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1、自身抗體的檢測及臨床應用 自身抗體的檢測及臨床應用 2014/08/01 《臨床檢驗雜志》2014年第六期 1如何實現(xiàn)自身抗體檢驗質(zhì)量的真正提升 1．1自身抗體的室內(nèi)質(zhì)控問題除了室間質(zhì)評，每個實驗室的室內(nèi)質(zhì)控也是保證檢驗質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。目前多數(shù)檢驗項目都可以直接購買國際或國內(nèi)標準化質(zhì)控品，但自身抗體的檢測仍缺少標準化的質(zhì)控品，檢驗質(zhì)量很難保證。每個實驗室要想保證前后檢驗結(jié)果的縱向可比性，應該自建室內(nèi)質(zhì)控品，特別是弱陽性室內(nèi)質(zhì)控品，并且在實驗室不同檢驗人員之間實現(xiàn)可比性

2、。這種方法在國際或國內(nèi)統(tǒng)一的標準化質(zhì)控品尚未研發(fā)或普及之前，可以作為各個實驗室提高檢驗結(jié)果穩(wěn)定性的一個較好手段，也已納入最新版的CNAS文件。 1．2不同檢測方法間的差異問題同一實驗室不同檢測方法在檢測相同或相似的項目時偶爾會出現(xiàn)結(jié)果不一致的問題。如IIF法檢測ANA有不同核型，在做抗ENA抗體確認實驗時，不同核型會對應相應特異性抗原的抗體，如細顆粒型常對應抗SSA/SSB抗體、粗顆粒型常對應抗ＲNP/Sm抗體、均質(zhì)型常對應抗dsDNA/組蛋白/核小體等抗體;IIF法檢測AMA與免疫印跡法或ELISA法檢測的抗AMA-M2抗體相對應［4-5］。但實際檢測結(jié)果常出現(xiàn)不一致的現(xiàn)象，一種方法陽性，

3、對應的方法卻陰性。對于這種現(xiàn)象有些已經(jīng)過深入研究，得到了比較滿意的解釋。如出現(xiàn)ANA細顆粒型陽性，抗SSA/SSB抗體陰性時，可以解釋為Hep-2細胞成分復雜，可能是其他成分而非SSA/SSB引起此核型;反之，抗SSA/SSB抗體陽性而ANA陰性時，則可解釋為SSA/SSB抗原在Hep-2細胞制作基質(zhì)時容易漏出，無法檢測。但有些現(xiàn)象則難以闡釋，如抗AMA-M2抗體陽性時，AMA陰性，只能籠統(tǒng)地解釋為方法學差異。其原因也確實可能是廠家試劑生產(chǎn)過程中的問題。即使檢測同一項目，不同方法間也有不一致的現(xiàn)象。如IIF法檢測抗dsDNA抗體特異性很高但不夠敏感，ELISA和免疫印跡法檢測則可以提高敏感性，

4、但假陽性又會增加。因此，國際最新的ANA應用推薦指南也建議對于抗dsDNA抗體的檢測結(jié)果應標明檢測方法［9］。如何協(xié)調(diào)方法間的不一致，需要更豐富的檢驗經(jīng)驗，更充分地與臨床溝通和更深入地進行相關(guān)研究。 2加強與臨床醫(yī)生及患者的交流溝通 做好與臨床醫(yī)生或患者溝通是分析前和分析后質(zhì)量控制過程中的一個不可或缺的環(huán)節(jié)，對保證和持續(xù)改進檢驗質(zhì)量具有極為重要的作用。但目前臨床與檢驗之間缺乏雙向溝通的意識，出現(xiàn)檢驗質(zhì)量差錯時，在責任認定上相互指責。在自身抗體的檢測中，加強與臨床醫(yī)生或患者溝通，至少可以發(fā)揮以下幾個重要作用。 2．1有利于加深臨床醫(yī)生對檢驗工作的理解和信任自身免疫性疾病特別是自身免疫性風濕

5、病臨床表現(xiàn)比較復雜，很多檢驗工作者對這些疾病的臨床知識掌握不夠，沒有信心與臨床溝通，這樣有時會造成臨床醫(yī)生對自身抗體項目的忽視，開申請單時漏掉部分有用的自身抗體項目，甚至造成臨床醫(yī)生對檢驗結(jié)果的不理解或誤解。例如，筆者所在單位就曾有臨床醫(yī)生發(fā)現(xiàn)本實驗室抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)檢驗結(jié)果與其他單位不一致，給臨床治療帶來困惑和干擾。本實驗室用不同方法再次檢測，結(jié)果保持一致，并向臨床解釋了各單位實驗室之間檢測結(jié)果出現(xiàn)差異的可能原因，使問題得到滿意解決，加深了臨床醫(yī)生對檢驗工作的理解和信任。 2．2有利于引導患者正確就醫(yī)，得到及時準確診治當前，大醫(yī)院分科細密，醫(yī)生看病?？苹瑢ζ渌剖壹膊∪狈?/p>

6、認識，導致誤診或延遲診治。尤其是自身免疫性疾病，臨床表現(xiàn)多樣化，更易使患者無所適從。自身抗體的檢測有助引導患者正確就醫(yī)，例如，原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)臨床癥狀并不特異，可表現(xiàn)為疲勞、皮膚瘙癢、貧血甚至關(guān)節(jié)痛，患者首選就診科室常非對口的消化內(nèi)科，而是皮膚科、風濕科甚至血液科。這些科室的醫(yī)生最常開的檢驗項目是ANA等自身抗體，檢驗結(jié)果大都ANA陰性，但常會AMA陽性，該項目是PBC特異診斷指標之一。及時與患者和臨床溝通，會幫助PBC患者得到正確診治，科室也贏得口碑。 2．3有利于檢驗人員拓寬視野，加深對自身免疫性疾病的認識與臨床溝通，可以督促檢驗人員學習和掌握檢驗知識，并從臨床中學到相關(guān)疾病

7、的臨床情況，了解臨床醫(yī)生在診治自身免疫病的過程中對自身抗體的需求情況，可以有的放矢提高自身抗體的臨床應用效能。 3面對新技術(shù)的思考 自身抗體檢測新技術(shù)主要包括兩大類，一類是能對目前常規(guī)檢測技術(shù)進行整合和自動化的檢測系統(tǒng)，另一類是當前尚未用于臨床常規(guī)檢測的新技術(shù)。 3．1自動化檢測系統(tǒng)的建立自身抗體檢測是臨床實驗室中為數(shù)不多、仍采用手工操作的項目，實現(xiàn)自動化，是檢驗工作者夢寐以求的，大量的研究也正朝著這個方向努力。其實，一些免疫印跡法、ELISA、IIF法自動加樣儀器已廣泛用于各大醫(yī)院臨床實驗室，甚至將幾種加樣方法整合到一臺儀器，IIF法結(jié)果自動判斷系統(tǒng)也在部分醫(yī)院得到了應用，使得自身抗體

8、檢測操作過程的自動化水平得到了明顯提高。但IIF結(jié)果自動判斷系統(tǒng)對于未知核型的鑒定以及ANA滴度和復雜核型的判斷準確性很低，仍然需要人工判斷。因此，這種自動化檢測系統(tǒng)還只能起到初篩作用，結(jié)果判讀仍需人工。但相信在不久的將來，隨著各種不同滴度和核型的ANA圖譜日益豐富和完善，自動化判讀的準確性會大大提高，最終應該能替代人工。 3．2新技術(shù)能否引入臨床實驗室近來，很多新技術(shù)如液相芯片技術(shù)、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)、蛋白質(zhì)組學相關(guān)技術(shù)等都在自身抗體檢測的研究方面取得了較大進展，這些技術(shù)真正實現(xiàn)了檢測過程的自動化、高通量、多元化、平行進行。但這些技術(shù)還多處于研究階段，能進入臨床實驗室實際應用的很少。如真能引入

9、臨床實驗室，帶來的一些相關(guān)問題也需要深入思考:(1)日常檢測的自身抗體哪些需要同時進行檢測，新技術(shù)方法與傳統(tǒng)方法比較，有哪些明顯優(yōu)勢和弊端，權(quán)衡利弊，有必要引進嗎?(2)目前，很多臨床實驗室已通過ISO15189認證，基本與國際接軌，對檢驗結(jié)果的準確性提出了更高要求。每一種新技術(shù)在應用于臨床常規(guī)之前，都要對其技術(shù)、方法或試劑進行嚴格的性能驗證，對于已成熟、可以應用到臨床的新技術(shù)還應進行成本效益、標本檢測量以及臨床需求等全面評估。 作者：楊再興梁艷仲人前單位：第二軍醫(yī)大學附屬長征醫(yī)院實驗診斷科 上一個文章： 炎癥性腸病的血清標志物研究下一個文章： 臨床生化檢驗反應面法的設(shè)計方式