《抗Tim-3單抗聯(lián)合化療藥物對(duì)同種異體造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)和黑色素瘤的治療研究》由會(huì)員分享，可在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)《抗Tim-3單抗聯(lián)合化療藥物對(duì)同種異體造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)和黑色素瘤的治療研究（3頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、 抗 Tim-3 單抗聯(lián)合化療藥物對(duì)同種異體造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)和黑色素瘤的治療研究 第一部分抗 Tim-3 單抗體聯(lián)合環(huán)磷酰胺對(duì)同種異體骨髓造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)的治療研究目的 : 建立小鼠同種異體骨髓造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)模型 , 探討抗 Tim-3 單抗體聯(lián)合環(huán)磷酰胺對(duì)此模型的治療效果及其可能的機(jī)制 , 為臨床上治療移植后白血病復(fù)發(fā)開(kāi)創(chuàng)了新的方法。方法 :1. 以雌性 C57BL/6 小鼠為供鼠、接受 8Gy全身照射的 BALB/c 小鼠作為受鼠進(jìn)行同種異體骨髓移植 , 移植物中包 括 1X107骨髓細(xì)胞 ,5X106 脾細(xì)胞和 1X1

2、06A20細(xì)胞 , 建立小鼠骨髓造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)模型。 2. 根據(jù)小鼠的臨床表現(xiàn)、 外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)和外周血圖片判斷小鼠骨髓造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)模 型是否成功。3. 根據(jù)治療方案的不同 , 受鼠隨機(jī)分為 4 組: 同型對(duì)照組 , 抗 Tim-3 單抗組 , 環(huán)磷酰胺組與聯(lián)合環(huán)磷酰胺和抗 Tim-3 單抗組。觀(guān)察各組小鼠的生存時(shí)間 , 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血和脾臟淋巴細(xì)胞 中 CD4+ T 細(xì)胞、 CD8+ T 細(xì)胞、 CD3+CD4+CD25+FoxP3+ Treg細(xì)胞和 CD3+CD8+Granzyme B 細(xì)T胞的比例。結(jié)果 : 小

3、鼠骨髓造血干細(xì)胞移植 后淋巴瘤復(fù)發(fā)模型建立成功。 抗 Tim-3 單抗和環(huán)磷酰胺聯(lián)合使用顯著 提高移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)小鼠生存期 ( 平均提高 7.2 天,P<0.05) 。與 同型對(duì)照組相比  , 抗  Tim-3  單抗組升高了受鼠外周血和脾臟  CD4+T細(xì) 胞的比例  ( 外周血中升高了  10.1%,  脾臟中升高了  2.2%,P<0.05), 環(huán)磷酰胺組能使受鼠脾臟 CD4+T細(xì)胞的比例顯著下降 ( 下降了

4、 19.1%,P<0.01) 。與同型對(duì)照相比 , 抗 Tim-3 單抗和環(huán)磷酰胺聯(lián)合 用藥顯著降低了骨髓移植后免疫抑制性 Treg 細(xì)胞的比例 ( 外周血中 降低了 1.55%, 脾臟中降低了 1.86%,P<0.01), 提高骨髓移植后 CD8+T淋巴細(xì)胞中顆粒酶 B+的細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞的比例 ( 外周血中 升高了 6.84%, 脾臟中升高了 5.47%,P<0.001), 恢復(fù) CD4/CD8T細(xì) 胞的比值。結(jié)論 :CD4+T細(xì)胞、 CD8+T細(xì)胞和 Treg 細(xì)胞以及 CTL在移 植

5、后淋巴瘤復(fù)發(fā)中起重要作用 , 聯(lián)合抗 Tim-3 單抗和環(huán)磷酰胺治療同 種異體骨髓造血干細(xì)胞移植后淋巴瘤復(fù)發(fā)有效。 第二部分抗 Tim-3 單 抗聯(lián)合曲美替尼對(duì)黑色素瘤的治療研究目的 : 探討抗 Tiim-3 單抗體 聯(lián)合曲美替尼對(duì)此模型的治療效果及其可能的機(jī)制 , 為臨床上治療黑 色素瘤提供新的思路。 方法 : 建立小鼠黑色素瘤皮下移植瘤模型 , 根據(jù) 治療方案的不同 , 小鼠隨機(jī)分為 4 組: 對(duì)照組 , 抗 Tim-3 單抗組 , 曲美替 尼組與聯(lián)合曲美替尼和抗 Tim-3 單抗組。比較各組小鼠腫瘤體積的大 小,

6、繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn) , 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組小鼠腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞中 CD4+T 細(xì)胞和 CD8+T 細(xì)胞的比例以及其中 Tim-3+細(xì)胞的比例。免疫組化分析各組小鼠腫瘤 Ki67 和 Caspase-9 的陽(yáng)性率差異。 CCK-8法檢測(cè)在體外實(shí)驗(yàn)中各組對(duì) B16F10細(xì)胞株增殖的影響。 結(jié)果 : 與對(duì)照組 相比 , 曲美替尼能明顯抑制 B16F10細(xì)胞的生長(zhǎng) , 最高的抑制率發(fā)生在 4h, 曲美替尼組與聯(lián)合曲美替尼和抗 Tim-3 單抗組的抑制率分別為 22.3 0.83%,23.0 1.11%,P<0.01 。與對(duì)照相比曲美替尼組和聯(lián) 合曲美替尼和抗 T

7、im-3 單抗組 ,Caspase-3 陽(yáng)性率明顯升 高 ,P<0.01; 而 Ki67 陽(yáng)性率明顯降低 ,P<0.01 。聯(lián)合曲美替尼和 抗 Tim-3 組的小鼠在第 23 天的腫瘤大小的抑制率為 40.8 2.19%,P<0.01 腫瘤體積明顯得到抑制。與對(duì)照組相比 , 抗 Tim-3 單抗組腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞中 CD8+T細(xì)胞比例明顯升高 , 曲美替尼組腫 瘤浸潤(rùn) CD8+ T細(xì)胞中 Tim-3+CD8+ T 細(xì)胞的比例升高了 2 倍。結(jié)論 : 曲美替尼能通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)來(lái)發(fā)揮對(duì) B16F10黑色素瘤的抗腫瘤能力?？?Tim-3 單抗能明顯升高黑色素瘤 小鼠中 CD8+ T細(xì)胞從而增加抗腫瘤的免疫應(yīng)答。聯(lián)合曲美替尼和抗 Tim-3 單抗治療黑色素瘤有強(qiáng)大的抗腫瘤效果。