(新課標)2019版高考生物一輪復習 專題28 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應用講學案
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1、 專題28 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應用 考綱解讀 主題 考點 內(nèi)容 要求 高考示例 ??碱}型 預測熱度 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的 應用 1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 運用發(fā)酵加工食品的基本方法 實驗與 探究 2017江蘇單科,10,2分 2017課標全國 Ⅱ,37,15分 選擇題 非選擇題 ★★☆ 測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì) 2 微生物的培養(yǎng)和應用 微生物的分離和培養(yǎng) 實驗與 探究 2017課標全國 Ⅰ,37,15分 2017江蘇單科,31,7分 2016課標全國 Ⅰ,39,15分 非選擇題 ★★★ 某種微生物數(shù)量的測定 培養(yǎng)基
2、對微生物的選擇作用 利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應用 分析解讀 本專題內(nèi)容在生物技術(shù)實踐中占有比較重要的地位,與其他技術(shù)聯(lián)系密切。近幾年的高考命題熱點包括果酒和腐乳的制作技術(shù)、微生物的實驗室培養(yǎng)技術(shù)、特定微生物數(shù)量的測定方法、培養(yǎng)基對微生物的選擇作用等。復習時應注意對各種技術(shù)的系統(tǒng)理解和橫向?qū)Ρ?可將果酒、果醋與泡菜的制作、特定微生物的分離純化等實踐操作構(gòu)建過程模型,以加深對相關(guān)技術(shù)的記憶和理解。 命題探究 答案 (1)脲酶 分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物 為細胞生命活動提供能量,為其他有機物的 合成提供原料 (2
3、)尿素 其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用 (3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 命題技巧 1.本題將教材中有關(guān)微生物培養(yǎng)和利用的基礎(chǔ)知識巧妙組合和應用,突出了對主干知識的考查,重視生物基礎(chǔ)知識和技能的應用 2.設(shè)問注重基礎(chǔ),指向明晰,考查注重能力,立意精準,貼近高中生學習實際 核心考點 1.微生物的分離和培養(yǎng) 2.培養(yǎng)基對微生物的選擇利用及細胞代謝等 易混易錯 1.不能正確區(qū)別不同微生物的碳源和氮源 2.不能全面掌握葡萄糖和無機鹽在微生物培養(yǎng)中的作用 思路分析 (1)能分
4、解尿素的細菌體內(nèi)應含有脲酶;能分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物,不能利用CO2來合成有機物,可用葡萄糖等有機物作 為碳源。進入細菌體內(nèi)的葡萄糖既能為細胞生命活動提供能量,又可為其他有機物的合成提供原料 (2)篩選可分解尿素的細菌,應選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基,而能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,其他兩組不能起到篩選作用 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,這兩種物質(zhì)既可為細菌生長提供無機營養(yǎng),又可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH相對穩(wěn)定 核心素養(yǎng) 1.生命觀念:微生物的生命活動離不開物質(zhì)供給,而不同生物的差異性體現(xiàn)了生物生命活動的多
5、樣性 2.理性思維:理解氮源和無機鹽在微生物培養(yǎng)中的作用,并作出應用性判斷 五年高考 考點一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 1.(2017江蘇單科,10,2分)下列關(guān)于“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是( ) A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味 B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D.成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生 答案 B 2.(2016江蘇單科,7,2分)下列關(guān)于中學“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是( ) A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,利于毛霉生長 B.加料酒主要是為了滅菌,避免腐敗變質(zhì) C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸
6、桿菌 D.實驗室制作的腐乳不宜直接食用 答案 D 3.(2017課標全國Ⅱ,37,15分)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵,并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?;卮鹣铝袉栴}: (1)該實驗的自變量是 、 。? (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是 。? (3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系,則無法確定發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是
7、 。? (4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)椤 ?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)椤 ? 答案 (1)菌種 發(fā)酵時間 (2)好氧菌 (3)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間 (4)氨基酸和肽 脂肪酸和甘油 4.(2016課標全國Ⅱ,39,15分)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的。回答下列問題: (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段,在酵母菌細胞 的 中進行,其產(chǎn)物乙醇與 試劑反應呈現(xiàn)灰
8、綠色,這一反應可用于乙醇的檢驗;過程③在酵母菌細胞的 中進行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增殖速度 。? (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在 條件下才能完成。? (3)在生產(chǎn)過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度 (填“低于”或“高于”)第二階段的。? (4)醋酸桿菌屬于 核生物,其細胞結(jié)構(gòu)中 (填“含有”或“不含有”)線粒體。? 答案 (1)細胞質(zhì)基質(zhì) 重鉻酸鉀 線粒體 快 (2)有氧 (3)低于 (4)原 不含有 5.(201
9、6天津理綜,10,12分)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味,其生產(chǎn)工藝流程如下圖。 (1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應溫度,這是因為酶 。? (2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高 的數(shù)量,有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。? (3)在醋酸發(fā)酵階段,獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。 ①發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點是 ,由此推測,影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是
10、 。? ②乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸 中 層的醋醅有利于乳酸菌繁殖,積累乳酸。? ③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變,加劇了不同種類乳酸菌的 ,淘汰了部分乳酸菌種類。? 答案 (12分) (1)在最適溫度條件下催化能力最強 (2)酵母菌 (3)①先快速增長后趨于穩(wěn)定 氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH ②顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動,或下) ③種間競爭(或競爭) 教師用書專用(6—10) 6.(2015江蘇單科,24,3分)如圖為蘋果酒的發(fā)酵裝
11、置示意圖,下列敘述錯誤的是(多選)( ) A.發(fā)酵過程中酒精的產(chǎn)生速率越來越快 B.集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2 C.發(fā)酵過程中酵母種群呈“J”型增長 D.若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜,最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣 答案 ABC 7.(2015江蘇單科,17,2分)關(guān)于“腐乳的制作”實驗,下列敘述錯誤的是( ) A.將腐乳坯堆積起來會導致堆內(nèi)溫度升高,影響毛霉生長 B.腐乳坯若被細菌污染,則腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物 C.勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長 D.裝壇階段加入料酒,可有效防止雜菌污染 答案 C 8.(2013江蘇單科,14,2分)某研究性學習小組
12、以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。下列相關(guān)敘述正確的是( ) A.酵母菌是嗜溫菌,所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度較高 B.先供氧進行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵 C.與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好 D.適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖 答案 D 9.(2016浙江自選,17,10分)某研究小組以紫葡萄為原料制作葡萄酒的基本流程和裝置示意圖如下。 請回答: (1)制作葡萄漿前,對葡萄進行清洗和用 色的高錳酸鉀溶液浸泡。制作酵母懸液時,在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖,待酵母懸液中出現(xiàn) 即可。? (2)裝瓶后開始的
13、一段時間,發(fā)酵瓶中溶解氧的含量變化是 。發(fā)酵過程中,發(fā)酵瓶中酒精的含量變化是 。? (3)下列關(guān)于裝置中有水彎管作用的敘述,錯誤的是 。? A.隔絕氣體出入 B.使發(fā)酵瓶內(nèi)外的壓強基本平衡 C.減少雜菌污染 D.有利于發(fā)酵瓶內(nèi)形成缺氧環(huán)境 (4)實驗中,判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是 。? A.發(fā)酵瓶中pH開始下降 B.發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡 C.發(fā)酵瓶中酒精濃度達到30% D.發(fā)酵瓶中酵母菌數(shù)量急劇減少 (5)欲利用葡萄酒制作果醋,發(fā)酵瓶中應加入的菌種是 ,該菌種在 條件下能將乙醇氧化為醋酸。? 答案 (1)紅(紫) 氣泡 (2)減少 增加
14、 (3)A (4)B (5)醋化醋桿菌 有氧 10.(2015廣東理綜,29,16分)泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一,但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害。某興趣小組準備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到下圖。 (1)制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是 。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有 。? (2)據(jù)圖,與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食用,因為后者 ;pH值呈下降趨勢,原因是 。? (3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的實驗方案和食鹽濃度(4%~10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜
15、過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件。請你設(shè)計一個實驗結(jié)果記錄表,并推測實驗結(jié)論。 答案 (16分)(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境(1分) 丙酮酸、[H]、ATP(3分) (2)亞硝酸鹽含量已接近最低水平(1分) 乳酸積累(2分) (3)結(jié)果記錄表(6分) 亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg) 食鹽濃 度(%) 乳酸菌 發(fā)酵時間(d) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 4 普通 優(yōu)選 7 普通 優(yōu)選
16、 10 普通 優(yōu)選 注:其他合理答案酌情給分。 推測實驗結(jié)論: ①用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜,亞硝酸鹽含量更低(1分) ②最適條件是亞硝酸鹽含量最低時的食鹽濃度和發(fā)酵時間(2分) 考點二 微生物的培養(yǎng)和應用 1.(2016江蘇單科,25,3分)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)敘述正確的是(多選)( ) A.生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特
17、征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C.在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進一步純化 D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株 答案 BC 2.(2015江蘇單科,19,2分)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時,下列敘述正確的是( ) A.高壓滅菌加熱結(jié)束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋 B.倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落 D.用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時,應標記在皿底上 答案 D 3.(2017江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下
18、圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題: (1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有 。? (2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸 ,以達到富集酚降解菌的目的。若如圖平板中菌落過于密集,應進一步 ,以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加 。? (3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中 (填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。? (4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度
19、并進行顯色反應,下表中1~5號比色管的苯酚濃度應分別為 。? 管號 1 2 3 4 5 6 苯酚濃度(mg/L) 1 如果廢水為50 mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋 (填序號:①5?、?0?、?0)倍后,再進行比色。? 答案 (7分)(1)蛋白胨、苯酚 (2)增加 稀釋涂布 凝固劑 (3)③ (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8?、? 4.(2016課標全國Ⅰ,39,15分)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣
20、中微生物的分布情況。實驗步驟如下: ①配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作無菌平板; ③設(shè)置空白對照組和若干實驗組,進行相關(guān)操作; ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題: (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于 。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X通常是 。? (2)步驟③中,實驗組的操作是 。? (3)若在某次調(diào)查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了
21、 現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法 (填“正確”或“不正確”)。? 答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 瓊脂 (2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間 (3)污染 不正確 5.(2015課標全國Ⅰ,39,15分)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?;卮鹩嘘P(guān)問題: (1)顯微觀察時,微生物A菌體中的油脂通常可用 染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選 用 (填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。? (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落
22、,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應選用以 為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。? (3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用 直接計數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選 用 法進行計數(shù)。? (4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學測得相同時間內(nèi),在35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg,則上述三個溫度中, ℃條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度,應圍繞 ℃設(shè)計后續(xù)實驗。? 答案 (1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ) 萃取法(每空2分,共4分) (2)油脂(3分) (3)血細
23、胞計數(shù)板 稀釋涂布平板(每空2分,共4分) (4)45 40(每空2分,共4分) 6.(2014課標全國Ⅰ,39,15分)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}: (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復合酶,其中的葡萄糖苷酶可 將 分解成 。? (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時,CR可與纖維素形成 色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 。? (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):
24、 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 + + + + - + + 培養(yǎng)基乙 + + + - + + + 注:“+”表示有,“-”表示無。 據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ;培養(yǎng)基乙 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ? 。? 答案 (1)纖維二糖 葡萄糖 (2)紅 透明圈 (3)不能 液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落 不能 培養(yǎng)基中沒
25、有纖維素,不會形成CR—纖維素紅色復合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 7.(2014課標全國Ⅱ,39,15分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}: (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是 ;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為 。? (2)該小組采用
26、平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過 滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是 ? 。? (3)示意圖A和B中, 表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。? (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中 的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高 的利用率。? 答案 (1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107 (2)灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以
27、便獲得單個菌落 (3)B (4)溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì) 8.(2013課標全國Ⅱ,39,15分)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。 回答下列問題: (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用 法或 法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。? (2)取該單菌落適當稀釋,用 法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。? (3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置
28、于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A ;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B ;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明 ;? 含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的 。? (4)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗菌目的,最好應選用抗生素 。? 答案 (15分) (1)劃線 稀釋涂布(或涂布)(每空2分,共4分) (2)涂布(1分)
29、 (3)敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性比對A的弱 耐藥菌(每空2分,共8分) (4)A(2分) 教師用書專用(9—18) 9.(2015四川理綜,3,6分)下列是以酵母菌為材料進行的實驗,有關(guān)敘述錯誤的是( ) A.探究酵母菌的呼吸方式,可用溴麝香草酚藍檢測產(chǎn)生的CO2 B.用酵母菌發(fā)酵釀制果酒,選擇酸性重鉻酸鉀檢測產(chǎn)生的酒精 C.探究酵母菌種群數(shù)量變化,應設(shè)空白對照排除無關(guān)變量干擾 D.用稀釋涂布平板法培養(yǎng)計數(shù),應選擇有30~300菌落數(shù)的平板 答案 C 10.(2013安徽理綜,6,6分)下圖為通過DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細菌克隆示意圖。下列敘述正
30、確的是( ) A.根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準確計算樣品中含有的活菌實際數(shù)目 B.外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子之間才能進行復制 C.重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接 D.放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細菌菌落位置 答案 D 11.(2013江蘇單科,18,2分)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是( ) A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌 B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線 C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D.培養(yǎng)過程中每隔一
31、周觀察一次 答案 B 12.(2016四川理綜,10,12分)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程,圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。 圖甲 圖乙 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應以 為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑,產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成 色。? (2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL,培養(yǎng)一段時間后,平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是 ,每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為 ×108個;與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比
32、,此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較 。? (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活,突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中,終止密碼為 ,突變基因表達的蛋白含 個氨基酸。? 答案 (12分)(1)尿素 酚紅 紅 (2)稀釋涂布平板法 1.75 少 (3)UGA 115 13.(2015天津理綜,8,16分)纖維素分子不能進入酵母細胞。為了使酵母菌能夠利用環(huán)境中的纖維素為原料生產(chǎn)酒精,構(gòu)建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒。下面是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運輸?shù)?/p>
33、示意圖。 據(jù)圖回答: (1)本研究構(gòu)建重組質(zhì)粒時可選用四種限制酶,其識別序列如下圖。為防止酶切片段的自身連接,可選用的限制酶組合是 或 。? A.①② B.①③ C.②④ D.③④ (2)設(shè)置菌株Ⅰ為對照,是為了驗證 不攜帶纖維素酶基因。? (3)纖維素酶基因的表達包括 和 過程。與菌株Ⅱ相比,在菌株Ⅲ、Ⅳ中參與纖維素酶合成和分泌的細胞器還有 。? (4)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,菌株 不能存活,原因是 。?
34、(5)酵母菌生成酒精的細胞部位是 ,產(chǎn)生酒精時細胞的呼吸方式是 。在利用纖維素生產(chǎn)酒精時,菌株Ⅳ更具優(yōu)勢,因為導入的重組質(zhì)粒含有 ,使分泌的纖維素酶固定于細胞壁,減少因培養(yǎng)液更新而造成的酶的流失,提高酶的利用率。? 答案 (16分)(1)B(或C) C(或B) (2)質(zhì)粒DNA和酵母菌基因組 (3)轉(zhuǎn)錄 翻譯 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體 (4)Ⅱ 缺少信號肽編碼序列,合成的纖維素酶不能分泌到胞外,細胞無可利用的碳源 (5)細胞質(zhì)基質(zhì) 無氧呼吸 A基因片段 14.(2015浙江自選,17,10分)某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑,開展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、
35、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如下圖所示: 土樣中的菌種篩選菌株鑒定優(yōu)良菌株擴大培養(yǎng)植酸酶提純植酸酶固定化植酸酶特性分析 請回答: (1)土壤懸液首先經(jīng)80 ℃處理15分鐘,其目的是篩選出① 。? (2)在無菌條件下,將經(jīng)過處理的土壤懸液進行② ,然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到③ ,其周圍出現(xiàn)透明水解圈,圈的直徑大小與④ 強弱有關(guān)。? (3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后,將優(yōu)良菌株進行液體擴大培養(yǎng)。培養(yǎng)時需要振蕩,其主要目的是⑤ 。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比,不含有的成分是⑥ 。? (4)在合適條件下,將提純的植酸酶與
36、海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對酶進行⑦ 。? A.吸附 B.包埋 C.裝柱 D.洗滌 (5)溫度與植酸酶相對酶活性的關(guān)系如圖所示。下列敘述錯誤的是⑧ 。? A.測試溫度中,固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60 ℃和45 ℃ B.測試溫度范圍內(nèi),固定化植酸酶的相對酶活性波動低于非固定化植酸酶 C.固定化與非固定化植酸酶相比,相對酶活性在80%以上時的溫度范圍較寬 D.65 ℃時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點 答案 (1)①耐高溫菌株 (
37、2)②稀釋?、蹎尉洹、苤菜崦傅幕钚? (3)⑤供氧?、蕲傊? (4)⑦B (5)⑧D 15.(2015江蘇單科,31,8分)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對其降解纖維素能力進行了研究。請回答下列問題: (1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不需要的是 (填序號)。? ①酒精燈?、谂囵B(yǎng)皿?、埏@微鏡?、軣o菌水 (2)在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是 。? (3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘
38、附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是 。? (4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的 有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強的菌株是 (填圖中序號)。? (5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖,推測菌株 更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是 ? 。? 答案 (8分)(1)③ (2)培養(yǎng)基表面的菌
39、懸液會出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果 (3)避免培養(yǎng)基污染棉塞 (4)量與活性?、? (5)J4 發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高 16.(2014四川理綜,10,11分)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。 (1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、 四類,該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是 。? (2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的
40、培養(yǎng)基常需添加生長素和 ,這些植物激素一般需要事先單獨配制成 保存?zhèn)溆谩? (3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是 。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有 ? 。? (4)為探究苯磺隆的降解機制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是 ,該實驗設(shè)計是
41、否合理?為什么? 。? 答案 (11分)(1)氮源和無機鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖 (2)細胞分裂素 母液 (3)接種環(huán)?、俳臃N環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端開始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì) 不合理,缺少空白對照 17.(2014江蘇單科,30,8分)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。請回答下列問題: (1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是 ;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應該 。 ? (2
42、)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是 。? (3)如圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是 。(填序號)? ①安全閥、放氣閥、壓力表 ?、诜艢忾y、安全閥、壓力表 ③安全閥、放氣閥、溫度表 ?、芊艢忾y、安全閥、溫度表 (4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是 。? (5)為增加β-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細胞時,添加石英砂的目的是 ;研磨 時 (填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是
43、 。 ? 答案 (8分) (1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌) 用牛皮紙(報紙)包扎器皿 (2)抑制細菌(放線菌)生長 (3)① (4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死 (5)有助于研磨充分 不需要 β-胡蘿卜素較耐酸 18.(2013四川理綜,10,12分)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。 圖甲 圖乙 (1)圖甲中,過程①需要的酶有 。為達到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應以
44、 作為唯一碳源。②、③過程需重復幾次,目的是 。? (2)某同學嘗試過程③的操作,其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學的接種方法是 ;推測該同學接種時可能的操作失誤是 。? (3)以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,接種 菌的發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是 。? (4)用凝膠色譜法分離α-淀粉酶時,在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì),相對分子質(zhì)量較 。? 答案 (1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶(2分) 淀粉 (1分) 進一步篩選純化獲得
45、分解淀粉能力強的酵母菌(2分) (2)稀釋涂布平板法(1分) 涂布不均勻(2分) (3)工程酵母(1分) 工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強,導致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快(2分) (4)小(1分) 三年模擬 A組 2016—2018年模擬·基礎(chǔ)題組 考點一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 1.(2017廣西柳州上學期模擬,38)下面是果酒和果醋制作的實驗流程和發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下列問題: (1)完成圖1中的實驗流程: 。? (2)圖2裝置中的充氣口在 過程中要關(guān)閉,否則可能發(fā)生使發(fā)酵液變酸的反 應 (寫出該反應式),而排氣
46、口在該過程中應開放,排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,目的是 。? (3)葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是 ,重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應 呈 色。? (4)果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和 兩種微生物的發(fā)酵原理,后者在結(jié)構(gòu)上的主要特點是 。? 答案 (1)醋酸發(fā)酵 (2)酒精發(fā)酵 C2H5OH+O2CH3COOH+H2O 避免空氣中其他微生物進入發(fā)酵裝置(防止空氣中的微生物污染) (3)紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中 灰綠 (4)醋酸菌 無以核膜為界限的細胞核 2.(2018吉林通榆一中上
47、學期期中,37)近年來,紀錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮,其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題: (1)在果醋制作時,運用醋酸菌在供應 和糖源充足時,將糖分解成醋酸;在糖源不充足時,也可以利用酒精生成醋酸,請寫出該過程的化學反應式: 。? (2)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時,應注意控制 ;配制鹵湯時,要使鹵湯中酒的含量控制在 %左右。? (3)制作泡菜的原理是 。蔬菜在腌制過程中,會產(chǎn)生亞硝酸鹽。
48、在 條件下,亞硝酸與對氨基苯磺酸發(fā)生 反應后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成 色染料。? 答案 (1)氧氣 C2H5OH+O2CH3COOH+H2O (2)鹽的用量 12 (3)乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖,將葡萄糖分解成乳酸 鹽酸酸化 重氮化 玫瑰紅 3.(2018四川雅安中學高三上學期周考,11)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題: (1)制作泡菜時,所用鹽水需煮沸,其目的是 。為了縮短制作時間,有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的目的是 。? (2)泡菜制作過程中,乳酸發(fā)酵過程即為乳酸菌進行 的過程。該過
49、程發(fā)生在乳酸菌 的 中。? (3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有 、 和 等。? (4)從開始制作到泡菜質(zhì)量最佳這段時間內(nèi),泡菜液逐漸變酸,這段時間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是 ,原因是: 。? 答案 (1)消滅雜菌 增加乳酸菌數(shù)量 (2)無氧呼吸 細胞質(zhì) (3)溫度 食鹽用量 腌制時間 (4)乳酸菌數(shù)量增加,雜菌數(shù)量減少 乳酸菌比雜菌更為耐酸 考點二 微生物的培養(yǎng)和應用 4.(2017黑龍江大慶中學上學期期末,35)回答與微生物實驗室培養(yǎng)有關(guān)的問題: (1)在制備固
50、體培養(yǎng)基時需加入的常用凝固劑是 。若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH,則應在滅菌之 (填“前”或“后”)調(diào)節(jié)。? (2)為防止外來雜菌入侵,對 等可采用干熱滅菌法進行滅菌。? (3)如圖為平板劃線法接種后的示意圖。在劃線接種的整個操作過程中,對接種環(huán)至少需進行 次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋,將平板 放入恒溫箱中培養(yǎng),這樣放置的目的是 。? (4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目時,每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,最后選 取 作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目。? 答案 (1)瓊
51、脂 前 (2)玻璃器皿和金屬用具 (3)6 倒置 避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā) (4)菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄 5.(2018四川綿陽一診,11)水中細菌總數(shù)可以作為判定被檢水樣被有機物污染程度的標志。在水質(zhì)衛(wèi)生學檢驗中,細菌總數(shù)是指1 mL水樣在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中,經(jīng)37 ℃、24 h培養(yǎng)后,所生長出的菌落數(shù)。為初步測定某處池水中的細菌數(shù)目,實驗的大致流程為:水樣采集→梯度稀釋→接種培養(yǎng)→菌落計數(shù)?;卮鹣铝袉栴}: (1)對采集的池水進行梯度稀釋時,應先將1 mL水樣加入 中以獲得稀釋10倍的稀釋液。實驗中對采集的池水要進行稀釋的目的是
52、 。? (2)接種培養(yǎng)所用到培養(yǎng)基中,能為細菌同時提供碳源和氮源的物質(zhì)是 。? (3)為保證菌落計數(shù)結(jié)果準確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進行計數(shù)。用這種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目低,原因是 。? (4)實驗過程中為確保培養(yǎng)基上菌落來自所采集水樣,避免雜菌污染。實驗中需要注意的具體操作 有 (至少答2點)。? 答案 (1)9 mL無菌水 避免池水中細菌數(shù)目過多(密度過大),得不到單菌落 (2)牛肉膏、蛋白
53、胨 (3)30~300 當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落 (4)采集水樣的容器要滅菌,稀釋和接種要在酒精燈火焰旁等 6.(2018貴州黔東南州第一次聯(lián)考,11)農(nóng)作物秸稈是寶貴的可再生資源,已有多種方案充分利用這類資源。回答下列問題: (1)秸稈粉碎翻壓還田,就是把作物收獲后的秸稈通過機械化粉碎、耕地、直接翻壓在土壤里,這主要是利用土壤中的 (微生物)。? (2)實驗室鑒別此類微生物的方法是 法,一般用 (接種法)將該菌接種到鑒別培養(yǎng)基上,經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)后,在該菌菌落的周圍應該出現(xiàn) 。? (3
54、)纖維素可在微生物作用下轉(zhuǎn)化為葡萄糖,可再接種 (微生物)進一步發(fā)酵生產(chǎn)酒精。之后還可以通過接種醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸,在利用該微生物進行液體深層醋酸發(fā)酵時,對氣體的需求情況是 。? 答案 (1)纖維素分解菌 (2)剛果紅染色 稀釋涂布平板法 透明圈 (3)酵母菌 不斷通入(無菌)空氣 B組 2016—2018年模擬·提升題組 (滿分:70分 時間:30分鐘) 非選擇題(共70分) 1.(2018山東泰安元月模擬,37)紅方是腐乳的一種。請回答與其制作有關(guān)的問題:(10分) (1)補充制作紅方的實驗流程:① →②加鹽
55、腌制→③ →④密封腌制。? (2)在實驗流程①中,首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi),籠屜中的溫度應控制在 ℃,并保持一定的 。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲,這些毛霉來自空氣中的 。? (3)在實驗流程②操作中,向長滿毛霉的豆腐塊加鹽,其作用是析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬。同時,鹽還能 ,避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。? (4)在實驗流程③用到的輔料中,鹵湯是由 及各種 配制而成的。? 答案 (1)豆腐上長出毛霉 加鹵湯裝瓶 (2)15~18 濕度 毛霉孢子 (3)抑制微生物的生長 (4)酒 香辛料 2.(2018貴州貴陽上學
56、期月考,37)如圖表示果酒和果醋生產(chǎn)過程中物質(zhì)變化情況,請回答下列與果酒和果醋制作的相關(guān)問題:(10分) (1)過程①②均發(fā)生在酵母菌的 中。? (2)過程④是醋酸菌在 時,將酒精變成乙醛,再將乙醛變成醋酸;過程⑤是醋酸菌 在 時,將葡萄糖轉(zhuǎn)變成醋酸。? (3)果酒的制作離不開酵母菌,在家庭制作葡萄酒時,菌種主要來自 。? (4)制作果酒的條件是先通氣后密封。先通入無菌空氣的目的是 ;后密封的目的是
57、 。? (5)葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因是 。培養(yǎng)液中的酒精檢測的原理 是 在酸性條件下由橙黃色變成 。? 答案 (1)細胞質(zhì)基質(zhì) (2)缺少糖源 氧氣、糖源充足 (3)附著在葡萄皮上的野生型酵母菌 (4)讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖 讓酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精 (5)紅葡萄皮的色素進入發(fā)酵液 重鉻酸鉀 灰綠色 3.(2017廣東百校聯(lián)考上學期月考,11)新鮮的泡菜濾液中含有乳酸菌,可作為實驗材料分離純化乳酸菌。請回答下列問題:(8分) (1)分離純化乳酸菌時
58、,首先需要用無菌水對泡菜濾液進行 ,這樣做的理由是 ? 。? (2)分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣,從而使培養(yǎng)基在分離純化過程中會形成 。? (3)若要長期保存乳酸菌,菌液中常需要加入一定量的 (填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”),且要放置在 (填“-5”“-20”或“-100”)℃的冷凍箱中,若要短期保存乳酸菌,可將菌種接種到試管的 (填“溶液中”“固體培養(yǎng)基表面上”或“固體斜面培養(yǎng)基上”),菌落長成后,將試管放置在 (填“-4”“0”或“4”)
59、℃的冰箱中保藏。? 答案 (1)梯度稀釋 在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 (2)透明圈 (3)甘油 -20 固體斜面培養(yǎng)基上 4 4.(2018安徽安慶重點中學第二次聯(lián)考34)生物強化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油黏度的原理,通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請分析回答:(10分) (1)土壤有 之稱,該類微生物應取自 的土壤。? (2)用于篩選和純化該類微生物的培養(yǎng)基從功
60、能上講屬于 培養(yǎng)基。對培養(yǎng)基進行滅菌,常用的方法是 。? (3)接種后,必須密封培養(yǎng),其原因是 。培養(yǎng)一段時間后,在培養(yǎng)基上形成降油圈,此時選取降油圈 的菌落作為高效菌株。? (4)擴大培養(yǎng)過程中需要對微生物進行計數(shù),取0.2 mL樣品,用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng),最后統(tǒng)計三個平板,菌落數(shù)分別是200、180、220,則樣品中微生物的數(shù)量為 個/mL。該統(tǒng)計結(jié)果 (填“低于”或“高于”)實際值。? 答案 (1)微生物的天然培養(yǎng)基 長期被石油污染(含石油多的) (2)選擇 高壓蒸汽滅菌法 (3)該類微生物是厭氧型微生
61、物 最大 (4)1 000 低于 5.(2018重慶巴蜀中學適應性月考,11)石油的主要成分是各種烴類,石油土壤污染是現(xiàn)代石油開采過程中造成的環(huán)境污染,所帶來的危害不容忽視。可利用生物技術(shù)解決這一問題。(10分) (1)一般來說,實驗時還要設(shè)置對照組,主要目的是排除實驗組中 因素對實驗結(jié)果的影響。選擇培養(yǎng)基允許特定種類的微生物生長,同時 其他種類微生物生長。? (2)欲得到能高效降解石油的細菌,可以選擇 的環(huán)境采集土樣來分離所需細菌,并在培養(yǎng)基中加入石油作為 制成選擇培養(yǎng)基。若想首先“濃縮”所需細菌,培養(yǎng)基中不能加入 ;若想對初步篩
62、選得到的目的菌進行純化并計數(shù),可采用的接種方法是 。某實驗室采用此方法,將1 mL樣品稀釋100倍,在3個平板上分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)正確操作培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為150、158和157。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù) (填“至多”或“至少”)為 個。? 答案 (1)非測試(無關(guān)) 抑制或阻止 (2)被石油污染(土壤石油含量較高) 唯一碳源 瓊脂 稀釋涂布平板法 至少 1.55×108 6.(2018湖南長郡月考,35)我國規(guī)定每升飲用水中大腸桿菌不能超過3個。某興趣小組嘗試對某品牌飲用水的大腸桿菌含量進行檢測,操作簡圖如圖甲,伊紅美藍培養(yǎng)基配
63、方如圖乙。 圖甲 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 100 mL 20%乳糖溶液 2 mL 2%伊紅水溶液 2 mL 0.5%美藍水溶液 1 mL 圖乙 回答下列相關(guān)問題:(10分) (1)圖甲中濾膜的孔徑應 (填“大于”或“小于”)大腸桿菌。受此啟發(fā),對某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌? 。? (2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時,除了水分、無機鹽以外,還應加入 (一種營養(yǎng)成分),以及 。伊紅美藍培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色,從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基
64、。? (3)該小組通過統(tǒng)計 的數(shù)目,計算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。理論上他們的統(tǒng)計值要比實際 (填“偏高”或“偏低”),理由是 。? 答案 (1)小于 用濾膜過濾除菌 (2)氮源 瓊脂 鑒別 (3)黑色菌落 偏低 兩個或多個大腸桿菌連在一起時,平板上只能觀察到1個菌落 7.(2017重慶巴蜀中學上學期第一次月考,9)廢紙主要成分是木質(zhì)纖維。圖1是工業(yè)上利用廢紙生產(chǎn)乙醇的基本工作流程?;卮鹣铝袉栴}:(12分) (1)自然界中①環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在 的環(huán)境中。②中獲得的酶是 酶
65、。? (2)若從土壤中分離出上述微生物,應用以 為唯一碳源的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),并加入 形成紅色復合物進行篩選,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 。? (3)要統(tǒng)計每克土壤樣品中上述微生物活菌數(shù)目,宜采用 法接種,根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積,統(tǒng)計平板上的 就能大約推測出樣品中活菌數(shù)。? (4)接種前要對培養(yǎng)基進行 。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中,一定要注意在 條件下進行。? (5)接種后一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖2所示,推測接種時可能的操作失誤是 。向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是 。? (6)生產(chǎn)中可以滿足④環(huán)節(jié)的常見菌種是 。玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物可為該微生物的生長提供 。? 答案 (1)富含纖維素(或落葉較多) 纖維素 (2)纖維素 剛果紅(CR) 透明圈 (3)稀釋涂布平板 菌落數(shù) (4)滅菌 無菌 (5)涂布不均勻 避免培養(yǎng)基污染棉塞 (6)酵母菌 碳源 18
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