單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,*,實驗二流感病毒的收獲及,血凝效價測定,第一部分流感病毒的收獲,實驗目的,掌握從雞胚尿囊腔收獲流感病,毒的方法,獲得大量的病毒抗原。,實驗原理,BUDDING,將流感病毒接,種于雞胚尿囊腔后,病毒就在尿囊的內(nèi),胚層細胞繁殖,繁,AtTACHMENT,FUSION,殖12天后,病毒顆,粒釋放至尿囊液中,NDOCYTOSIS,從而使尿囊腔中含,有大量病毒,通過收獲尿囊液,可以得到較大量的流感病毒,實驗材料及器械,已接種流感病毒的十日齡雞胚,2.無菌鑷子、眼科剪刀、玻璃吸管,無菌EP管(1.5和10mL各一個,3.75%酒精棉球,實驗方法與步驟,收獲時間根據(jù)不同的病毒而異,流感病,毒一般培養(yǎng)3648小時即可進行收獲,收獲前一天晚上,將雞胚于4冰箱過,夜(如果急于收獲亦可于-20放置1,小時左右),將雞胚凍死,使紅血球凝,固,這樣可避免在收獲時流出的血細胞,同尿液或羊水里的病毒發(fā)生凝集,造成,病毒滴度的下降。,4冷藏時間不宜過長,過長易造成散,黃,影響收獲?？焖倮鋬鰰r間也不易過,長,一旦雞胚凍成冰塊就無法收獲,2.經(jīng)過冰凍的雞胚用碘酒、75%酒精消毒,雞胚氣室部卵殼,3.用無菌鑷子將消毒,過的殼打碎,輕輕揭,去氣室部位卵殼,撕,去殼膜和絨毛尿囊膜,并將雞胚輕輕推向,5 DAYS,壓住。,用無菌吸管通過絨,毛尿囊膜進入尿囊腔,吸出尿囊液(無大血,管處輕輕吸取清亮的,s黃色液體)。收取的,10口,尿囊液可無菌小瓶,第二部分血細胞凝集實驗測定,流感病毒效價,實驗目的,掌握血凝試驗的方法和原理,了解流,感病毒具有凝集雞紅細胞的能力,掌握,病毒類型的測定的一種方法,Influenza a virus A membrane virus,(-)RNAS,8 different ones,匯管,micrometers,