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1、2022年高二下學(xué)期生物《DNA的粗提取與鑒定》導(dǎo)學(xué)案 人教版
【學(xué)習(xí)目標(biāo)】
1.簡述DNA粗提取與鑒定的基本方法和原理。
2.概述DNA提取中去除雜質(zhì)的方法和原理。
3、嘗試對植物和動物組織中的DNA就行粗提取,并進(jìn)行鑒定。
【問題情境】
1、DNA的鑒定原理?
2、DNA粗提取實驗材料選取的原則?
3、破碎雞血細(xì)胞,獲取含DNA的濾液為什么加蒸餾水?
4、破碎植物細(xì)胞加洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?
5、為什么反復(fù)地溶解和析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?
6、DNA析出方法?
【我的疑問】
2、
備 注
[
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【自主探究】
(一)DNA粗提取的原理
1.DNA的溶解性
DNA在不同濃度 溶液中溶解度不同;DNA不溶于 。
2.將DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。
蛋白酶水解 而不會對DN
3、A產(chǎn)生影響。
溫度值為 ,蛋白質(zhì)變性沉淀,而DNA不會變性。
洗滌劑將細(xì)胞膜上的 ,從而瓦解細(xì)胞膜。
(二)實驗設(shè)計
1.實驗材料
2.破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液
如是洋蔥,加入一定量 溶解細(xì)胞膜;加入一定量的食鹽,溶解DNA物質(zhì)。
3.去除濾液中的雜質(zhì)
方案一的原理是 ;
方案二的原理是 ;
方案三的原理是
4、 。
4.DNA析出與鑒定
(三).實驗操作
制備雞血細(xì)胞液…………加 ,靜置或離心
↓
破碎細(xì)胞,釋放DNA… 加 ,同一方向快速通方向攪拌
↓→過濾,除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等。
溶解核內(nèi)DNA… 加入NaCl至 ,同一方向緩慢攪拌
↓
DNA析出…加蒸餾水至 ,過濾,在溶解到2mol/L溶液中
↓→除去細(xì)胞質(zhì)中的大部分物質(zhì)。
DNA初步純化………… 與等體積 混合,析出白色絲狀物
↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。
DNA鑒定………………
5、 ,沸水浴,呈現(xiàn)藍(lán)色
備 注
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【課堂檢測】
( ?。?. 在DNA分子的粗提取實驗中,兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是
A. 稀釋血液、沖洗樣品
B. 使血細(xì)胞破裂,降低NaCl濃度使DNA析出
C. 使血細(xì)胞破裂,增大DNA溶解度
D. 使血細(xì)胞破裂,提取含雜質(zhì)較少的DNA
( )2(多選)與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述,正確的是
A.操作時緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度
B.在操作A時,用玻璃棒輕緩攪拌(可以加速細(xì)胞的破裂),以保證DNA分子完整
C.
6、加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出
D.當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時,此時NaCl的濃度相當(dāng)于0.14mol/L
( )3(多選)關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實驗的表達(dá)哪項是正確的
A. 離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質(zhì)
B. 離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了提取DNA
C.向溶解的DNA燒杯中加蒸餾水是漂洗DNA
D. NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時,DNA溶解
4.DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性,隨著NaCl溶液的變化而變化。
(1)請在下列NaCl溶液中選出溶解度能使DNA析出最徹底的一種( )和溶解度最高的一種( )
7、A. 0.14mol/l B. 2mol/l C. 0.15mol/l D. 0.3mol/l
(2)DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以____________,可以推測溶于酒精中的物質(zhì)可能有____________。
(3)利用DNA與__ ___變藍(lán)色的特性,將該物質(zhì)作為鑒定___ ___的試劑。其實驗過程要點是向放有_____的試管中加熱4ml的___ _?;旌暇鶆蚝?,將試管置于___ 5min,待試管____ __,觀察試管中溶液顏色的變化,這個實驗也說明DNA耐__ _溫。
【回標(biāo)反饋】
8、
備 注
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【鞏固練習(xí)】
( ?。?.洗滌劑能夠瓦解 ,但對DNA沒有影響。
A.細(xì)胞壁 B.細(xì)
9、胞膜 C.細(xì)胞核 D.細(xì)胞質(zhì)
( ?。?.在沸水浴的條件下,DNA遇 會被染成藍(lán)色。
A.斐林試劑 B.蘇丹Ⅲ染液 C.雙縮脲試劑 D.二苯胺
( )3.在DNA提取過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是
A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA的損失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷
( )4.下列操作中,對DNA的提取量影響最小的是
A.使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,放出DNA等核物質(zhì)
B.攪拌時,要使用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌
C.在“析出DNA粘稠物”時,要緩緩加蒸餾水,直至溶液中粘稠物不再增加
D.在用酒精沉淀DN
10、A時,要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻
E在DNA的溶解和再溶解時,要充分?jǐn)嚢?
( )5.DNA的粗提取中,將與濾液體積相等的、冷卻的 ,靜置2—3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物。
A.0.9%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液
C.質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%的HCl D.體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液
( )6.以血液為實驗材料時,需要向血液中加入 ,防止血液凝固。
A.醋酸鈉 B.龍膽紫 C.檸檬酸鈉 D.醋酸洋紅
( )7.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不斷
11、加入蒸餾水的目的是( )
A.加快溶解DNA的速度 B. 減少DNA的溶解度,加快DNA析出
C. 加快溶解雜質(zhì)的速度 D.減小雜質(zhì)的溶解度,加快雜質(zhì)的析出
( )8.去除濾液中的雜質(zhì)時,直接在濾液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的 分解蛋白質(zhì)。
A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.腸肽酶
9.(多選)關(guān)于DNA在NaCl溶液中的溶解度,下面的敘述哪一個是錯誤的
A.隨著NaCl溶液濃度增大,DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大
B.隨著NaCl溶液濃度的減小,DNA在NaCl溶液中的溶解度也減小
C.DNA在N
12、aCl溶液中的溶解度與NaCl溶液的濃度無關(guān)
D.當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mol/L時,DNA的溶解度最低
10. 填寫本實驗完成下列實驗操作時所用試劑。
⑴提取雞血細(xì)胞中核物質(zhì)
⑵溶解核內(nèi)DNA:
⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA
⑷DNA粘稠物的再溶解
⑸提取雜質(zhì)較少的DNA白色乳狀絲狀物
⑹DNA的鑒定
備 注
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