肉機(jī)機(jī)械法粉碎;,植物肉質(zhì)組織:常用磨碎法;,微生物:常用自溶、冷熱交替、加砂研磨、,超聲、加壓等處理方法,原料的粉碎:在提取前先將大塊的原料粉碎或,6,1.機(jī)械法:

5、組織搗碎機(jī)、勻漿器、研缽、球磨機(jī)、萬(wàn)能粉碎,機(jī)、絞肉機(jī)、擊碎機(jī)、刨片機(jī)。,動(dòng)物組織多在冰凍狀態(tài)絞碎、溶漿。,2物理法,A、反復(fù)凍融法:把待破碎的樣品冷至-20-15,使,之凝固,然后緩慢的溶解,如此反復(fù)操作,大部分動(dòng)物性,細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的顆?？梢云扑?B、冷熱交替法:將材料投入沸水中,在90左右維持?jǐn)?shù),分鐘,立即置于冰浴中,使之迅速冷卻,絕大部分細(xì)胞被破,壞。此法多用于細(xì)菌或病毒中提取蛋白和核酸,1.機(jī)械法:組織搗碎機(jī)、勻漿器、研缽、球磨機(jī)、萬(wàn)能粉碎,7,C、超聲波處理法:多用于微生物材料,處理的效果與,樣品濃度、使用頻率有關(guān)。用大腸桿菌制備各種酶,時(shí),常用50100mg/L菌體濃度,在110K

6、c頻率下,處理1015min。操作時(shí)注意避免溶液中氣泡的存在,加壓破碎法:加氣壓或水壓,達(dá)0593432MPa,(210-350 kgf/cm2)的壓力時(shí),可使90%以上細(xì)胞被,壓碎。多用于微生物酶制劑的工業(yè)制備。,C、超聲波處理法:多用于微生物材料,處理的效果與,8,3.生化及化學(xué)法,A.自溶法:將新鮮的生物材料存放在一定的pH和適當(dāng)溫,度下,利用組織細(xì)胞中自身的酶系將細(xì)胞破壞,使細(xì)胞內(nèi)含,物釋放出來(lái)的方法。自溶的溫度,動(dòng)物材料在0-4,微生,物在室溫下。自溶時(shí),需加少量的防腐劑,甲苯、氯仿,以,防止外界細(xì)菌的污染。,*由于自溶時(shí)間較長(zhǎng),不易控制,故制造具有活性的核酸,和蛋白質(zhì)時(shí)比較少用。,

7、3.生化及化學(xué)法,9,B.溶菌酶處理法:溶菌酶是專一地破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,多用于微生物,對(duì)蝸牛酶、纖維酶及植物細(xì)胞也適用。如,用噬菌體感染大腸桿菌細(xì)胞制造DNA時(shí),采用pH8.0的,0.1 mol/L Tris-0.01mo/L EDTA制成2億/m的細(xì)胞懸液,然后加入100g-1mg的溶菌酶,在37C保溫10min,細(xì)菌胞壁即被破壞。,C.表面活性劑處理法:表面活性劑的分子中,兼有親脂,性和親水性基團(tuán),能降低水的界面張力,具有乳化、分散、,增溶作用。常用有:SDS、氯化十二烷基吡啶、去氧膽酸,鈉。,B.溶菌酶處理法:溶菌酶是專一地破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,10,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,1

8、1,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,12,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,13,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,14,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,15,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,16,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,17,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,18,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,19,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,20,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,21,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,22,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,23,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,24,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,25,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,2

9、6,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,27,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,28,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,29,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,30,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,31,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,32,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,33,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,34,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,35,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,36,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,37,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,38,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,39,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,40,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,41,生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)課件,42,