浙科版生物選修3第三節(jié)《動(dòng)物的克隆》教案
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1、2019最新浙科版生物選修 3第三節(jié)《 動(dòng)物的克隆》教案 【教學(xué)目標(biāo)】 知識(shí)與能力方面: 1 .簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞組織培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆。 2 .說出動(dòng)物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展歷程。 3 .描述細(xì)胞系及細(xì)胞株的含義。 4 .簡(jiǎn)述動(dòng)物的克隆培養(yǎng)法。 5 .描述動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度 說出動(dòng)物難以克隆的原因。 6 .簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念和核移植的程序。 7 .列舉動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞核移植的應(yīng)用和發(fā)展前景。 過程與方法方面: 通過對(duì)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行比較分析 ,提高比較、分析的能力。 情感態(tài)度、價(jià)值觀方面: 認(rèn)同細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)理論研究與技術(shù)開發(fā)之間的關(guān)系 ,體會(huì)S
2、(科學(xué))、T (技術(shù))、S (社會(huì))三者之間的相互關(guān)系。 【教學(xué)重點(diǎn)】 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 教教學(xué)難點(diǎn)】 動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備。 【教學(xué)方法】 講授法和自學(xué)相結(jié)合。 【教學(xué)課時(shí)】 2 課時(shí)。 【教學(xué)過程】 (導(dǎo)入新課) 植物組織培養(yǎng)可以進(jìn)行植物的無性繁殖 ,動(dòng)物能不能通過相同的操作來達(dá)到這個(gè)目的? 植物的體細(xì)胞雜交可以生產(chǎn)出雜種植株 ,動(dòng)物能不能通過相同的操作來達(dá)到這個(gè)目的? 都不能。因?yàn)閯?dòng)物體已經(jīng)高度分化的細(xì)胞的全能性很難誘導(dǎo)出來。 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (提出問題)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程是什么 ,主要應(yīng)用于哪些方面? (學(xué)生活動(dòng)))閱讀課本,觀看視頻,討論并
3、總結(jié)流程。 (總結(jié)歸納) 1 .發(fā)展歷史: 20世紀(jì)初,人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)向外突出形成的 ,還是由神經(jīng)細(xì)胞 周圍的其他細(xì)胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問題展開了激烈的爭(zhēng)論。 1907年,美國(guó)生物 學(xué)家哈里森(Harrison)從蝌蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織 ,把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培 養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周 ,并且從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅 解決了神經(jīng)纖維的起源問題,而且開創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。此后 ,在許多科學(xué)家的不懈努 力下,動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念: 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就
4、是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織 ,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適 宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖. 動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過程: 胰蛋白酶 加培養(yǎng)液 動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官 一單個(gè)細(xì)胞懸浮液------一原代培養(yǎng)一傳代培養(yǎng) 思考討論:在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,為什么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物組織進(jìn)行處理? 胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解 ,獲 得單個(gè)細(xì)胞。 有關(guān)概念: ? 原代培養(yǎng):從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。初次培養(yǎng)稱為原代細(xì)胞培 ? 傳代培養(yǎng):將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出 ,配制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個(gè)或兩個(gè)
5、以上 的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞系:可連續(xù)傳代的細(xì)胞。 細(xì)胞株:通過一定的選擇或純化方法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的 細(xì)胞稱為細(xì)胞株。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別: 細(xì)胞系泛指可傳代的細(xì)胞 ,其中的所有細(xì)胞都能傳代培養(yǎng) ,但是 卻不一定具有相同的特征,不能稱為細(xì)胞克??;而細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系 ,一個(gè)細(xì)胞 株就是一個(gè)細(xì)胞克隆。 3 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件: (1)無菌無毒的環(huán)境 (2)營(yíng)養(yǎng):水、無機(jī)鹽、葡糖糖、氨基酸、核甘酸、動(dòng)物血清等 (3)溫度和pH (4)氣體環(huán)境 4 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 : (1)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) :如病毒疫苗
6、、干擾素、單克隆抗體 (2)健康細(xì)胞培養(yǎng):培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植 (3)細(xì)胞的生理、藥理、病理研究 5 .植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 比較項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 原理 細(xì)胞的全能性 細(xì)胞增殖 培養(yǎng)基性質(zhì) 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基特有成分 蔗糖植物激素 葡萄糖動(dòng)物血清 培養(yǎng)結(jié)果 植物體 細(xì)胞株、細(xì)胞系 培養(yǎng)目的 快速繁殖、培育 無病毒植株 獲得細(xì)胞或細(xì)胞 分泌蛋白 思考: 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處? 主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有: 1)、
7、液體 培養(yǎng)基 2)、成分中有動(dòng)物血清等。 2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料? 因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛 ,分裂能力強(qiáng)。(注意:不是因?yàn)榧?xì)胞的全能 性, 因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般不能最終形成新的動(dòng)物個(gè)體 ,而只能獲得更多的動(dòng)物細(xì)胞。) 3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞? 成塊組織不利培養(yǎng) ,其中的細(xì)胞不能與培養(yǎng)液充分接觸 ,而且動(dòng)物細(xì)胞具有接觸抑制的特 性,分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)。 4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體? 不能 ,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多 ,不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體 二、動(dòng)物細(xì)胞培
8、養(yǎng)融合技術(shù) (提出問題)讓學(xué)生回顧有關(guān)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的基本知識(shí) , 教師設(shè)問:植物體細(xì)胞雜交 技術(shù)的過程是怎樣的? 先用酶去除兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁 , 使之成為原生質(zhì)體 , 再用物理或化學(xué)的方法 , 誘 導(dǎo)兩種原生質(zhì)體融合成雜種細(xì)胞 , 最后用植物組織培養(yǎng)的方法把其培育成新的植物體。 動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別? 動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁、無明顯的液泡、無質(zhì)體(葉綠體)。 既然動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞不同 , 那么動(dòng)物細(xì)胞是否可以融合或雜交?如果可以 , 兩著的 方法、過程相同嗎? 不同。 動(dòng)物細(xì)胞融合是怎么一回事? 動(dòng)物細(xì)胞融合指的是兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。
9、(學(xué)生活動(dòng))閱讀課文 , 總結(jié)動(dòng)物細(xì)胞融合的過程 , 方法和應(yīng)用。 (總結(jié)歸納) 1. 動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同? 相同 , 都是依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同 , 那么動(dòng)物細(xì)胞融合的具體過程是否 也和植物原生質(zhì)體融合的過程一樣呢? 基本一樣 , 但在方法和過程上稍有差別? 2. 動(dòng)物細(xì)胞融合過程 ( 1 )動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法 : 物理法:電刺激 化學(xué)法:聚乙二醇( PEG) 生物法:滅活的仙臺(tái)病毒(動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法) 為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑? 因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分
10、子和脂質(zhì)重新排布 , 細(xì)胞膜打開 , 細(xì)胞發(fā)生 融合。 不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎? 不能 , 因?yàn)椴粶缁畹牟《緯?huì)感染細(xì)胞 , 而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 ( 2)融合過程: 把兩個(gè)不同的動(dòng)物細(xì)胞放在一起 , 用滅活的病毒處理細(xì)胞后 , 它們就先質(zhì)融合 , 再核融 合 , 進(jìn)而形成雜交細(xì)胞 , 這個(gè)細(xì)胞有絲分裂后仍能形成兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞。 在實(shí)際操作中 , 要用到多個(gè)細(xì)胞在同一體系中誘導(dǎo) , 增加成功率 , 但誘導(dǎo)之后必須加以 篩選 , 以選出雜交細(xì)胞。 3. 動(dòng)物細(xì)胞融合的意義 ( 1 )打破生殖隔離 , 使遠(yuǎn)緣雜交成為可能;廣泛應(yīng)用;制備單克隆抗體。 大家都知道 , 物種
11、間由于存在生殖隔離使得有性雜交方法有局限性 , 而細(xì)胞融合技術(shù) 能打破生殖隔離 , 使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(要注意的是 , 雖然可以打破種間隔離 , 但因?yàn)閯?dòng)物 細(xì)胞一般不能通過培養(yǎng)發(fā)育成完整的個(gè)體 , 所以這個(gè)意義只是理論上的意義) 正因?yàn)槿绱?, 細(xì)胞融合技術(shù)已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)及生物新品種培育等 領(lǐng)域。 此技術(shù)還有一個(gè)十分重要的用途 , 就是制備單克隆抗體。 三、單克隆抗體 (提出問題)在弄清什么是單克隆抗體之前 , 我們先回顧一下抗體的基礎(chǔ)知識(shí) , 再來了解以 下兩個(gè)問題:傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?抗體是從何來的? (學(xué)生活動(dòng))閱讀課本 , 討論總結(jié)
12、。 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原 , 使動(dòng)物產(chǎn)生抗體 , 然后從動(dòng)物血 清中分離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低 , 而且制備的抗體特異性 差。 B 淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)? B 淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體 , 但每一個(gè) B 淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。 根據(jù) B 淋巴細(xì)胞的這個(gè)特點(diǎn) , 若要想獲得大量的單一抗體 , 如何做呢? 采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 我們必須用單個(gè) B 淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖 , 也就是通過克隆形成細(xì)胞群 , 這樣的細(xì)胞群 就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體 , 即單克隆抗體 , 這就是單克隆抗體的概 念。 可遺憾的是 , 在
13、體外培養(yǎng)的條件下 , 一個(gè) B 淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的 , 那么 , 米爾 斯坦和柯勒兩位科學(xué)家是怎樣解決這一問題的呢?想一想 , 能利用細(xì)胞融合技術(shù)來制備單克 隆抗體嗎?請(qǐng)閱讀課本單克隆抗體制備的文字及示意圖 , 再思考回答問題。 兩位科學(xué)家極富創(chuàng)造性的設(shè)想是什么? 如果把一種 B 淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合 , 所得到的融合 細(xì)胞既能大量增殖 , 又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。 如果把 B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞放在一起誘導(dǎo)時(shí) , 會(huì)有幾種融合方式(類型)? 三種 , 有 B 淋巴細(xì)胞間的融合、骨髓瘤細(xì)胞間的融合以及 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞 間的融合。
14、 那么 ,B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞間融合所形成的能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞是如何篩 選出來的? 先用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜種細(xì)胞 , 再進(jìn)行抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)就能得到雜交瘤 細(xì)胞。 科學(xué)家又是如何利用雜交瘤細(xì)胞來生產(chǎn)抗體的呢? 第一種方法是:將雜交瘤細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng) , 從細(xì)胞培養(yǎng)液中就能提取大量的 單克隆抗體;第二種方法是:把雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖 , 再?gòu)男∈蟾骨恢刑崛? 克隆抗體。 正是由于這兩位科學(xué)家的杰出貢獻(xiàn) , 他們于 1984 年雙雙獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。 單克隆抗體一般用于哪些方面? 診斷試劑;治療疾病和運(yùn)載藥物。 四、動(dòng)物的克隆繁殖 (提
15、出問題)對(duì)高等動(dòng)物能不能通過細(xì)胞培養(yǎng)的方法來進(jìn)行無性繁殖?不能。 (學(xué)生活動(dòng))閱讀課文,討論歸納。 (歸納總結(jié)) 1 .動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度。 全能干細(xì)胞一多能干細(xì)胞一單能干細(xì)胞一高度特化。在這個(gè)過程中 ,細(xì)胞分化的結(jié)果使 得細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和功能上高度特化。 2 .動(dòng)物難以克隆的根本原因 細(xì)胞分化使得細(xì)胞發(fā)生了基因的差異表達(dá) ,有的基因開放,有的基因關(guān)閉。分化成熟的體 細(xì)胞基因組中基因的活動(dòng)很不完全,不能像受精卵那樣發(fā)揮細(xì)胞的全能性。 但因?yàn)榧?xì)胞核還是具有個(gè)體發(fā)育的全套基因 ,所以可以利用核移植技術(shù)來誘導(dǎo)核基因全 能性的表達(dá)。 3 .細(xì)胞核移植和動(dòng)物的克隆繁殖 動(dòng)物核移
16、植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中 .使其 重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體 . 核移植技術(shù) (1)克隆羊培育過程 A羊取體細(xì)胞核 一 B羊取卵細(xì)胞去核一品紀(jì)細(xì)胞一早期胚胎一植入代孕羊子宮發(fā)育一幼體娩出一成體 (2)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景 遺傳疾病的治療、優(yōu)良品種的培育、物種的優(yōu)化、瀕危動(dòng)物的保存、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的擴(kuò) 群等。 【板書設(shè)計(jì)】 廠過程:原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng) (動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng): [ 應(yīng)用:生產(chǎn)產(chǎn)品、組織器官、進(jìn)行細(xì)胞生理病理研究 動(dòng)物的克隆 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較:培養(yǎng)基、培養(yǎng)結(jié)果、培養(yǎng)目的 「原理
17、:膜的流動(dòng)性 方法:物理法、化學(xué)法、生物法 ]動(dòng)物細(xì)胞融合Y 應(yīng)用:?jiǎn)慰寺】贵w 單克隆抗體的制備:已免疫的 B細(xì)胞一[融合 骨髓瘤細(xì)胞―I雜文/細(xì)胞一單克隆抗體 「動(dòng)物細(xì)胞的全能性:全能一多能一單能 動(dòng)物的克隆繁殖動(dòng) 動(dòng)物難以克隆的原因:細(xì)胞基因的差異表達(dá) k L細(xì)胞核移植:克隆羊多莉 【隨堂練習(xí)】 1 .為了使用于培養(yǎng)的動(dòng)物組織細(xì)胞分散開以便配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液 ,選取來的動(dòng) 物組織應(yīng)選用下列哪種物質(zhì)處理 () A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.鹽酸 D.胰脂肪酶 2 .下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是 () A.培養(yǎng)基成分不同 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行 C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng),而植物細(xì)胞不能 D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng),而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株 3 .在克隆多利羊的過程中 ,下列哪項(xiàng)技術(shù)沒有運(yùn)用到 ( ) A .細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B .細(xì)胞核移植 C .胚胎移植技術(shù) D .基因工程技術(shù) 【布置作業(yè)】完成學(xué)案和作業(yè)本上內(nèi)容。 【教學(xué)反思】本節(jié)課比較難上 , 所以一定要逐步進(jìn)行 , 循循善誘 , 一點(diǎn)一點(diǎn)引導(dǎo)學(xué)生討論 , 而 且要將動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)進(jìn)行比較 , 將動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交進(jìn)行比較 這樣才能使學(xué)生理解動(dòng)物細(xì)胞工程的不同之處。 6 / 6
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