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1、技能訓(xùn)練1 實驗室常用玻璃器皿洗刷、消毒和儀器使用,實訓(xùn)目標 熟悉各種玻璃器皿的洗刷和滅菌方法； 了解傳染病實驗室常用儀器的構(gòu)造； 熟悉儀器的使用方法和注意事項。,儀器材料 試管、刻度吸管、培養(yǎng)皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、量杯、漏斗、乳缽、普通棉花、脫脂棉、紗布、牛皮紙、舊報紙、新潔爾滅、來蘇兒、石炭酸、肥皂粉、重鉻酸鉀、粗硫酸、鹽酸、橡膠手套、橡膠圍裙等； 電熱恒溫培養(yǎng)箱、電熱干燥箱、高壓蒸氣滅菌器、電冰箱、電動離心機、電熱恒溫水浴箱等。,方法步驟 （一）玻璃器皿的洗刷、包裝和消毒 （二）實驗室常用儀器的使用,（一）玻璃器皿的洗刷、包裝和消毒,1玻璃器皿的洗刷 2玻璃器皿的包裝 3玻

2、璃器皿的滅菌,1玻璃器皿的洗刷,（1）新購入的玻璃器皿 用12鹽酸溶液浸泡數(shù)小時或過夜,再用清水反復(fù)沖刷，最后用蒸餾水沖洗23次，倒立使之自然干燥或烘干。 （2）一般使用過的器皿 可于用后立即用清水沖凈。凡沾有油污的，可用肥皂水煮半小時后趁熱刷洗，再用清水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗23次，晾干。 （3）載玻片 用畢立即浸泡于消毒液中，經(jīng)12d取出，用洗衣粉液煮沸5min，再用毛刷刷去油脂及污垢，然后用清水沖洗，晾干或?qū)⑾磧舻牟Ｆ谜麴s水煮沸，趁熱把玻片攤放在干毛巾或干紗布上，稍等片刻，玻片即干，保存?zhèn)溆没蚪萦?5酒精中備用。,（4）細菌培養(yǎng)用過的試管、平皿等 須高壓蒸氣滅菌

3、后，倒去內(nèi)容物，用熱肥皂水刷去污物，然后用清水沖洗，最后用蒸餾水沖洗23次，晾干或烘干。 （5）對污染有病原微生物的吸管 用后投入盛有消毒液（23來蘇兒或5石炭酸）的玻璃筒內(nèi)（筒底必須墊有棉花，消毒液要淹沒吸管），經(jīng)12d后取出，浸入2肥皂粉液中12h（或煮沸）取出，再用一根橡皮管，使一端接于自來水龍頭，另一端與吸管口相接，用自來水反復(fù)沖洗 ，最后用蒸餾水沖洗。 （6）如遇玻璃器皿用上述方法不能洗凈者，可用下列清洗液浸泡后洗刷。 重鉻酸鉀（工業(yè)用）80g，粗硫酸100ml，水1000ml。,（1）培養(yǎng)皿 將合適的底蓋配對，用報紙6個一摞包成一包，裝入金屬盒內(nèi)。 （2）試管、三角燒瓶等

4、 塞上大小適合的棉塞或紗布塞（也可用各種型號的軟木塞），并在棉塞、瓶口之外，包以牛皮紙，用細繩扎緊即可。 （3）吸管 用35cm寬的長紙條（舊報紙、牛皮紙等），由尖端纏卷包裹，直至包沒吸管將紙條合攏。 （4）乳缽、漏斗、燒杯等 可用紙張直接包扎或用厚紙包嚴開口處，再以牛皮紙包扎。,2玻璃器皿的包裝,常用干熱滅菌法 將包裝的玻璃器皿放入干燥箱內(nèi)，為使空氣流通，堆放不宜太擠，也不能緊貼箱壁，以免燒焦。一般160，維持2h。 滅菌完畢，關(guān)閉電源待箱中溫度下降至60以下，開箱取出玻璃器皿。,3玻璃器皿的滅菌,（二）實驗室常用儀器的使用,1電熱恒溫培養(yǎng)箱 2電熱干燥箱 3高壓蒸氣滅菌器 4電冰

5、箱 5電動離心機 6電熱恒溫水浴箱,1電熱恒溫培養(yǎng)箱,電熱恒溫培養(yǎng)箱又稱溫箱， 主要由箱體、電熱絲、溫度調(diào)節(jié)器等構(gòu)成。 溫箱主要用于細菌的培養(yǎng)、某些血清學(xué)試驗及有關(guān)器皿的干燥等,（1）電熱恒溫培養(yǎng)箱使用方法,插上電源插頭，開啟電源開關(guān)，綠色指示燈明亮，表明電源接通。 然后把溫控儀上的調(diào)節(jié)旋鈕旋至所需溫度刻度處，此時紅燈亮，箱內(nèi)開始升溫，待紅綠指示燈交替發(fā)亮?xí)r，工作室內(nèi)溫度達到設(shè)定狀態(tài)，進入正常工作。 應(yīng)注意，近幾年銷售的溫箱有的紅燈亮表示通電及恒溫，綠燈亮表示升溫。,（2）電熱恒溫培養(yǎng)箱使用注意事項,溫箱必須放置于干燥及平穩(wěn)處。 使用時，隨時注意溫度計的指示溫度是否與所需溫度相同。 除了取放培

6、養(yǎng)物開啟箱門外，盡量減少開啟次數(shù)，以免影響恒溫。 工作室內(nèi)隔板放置試驗材料不宜過重、過密，以防影響熱空氣對流。底板為散熱板，其上切勿直接放置物品。 培養(yǎng)箱內(nèi)禁止放入易揮發(fā)性物品，以免發(fā)生爆炸。,2電熱干燥箱,電熱干燥箱又稱干熱滅菌箱，其構(gòu)造和使用方法與溫箱相似，但所用溫度較高。 主要用于玻璃器皿和金屬制品的干熱滅菌。 滅菌時箱內(nèi)放置物品要留空隙，保持熱空氣流動，以利徹底滅菌。常用滅菌溫度160，維持2 h。滅菌時，關(guān)門加熱應(yīng)開啟箱頂上的活塞通氣孔，使冷空氣排出，待升至60時，將活塞關(guān)閉，為了避免玻璃器皿炸裂，滅菌后箱內(nèi)溫度降至60時，才能開啟箱門取物品。若僅需達到干燥目的，可一直開啟活塞通氣孔

7、，溫度只需60左右即可。 滅菌過程中如遇溫度突然升高，箱內(nèi)冒煙，應(yīng)立即切斷電源，關(guān)閉排氣小孔，箱門四周用濕毛巾堵塞，杜絕氧氣進入，火則自熄。,3高壓蒸氣滅菌器,高壓蒸氣滅菌器是應(yīng)用最廣、效率最高的滅菌器，有手提式、立式、橫臥式三種，其構(gòu)造和工作原理基本相同。 高壓蒸氣滅菌器為一鍋爐狀的雙層金屬圓筒，外筒盛水，內(nèi)筒有一活動金屬隔板，隔板有許多小孔，使蒸氣流通。滅菌器上方或前方有金屬厚蓋，蓋上有壓力表、安全閥和放氣閥。蓋的邊緣附有螺旋，借以緊閉滅菌器，使蒸氣不能外溢。 在標準大氣壓下，水的沸點是100，這個溫度能殺死一般細菌的繁殖體，要殺死芽胞則需要很長時間。如果人為地加大壓力，則水的沸點可

8、以升高。因高壓蒸氣滅菌器是一個密閉的容器，加熱時蒸氣不能外溢，所以鍋內(nèi)壓力不斷增大，使水的沸點超過121。,（1）高壓蒸氣滅菌器使用方法,加適量水于滅菌器外筒內(nèi)，使水面略低于支架，將滅菌物品包扎好放入內(nèi)筒篩板上。 器蓋蓋上時，必須將器蓋腹側(cè)的放氣軟管插入消毒內(nèi)筒的管架中，然后對稱扭緊六個螺栓； 檢查安全閥、放氣閥，并使安全閥關(guān)閉，放氣閥打開。 通電后，待水蒸氣從放氣閥均勻冒出時，表示鍋內(nèi)冷空氣已排盡，然后關(guān)閉放氣閥繼續(xù)加熱，待滅菌器內(nèi)壓力升至約1105Pa（121.3），開始計時，維持2030min（通過控制電源維持），即可達到滅菌的目的。 滅菌完畢，停止加熱，待壓力自動降至零時才能開蓋取物。

9、 手提式高壓蒸氣滅菌器滅菌之后，可放出器內(nèi)的水，并擦干凈。,高壓蒸氣滅菌器使用方法視頻,（2）高壓蒸氣滅菌器使用注意事項,螺栓必須對稱均勻旋緊，以免漏氣。 內(nèi)筒中的滅菌物品，不可堆壓過緊，以免妨礙蒸氣流通，影響滅菌效果。 凡能耐熱和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、敷料、病原微生物等都可應(yīng)用此法滅菌。 為了達到徹底滅菌的目的，滅菌時間和壓力必須準確可靠，操作人員不能擅自離開。 注意安全，在高壓滅菌密封液體時，如果壓力驟降，可能造成物品內(nèi)外壓力不平衡而炸裂或液體噴出。,4電冰箱,電冰箱主要由箱體、制冷系統(tǒng)、自動控制系統(tǒng)和附件四大部分構(gòu)成。 實驗室中常用以保存培養(yǎng)基、藥敏片、病料以及菌種、疫苗、診斷

10、液等生物制品。,電冰箱使用方法及注意事項,（1）電冰箱應(yīng)放置在干燥通風處，避免日光照射，遠離熱源，離墻10cm以上，以保證對流，利于散熱。 （2）電冰箱電源的電壓一般為220V，如不符合，須另裝穩(wěn)壓器穩(wěn)壓。 （3）通電檢查箱內(nèi)照明燈是否明亮，機器是否運轉(zhuǎn)。 （4）使用時將溫度調(diào)節(jié)器調(diào)至一定刻度（冷凍室0以下，冷藏室溫度410）。調(diào)節(jié)溫度時不可一次調(diào)得過低，以免凍壞箱內(nèi)物品。應(yīng)作第二次、第三次調(diào)整。 （5）冷凍室冰霜較厚時，按化霜按鈕或切斷電路，進行化霜，融化后清潔整理。 （6）箱內(nèi)存放物品不宜過擠，以利冷空氣對流，使箱內(nèi)溫度均勻。 （7）箱內(nèi)保持清潔干燥，如有霉菌生長，斷電后取出物品，經(jīng)福爾馬

11、林熏蒸消毒后，方可使用。,5電動離心機,實驗室常用電動離心機沉淀細菌、血細胞、蟲卵和分離血清等，較多用的低速離心機轉(zhuǎn)速可達4000r/min。 常用傾角電動離心機，其中管孔有一定傾斜角度，使沉淀物迅速下沉。 上口有蓋，確保安全，前下方裝有電源開關(guān)和速度調(diào)節(jié)器，可以調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。,電動離心機使用方法及注意事項,（1）先將盛有材料的兩個離心管及套管放天平上配平，然后對稱放入離心機中，若分離材料為一管，則對側(cè)離心管放入等量的其他液體。 （2）將蓋蓋好，接通電路，慢慢旋轉(zhuǎn)速度調(diào)節(jié)器到所需刻度，保持一定的速度，達到所需的時間（一般轉(zhuǎn)速2000r/min，維持320min），將調(diào)節(jié)器慢慢旋回“0”處，停止轉(zhuǎn)動

12、方可揭蓋取出離心管。,6電熱恒溫水浴箱,為鍍鎳的銅或不銹鋼制成的水浴箱，加熱快耗電省，箱前有“電源”和“加熱”指示燈（一紅一綠），并裝有溫度調(diào)節(jié)器，自37100可以調(diào)節(jié)定溫，箱側(cè)有一水籠頭，供放水用。 水浴箱主要用于蒸餾、干燥、濃縮、溫漬化學(xué)藥品及血清學(xué)試驗用。,使用時必須先加水于箱內(nèi)，通電后電源指示燈（綠燈）即亮，再順時針方向旋轉(zhuǎn)溫度調(diào)節(jié)器，綠燈滅，使加熱指示燈（紅燈）亮，即接通內(nèi)部電熱絲，使之加溫。 如水溫達到所需溫度，再逆時針方向微微調(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)器，使紅綠指示燈忽亮忽滅，經(jīng)3060min觀察，水溫恒定不變即達到定溫。 如下次使用需要同樣溫度，可不必旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕，或記下所需刻度，以作下次轉(zhuǎn)向之用。 使用時，不可加水過多，以浸過加熱容器為宜。加水少于最低水位，則箱旁焊錫溶化引起漏水。 使用完畢，待水冷卻后，必須放水擦干。,電熱恒溫水浴箱使用方法及注意事項,課后作業(yè),1.寫出實習(xí)報告,