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2018-2019學年高中生物 第一章 基因工程 第1課時 工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生課件 浙科版選修3.ppt

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1、第1課時 工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生,第一章 基因工程,選修3 現(xiàn)代 生物技術(shù)專題,,一、基因工程的概念和理論基礎(chǔ),,二、基因工程的操作工具,,達標檢測,內(nèi)容索引,一、基因工程的概念和理論基礎(chǔ),新知導學,遺傳工程,遺傳物質(zhì),細胞,遺傳物質(zhì),受體細胞,重組DNA分子,DNA是生物遺傳物質(zhì),DNA雙螺旋,DNA連接酶,遺傳信息,質(zhì)粒載體,探究1——理性思維 六個方面理解基因工程的含義,互動探究,基因重組,遠緣雜交不親和,定向,體外,受體細胞,基因產(chǎn)物,探究2——學會總結(jié) 1.不同生物的DNA分子能拼接起來的理論基礎(chǔ) (1)DNA分子的基本組成單位都是 。 (2)雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)

2、都是規(guī)則的 。 (3)所有生物的DNA堿基對均遵循嚴格的“ ”。 2.外源基因能夠在受體內(nèi)表達的理論基礎(chǔ) (1)基因是控制生物體性狀的結(jié)構(gòu)和功能單位,具有相對獨立性。 (2)遺傳信息的傳遞都遵循 。 (3)生物界共用一套 。,四種脫氧核苷酸,雙螺旋結(jié)構(gòu),堿基互補配對原則,中心法則,遺傳密碼,例1 科學家們經(jīng)過多年的努力,創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)——基因工程,實施該工程的最終目的是 A.定向提取生物體內(nèi)的DNA分子 B.定向地對DNA分子進行人工“剪切” C.在生物體外對DNA分子進行改造 D.定向地改造生物的遺傳性狀,答案,解析,√,解析 基因工程是在體外進行基

3、因重組,然后導入受體細胞內(nèi)。重組基因在受體細胞內(nèi)表達,產(chǎn)生人類所需的生物類型和生物產(chǎn)品,也就是定向地改造了生物的遺傳性狀。,例2 (2017浙江鎮(zhèn)海中學月考)關(guān)于基因工程的敘述,錯誤的是 A.利用體外DNA重組技術(shù)定向改造生物的遺傳性狀 B.在細胞水平上設(shè)計施工,需要限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和載體 C.打破物種界限獲得人們需要的生物類型或生物產(chǎn)品 D.抗蟲煙草的培育種植降低了生產(chǎn)成本,減少了環(huán)境污染,答案,解析,√,解析 基因工程是指按照人類的愿望,將不同生物的遺傳物質(zhì)在體外人工剪切并和載體重組后轉(zhuǎn)入細胞內(nèi)進行擴增,并表達產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的技術(shù),可定向改造生物的遺傳性狀,A正確; 基因工程

4、是在分子水平上設(shè)計施工的,B錯誤; 基因工程可在不同生物間進行,故可打破物種界限獲得人們需要的生物類型或生物產(chǎn)品,C正確; 抗蟲煙草的培育種植減少了農(nóng)藥的使用,降低了生產(chǎn)成本,減少了環(huán)境污染,D正確。,二、基因工程的操作工具,1.限制性核酸內(nèi)切酶 (1)來源:從 中分離出來。 (2)作用:對DNA分子上不同的特定的 進行識別和切割。 (3)結(jié)果:把 切割成許多不同的片段。 2.DNA連接酶 (1)作用:具有縫合DNA片段的作用,將具有_______________________ 連接在一起。 (2)結(jié)果:形成 ,將 連接在一起。,新知導學,原核生物,核苷酸序列

5、,雙鏈DNA分子,末端堿基互補的2個DNA,片段,重組DNA分子,外源基因和載體DNA,DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶的作用和作用部位是否相同?,答案 DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶的作用正好相反,前者是“縫合”,后者是“切割”;但二者作用部位相同,都作用于特定部位的磷酸二酯鍵。,思考,答案,3.質(zhì)粒——最常用的載體 (1)本質(zhì):具有 能力的很小的 分子。 (2)存在形式:獨立于細菌 之外。 (3)質(zhì)粒作為載體所具備的條件 ①能 。 ②具有 基因,例如四環(huán)素的抗性基因。 (4)作用:作為基因工程的 。,自主復制,雙鏈環(huán)狀DNA,擬核DNA,自主復制,抗生素抗性,載體,4.第

6、一個人工DNA重組產(chǎn)物是: 與 連接物。 5.基因工程誕生的標志——基因工程發(fā)展史上第一個成功的基因克隆實驗是:某些接受了重組DNA分子的大腸桿菌同時具有 和_______ 的性狀。,猿猴病毒DNA,噬菌體DNA,抗四環(huán)素,抗卡那,霉素,探究——圖示解讀 1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀” 據(jù)圖回答相關(guān)問題: (1)把如圖1所示DNA分子切割成2個片段的酶稱為_______________ 。該限制性核酸內(nèi)切酶的切點在 之間,形成 個粘性末端,其特點是 。,互動探究,限制性核酸內(nèi)切,酶,G、A,2,堿基序列完全相同,(2)此限制性核酸內(nèi)切酶識別

7、特點是 ,如圖1中的識別序列為 。 (3)如果G堿基發(fā)生基因突變,可能發(fā)生的情況是__________________ 。,只能識別某一特定的核苷酸序列,GAATTC,限制性核酸內(nèi)切酶不,能識別切割位點,(4)如圖2所示,限制性核酸內(nèi)切酶斷裂的化學鍵是 。所以,斷裂的位置為 處。,磷酸二酯鍵,2,觀察上圖回答相關(guān)問題: (1)如圖所示,DNA連接酶連接的2個DNA片段具有 的特點,形成 。 (2)作用實質(zhì):恢復被限制性核酸內(nèi)切酶切開了的兩個核苷酸之間的_____ 。,2.DNA連接酶——“分子縫合針”,重組DNA分子,末端堿基互補,磷酸,二酯鍵,(3)

8、觀察下圖所示過程,回答相關(guān)問題:,①是 ,②是 ,二者的作用部位都是____ 。,限制性核酸內(nèi)切酶,DNA連接酶,磷酸,二酯鍵,3.分析質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)模式圖,回答下列問題:,(1)質(zhì)粒上抗生素抗性基因有什么作用?,答案 作為標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。,(2)作為基因進入受體細胞的載體,要求必須對受體細胞無害,為什么?,答案 載體如果對受體細胞有害,其一旦被導入受體細胞,就會影響受體細胞的生命活動,甚至會破壞受體的生命活動。,答案,例3 (2017杭州七校聯(lián)考)用兩種限制性核酸內(nèi)切酶Xba Ⅰ和Sac Ⅰ(兩種酶切出的粘性末端不同)切割某DNA,獲得含目的基因的片段

9、(注:圖中箭頭所指的位置是限制性核酸內(nèi)切酶識別和切割的位點)。若利用該片段形成重組DNA,應選用下圖中,答案,解析,√,解析 該Ti質(zhì)粒中含有限制性核酸內(nèi)切酶Xba Ⅰ和SacⅠ的切割位點,且用這兩種酶切割可將目的基因插入T-DNA中,A正確; 該Ti質(zhì)粒中不含限制性核酸內(nèi)切酶Sac Ⅰ的切割位點,B錯誤; 該Ti質(zhì)粒中含有限制性核酸內(nèi)切酶Xba Ⅰ和Sac Ⅰ的切割位點,但用這兩種酶切割不會將目的基因插入T-DNA中,C錯誤; 該Ti質(zhì)粒中不含限制性核酸內(nèi)切酶Xba Ⅰ的切割位點,D錯誤。,例4 (2018浙江金華調(diào)研)下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制性核酸內(nèi)切

10、酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是,A.①②③④ B.①②④③ C.①④②③ D.①④③②,答案,解析,√,解析 限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶三者均作用于磷酸二酯鍵處,限制性核酸內(nèi)切酶使鍵斷開,而DNA聚合酶連接的是單個脫氧核苷酸,DNA連接酶作用于DNA片段,解旋酶作用于氫鍵,使DNA雙鏈打開,形成DNA單鏈,綜上所述,C正確。,(1)限制性核酸內(nèi)切酶與DNA連接酶的比較,(2)限制性核酸內(nèi)切酶與解旋酶的區(qū)別 ①相同點:都作用于DNA分子中的化學鍵。 ②不同點:作用部位不同,前者作用于磷酸二酯鍵,后者作用于氫鍵。,(3)DNA連接酶與DNA聚合酶的比較

11、,工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生,,限制性核酸內(nèi)切酶,的發(fā)現(xiàn) 限制性核酸內(nèi)切酶的作用及作用特點 限制性核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)對基因工程誕生的意義,,DNA連接酶,DNA連接酶的作用 DNA連接酶的發(fā)現(xiàn)對基因工程誕生的意義,,質(zhì)粒,質(zhì)粒的_________ 質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)特點 質(zhì)粒對于基因工程誕生的意義,,限制性核酸內(nèi)切酶,化學本質(zhì),學習小結(jié),達標檢測,1.下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對DNA分子的識別序列和剪切位點圖(箭頭表示切點,切出的斷面為粘性末端)。下列敘述錯誤的是 限制性核酸內(nèi)切酶1:—↓GATC—; 限制性核酸內(nèi)切酶2:—CCGC↓GG—; 限制性核酸內(nèi)切酶3:—G↓GATCC—。 A.不同的

12、限制性核酸內(nèi)切酶有不同的識別序列和切割位點,體現(xiàn)了酶的專 一性 B.限制性核酸內(nèi)切酶2和3識別的序列都包含6個脫氧核苷酸 C.限制性核酸內(nèi)切酶1和3剪出的粘性末端相同 D.能夠識別和切割RNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制性核酸內(nèi)切 酶2,答案,解析,√,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,解析 不同的限制性核酸內(nèi)切酶有不同的識別序列和切割位點,體現(xiàn)了酶具有專一性;限制性核酸內(nèi)切酶2和限制性核酸內(nèi)切酶3識別的序列分別是CCGCGG和GGATCC,均含有6個脫氧核苷酸;限制性核酸內(nèi)切酶1和限制性核酸內(nèi)切酶3剪出的粘性末端相同,均為GATC;三種限制性核酸內(nèi)切酶均不能識別和切割RNA中

13、的核苷酸序列。,2.(2017東陽期中)下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是 A.DNA連接酶的作用是將兩個粘性末端的堿基連接起來 B.目的基因?qū)胧荏w細胞后,受體細胞即發(fā)生基因突變 C.目的基因與載體結(jié)合的過程發(fā)生在細胞外 D.常使用的載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等,答案,解析,√,1,2,3,4,5,解析 DNA連接酶的作用對象是磷酸二酯鍵,A錯誤; 目的基因?qū)胧荏w細胞屬于基因重組,B錯誤; 目的基因與載體在體外重組,重組好之后導入受體細胞中,C正確; 常使用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體和動植物病毒等,D錯誤。,A.DNA連接酶作用位點在b處,催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成化學鍵 B.甲、乙

14、具相同的粘性末端可形成重組DNA分子,但甲、丙之間不能 C.甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的 D.切割甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子,3.(2017舟山中學期中)對下圖所示粘性末端的說法錯誤的是,√,答案,解析,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,解析 DNA連接酶的作用位點為磷酸二酯鍵,即圖示中的a位置,A錯誤; 甲、乙具有相同的粘性末端(—TTAA)可形成重組DNA分子,但甲、丙粘性末端不同,兩者不能形成重組DNA分子,B正確; 限制性核酸內(nèi)切酶特異性識別DNA序列,甲、乙、丙的DNA序列不同,因此粘性末端是由各自不同的限制性核酸

15、內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的,C正確; 甲與乙片段形成的重組DNA分子序列與甲的序列不同,識別甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子,D正確。,4.(2017浙江名校協(xié)作體聯(lián)考)下列關(guān)于DNA連接酶的理解正確的是 A.其化學本質(zhì)是蛋白質(zhì) B.DNA連接酶可以恢復DNA分子中的氫鍵 C.它不能被反復使用 D.在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶,√,答案,解析,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,解析 DNA連接酶的化學本質(zhì)為蛋白質(zhì),其功能是將末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起,形成重組DNA分子,A正確; DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵,B錯誤; 酶可以被反

16、復使用,C錯誤; DNA聚合酶以一條脫氧核苷酸鏈為模板,將單個脫氧核苷酸連接成DNA單鏈片段,與DNA連接酶的作用機理不同,基因工程中不可用DNA聚合酶代替DNA連接酶,D錯誤。,5.下面是大腸桿菌及質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖,請據(jù)圖回答下列問題:,1,2,3,4,5,答案,解析,(1)a代表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學本質(zhì)相同,都是______,二者還具有其他共同點,如:①____________,②_______________(寫出兩條即可)。,DNA,能夠自我復制,具有遺傳效應,解析 質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,是能夠自主復制的雙鏈環(huán)狀DNA分子,具有一至多個限制性核酸內(nèi)切酶切割位點,進入受體細胞后

17、能自主復制,具有標記基因,便于重組DNA的鑒定與選擇。,(2)若質(zhì)粒DNA分子的切割末端為 ,則與之連接的目的基因切 割末端應為___________;可使用______________把質(zhì)粒和目的基因連接在一起。 (3)氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒DNA上稱為____________,其作用是_______________________。 (4)下列常在基因工程中作為載體的是 A.蘇云金芽孢桿菌抗蟲基因 B.土壤農(nóng)桿菌中RNA分子 C.大腸桿菌的質(zhì)粒 D.動物細胞的染色體,—A —TGCGC,CGCGT— A—,DNA連接酶,標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇,1,2,3,4,5,答案,√,

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