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1、2009Central Laboratory of Biology實驗一 玻璃器皿的包扎及滅菌微 生 物 學 實 驗 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 課前預習與目的要求l【課前預習】1. 高壓蒸汽滅菌原理。2. 上海申安LDZX-50KBS滅菌鍋的使用方法。l【目的要求】1. 學習并掌握玻璃器皿的包扎方法。2. 掌握高壓蒸汽滅菌的基本原理及操作方法。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei

2、 Normal University 基本原理微生物學實驗所用的器皿，大多數(shù)要進行消毒、滅菌，才能用來培養(yǎng)微生物。玻璃器皿的包裝方法正確合理，在使用過程中才能有效防止雜菌的污染。玻璃器皿包裝好后，一般用高壓蒸氣滅菌法進行滅菌。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 基本原理高壓蒸氣滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸氣。待水蒸氣急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡，關閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內的

3、壓力，從而使沸點增高，得到高于100的溫度。導致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 實驗用品棉花，試管，培養(yǎng)皿，紗布，三角瓶，橡皮筋，量筒，牛皮紙（或舊報紙），LDZX-50KBS立式高壓蒸氣滅菌鍋等。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 方法步驟1. 熟悉微生物學實驗的結構與功能。2. 清洗試管、三角瓶，培養(yǎng)皿等玻

4、璃器具，烘干。 3. 制作試管棉塞及三角瓶棉塞（參照微生物學實驗基本操作技術）。4. 用量筒或吸管取適量自來水于三角瓶和試管中，包裝好以制備無菌水。5. 包裝空培養(yǎng)皿，移液管。6. 滅菌（參照）。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 玻璃器皿清洗方法l玻璃器皿在使用過程中確保干凈，用過的器皿應及時清洗。l器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗潔凈清洗。l瓊脂培養(yǎng)基的器皿應先將培養(yǎng)基刮去。l瓊脂和固體物不能丟棄到水池中，以免堵塞管道。l清洗方法詳見。 Central Laborato

5、ry of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 棉塞的制作棉塞的作用有二：一是防止雜菌污染，二是保證通氣良好。形狀，大小，松緊適度。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 培養(yǎng)皿的包裝培養(yǎng)皿常用舊報紙緊緊包裹，一包710套，包好后干熱或濕熱滅菌。也可用金屬筒包裝。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal

6、University 移液管的包裝作用：以免使用時將雜菌吹入其中，或不慎將微生物吸出管外。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 試管和三角瓶的包裝試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞；用二層報紙包扎好（如有牛皮紙，效果更好），進行干熱或濕熱滅菌。試管較多時，一般7個或10個一組，再用雙層報紙包扎。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 上海申安LDZX-50

7、KBS滅菌鍋的使用 1）打開電源與開關，檢查水位顯示燈；2）加滅菌物品；3）蓋緊； 4）設定溫度和時間；5）查看排氣（水）閥旋至排氣處；6）排氣；7）結束后取物。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 實驗結果記錄自己制作的實驗用品（含無菌水）名稱的規(guī)格與數(shù)量。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 注意事項1. 實驗前，熟悉實驗室平面布局圖，了解實驗儀器用

8、品擺放規(guī)律及用途。2. 制備無菌水時，試管裝水量要超過試管高度的1/5，三角瓶裝水量不要超過規(guī)格容量的1/2（裝量過多，滅菌過程中易噴出或潤濕棉塞）；3. 滅菌鍋的操作安全。 Central Laboratory of BiologyCollege of Life Sciences, Hubei Normal University 實驗報告1. 高壓蒸氣滅菌開始之前，為什么要將鍋內冷空氣排盡滅菌完畢后，為什么待壓力降低“0”時才能打開排氣閥，開蓋取物。2. 在使用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌時，怎樣杜絕一切不安全的因素。3. 滅菌在微生物實驗操作中有何重要意義。 Central laboratory of Biology 生物學實驗教學中心 Thanks for your attention!