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2014高三生物一輪復(fù)習(xí)指導(dǎo) 活頁作業(yè)35 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(含解析)新人教版選修1

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1、 活頁作業(yè)(一) 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 一、選擇題 因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,而樣品稀釋度無論多高都很難使其中的細(xì)菌都單個(gè)分布于培養(yǎng)基上,故計(jì)數(shù)結(jié)果比實(shí)際值低。 答案:B 2.用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)(  ) ①可以用相同的培養(yǎng)基 ②都需要使用接種針進(jìn)行接種?、鄱夹枰诨鹧媾赃M(jìn)行接種?、芏伎梢杂脕碛?jì)數(shù)活菌 A.①②         B.③④ C.①③ D.②④ 解析:平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基,故①正確;平板劃線法采用接種針進(jìn)行操作,而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作,故②錯(cuò)誤;純化時(shí),要進(jìn)行無菌操作,需要在

2、火焰旁接種,避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基,故③正確;平板劃線法一般用于分離而不是計(jì)數(shù),故④錯(cuò)誤。 答案:C 3.細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精消毒、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌(  ) A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種環(huán) C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、手、高壓鍋 答案:C 4.通過實(shí)驗(yàn)測(cè)定土壤中的細(xì)菌數(shù)量,下列與此操作有關(guān)的敘述中,不正確的是(  ) A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B.取104、105倍的土壤稀釋液0.1 mL,分別涂布于各組平板上 C.將培養(yǎng)皿倒置,37℃恒溫培

3、養(yǎng)24~48小時(shí) D.選擇菌落數(shù)在300個(gè)以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù) 解析:檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù),用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板,取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上,將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置,37℃恒溫培養(yǎng)24~48小時(shí),在確定對(duì)照組無菌后,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 答案:D 5.(2013·赤峰質(zhì)檢)下表為某培養(yǎng)基的配方,有關(guān)敘述正確的是(  ) 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 伊紅 美藍(lán) 青霉素 瓊脂 蒸餾水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.06

4、5 g 1萬單位 適量 1 000 mL A.能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌,擬核上有抗青霉素的基因 B.此培養(yǎng)基是天然鑒別培養(yǎng)基 C.此培養(yǎng)基可以用來檢測(cè)自來水中細(xì)菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn) D.此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中 解析:此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基。抗性基因一般位于大腸桿菌的質(zhì)粒上,而不是擬核上;此培養(yǎng)基只能用來檢測(cè)自來水中大腸桿菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)。 答案:D 6.下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述,不正確的是(  ) A.剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入 B.剛果紅可以在菌落形成后加入 C.剛果紅在菌落形成前倒平板時(shí)

5、加入,加入的剛果紅不需要滅菌 D.在菌落形成后加入剛果紅時(shí),剛果紅不需要滅菌 答案:C 二、非選擇題 7.(2013·南昌模擬)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料,但若不經(jīng)細(xì)菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們?cè)噲D探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示,實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答問題。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10 g 1 g 15g 將上述物質(zhì)溶解后,用自來水定容

6、到1 000 mL (1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)?________________________________________________________________________, 理由是_______________________________________________________________。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是________,這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________,實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),原因是_______________________

7、______________________________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí),常采用________(方法)接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)下列材料或用具中:①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿;②玻棒、試管、錐形瓶和吸管;③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。需要滅菌的是:________;需要消毒的是:________。(填序號(hào)) (6)在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí),A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有________(填序號(hào))。 ①由于土樣不同?、谟捎谂囵B(yǎng)基污染?、塾捎诓僮魇д` ④沒有設(shè)置對(duì)照 (7)在以尿素為唯一氮源的

8、培養(yǎng)基中加入________,細(xì)菌合成的________將尿素分解為氨,pH增高,使指示劑變紅色。 解析:(1)微生物與植物生長(zhǎng)所需的營養(yǎng)不完全相同,培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不能用于組織培養(yǎng)。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素作唯一氮源,分解尿素的微生物可生長(zhǎng),這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來自尿素和葡萄糖。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)增加溶氧量。 (4)在固體培養(yǎng)基上接種用稀釋涂布平板法或平板劃線法。 (5)滅菌要徹底消滅微生物及其芽孢,如①和②。實(shí)驗(yàn)操作者的雙手要消毒。 (6)A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出的菌落數(shù)與其他組相比,原因可能是土樣不同,培養(yǎng)基污染,操作失誤等。與是

9、否設(shè)置對(duì)照無關(guān)。 (7)由于細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH增高,故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑將變紅。 答案:(1)不能 缺少植物激素(或缺少植物需要的各種營養(yǎng)) (2)篩選目的菌 選擇 (3)尿素 葡萄糖 為目的菌提供氧氣 (4)稀釋涂布平板法(平板劃線法) (5)①②?、邸?6)①②③ (7)酚紅指示劑 脲酶 8.如圖為分離并統(tǒng)計(jì)分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程,據(jù)此回答有關(guān)問題: →→→ (1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌,從高溫?zé)崛袑ふ夷蜔峋?,這說明 _______________________________________________

10、_________________________。 (2)某同學(xué)根據(jù)需要,配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。 纖維素粉 NaNO3 Na2HPO4·7H2O KH2PO4  5 g    1 g      1.2 g     0.9 g MgSO4·7H2O KCl 酵母膏、水解酪素   0.5 g    0.5 g  適量 如果將其中的纖維素粉換成____________________,菌落數(shù)____________________,即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。 (3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,本實(shí)驗(yàn)宜采用________法,

11、原因是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 9.纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素。回答下列問題: (1)在篩選纖維素分解菌的過程中,通常用________染色法,這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選。甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到了如圖所示的結(jié)果,則纖維素分解菌位于(  ) A.③        B.①②

12、 C.②③ D.①②③ (2)乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù),與分離醋酸菌相比,進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)除了營養(yǎng)不同外,最主要的實(shí)驗(yàn)條件差別是________________________________________,該同學(xué)采用活菌計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目________。 (3)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過程中,為了抵制外界酸和堿對(duì)酶活性的影響,采取的措施是向提取液和分離液中添加________。若探究纖維素酶活性的最適溫度,如何設(shè)置對(duì)照?________________________________________________________________

13、________。 解析:(1)剛果紅與纖維素形成的紅色復(fù)合物在纖維素被分解后將不再形成,則在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 (2)牛胃是一個(gè)厭氧的環(huán)境,所以其中的纖維素分解菌與需氧的醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同。因是活菌計(jì)數(shù)法,所以部分死亡菌無法計(jì)數(shù)。另外當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上只觀察到一個(gè)菌落,所以偏小。 (3)探究最適溫度可設(shè)置一系列的溫度梯度相互對(duì)照,其他無關(guān)變量要適宜。 答案:(1)剛果紅 A (2)保證無氧環(huán)境 小(低) (3)緩沖溶液 不同的溫度梯度之間相互對(duì)照 10.氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料,因其不易降解,會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(

14、圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。 2可知,SP1菌在__________培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng),其原因是________________________________________________________________________。 解析:配制固體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)在液體培養(yǎng)基的成分中再加入瓊脂作為凝固劑。在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH,后進(jìn)行滅菌,防止滅菌后在調(diào)節(jié)pH的過程中污染培養(yǎng)基。據(jù)表可知,培養(yǎng)基Ⅰ為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,包括碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子,適用于多種微生物的培養(yǎng)。培養(yǎng)基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨,以硝酸銨為氮源,可以選擇出以硝酸銨為氮源的微生物,是選擇培養(yǎng)基。在營養(yǎng)缺乏、環(huán)境惡劣時(shí),微生物可以形成休眠體——芽孢,來度過不良環(huán)境。據(jù)圖2可知,SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下菌體數(shù)最早達(dá)到最大值,即最早停止生長(zhǎng),原因是在培養(yǎng)基Ⅲ中,氯苯是唯一碳源,由于20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件氮源最少,因此也最早被耗盡,使SP1菌停止生長(zhǎng)。 答案:(1)瓊脂 (2)先調(diào)pH,后滅菌 (3)通用 選擇 硝酸銨 (4)芽孢 (5)20 mg/L氯苯 碳源最早耗盡 6

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