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1、會(huì)計(jì)學(xué)1高考一輪生物復(fù)習(xí)高考一輪生物復(fù)習(xí) 動(dòng)物細(xì)胞工程人教動(dòng)物細(xì)胞工程人教一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.概念與操作流程第1頁(yè)/共45頁(yè)2.條件(1)無(wú)菌、無(wú)毒：對(duì)_無(wú)菌處理，添加_，定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物。(2)營(yíng)養(yǎng)：除正常的有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)外，加入_。(3)適宜的溫度和pH：溫度為_(哺乳動(dòng)物)，pH為_。(4)氣體環(huán)境：含_的空氣加_的混合氣體。3.應(yīng)用生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)_、醫(yī)學(xué)研究。培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具抗生素血清、血漿36.50.5 95%5%CO2有毒物質(zhì)第2頁(yè)/共45頁(yè)二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.動(dòng)物核移植概念是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的_移入一個(gè)_中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這

2、個(gè)新胚胎最終發(fā)育為_。細(xì)胞核去核的卵母細(xì)胞動(dòng)物個(gè)體第3頁(yè)/共45頁(yè)2.過(guò)程供體體細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)供體細(xì)胞核重組細(xì)胞卵巢卵 母細(xì)胞去核無(wú)核卵母細(xì)胞胚胎代孕母體生出與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體注 人減中期發(fā)育胚胎移植細(xì)胞 融合 第4頁(yè)/共45頁(yè)3.應(yīng)用(1)加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。(2)保護(hù)_。(3)生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。(4)作為異種移植的_。(5)用于組織器官的_。【點(diǎn)撥】核移植過(guò)程中供體理論上是提供細(xì)胞核，但操作過(guò)程中可以把整個(gè)體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中去，原因是體細(xì)胞體積相對(duì)較小，取核難度較大，另外細(xì)胞膜對(duì)核融合的障礙性較小。 瀕危物種供體移植第5頁(yè)/共45頁(yè)三、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗

3、體1.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成_的過(guò)程。(2)融合方法：_、_、電激等。(3)意義：突破了_的局限,使_成為可能，也為制造_開辟了新途徑。一個(gè)細(xì)胞聚乙二醇(PEG)滅活的病毒有性雜交方法遠(yuǎn)緣雜交單克隆抗體第6頁(yè)/共45頁(yè)2.單克隆抗體(1)制備: (2)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、_，可大量制備。(3)用途：作為_；用于治療疾病和_。靈敏度高診斷試劑運(yùn)載藥物B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 培養(yǎng)、篩選 第7頁(yè)/共45頁(yè)【點(diǎn)撥】植物細(xì)胞融合獲得的雜交細(xì)胞可形成雜種植株，而動(dòng)物細(xì)胞融合獲得的雜交細(xì)胞不會(huì)發(fā)育成個(gè)體。制備單克隆抗體時(shí)，需進(jìn)行兩次篩選，第一次是為了選出雜交瘤細(xì)胞，第二次是為了獲得

4、足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。 第8頁(yè)/共45頁(yè)植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植的比較第9頁(yè)/共45頁(yè)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)核移植核移植結(jié)結(jié)果果關(guān)關(guān)鍵鍵環(huán)環(huán)節(jié)節(jié)與外植體完全相同的個(gè)體相同分化程度的細(xì)胞群與供體基本相同的個(gè)體細(xì)胞的脫分化、再分化、分化細(xì)胞分化、細(xì)胞癌變核融合、細(xì)胞分化第10頁(yè)/共45頁(yè)【高考警示鐘】1.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程，但植物細(xì)胞可以先分裂再分化，而動(dòng)物細(xì)胞不分化只分裂。2.區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。貼壁生長(zhǎng)到一定程度需要用胰蛋白酶處理，然后再分瓶培養(yǎng)，原代培養(yǎng)結(jié)束，開始了傳代培養(yǎng)。3.植物組

5、織培養(yǎng)成的植株與提供外植體的植株完全相同，而動(dòng)物細(xì)胞核移植形成的個(gè)體與供體大部分性狀相同，也有部分性狀與受體相同。第11頁(yè)/共45頁(yè)【典例訓(xùn)練1】人的血清白蛋白(HAS)在臨床上需求量很大，通常從血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威脅與日俱增，使人們對(duì)血液制品的使用顧慮重重。如果應(yīng)用現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)，將人的血清白蛋白基因?qū)肽膛＜?xì)胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)血清白蛋白就會(huì)安全、高效地滿足人類需求。如圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)人類血清白蛋白的圖解，根據(jù)圖示回答：第12頁(yè)/共45頁(yè)(1)以上過(guò)程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)中，屬于細(xì)胞工程的有_。(2)在基因工程中，我們稱為目的基因，請(qǐng)舉出獲取目的基因的主要方法：_(

6、至少答兩種)。在進(jìn)入之前要構(gòu)建基因表達(dá)載體，這是基因工程的核心，除目的基因外，基因表達(dá)載體還必須含有_，將導(dǎo)入的常用方法是_。(3)圖中一般經(jīng)過(guò)_處理可以得到，從到的過(guò)程中一般利用未受精的卵母細(xì)胞去核后作為受體細(xì)胞，對(duì)卵母細(xì)胞的去核處理一般選擇在_期進(jìn)行。 第13頁(yè)/共45頁(yè)(4)用細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)育成胚胎時(shí)，一般不超過(guò)_代，原因是_，此培養(yǎng)過(guò)程與植物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基有何不同？_。(5)將送入的最佳時(shí)期是_期。【解題指南】1.考查實(shí)質(zhì)：動(dòng)物細(xì)胞核移植過(guò)程、基因工程操作過(guò)程。2.解題關(guān)鍵：(1)明確過(guò)程是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，的形成過(guò)程為核移植；(2)明確細(xì)胞培養(yǎng)在10代以內(nèi)，細(xì)胞核型不會(huì)發(fā)

7、生變化。第14頁(yè)/共45頁(yè)【解析】(1)圖中形成的過(guò)程為核移植，由重組細(xì)胞發(fā)育成的過(guò)程需經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(2)獲取目的基因的方法主要有PCR擴(kuò)增技術(shù)、人工合成法和從基因文庫(kù)中提取法，獲取的目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。(3)動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞常用胰蛋白酶處理，對(duì)卵母細(xì)胞的去核處理一般選擇在M時(shí)期。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，一般不超過(guò)10代，超過(guò)10代后細(xì)胞的核型可能會(huì)發(fā)生變化。(5)胚胎移植的最佳時(shí)期是桑椹胚或囊胚期。第15頁(yè)/共45頁(yè)答案：(1)核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(2)基因文庫(kù)中提取、PCR技術(shù)擴(kuò)增、人工化學(xué)合成(兩種即可) 啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因 顯微注射法(3)胰蛋白酶或膠

8、原蛋白酶 M(或減數(shù)第二次分裂中)(4)10 10代以內(nèi)的細(xì)胞，細(xì)胞核型不發(fā)生變化此培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清、血漿等 (5)桑椹胚或囊胚第16頁(yè)/共45頁(yè)【變式備選】（2012桐城模擬）某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處錯(cuò)誤（ ）植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合、單克隆抗體、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合、單克隆抗體、核移植等核移植等特殊處理特殊處理酶解法去除細(xì)胞壁酶解法去除細(xì)胞壁胃蛋白酶處理制成細(xì)胞懸浮液胃蛋白酶處理制成細(xì)胞懸浮液融合方法融合方法物理方法、化學(xué)方

9、法、生物物理方法、化學(xué)方法、生物方法方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法典型應(yīng)用典型應(yīng)用無(wú)病毒植物的培育、人工種無(wú)病毒植物的培育、人工種子等子等單克隆抗體的制備等單克隆抗體的制備等培養(yǎng)基培養(yǎng)基 區(qū)別區(qū)別所用的糖必須為葡萄糖所用的糖必須為葡萄糖所用的糖為葡萄糖且動(dòng)物血清不可所用的糖為葡萄糖且動(dòng)物血清不可缺少缺少 第17頁(yè)/共45頁(yè)A0 B1 C2 D3【解析】選D。動(dòng)物的組織塊剪碎后只能用胰蛋白酶處理，而不能用胃蛋白酶處理；植物的原生質(zhì)體的促融方法可用物理法或化學(xué)法，而不用生物法；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中的糖需用蔗糖，不用葡萄糖。第18頁(yè)/共45頁(yè) 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體

10、1.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合原理原理過(guò)過(guò)程程細(xì)胞A、B原生質(zhì)體A、B融合的原生質(zhì)體雜種細(xì)胞雜種植株去壁融合植物組織培養(yǎng)細(xì)胞A、B雜交細(xì)胞多個(gè)相同雜交細(xì)胞融合有絲分裂細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性第19頁(yè)/共45頁(yè)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合相相關(guān)關(guān)酶酶融合融合方法方法結(jié)果結(jié)果意義意義纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶物理法:離心、電激、振動(dòng);化學(xué)法:聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)雜種植株雜交細(xì)胞克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,獲得雜種植株突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交

11、成為可能第20頁(yè)/共45頁(yè)2.單克隆抗體的制備(1)取相應(yīng)B淋巴細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原，否則不能獲得單克隆抗體。(2)細(xì)胞融合后需經(jīng)二次篩選：第一次：在特定的選擇性培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞)和融合的具有同種核的細(xì)胞(BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)才能生長(zhǎng)。這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一的特異性抗體。第21頁(yè)/共45頁(yè)第二次：經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞(很多種雜交瘤細(xì)胞)，需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)篩選后才可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。第22頁(yè)/共45頁(yè)【典例訓(xùn)練2】有性生

12、殖的生物產(chǎn)生后代需進(jìn)行受精作用，植物體細(xì)胞雜交要進(jìn)行原生質(zhì)體的融合，單克隆抗體的制備需進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合，可見細(xì)胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用。下列為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程，據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：第23頁(yè)/共45頁(yè)(1)若a、b分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個(gè)煙草品種的花粉，且這兩對(duì)基因分別位于兩對(duì)同源染色體上。由于受一對(duì)隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強(qiáng)度大于800lx時(shí)都不能生長(zhǎng)。要想從融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細(xì)胞，較為簡(jiǎn)便的篩選方法是_。(2)若a、b表示兩種植物體細(xì)胞，則由d細(xì)胞形成雜種植株的原理是_，這種育種方法的優(yōu)點(diǎn)是_。(3)若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)

13、胞，則d細(xì)胞特點(diǎn)是_。由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較，具有_的特點(diǎn)。生產(chǎn)上一般不能通過(guò)直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞的方法生產(chǎn)單克隆抗體的主要原因是_。 第24頁(yè)/共45頁(yè)（4）下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解，請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)：_。第25頁(yè)/共45頁(yè)【解題指南】1.考查實(shí)質(zhì)：植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體的制備。2.解題關(guān)鍵：(1)hr是a、b產(chǎn)生配子中相同的配子，另外兩種配子分別是Hr、hR。(2)兩個(gè)不同的細(xì)胞形成的雜種細(xì)胞發(fā)育成植株。(3)瘤細(xì)胞特點(diǎn)、B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)與融合后的細(xì)胞具備的特點(diǎn)之間的關(guān)系。(4)單克隆抗體產(chǎn)生的過(guò)程由細(xì)胞融合和雜

14、交細(xì)胞的培養(yǎng)兩部分組成。第26頁(yè)/共45頁(yè)【解析】(1)a的花粉基因型為Hr和hr，b的花粉基因型為hR和hr，只有HhRr的基因組合方式?jīng)]有隱性純合基因，所以雜種細(xì)胞HhRr能在光照強(qiáng)度大于800lx時(shí)生長(zhǎng)。(2)植物體細(xì)胞雜交形成植株，是植物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)，克服了自然條件下物種之間的生殖隔離。(3)在單克隆抗體產(chǎn)生過(guò)程中細(xì)胞d是雜交瘤細(xì)胞，具備了融合前兩種細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)，能無(wú)限增殖且產(chǎn)生特定抗體。而且反復(fù)篩選的細(xì)胞d產(chǎn)生的抗體品質(zhì)優(yōu)良。B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特定抗體，但不能無(wú)限增殖，無(wú)法得到大量的抗體。第27頁(yè)/共45頁(yè)(4)只能注射特定抗原后才能得到特定的B淋巴細(xì)胞，再與瘤細(xì)胞融合，經(jīng)篩選后可體

15、內(nèi)培養(yǎng)也可體外培養(yǎng)以得到大量單克隆抗體。答案：(1)給予大于800lx的光照(2)植物細(xì)胞的全能性克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(3)既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、化學(xué)性質(zhì)單一B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖(4) 第28頁(yè)/共45頁(yè)【互動(dòng)探究】(1)若a、b表示兩種植物體細(xì)胞，則融合前需進(jìn)行什么操作？提示：利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。分析：細(xì)胞融合是利用細(xì)胞膜的流動(dòng)性，細(xì)胞壁如果存在無(wú)法進(jìn)行融合。(2)植物體細(xì)胞雜交與單克隆抗體產(chǎn)生過(guò)程中，a、b融合的方法相同嗎？提示：植物細(xì)胞可用物理法如電激等，化學(xué)法如用PEG誘導(dǎo)；動(dòng)物細(xì)胞除物理法和化學(xué)法外還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)。第29頁(yè)/共4

16、5頁(yè) 1.（2012佛山模擬）下列不屬于細(xì)胞工程基本技術(shù)的是（ ）A細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B細(xì)胞融合技術(shù)C細(xì)胞核移植技術(shù) D轉(zhuǎn)基因技術(shù)【解析】選D。D項(xiàng)屬于基因工程。細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過(guò)某種工程學(xué)手段，在細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)，從而獲得新型生物或特種細(xì)胞產(chǎn)品或產(chǎn)物的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。第30頁(yè)/共45頁(yè)2.（2012安師大附中模擬）下列哪一項(xiàng)屬于克隆（ ）A.將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B.將抗藥基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi)C.將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D.將某種瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系【

17、解析】選D?？寺【褪恰皬?fù)制”的意思，將某種瘤細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)細(xì)胞系屬于克?。籄、B選項(xiàng)都屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)；C項(xiàng)屬于細(xì)胞融合。第31頁(yè)/共45頁(yè)3.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）A培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變C二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的D惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)【解析】選D。由于細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸抑制，細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上只能形成單層的細(xì)胞，A錯(cuò)；克隆培養(yǎng)法中細(xì)胞都是由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)有絲分裂而得到的，所以細(xì)胞的基因型相同，多數(shù)不會(huì)發(fā)生改變，B錯(cuò)；二倍體細(xì)胞通常為有限細(xì)胞系，C錯(cuò)；惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有癌變

18、的特點(diǎn)，能夠無(wú)限增殖，可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D正確。第32頁(yè)/共45頁(yè)4.我國(guó)科學(xué)家在山東萊陽(yáng)農(nóng)學(xué)院培養(yǎng)出了克隆?！翱悼怠焙汀半p雙”，其過(guò)程如圖所示：第33頁(yè)/共45頁(yè)下列敘述中錯(cuò)誤的是（ ）A.該過(guò)程利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性母牛和B母牛與“康康”“雙雙”之間不存在真正意義上的親子代關(guān)系C.該過(guò)程體現(xiàn)的方法為拯救瀕危動(dòng)物提供了一種新思路D.“康康”、“雙雙”之間若進(jìn)行器官移植，則會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)第34頁(yè)/共45頁(yè)【解析】選D。核移植技術(shù)產(chǎn)生動(dòng)物個(gè)體的原理是利用動(dòng)物細(xì)胞核的全能性；因?yàn)锳、B母牛并沒有將遺傳物質(zhì)傳遞給“康康”、“雙雙”，故從遺傳學(xué)角度來(lái)說(shuō)，它們之間并沒親子代關(guān)系；核移植（克隆）技術(shù)

19、的應(yīng)用之一是拯救瀕危物種，擴(kuò)大其種群數(shù)量；“康康”、“雙雙”的核遺傳物質(zhì)并沒有差別，若進(jìn)行器官移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。第35頁(yè)/共45頁(yè)5.關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是（ ）A.可以制成診斷盒，用于疾病的診斷B.可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C.可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)D.可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)【解析】選D。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)，因此可以用于疾病的準(zhǔn)確診斷，與藥物結(jié)合后可利用單克隆抗體準(zhǔn)確找到病變部位并對(duì)其定向治療。單克隆抗體的生產(chǎn)還可將調(diào)控細(xì)胞周期的基因?qū)胂鄳?yīng)B淋巴細(xì)胞內(nèi)，使其能大量增殖并產(chǎn)生相應(yīng)抗體?？蓪⒐撬枇黾?xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，也可以植入小鼠

20、體內(nèi)培養(yǎng)，因此單克隆抗體的產(chǎn)生可以在體內(nèi)進(jìn)行，也可在體外進(jìn)行。第36頁(yè)/共45頁(yè)6.如圖表示高等動(dòng)、植物細(xì)胞融合的部分過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)若上圖表示植物體細(xì)胞雜交的部分過(guò)程，欲將丁細(xì)胞培育成植株，可選用_技術(shù)，這一技術(shù)的兩個(gè)關(guān)鍵步驟是_和_。第37頁(yè)/共45頁(yè)(2)若上圖表示制備單克隆抗體的部分過(guò)程，甲細(xì)胞為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，則乙細(xì)胞為_。在分離乙細(xì)胞之前，應(yīng)對(duì)小鼠進(jìn)行的處理是_。過(guò)程區(qū)別于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)方法是_，過(guò)程可利用_培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，篩選得到的丁細(xì)胞還需進(jìn)行_和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。上述制備過(guò)程涉及到的生物技術(shù)有_。第38頁(yè)/共45頁(yè)【解

21、析】(1)將丁細(xì)胞培育成植株利用了植物組織培養(yǎng)的方法，包括脫分化和再分化過(guò)程，利用了細(xì)胞全能性原理。(2)甲細(xì)胞若為骨髓瘤細(xì)胞，則乙細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞，兩者融合后會(huì)形成雜交瘤細(xì)胞，需要通過(guò)選擇性培養(yǎng)基將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)。動(dòng)物細(xì)胞融合除植物細(xì)胞融合的物理法、化學(xué)法外，還可以用滅活的病毒來(lái)誘導(dǎo)，細(xì)胞融合后，產(chǎn)生的雜種細(xì)胞有多種，需經(jīng)特定的選擇性培養(yǎng)基篩選。單克隆抗體制備過(guò)程中主要利用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。第39頁(yè)/共45頁(yè)答案：(1)植物組織培養(yǎng) 脫分化 再分化(2)B淋巴細(xì)胞 將抗原注射入小鼠體內(nèi) 用滅活的病毒誘導(dǎo) 特定的選擇性 克隆化培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)

22、胞培養(yǎng)技術(shù)第40頁(yè)/共45頁(yè)7.如圖為制備單克隆抗體的流程圖，據(jù)圖回答：第41頁(yè)/共45頁(yè)（1）制備單克隆抗體的原理是，克隆_細(xì)胞形成的細(xì)胞群，并產(chǎn)生_的抗體。（2）已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷，一般情況下，細(xì)胞中有D或S途徑即能分裂增殖。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，但能不斷分裂增殖。將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說(shuō)明原理。方法：_。原理：_。第42頁(yè)/共45頁(yè)（3）雜交瘤細(xì)胞具備_的特點(diǎn)。（4）在單克隆抗體制備過(guò)程中，應(yīng)

23、用了細(xì)胞工程中的_和_兩大技術(shù)?！窘馕觥勘绢}主要考查單克隆抗體的制備過(guò)程和原理。（1）經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體。（2）雜交瘤細(xì)胞有兩種合成DNA的途徑，因此在選擇性培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞能生存并無(wú)限增殖。（3）由題圖不難看出，生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)用到了兩種細(xì)胞工程技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。第43頁(yè)/共45頁(yè)答案：（1）B淋巴 大量、專一（2）在上述試管中加入氨基嘌呤后，收集能分裂增殖的細(xì)胞淋巴細(xì)胞不能分裂，鼠骨髓瘤細(xì)胞的D途徑被阻斷，也不能分裂，而雜種細(xì)胞中有S途徑，可分裂增殖（3）大量增殖（或無(wú)限增殖）、產(chǎn)生專一抗體（4）動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)第44頁(yè)/共45頁(yè)