《高中生物《第二章 第二節(jié) 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)》課件6 新人教版選修1》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高中生物《第二章 第二節(jié) 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)》課件6 新人教版選修1（29頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、專題2 微生物的培養(yǎng)與應用課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)專題2 微生物的培養(yǎng)與應用課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)兩個主要目的從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少這樣 的細菌專題2 微生物的培養(yǎng)與應用課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)兩個主要目的從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少這樣 的細菌CO（NH2）2 + H2OCO2+2NH3脲酶一 研究思路（一）篩選菌株耐高溫的DNA聚合酶一 研究思路（一）篩選菌株耐高溫的DNA聚合酶美國微生物學科布魯克 1966年發(fā)現(xiàn)水生耐熱細 菌Taq 分離到耐高溫的Taq DNA聚合

2、酶一 研究思路（一）篩選菌株自然界篩選：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境 中去尋找。一 研究思路（一）篩選菌株自然界篩選：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境 中去尋找。實驗室篩選：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包 括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止 其他微生物生長。一 研究思路（一）篩選菌株選擇培養(yǎng)基：一 研究思路（一）篩選菌株選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許特定種類的微生物 生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生 長的培養(yǎng)基。目的是從眾多微生物中分離 所需要的微生物。 一 研究思路（二）統(tǒng)計菌落數(shù)目1.顯微鏡直接計數(shù)：先將待測樣品制成懸液，然后取一定量的 懸液放在顯微鏡下進行計數(shù)

3、。根據(jù)在顯微 鏡下觀察到的微生物數(shù)目來計算出單位體 積內(nèi)的微生物總數(shù)一 研究思路（二）統(tǒng)計菌落數(shù)目1.顯微鏡直接計數(shù)：先將待測樣品制成懸液，然后取一定量的 懸液放在顯微鏡下進行計數(shù)。根據(jù)在顯微 鏡下觀察到的微生物數(shù)目來計算出單位體 積內(nèi)的微生物總數(shù)優(yōu)點：設(shè)備簡單、能觀察微生物的形態(tài)特征。缺點：不能區(qū)分死菌和活菌。一 研究思路（二）統(tǒng)計菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計數(shù)法: 應用： 統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生 長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一 個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能 推測出樣品中大約含有多少活菌。注意： 一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行記數(shù)。

4、一 研究思路（二）統(tǒng)計菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計數(shù)法: 第一位同學只涂布了一個平板，沒有設(shè)置 重復組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學考慮到設(shè)置重復組的問題，涂 布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù) 結(jié)果與另2個相差太遠，說明在操作過程 中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將 3個平板的計數(shù)值用來求平均值。一 研究思路（三）設(shè)置對照增強實驗的說服力和準確性。將待測樣品經(jīng)過一系列的稀釋，然后選擇 三個稀釋度的菌液均勻涂布在平板上，然 后培養(yǎng)。注意：為了結(jié)果接近真實值，可將同一稀 釋度菌液涂布到3個或3個以上的平板上， 經(jīng)培養(yǎng)，計算出菌落的平均數(shù)。一 研究思路（三）設(shè)置對照判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污

5、染：將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：對照培養(yǎng)基接種后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目。計算公式：每克樣品中的菌株數(shù) =（CV）M某同學在稀釋倍數(shù)為106 的培養(yǎng)基中測得 平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣 品中的菌落數(shù)是（涂布平板時所用稀釋液 的體積為0.1ml） A. 2.34108 B. 2.34109 C. 234 D. 23.4 每克樣品中的菌株數(shù) =（CV）M某同學在稀釋倍數(shù)為106 的培養(yǎng)基中測得 平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣 品中的菌落數(shù)是（涂布平板時所用稀釋液 的體積為0.1ml） A. 2.34108 B. 2.34109 C. 234 D.

6、23.4 每克樣品中的菌株數(shù) =（CV）M二 實驗設(shè)計1. 實驗設(shè)計的內(nèi)容包括：實驗方案、材料用具、實施步驟和時間 安排等。二 實驗設(shè)計2. 實驗流程：土壤取樣樣品系列稀釋涂布平板與培養(yǎng)觀察并記錄結(jié)果 菌落計數(shù)二 實驗設(shè)計2. 實驗流程：（1）土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層 土3 cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準 備好的信封中。（2）樣品的稀釋因為不同微生物在土壤中含量不同，其目 的是保證獲得菌落數(shù)在30300之間。 不同。二 實驗設(shè)計2. 實驗流程：（3）微生物的培養(yǎng)與觀察培養(yǎng)皿編號：104、105、106各編號三個 培養(yǎng)皿。每個培養(yǎng)皿加入牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 15ml。用

7、移液管按照編號分別加入不同濃度土壤稀釋 冷卻倒置放入3037攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)。觀察紀錄。液各0. 1ml，轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使土壤稀釋液與培養(yǎng)基混合均勻。三 操作提示1. 無菌操作2. 做好標記3. 規(guī)劃時間四 結(jié)果分析與評價五 課題延伸1. 對分離的菌種作進一步的鑒定，還需要 借助生物化學的方法。2. 在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合 成的脲酶將尿素分解成了氨 。氨會使培 養(yǎng)基的堿性增強，pH升高 。因此，我們 可以通過檢測培養(yǎng)基pH變化來判斷該化學 反應是否發(fā)生。五 課題延伸3. 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚 紅指示劑。培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高， 指示劑將變紅 ，說明該細菌

8、能夠分解尿素。練習1. 用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的 數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比 A. 比實際值高 B. 比實際值低 C. 和實際值一致 D. 比實際值可能高也可能低練習1. 用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的 數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比 A. 比實際值高 B. 比實際值低 C. 和實際值一致 D. 比實際值可能高也可能低練習2. 下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是 A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、瓊脂、水 C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、瓊脂、水 D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水練習2. 下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是 A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、瓊脂、水 C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、瓊脂、水 D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水