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1、實驗技能(二) 變量梯度設置在實驗中的應用
普通淀粉酶的最適溫度在40~60 ℃之間,而極端耐熱淀粉酶在100 ℃仍能保持較高的活性,因此在生產(chǎn)上具有更為廣泛的應用前景。請回答有關(guān)問題:
(1)要鑒定該酶的化學本質(zhì),可將該酶液與___________________________混合,若反應液呈________色,則該酶的化學本質(zhì)為蛋白質(zhì)。
(2)測定淀粉酶活性時,應選擇________作為該酶作用的底物,反應液中應加入________溶液以維持其酸堿度穩(wěn)定。
(3)設計實驗探究極端耐熱淀粉酶起催化作用的最適溫度。
①此實驗中除自變量和因變量外,還需要考慮___________
2、____________________(指出兩點即可)等因素。
②結(jié)合題目信息,簡要寫出探究該酶催化作用最適溫度的實驗思路:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析:大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)
3、,少數(shù)酶是RNA,要鑒定該酶的化學本質(zhì),可將該酶液與雙縮脲試劑混合,若反應液呈紫色,則該酶的化學本質(zhì)為蛋白質(zhì)。
答案:(1)雙縮脲試劑 紫 (2)淀粉 (酸堿)緩沖
(3)①淀粉溶液的濃度和含量、pH及添加試劑的量、實驗操作順序等?、谠?0 ℃和100 ℃之間每隔一定溫度設置一個實驗組,其他實驗條件適宜且保持一致。以反應液和碘液發(fā)生顏色反應的程度為指標確定最適溫度
1.概述
變量梯度指自變量相鄰兩次取值之間的差值大小,即自變量每次變化的幅度。生物實驗中常見的變量梯度有pH梯度、溫度梯度、濃度梯度等。
2.過程分析
(1)在合適范圍內(nèi)取值:生物體或細胞生活在特定的環(huán)境中,研究某因
4、素對生物或細胞的影響時,自變量應在它能發(fā)揮作用的范圍內(nèi)取值。如確定生長素類似物促進扦插枝條生根的適宜濃度,生長素濃度應在10-12~10-8 mol/L范圍內(nèi),變量梯度應相差一個數(shù)量級。
(2)梯度大小設置要適宜:梯度過小,看不出變化,實驗組數(shù)增多,增加了操作難度;梯度過大,實驗結(jié)果不準確。如探究唾液淀粉酶的最適pH,預測其數(shù)值應在7.0左右,pH梯度設為0.4,即共做五組實驗,其緩沖液pH分別為6.2、6.6、7.0、7.4、7.8。
(3)根據(jù)實驗目的確定變量梯度的大小
①若進行定性分析,梯度設置可稍大些。如探究溫度對光合作用的影響,一般情況下植物在30 ℃左右時,光合作用最強。我們
5、既要研究溫度降低時光合作用強度的變化,也要研究溫度升高時的變化,溫度梯度設置如下:0 ℃、10 ℃、20 ℃、30 ℃、40 ℃。
②若要進行定量分析,梯度設置應小些。如探究光合作用的最適溫度,溫度梯度設置如下:24 ℃、27 ℃、30 ℃、33 ℃、36 ℃。
(4)在實際操作中,為避免因梯度設計不當,造成人力物力方面的浪費,我們可以設計一個預實驗,每組之間梯度適當加大一些,當找到一個大致的適宜范圍后,再在這個范圍內(nèi)縮小每組之間梯度值,最后測出一個準確范圍。
1.某生物興趣小組用迎春枝條作實驗材料,做了探究α-萘乙酸(NAA)促進插條生根最適濃度實驗的預實驗,結(jié)果如下圖。請根據(jù)預實
6、驗結(jié)果,設計進一步的探究實驗。
(1)材料用具:生長旺盛的一年生迎春枝條若干、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、NAA、蒸餾水等。
(2)配制溶液:配制濃度依次為_____________________________________________(溶液濃度梯度為0.5 ppm)的NAA溶液9份,并編號1~9。
(3)實驗步驟:
第一步:______________________________________________________________;
第二步:____________________________________________________________
7、__;
第三步:一天后取出枝條分別進行扦插;
第四步:每天對扦插枝條的生根情況進行觀察記錄。
(4)請設計本實驗的觀察記錄表。
(5)該實驗應控制好兩個主要的無關(guān)變量,具體方法是________________、________________。
解析:根據(jù)預實驗的結(jié)果,可確定進一步探究的濃度范圍是2~6 ppm,再根據(jù)題中要求濃度差為0.5 ppm,可確定要配制的濃度梯度為2 ppm、2.5 ppm、3 ppm,3.5 ppm、4 ppm、4.5 ppm、5 ppm、5.5 ppm、6 ppm共9個不同的濃度。填寫實驗步驟時,應遵循隨機分組→浸泡→培養(yǎng)(扦插)→統(tǒng)計的思路進行解答。
8、該實驗的無關(guān)變量應從實驗材料、處理時間、溫度等方面考慮。
答案:(2)2 ppm、2.5 ppm、3 ppm、3.5 ppm、4 ppm、4.5 ppm、5 ppm、5.5 ppm、6 ppm
(3)將迎春枝條隨機均分為9份 將9份枝條的基部分別浸泡在1~9號NAA溶液中
(4)如下表:
NAA濃度( ppm)
生根條數(shù)
天數(shù)
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5
5.5
6
1
2
3
…
(5)各組枝條處理
9、時間長短一致 所用植物材料盡可能做到生長狀況一致
2.低溫迫使植物細胞產(chǎn)生大量對細胞有害的過氧化產(chǎn)物,如脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物(MDA)。超氧化物歧化酶(SOD)能夠消除過氧化產(chǎn)物,從而增強植物的抗冷性。研究人員進行了“水楊酸對水稻幼苗抗冷性的影響”實驗,步驟及結(jié)果如表所示。據(jù)表回答下列問題:
組別
處理
培養(yǎng)溫度
SOD活性[U/(g·min)]
1
25 ℃的蒸餾水澆灌
25 ℃
7.3
2
①
②
9.4
3
5 ℃的0.5 mmol/L水楊酸澆灌
5 ℃
10.3
4
5 ℃的1.0 mmol/L水楊酸澆灌
5 ℃
11.6
5
5 ℃的1.5
10、mmol/L水楊酸澆灌
5 ℃
13.6
6
5 ℃的2.0 mmol/L水楊酸澆灌
5 ℃
8.5
7
5 ℃的2.5 mmol/L水楊酸澆灌
5 ℃
7.9
8
5 ℃的3.0 mmol/L水楊酸澆灌
5 ℃
6.5
(1)表中①是________,②是________。實驗設計時每組取50株水稻幼苗,而不是1株,目的是______________________________________________________________________。
(2)本實驗需要控制的無關(guān)變量有_________________________________
11、______(至少寫兩點)。
(3)組別1和2對照可得結(jié)論是_________________________________________________。
組別2~8可得到的結(jié)論是__________________________________________________。
在5 ℃條件下,2.0 mmol/L的水楊酸對水稻幼苗抗冷性的影響是________(填“增強”或“減弱”)。
(4)請根據(jù)5 ℃條件下的實驗結(jié)果,完成水楊酸濃度與SOD活性關(guān)系的坐標折線圖。
解析:(1)2組與3~8組之間應形成對照,根據(jù)單一變量原則,表中①應為5 ℃的蒸餾水澆灌,②是5 ℃。實驗
12、對象多可避免偶然性,使實驗結(jié)果更準確。(2)除自變量以外,對實驗結(jié)果有影響的變量均為無關(guān)變量,比如蒸餾水和水楊酸的澆灌量、培養(yǎng)時間、幼苗發(fā)育情況等。(3)組別1與2之間的變量為溫度,且低溫時SOD活性較大,說明環(huán)境溫度降低時,水稻幼苗自身可增強抗冷性。分析2~8組SOD活性可知,在一定范圍內(nèi)隨著水楊酸濃度的增加,水稻的抗冷性增強,當水楊酸濃度增加到一定值時,水稻的抗冷性開始減弱。與2組比較可知,在5 ℃條件下,2.0 mmol/L的水楊酸對水稻幼苗抗冷性的影響是減弱。(4)根據(jù)表格中的實驗結(jié)果,在坐標圖中描點連線即可,同時注意橫縱坐標一定要標上。
答案:(1)5 ℃的蒸餾水澆灌 5 ℃ 避免偶然性,減少誤差,使實驗結(jié)果更準確 (2)蒸餾水和水楊酸的澆灌量、光照強度、培養(yǎng)時間、幼苗的發(fā)育情況等 (3)環(huán)境溫度降低時,水稻幼苗自身可增強抗冷性 在一定范圍內(nèi),隨水楊酸濃度的增加,水稻幼苗的抗冷性增強;當水楊酸濃度增加到一定程度時,水稻幼苗的抗冷性開始減弱(或水楊酸對水稻幼苗的抗冷性的影響具有兩重性、1.5 mmol/L左右的水楊酸增強水稻幼苗抗冷性的效果最好) 減弱
(4)如圖
4