《2020屆高考生物藝考生大二輪總復(fù)習(xí) 上篇 專題九 生物技術(shù)與工程 第14講 生物技術(shù) 高頻命題點(diǎn)2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用教學(xué)案》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2020屆高考生物藝考生大二輪總復(fù)習(xí) 上篇 專題九 生物技術(shù)與工程 第14講 生物技術(shù) 高頻命題點(diǎn)2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用教學(xué)案（10頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、高頻命題點(diǎn)2　傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 真題領(lǐng)航——目標(biāo)方向?qū)敫呖? 1．(2019·江蘇卷，9)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是(　　) A．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵 B．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵 C．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反 D．毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵 解析：B　[本題借助對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，考查對(duì)發(fā)酵技術(shù)的綜合應(yīng)用能力；通過對(duì)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用分析，體現(xiàn)了科學(xué)探究素養(yǎng)中的技術(shù)評(píng)價(jià)與結(jié)果分析要素。乳酸菌為嚴(yán)格厭氧型細(xì)菌，通氣會(huì)造成乳酸菌死亡，A錯(cuò)誤；家庭釀制葡萄酒利用的主要

2、是附著在葡萄果皮上的野生酵母菌，果醋發(fā)酵需要的醋酸桿菌常從變酸酒的表面菌膜中獲取，腐乳的制作主要利用空氣中的毛霉孢子，三者都不是純種發(fā)酵，B正確；果醋發(fā)酵中隨著醋酸的產(chǎn)生，pH逐漸降低，果酒發(fā)酵中會(huì)產(chǎn)生較多的CO2，使發(fā)酵液pH降低，C錯(cuò)誤；毛霉產(chǎn)生的酶有蛋白酶和脂肪酶等，但毛霉不產(chǎn)生纖維素酶，D錯(cuò)誤] 2．(2017·全國(guó)Ⅱ卷，37)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}： (1)該實(shí)驗(yàn)的自變量是_________

3、___________________、________________。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是________________。 (3)如果在實(shí)驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間；若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是________________。 (4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_______________，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開_______________。 解析：(1)該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種、發(fā)酵時(shí)間。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的

4、發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌。(3)如果在實(shí)驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間；若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間，觀測(cè)發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間。 (4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗模巨D(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视汀? 答案：(1)菌種　發(fā)酵時(shí)間　(2)好氧菌 (3)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間，觀測(cè)發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間 (4)氨基酸和肽　脂肪酸和甘油 知識(shí)拓展——培養(yǎng)學(xué)生文字表達(dá)能力 1．傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)除抑制雜菌繁殖外，還

5、要控制哪些發(fā)酵條件？ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ 答案：發(fā)酵的溫度、pH、O2濃度及發(fā)酵時(shí)間。 2．腐乳制作中鹽、酒各種香辛料的共同作用是什么？ ________________________________________________________________________ ________________

6、________________________________________________________ 答案：調(diào)味作用，同時(shí)也有殺菌防腐作用。 3．在制作泡菜時(shí)，為什么要測(cè)定亞硝酸鹽的含量？ 答案：測(cè)定亞硝酸鹽含量的目的是掌握取食泡菜的最佳時(shí)間。 核心整合——掌握必備生物知識(shí) 1．理清3種傳統(tǒng)食品的發(fā)酵技術(shù)(填表) 食品 菌種 呼吸類型 原理 溫度 果酒 酵母菌 兼性厭氧 無氧呼吸產(chǎn)生酒精 ①18～25℃ 果醋 醋酸菌 ②有氧 糖(酒精)→③醋酸 30～35 ℃ 腐乳 ④毛霉等 有氧 蛋白酶、脂肪酶水解 蛋白質(zhì)、脂肪 15～18 ℃

7、 2.微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用(填表) 項(xiàng)目 果酒和果醋的制作 腐乳制作 泡菜制作 原理 a.酵母菌在⑤無氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇；b.醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為⑥醋酸 毛霉將蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機(jī)物 乳酸菌將糖轉(zhuǎn)化為⑦乳酸 實(shí)驗(yàn) 流程 讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制 操作注 意事項(xiàng) a.材料選擇與處理； b.防止發(fā)酵液污染，控制好發(fā)酵條件 a.材料用量；b.防止雜菌污染；c.控制溫度及酒精含量 a.泡菜壇的選擇；b.腌制條件(無氧) 答案：①18～25　②有氧?、鄞姿帷、苊埂、轃o氧 ⑥醋酸?、呷樗? 　把握控

8、制雜菌的“三大措施” (1)通過發(fā)酵條件控制雜菌。 a．無氧發(fā)酵時(shí)的無氧環(huán)境可以抑制好氧菌。 b．酒精發(fā)酵形成的酸性環(huán)境抑制雜菌繁殖。 (2)利用鹽控制雜菌：如腐乳的制作。 (3)利用酒精控制雜菌：如果酒、腐乳的制作。 考向立意——突顯科學(xué)思維和科學(xué)探究能力的考查 考向　以傳統(tǒng)發(fā)酵的應(yīng)用為載體，考查學(xué)生科學(xué)探究的能力 1．蘋果醋是以蘋果汁為原料發(fā)酵而成的，回答下列問題： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的________中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過程③在酵母菌細(xì)胞

9、的________中進(jìn)行，與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度________(填“低于”或“高于”)第二階段。 (4)醋酸桿菌屬于________核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中______(填“含有”或“不含有”)線粒體。 解析：(1)圖示中的過程①和②分別表示無氧呼吸的第一、第二階段，其場(chǎng)所均為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)；橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇發(fā)生化學(xué)

10、反應(yīng)，變成灰綠色，過程③表示有氧呼吸的第二、第三階段，其場(chǎng)所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜，即在酵母菌細(xì)胞的線粒體中進(jìn)行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸桿菌是一種好氧菌，在O2充足的條件下才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng)，因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，需要在有氧條件下才能完成。(3)第一階段即果酒的制作，所控制的溫度范圍是18～25 ℃，第二階段即果醋的制作所控制的溫度范圍是30～35 ℃，所以第一階段的溫度低于第二階段。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器。 答案：(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)　重鉻酸鉀　線粒體　快　(2)有氧　(3)低于　(4

11、)原　不含有 2．如圖為腐乳制作的流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問題： (1)傳統(tǒng)的制作過程中，豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉，其菌種來自______________。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上，這樣可以避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 (2)腐乳制作的原理主要利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的______________，通過發(fā)酵使豆腐中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類增加，且更易于消化和吸收。 (3)用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要________。加入鹵湯后，要用膠條密封，密封時(shí)最好將瓶口通過酒精燈火焰，防止________。 (4)配置鹵湯所加的香辛料的作用是調(diào)制腐乳的

12、風(fēng)味和防腐殺菌；若你完成了腐乳制作，可以從________等方面評(píng)價(jià)腐乳的質(zhì)量。 (5)吃腐乳時(shí)往往會(huì)發(fā)現(xiàn)有一層無毒致密的“皮”，該“皮”是由________形成的。 (6)腐乳含嘌呤量普遍較高，痛風(fēng)、腎病患者及消化道潰瘍患者，宜少吃或不吃，以免加重病情；腐乳中的嘌呤產(chǎn)生可能來自________代謝產(chǎn)物。 解析：(1)傳統(tǒng)的制作過程中，豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉來自空氣中的毛霉孢子?，F(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上，可以避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。(2)腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶

13、將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。使豆腐中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類增加，且更易于消化和吸收。(3)用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒，加入鹵湯后，封瓶時(shí)將瓶口通過酒精燈火焰的目的是防止瓶口被污染。(4)完成了腐乳制作?？梢詮纳珴?、口味、塊形等方面評(píng)價(jià)腐乳的質(zhì)量。(5)在制作腐乳過程中，在腐乳表面的皮實(shí)際上由毛霉的匍匐菌絲形成的。(6)嘌呤是核酸的組成成分，因此腐乳中產(chǎn)生的嘌呤可能來自核酸的代謝產(chǎn)物。 答案：(1)空氣中的毛霉孢子　(2)蛋白酶、脂肪酶等酶類　(3)用沸水消毒　瓶口被污染　(4)色澤、口味、塊形　(5)毛霉的匍匐菌絲　(6)核酸 一、選擇題 1．農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑

14、在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用會(huì)污染土壤。為修復(fù)被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細(xì)菌。已知該除草劑(含氮有機(jī)物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。請(qǐng)分析回答： (1)微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是________________________________________________________________________。 (2)在選育過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一________的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍________的大小，可篩選出高效的目的菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如上圖顯示的A～E五種菌株中

15、，________是最理想菌株。 (3)若想對(duì)初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可采用的接種方法是________。將1 mL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個(gè)平板上分別接入0.1 mL稀釋液，經(jīng)過適當(dāng)培養(yǎng)后，6個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5，空白對(duì)照組的平板上沒有菌落，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為________個(gè)。實(shí)際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計(jì)所得的這一數(shù)值要大，因?yàn)開__________________________________________ _________________________________________

16、_______________________________。 (4)科研人員用放射線處理該細(xì)菌，獲得突變株A和B，然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示： 接種的菌種 一般培養(yǎng)基 實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果 A 不生長(zhǎng) 添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng) B 不生長(zhǎng) 添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng) A＋B 能生長(zhǎng) 不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙，能生長(zhǎng) 請(qǐng)分析突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因。 ________________________________________________________________________ ________________

17、________________________________________________________。 解析：(1)微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染。(2)已知該除草劑為含氮有機(jī)物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明；降解該除草劑的細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中的該除草劑，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈?？梢?，在選育能降解該除草劑的細(xì)菌的過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍透明圈的大小，可篩選出高效的目的菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖顯示的A～E五種菌株中，E菌落周圍的透明圈最大，因此E是最理想菌株。(3)對(duì)初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可采用稀釋涂布平板

18、法進(jìn)行接種。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此應(yīng)選擇稀釋度為10倍的、分別接入0.1 mL稀釋液的3個(gè)平板上的菌落數(shù)(分別為59、57、58)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為[(59＋57＋58)÷3]×10÷(0.1×10－3)＝5.8×106(個(gè))。由于統(tǒng)計(jì)結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以實(shí)際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計(jì)所得的這一數(shù)值要大。(4)分析表中信息可知：突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，據(jù)此可推知，突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是：突

19、變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供。 答案：(1)防止雜菌污染(無菌操作)　(2)氮源　透明圈　E　(3)稀釋涂布平板法　5.8×106　統(tǒng)計(jì)結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落　(4)突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供 2．為探究大腸桿菌CV101菌株和CV103菌株的營(yíng)養(yǎng)需求，某團(tuán)隊(duì)在營(yíng)養(yǎng)成分相同的含醋酸鹽的培養(yǎng)液中分別接種CV101菌株和CV103菌株，并置于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，每隔一段時(shí)間統(tǒng)計(jì)兩種菌株的生長(zhǎng)狀況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下圖所

20、示，回答下列問題： (1)醋酸鹽培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上來看屬于________培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基主要應(yīng)用是________；從功能上來看屬于________培養(yǎng)基； (2)由圖可知：更適應(yīng)醋酸鹽培養(yǎng)基環(huán)境的菌株是________，其依據(jù)是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________， 原因是____________________________

21、_________________________________________。 (3)若要統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)30小時(shí)后醋酸鹽培養(yǎng)基中的CV101活菌數(shù)，可采用________法；為保證能在固體培養(yǎng)基上獲得單個(gè)菌落，接種前，需取1 mL該菌液進(jìn)行________處理。 解析：(1)根據(jù)題干信息分析，某團(tuán)隊(duì)在營(yíng)養(yǎng)成分相同的含醋酸鹽的培養(yǎng)液中分別接種CV101菌株和CV103菌株，因此該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，有利于菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)；從功能上看其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)據(jù)圖分析可知，在一定時(shí)間內(nèi)，CV101菌株在該培養(yǎng)基中數(shù)量持續(xù)增多，而CV103菌株的數(shù)量減少且維持在較低水平，說明CV101菌株能以醋酸

22、鹽為碳源，因此CV101菌株是更適應(yīng)醋酸鹽培養(yǎng)基環(huán)境的菌株。(3)常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中后者可以用于菌種的計(jì)數(shù)；為保證能在固體培養(yǎng)基上獲得單個(gè)菌落，接種前，需取1 mL該菌液進(jìn)行梯度稀釋處理。 答案：(1)液體　擴(kuò)大培養(yǎng)　選擇　(2)CV101菌株　在一定時(shí)間內(nèi)CV101菌株在該培養(yǎng)基中數(shù)量持續(xù)增多，而CV103菌株的數(shù)量減少且維持在較低水平　CV101菌株能以醋酸鹽為碳源　(3)稀釋涂布平板　梯度稀釋 3．某地盛產(chǎn)葡萄、柿子等水果，但因銷路不暢，造成水果嚴(yán)重積壓，腐爛變質(zhì)。某駐村扶貧支教老師為解決葡萄、柿子等資源嚴(yán)重?fù)p耗問題，組織學(xué)生設(shè)計(jì)了如圖1所示裝置，

23、試圖探究以柿子為原料制作柿子酒、柿子醋。請(qǐng)回答下列問題： (1)酵母菌的分離和純化： ①用清水沖洗葡萄1～2遍除去污物，用榨汁機(jī)榨取葡萄汁后，將其裝入甲瓶中。葡萄汁的質(zhì)量和環(huán)境溫度等方面滿足需求，在________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物則被抑制。應(yīng)注意的相關(guān)操作是_____________________________________。 ②若要通過酵母菌的單菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)在培養(yǎng)液中加入________，采用________法分離和計(jì)數(shù)。________(填“能”或“不能”)用這種培養(yǎng)基對(duì)酵母菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。 (2)柿子酒、柿子醋的制備： ①若在甲

24、瓶?jī)?nèi)裝入打碎的柿子漿，加入________酶，能較好的提升柿子酒的清澈度。 ②當(dāng)酒精發(fā)酵基本完成時(shí)，將果汁的酒精濃度稀釋至5～6度，然后導(dǎo)入乙瓶(裝有5%～10%的醋酸菌液)，攪勻，將溫度保持在30 ℃，進(jìn)行醋酸靜置發(fā)酵。該過程中，對(duì)乙瓶應(yīng)進(jìn)行的操作是__________________________________________。 ③為探究不同醋酸菌接種量(5%、10%、15%)與醋酸發(fā)酵的關(guān)系，進(jìn)行了相應(yīng)實(shí)驗(yàn)，獲得圖2所示實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。在接種后70 h，接種量為15%的醋酸產(chǎn)量最少的主要原因是__________________________________________。 答案

25、：(1)①缺氧、呈酸性　夾住a、b，關(guān)閉c、e，間隔一段時(shí)間應(yīng)打開b處夾子排出CO2?、诃傊∠♂屚坎计桨濉〔荒堋?2)①纖維素酶和果膠　②打開夾子d，通入無菌的空氣?、鄞姿峋L(zhǎng)繁殖消耗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較多，產(chǎn)生的代謝廢物積累太多 4．(2019·高三北京海淀模擬)某校課外興趣小組對(duì)某種品牌的酸奶中乳酸菌的數(shù)量進(jìn)行了測(cè)定。取6支滅菌的試管，分別加入9 mL滅菌的生理鹽水，編號(hào)為B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1 mL酸奶樣液加入試管B1中，混合均勻；然后另取一支吸管從B1中吸取1 mL溶液，加入B2中，依次類推，最后從試管B6中取0.1 mL樣液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，涂布三個(gè)平板，其菌落數(shù)分別為2

26、51、265、276個(gè)。請(qǐng)回答下列問題： (1)乳酸是乳酸菌________呼吸的產(chǎn)物，進(jìn)行的場(chǎng)所是________________________。 (2)制備乳酸菌的培養(yǎng)基過程中，對(duì)培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是________。平板冷凝后，倒置的目的是______________________________________________。 (3)該興趣小組對(duì)乳酸菌接種所采用的方法是________。根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)，可推測(cè)原酸奶中乳酸菌的濃度為________個(gè)/mL，該方法測(cè)定的乳酸菌的含量和實(shí)際值相比，一般________(填“偏大”或“偏小”)。 (4)為了使測(cè)量的結(jié)果

27、更加準(zhǔn)確，對(duì)照組的設(shè)置應(yīng)該是 __________________________________________________________________________________。 解析：(1)乳酸是乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸的產(chǎn)物，無氧呼吸的場(chǎng)所是乳酸菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。(2)制備培養(yǎng)基過程中，對(duì)培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是干熱滅菌法，對(duì)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。平板冷凝后，將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染，同時(shí)也可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)。(3)根據(jù)題干的操作步驟可推知，得到的是101、102、103、104、105、106倍的稀釋液。

28、從試管B6中取0.1 mL樣液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，三個(gè)平板中菌落數(shù)分別為251、265、276個(gè)，可推測(cè)原酸奶中乳酸菌的濃度為(251＋265＋276)÷3×10×106＝2.64×109個(gè)/mL。稀釋涂布平板法測(cè)定活菌數(shù)目時(shí)，因?yàn)橄噜彽募?xì)菌可能形成一個(gè)菌落，因此測(cè)定值可能比實(shí)際值小。(4)為了使測(cè)量的結(jié)果更加準(zhǔn)確，需要另增設(shè)一組培養(yǎng)基，接種等量無菌水，主要是檢測(cè)對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器具滅菌是否徹底和操作是否嚴(yán)格按無菌操作要求進(jìn)行。 答案：(1)無氧　細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)　(2)干熱滅菌法　防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基，也可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)　(3)稀釋涂布平板法　2.64×109　偏小　(4)

29、另增設(shè)一組培養(yǎng)基，接種等量無菌水，其他操作均相同 5．土壤是微生物的天然培養(yǎng)基。回答下列問題： (1)按照如表所示配方配制1 000 mL牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本流程：稱量→________________________。該培養(yǎng)基中能為微生物提供維生素的是____________________________。 牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方 牛肉膏 5.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 5.0 g 瓊脂 20.0 g 將上述物質(zhì)溶解后，添加自來水，定容至1 000 mL (2)從土壤中分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程中，首先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，目的是______

30、__________________________________________________________________；其次進(jìn)行梯度稀釋，目的在于鑒定培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)在________之間；然后進(jìn)行鑒定培養(yǎng)，____________________________的菌落是目的菌形成的。 (3)如圖所示為某同學(xué)統(tǒng)計(jì)某培養(yǎng)液中纖維素分解菌數(shù)目的流程及記錄結(jié)果。據(jù)圖分析，該樣液中微生物濃度大約為________個(gè)/mL。若各操作環(huán)節(jié)均正確，該同學(xué)認(rèn)為該培養(yǎng)液中含有多種微生物，則該同學(xué)做出如此判斷的理由是________________________________。 解析

31、：(1)由于該配方是按照1 000 mL的量制定的，所以按照如表配方配制1 000 mL牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本流程是稱量→溶化→(調(diào)pH→)滅菌→倒平板，無需進(jìn)行計(jì)算環(huán)節(jié)。牛肉膏和蛋白胨都能為微生物的生長(zhǎng)提供維生素。(2)選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，以確保能從樣品中分離到所需的微生物。利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣液中微生物數(shù)量時(shí)，為了使統(tǒng)計(jì)結(jié)果更加準(zhǔn)確，培養(yǎng)皿中菌落數(shù)應(yīng)在30～300之間。鑒定纖維素分解菌時(shí)，應(yīng)使用剛果紅染液，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，一旦纖維素被分解，纖維素分解菌形成的菌落周圍就會(huì)出現(xiàn)透明圈。(3)根據(jù)公式可計(jì)算出該樣液中微生物濃度大約為8.0×107個(gè)/mL。各操作環(huán)節(jié)均正確，由于培養(yǎng)基中形成了多種不同類型的菌落，所以判斷樣液中有多種微生物。 答案： (1)溶化→(調(diào)pH→)滅菌→倒平板　牛肉膏和蛋白胨　(2)增加纖維素分解菌的濃度，以確保能從樣品中分離到所需的微生物　30～300　產(chǎn)生透明圈 (3)8.0×107　培養(yǎng)皿中有多種不同類型的菌落 - 10 -