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實驗 影響酶促反應速度的因素 1、 實驗目的 通過本實驗了解溫度、PH、激活劑、抑制劑對酶促反應速度的影響。 2、 實驗原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各種糊精和麥芽糖。淀粉溶液與碘反應呈藍色；糊精根據分子大小，與碘反應分別呈藍、紫、紅、無色等不同的顏色；麥芽糖不與碘呈色。唾液淀粉酶的活性受溫度、酸堿度、抑制劑與激活劑等的影響。 溫度：溫度降低，酶促反應減弱或停止；溫度升高，反應速度加快。當上升至某一溫度時，酶促反應速度達最大值，此溫度稱為酶的最適溫度。由于酶的化學本質是蛋白質，溫度過高會導致蛋白質構象的改變，因此如果溫度繼續(xù)升高，反應速度反而會迅速下降甚至完全喪失。 酸堿度：唾液淀粉酶最適pH為pH6.9，高于或低于酶的最適pH值，都將引起酶活性的降低，過酸或過堿的反應條件可使酶活性喪失。 抑制劑與激活劑：酶的活性常受某些物質的影響，能增加酶的活性稱為酶的激活劑：降低酶活性且不使酶蛋白變性的稱為酶的抑制劑。如Cl-為唾液淀粉酶的激活劑，Cu2+為唾液淀粉酶的抑制劑。 根據上述性質，可以用碘檢查淀粉是否水解及其水解程度，間接判斷唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。 三、試劑及器材 1.試劑： 1％淀粉溶液，1％氯化鈉溶液，1％硫酸銅溶液，1％硫酸鈉溶液，碘液，磷酸氫二鈉（0.2mmol/L）, 檸檬酸溶液(0.1mmol/L)。 2.器材： 試管，試管夾，恒溫水浴鍋(37℃),吸管，滴管，試管架。 四、實驗操作： 1.收集唾液：實驗者先將痰咳盡, 用自來水漱口, 清除口腔內食物殘渣, 再含蒸餾水約15 mL, 作咀嚼咕漱運動, 3min后吐入小燒杯中備用。 2.觀察溫度對酶促反應速度的影響 取試管3支，編號1,2,3，按下表操作： 試劑(ml) 1 2 3 唾液 1 1 1 1%淀粉 2 2 2 水浴5min 100℃（冷卻） 37℃ 0℃ 碘液 1滴（冷卻） 1滴 1滴 現(xiàn)象 3. 觀察pH對酶促反應速度的影響 （1）配制一系列pH不等的緩沖液。 試劑(ml) 1 2 3 0.2mmol/L磷酸氫二鈉 5.15 7.72 9.72 0.1mmol/L檸檬酸 4.85 2.28 0.28 pH 5.00 6.80 8.00 （2）取試管3支，編號1,2,3，按下表操作： 試劑(ml) 1 2 3 唾液 2 2 2 緩沖液 3（pH5.00） 3（pH6.80） 3（pH8.00） 1%淀粉 2 2 2 37℃水浴10min 碘液 1滴 1滴 1滴 現(xiàn)象 4觀察激活劑和抑制劑對酶促反應速度的影響 取試管4支，編號1,2,3,4，按下表操作： 試劑 滴 1 2 3 4 1%淀粉 20 20 20 20 唾液 10 10 10 10 蒸餾水 6 — — — 1％氯化鈉 — 6 — — 1％硫酸銅 — — 6 — 1％硫酸鈉 — — — 6 37℃水浴5—10min 碘液 1滴 1滴 1滴 1滴 現(xiàn)象 5、 實驗結果及分析 6、 思考題 影響酶促反應速度的因素有哪些？它們如何影響酶的活性？