土傳病害生防菌哈茨木霉菌劑生產(chǎn)工藝的研究,指導(dǎo)老師：劉波博士、研究員匯報(bào)人：曾慶才,福州大學(xué)、福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院2013年01月07日,1,報(bào)告內(nèi)容,一、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與趨勢二、研究意義三、研究目標(biāo)與內(nèi)容四、研究方法與技術(shù)路線五、研究進(jìn)度安排六、研究基礎(chǔ)七、已具備的研究條件,2,一、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與趨勢,作物枯萎病是由尖孢鐮刀菌引起的一類土傳性真菌病害。病原菌從根部侵入植物，引起維管束病變，引起萎蔫死亡。目前，枯萎病的防治主要是化學(xué)藥劑防治法，抗病育種法以及輪作法?；瘜W(xué)藥劑對(duì)環(huán)境的危害嚴(yán)重，抗病品種培育費(fèi)時(shí)費(fèi)力，輪作又限制，生物防治就成為最受青睞的辦法。,3,生防微生物主要有木霉菌、叢枝菌根真菌、非致病性尖孢鐮刀菌。其中，木霉菌對(duì)多種植物病害具有很好的生防作用，被認(rèn)為具有重要生防價(jià)值。木霉菌已廣泛用于各種作物枯萎病的防治中，如Thangavelu,2003;楊春林,2008;LingN,2009。國內(nèi)外已有商品化木霉制劑，較多為液體發(fā)酵液及其孢子菌劑。采用固體發(fā)酵方式的較少。,一、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與趨勢,4,本實(shí)驗(yàn)室已篩選出一株哈茨木霉菌FJAT-9040，研究表明，其對(duì)多種作物枯萎病有良好的防治作用。,二、研究意義,為了該菌更好的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，利用微生物發(fā)酵床養(yǎng)豬產(chǎn)生的副產(chǎn)物墊料作為主要原料進(jìn)行固體發(fā)酵，形成哈茨木霉菌肥菌劑。一方面實(shí)現(xiàn)了資源的再利用，另一方面哈茨木霉菌肥菌劑在應(yīng)用中可起到增強(qiáng)植物抗性及防病效果。,5,（一）研究目標(biāo),三、研究目標(biāo)與內(nèi)容,6,1、哈茨木霉固體發(fā)酵條件的研究2、哈茨木霉固體發(fā)酵方式的研究3、哈茨木霉固體發(fā)酵過程中營養(yǎng)成分的檢測4、哈茨木霉固體發(fā)酵產(chǎn)物的保存期及菌體穩(wěn)定性檢測5、哈茨木霉菌劑的田間應(yīng)用,7,培養(yǎng)基配方的篩選,墊料麩皮比例,麥粒含量,碳源及其濃度,氮源及其濃度,響應(yīng)面法篩選最佳配方,培養(yǎng)條件的篩選,含水量,接種量,培養(yǎng)溫度,培養(yǎng)時(shí)間,響應(yīng)面法篩選最佳培養(yǎng)條件,8,非滅菌條件下對(duì)菌株生長的影響,滅菌條件下對(duì)菌株生長的影響,固體發(fā)酵方式,不同滅菌溫度不同滅菌時(shí)間,9,淺盤培養(yǎng)法,蘑菇菌棒培養(yǎng)法,固體發(fā)酵方式,10,近紅外光分析儀,11,不同濕度,不同溫度,不同時(shí)間,保存期及穩(wěn)定性檢測,孢子萌發(fā)情況,12,菌劑的田間應(yīng)用,種子出苗,植株生長情況,枯萎病防效,茄科：番茄、茄子瓜類：黃瓜、甜瓜,番茄、茄子,番茄、茄子,13,生防菌哈茨木霉FJAT-9040,菌劑生產(chǎn)工藝的研究,發(fā)酵條件的研究,發(fā)酵方式的研究,營養(yǎng)成分的檢測,產(chǎn)物的保存期和穩(wěn)定性的檢測,菌劑的田間應(yīng)用,14,五、研究進(jìn)度安排,2012年10-2013.3,2013年4-5,2013年6-7,2013年8-10,2013年11-2014.2,菌株FJAT-9040固體發(fā)酵條件的研究,固體發(fā)酵方式的研究,固體發(fā)酵過程營養(yǎng)成分的檢測,固體發(fā)酵產(chǎn)物保存期及穩(wěn)定性的檢測,菌劑的應(yīng)用,15,六、研究基礎(chǔ),張衡宇等對(duì)該菌株的研究主要包括生物學(xué)、液體發(fā)酵條件、對(duì)不同枯萎病病原菌的抑制作用。肖榮鳳等對(duì)該菌株的GFP標(biāo)記進(jìn)行了研究，獲得了1株熒光性狀穩(wěn)定的菌株FJAT-9295；同時(shí)對(duì)該菌株土壤定殖示蹤進(jìn)行了研究，研究表明菌株在育苗土中定殖最好，泥土中定殖最差；種植茄子的定殖效果比未種植的好。,（一）實(shí)驗(yàn)室研究基礎(chǔ),16,六、研究基礎(chǔ),通過單因素方法篩選出了墊料與麩皮的最佳產(chǎn)孢比例墊料：麩皮9：1，產(chǎn)孢量為4.6107個(gè)/ml。,培養(yǎng)基配方的篩選墊料與麩皮的比例,（二）本實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ),17,六、研究基礎(chǔ),通過單因素方法篩選出了外加麥粒的含量，40%（體積比）產(chǎn)孢量為2.3108個(gè)/ml。,培養(yǎng)基配方的篩選麥粒含量的篩選,18,六、研究基礎(chǔ),通過單因素方法篩選出了外加碳源為蔗糖，添加量為0.1g/50ml。,培養(yǎng)基配方的篩選碳源及其濃度的篩選,19,七、已具備的研究條件,該菌株的生物學(xué)特性、液體發(fā)酵條件、對(duì)不同枯萎病病原菌的抑制作用已進(jìn)行較為系統(tǒng)地研究。本實(shí)驗(yàn)室已成功對(duì)該菌株進(jìn)行GFP標(biāo)記，并具有一株熒光性狀較穩(wěn)定的菌株。本實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備齊全，有經(jīng)驗(yàn)豐富的老師指導(dǎo)，為實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行提供了保障。,20,謝謝！,21,