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1、專題重點專題難點培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識培養(yǎng)基對微生物的選擇作用纖維素酶的種類及作用無菌技術(shù)的操作微生物的數(shù)量測定從土壤中分離出分解纖維素的微生物專題 2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題 1 微生物的實驗室培養(yǎng)培養(yǎng)基1概念營養(yǎng)物質(zhì)人們按照微生物對_的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2營養(yǎng)構(gòu)成碳源特殊營養(yǎng)物質(zhì)(1)一般都含有水、_、氮源、無機鹽。(2)還要滿足微生物生長對 pH、_以及 O2的要求。3分類(1)液體培養(yǎng)基：配制成的液體狀態(tài)的基質(zhì)。(2)固體培養(yǎng)基：配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)，在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑，如瓊脂，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。無菌技術(shù)1消毒溫和巴氏(1)特點：使用較為_的物理或化學(xué)方法，僅殺

2、死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。(2)常用方法：煮沸消毒法、_消毒法、化學(xué)藥劑消毒法。2滅菌強烈灼燒(1)特點：使用_的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物。(2)常用方法：_滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)1配制培養(yǎng)基稱量混合溶化調(diào) pH分裝包扎2滅菌加水加培養(yǎng)基密封排冷氣維持壓力取出倒平板(或擱置斜面)3接種稀釋涂布平板(1)接種過程：洗凈雙手點燃酒精燈接種貼標簽。(2)接種工具：包括_、涂布器。接種環(huán)(3)接種方法：平板劃線法、_法。(4)注意事項：整個操作過程要在_旁完成。4培養(yǎng)酒精燈火焰接種后的培養(yǎng)皿放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。菌種保藏1臨時保藏固體斜面4 (1

3、)操作：采用_培養(yǎng)基，菌落長成后，放入_冰箱中保藏，以后每 36 個月，轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。(2)缺點：保存時間不長，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。2長期保存法甘油管藏采用_法，放入20 的冷凍箱中保存。營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)合成生物體的細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機化合物：CO2、NaHCO3 等。有機化合物：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽。有機化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等微生物的營養(yǎng)要素1微生物的營養(yǎng)物質(zhì)及功能營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源生長因子生

4、長必不可少的微量有機物酶和核酸的組成成分牛肉膏、酵母膏、動物組織提取液等無機鹽礦物質(zhì)參與酶的組成；調(diào)節(jié)滲透壓水作為溶劑和運輸?shù)慕橘|(zhì)；參與生化反應(yīng)備注：(1)不同種類的微生物，對碳源的需要差別較大。(2)微生物最常利用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。(3)對異養(yǎng)微生物來說，含 C、H、O、N 的化合物既是碳源又是氮源和能量來源。(4)微生物之所以需要補充生長因子，往往是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。營養(yǎng)型碳源氮源生長因子舉例自養(yǎng)型微生物CO2、NaHCO3N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等一般不需要硝化細菌異養(yǎng)型微生物糖類、脂肪酸等銨鹽、硝酸鹽、蛋白胨等有些種

5、類需要乳酸菌2.不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑、如瓊脂觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定培養(yǎng)基的種類劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途用途選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離特定微生物鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品

6、中是否含有大腸桿菌續(xù)表：關(guān)于微生物培養(yǎng)實驗的注意事項1配制培養(yǎng)基時，按照每個培養(yǎng)基消耗 1520 ml 的量來估算總用量。2滅菌后，培養(yǎng)基冷卻到 55 后應(yīng)及時進行倒平板操作。如果不能及時操作，需要將培養(yǎng)基放到 55 左右的電熱箱中保溫，以防止瓊脂凝固。第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束后灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在其他微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種，使每次劃線的菌種來自上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者3平板劃線操作時每次灼燒的目的如下表：4.實驗后，所有用過的培養(yǎng)基、培養(yǎng)液等都需要統(tǒng)一進行高壓蒸汽滅菌后再丟棄，否則將會造成環(huán)境污染。微

7、生物所需的營養(yǎng)要素)【例 1】下列關(guān)于微生物營養(yǎng)的說法，正確的是(A同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的無機物僅提供無機鹽D無機氮源也能提供能量【名師點撥】：不同的微生物，所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對微生物的具體情況分析。對于 A、B 選項，它的表達是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時是氮源，如 NH4HCO3；有的碳源同時是能源，如葡萄糖；有的碳源同時是氮源和能源，如蛋白胨。對于 C 選項，除水以外的無機物種類繁多，功能也多樣。如二氧化碳可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHCO3 可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機鹽；而 NaCl 則只能提供無機

8、鹽。對于 D 選項，無機氮源提供能量的情況還是存在的，如 NH3 可為硝化細菌提供能量和氮源?！敬鸢浮浚篋【配對練習(xí) 1】下列有關(guān)碳源的敘述不正確的是()A碳源主要用于構(gòu)成微生物的細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物B某些碳源可以作為微生物的主要能源物質(zhì)C蛋白質(zhì)一定不能做碳源D不同種類的微生物的碳源可能不同解析：蛋白質(zhì)也能做碳源。答案：C培養(yǎng)基的種類【例 2】下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是()A培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個細菌【名師點撥】：培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖

9、提供營養(yǎng)的基質(zhì)。培養(yǎng)基根據(jù)物理形態(tài)分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基；根據(jù)實驗?zāi)康牟煌梢苑譃槠胀ㄅ囵B(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基，因此按照不同的分類標準，種類也不同。固體培養(yǎng)基是因為加入了凝固劑瓊脂造成的，不是因為水的多少。微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個菌落，單個細菌用肉眼看不到?！敬鸢浮浚篈【配對練習(xí) 2】關(guān)于配制培養(yǎng)基的敘述中，正確的是()A制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B加入青霉素可得到放線菌C培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源D發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基解析：固體培養(yǎng)基需加入凝固劑，瓊脂是常用的，但不是唯一的；青霉素可抑制細菌和放線菌的生長；發(fā)酵工程一般用液體培養(yǎng)基；自生固氮菌能夠?qū)⒖諝庵械牡€原成氨，故培養(yǎng)基配制時不需加氮源。答案：C微生物培養(yǎng)的要點)【例 3】下列操作與滅菌無關(guān)的是(A接種前用火焰灼燒接種環(huán)B接種前用酒精擦拭雙手C接種在酒精燈火焰旁完成D將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)【名師點撥】：無菌操作是微生物培養(yǎng)的必要前提，學(xué)生必須樹立“無菌概念”。前三項都是無菌操作的規(guī)范要求，第四項將平板倒置(為了防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基中，造成污染)，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)與滅菌無關(guān)。【答案】：D【配對練習(xí) 3】判斷以下部位不含有微生物的是()DA洗干凈的臉上B洗完澡后的皮膚C刷完牙后的口腔D灼燒之后的接種環(huán)