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2019年高考生物試題匯編（9月）L單元 生物工程及技術(shù)（含解析） 目錄 L單元　生物工程及技術(shù) 1 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 1 L2 微生物的類型、營(yíng)養(yǎng)和代謝 3 L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 4 L4 酶的應(yīng)用 4 L5 DNA的粗提取及蛋白質(zhì)提取技術(shù) 4 L6 植物有效成分的提取 4 L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 4 L8 植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 4 L9 動(dòng)物細(xì)胞工程與單克隆抗體 4 L10 胚胎工程 4 L11 生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題 4 L12 生態(tài)工程 4 L13 生物工程及技術(shù)綜合 4 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】19、家庭制作果酒、果醋和腐乳三種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的共同點(diǎn)是 A.菌種均可來(lái)自于自然環(huán)境 B.將原料滅菌后再發(fā)酵 C.保證在無(wú)氧環(huán)境下發(fā)酵 D.適宜的溫度都是相同的 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【答案解析】A解析：制作果酒、果醋和腐乳時(shí)菌種均可來(lái)自于自然環(huán)境，A正確；原料均不需滅菌，B錯(cuò)；果醋的制作需要有氧的環(huán)境，C錯(cuò)；制作果酒適宜的溫度是18～25℃，制作果醋適宜的溫度是30～35℃，制作腐乳適宜的溫度是15～18℃，D錯(cuò)。 【生物卷（解析）xx屆湖南省師大附中高三第一次月考（xx09）】30.(15分，每空1分)完成下列傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的相關(guān)問(wèn)題： Ⅰ.(5分)下圖是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程和發(fā)酵裝置圖，請(qǐng)據(jù)圖示分析回答下列問(wèn)題。 (1)請(qǐng)將圖1中的實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整。 (2)圖2中的充氣口在 時(shí)關(guān)閉，在 時(shí)連接充氣泵，并不斷向內(nèi)泵入無(wú)菌空(氧)氣。 (3)排氣口在果酒發(fā)酵時(shí)排出的氣體是由 產(chǎn)生的二氧化碳(CO2)。 (4)葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中，重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精的顏色反應(yīng)為 色。 Ⅱ.(5分)下圖為腐乳制作的流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題。 ―→―→―→ (1)現(xiàn)代科學(xué)研究表明，許多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是　 毛霉　。 (2)傳統(tǒng)的制作過(guò)程中，豆腐塊上生長(zhǎng)的“霉”來(lái)自 。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上，這樣可以 ，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 (3)鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒的作用：一是可以 ；二是能使腐乳具有 。 Ⅲ.(5分)下圖是泡菜的制作及測(cè)定亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題。 (1)制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是 。 (2)制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為 ，鹽水煮沸的目的是 ，冷卻后再使用的目的是 。 (3)泡菜的制作方法不當(dāng)，很容易造成泡菜變質(zhì)，甚至發(fā)霉變味，發(fā)霉主要與 有關(guān)。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【答案解析】Ⅰ. (1)醋酸發(fā)酵 (2)果酒發(fā)酵　果醋發(fā)酵　(3)酵母菌　(4)灰綠　 Ⅱ.(1)　 毛霉　(2)　空氣中的毛霉孢子　 　避免其他菌種的污染　 (3)　抑制微生物生長(zhǎng)　 　獨(dú)特的香味　 Ⅲ. (1)　亞硝酸鹽的含量低　 (2)　4∶1　 　殺滅雜菌　　保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響　 (3)　霉菌　 解析：Ⅰ.（1）圖1方框中的內(nèi)容是果醋發(fā)酵。 （2）果酒發(fā)酵是在無(wú)氧環(huán)境中進(jìn)行的，而果醋制作是在有氧環(huán)境中進(jìn)行的，因此圖2裝置中的充氣口在果酒發(fā)酵時(shí)關(guān)閉，在果醋發(fā)酵時(shí)連接充氣泵，并連續(xù)不斷地向內(nèi)泵入空氣。 （3）酵母菌無(wú)氧呼吸時(shí)，除了產(chǎn)生酒精，還會(huì)釋放二氧化碳，因此排氣口在果酒發(fā)酵時(shí)排出的氣體是由酵母菌產(chǎn)生的CO2，在果醋發(fā)酵時(shí)排出的是含氧量少的空氣、CO2。 （4）果酒發(fā)酵過(guò)程中，紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中，因此葡萄酒呈現(xiàn)紅色；重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精的反應(yīng)出現(xiàn)灰綠色。 Ⅱ.(1)參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，其中起主要作用的是毛霉。 (2)傳統(tǒng)的制作過(guò)程中，腐乳制作中的菌種來(lái)自空氣中的毛霉孢子。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上，這樣可以　避免其他菌種的污染　，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 (3) 腐乳制作中鹵湯中的酒的作用：一是可以　抑制微生物生長(zhǎng)?。欢悄苁垢榫哂小—?dú)特的香味　。 Ⅲ.（1）制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是亞硝酸鹽的含量低. （2）制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為4：1，鹽水加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響． (3)泡菜的發(fā)霉變味主要與霉菌有關(guān)。 【思路點(diǎn)撥】Ⅰ.圖1是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程，酒精發(fā)酵后還可以進(jìn)行果醋發(fā)酵；圖2是果酒和果醋的發(fā)酵裝置圖，其中排料口的作用是出料、檢測(cè)；充氣口的作用是在果醋制作時(shí)通入氧氣的；排氣孔是排氣，其彎彎曲曲的好處是防止雜菌和浮塵的污染。 Ⅱ.腐乳制作中起主要作用的是毛霉；傳統(tǒng)的制作過(guò)程中，腐乳制作中的菌種來(lái)自空氣中的毛霉孢子；為了避免其他菌種的污染，現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的菌種接種在豆腐上；腐乳制作中鹵湯中添加的酒可以抑制微生物生長(zhǎng)，也能使腐乳具有　獨(dú)特的香味。 Ⅲ. 新鮮的蔬菜和原料里面亞硝酸鹽含量低;腌制過(guò)程中因?yàn)辂}水比細(xì)胞內(nèi)液濃度高，細(xì)胞會(huì)失水，產(chǎn)生的水使壇子中溶液量增加;為了抑制其它雜菌的繁殖，可以利用多種措施如：加鹽、加白酒、加水密封等;制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為4：1，鹽水要加熱煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響;泡菜的發(fā)霉變味主要與霉菌有關(guān)。 【理綜卷（生物解析）xx屆河北省唐山市高三9月模擬考試（xx09）WORD版】39．【生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)】（15分） 根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的相關(guān)問(wèn)題。 （1）當(dāng) 、 時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。 （2）在 條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)____ 色。 （3）下圖為腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題 ①圖中A代表 ，其主要目的是____ ，同時(shí)還能__ _； ②在配制鹵湯中酒的含量一般控制在____ 左右，加酒含量過(guò)高腐乳成熟時(shí)間將會(huì) ；酒精含量過(guò)低， ，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程的應(yīng)用 【答案解析】（15分；前5空每空1分，后5空每空2分） （1）氧氣；糖源都充足 （2）酸性；灰綠色 （3）①加鹽腌制；析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬； 抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì) ②12%；延長(zhǎng)；不足以抑制微生物的生長(zhǎng) 解析：在氧氣、糖源都充足的條件下，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色；在腐乳制作過(guò)程中，豆腐上長(zhǎng)出毛霉后需加鹽腌制，鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，還能抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中加酒需適量，加酒過(guò)高使腐乳成熟時(shí)間延長(zhǎng)，酒含量低，不足以抑制微生物的生長(zhǎng)。 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)果酒發(fā)酵及腐乳制作的原理過(guò)程分析。 L2 微生物的類型、營(yíng)養(yǎng)和代謝 L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】33、（8分）下表中甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養(yǎng)基的配方，回答下列問(wèn)題： （1）從作用上看，甲培養(yǎng)基屬于_____________，其中能提供氮源的物質(zhì)是________。 （2）為了判斷甲培養(yǎng)基是否具有篩選作用，應(yīng)在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種等量的相應(yīng)濃度的土壤稀釋液，相同且適宜條件下培養(yǎng)。如果________________，則證明該培養(yǎng)基具有篩選作用。 （3）如果將B配制成固體培養(yǎng)基，則在培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落______ ___（是/否）都能分解纖維素，理由是_______________________________________ ____。該培養(yǎng)基的主要作用是___________________________________________________________。 （4）為了計(jì)數(shù)微生物的數(shù)量，接種時(shí)應(yīng)采用___________________法，一位同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為___________________。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（1）選擇培養(yǎng)基 尿素 （2）上述培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落 （3）否 因培養(yǎng)基中還有水解酪素等能提供碳源，纖維素被分解后產(chǎn)生的糖類等也可為其它微生物生長(zhǎng)提供碳源（合理即得分） 能增加纖維素分解菌的濃度，確保從樣品中分離到所需的微生物(或選擇培養(yǎng)等) （4）稀釋涂布平板 1.6109 解析：（1）甲培養(yǎng)基中以尿素為唯一的氮源，可以篩選出尿素分解菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 （2）為了判斷甲培養(yǎng)基是否具有篩選作用，應(yīng)設(shè)計(jì)對(duì)照試驗(yàn)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上接種等量的相應(yīng)濃度的土壤稀釋液，在相同且適宜條件下培養(yǎng)。如果上述培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落，則證明該培養(yǎng)基具有篩選作用。 （3）由于B培養(yǎng)基不是以纖維素作為唯一的碳源，還有水解酪素等能提供碳源，所以在培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落不都能分解纖維素。乙培養(yǎng)基能增加纖維素分解菌的濃度，確保從樣品中分離到所需的微生物(或選擇培養(yǎng)等)。 （4）對(duì)微生物計(jì)數(shù)應(yīng)采用稀釋涂布平板法接種。每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量應(yīng)求培養(yǎng)后菌落數(shù)的平均值，即為（180+155+176+129）106/（60.1）= 1.6109。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】22、下列有關(guān)制備固定化酵母細(xì)胞敘述正確的是 A．在向溶化好的海藻酸鈉溶液中加入的必須是已活化的酵母細(xì)胞 B．溶化好的海藻酸鈉溶液必須冷卻至室溫，才能加入細(xì)胞 C．溶解海藻酸鈉，最好采用小火，或者持續(xù)加熱的方法 D．在固定化酵母細(xì)胞的過(guò)程中，要以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3酶的應(yīng)用 【答案解析】ABD解析:海藻酸鈉加熱時(shí)很容易發(fā)生焦糊，所以溶解海藻酸鈉，最好采用小火，或者間斷加熱的方法，C錯(cuò)。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】20、科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解石油成分“多環(huán)芳烴菲”的菌株Q，步驟如下圖所示，下列相關(guān)的敘述中，錯(cuò)誤的是 A. 步驟①—③中，培養(yǎng)液中需加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源 B. 步驟①—③中，將錐形瓶放在搖床上充分振蕩，使菌株與培養(yǎng)液充分接觸 C. 步驟④是利用平板劃線法純化菌株Q，圖中所示接種環(huán)最少灼燒2次 D. 步驟④中每一區(qū)域可重復(fù)畫幾次，但1區(qū)和5區(qū)不能出現(xiàn)交叉 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】C解析: 要想分離能降解石油成分“多環(huán)芳烴菲”的菌株，配制培養(yǎng)液時(shí)，必須用多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，故A正確；培養(yǎng)過(guò)程中，將錐形瓶充分震蕩，目的是使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，B正確；接種環(huán)在每次接種前和接種后都要通過(guò)灼燒滅菌，圖中所示接種環(huán)要灼燒6次，C錯(cuò)誤；純化菌株Q的過(guò)程中，在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上次劃線的末端開始劃線，1區(qū)和5區(qū)不能出現(xiàn)交叉，D正確。 【生物卷（解析）xx屆云南省玉溪一中高三上學(xué)期第一次月考（xx09）】選一．（15分）炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病，炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀，對(duì)炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確診。 （1）細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。 （2）細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如圖所示 (1)挑選可疑菌落制片后，用__________________(1分)觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 (2)對(duì)配制的液體培養(yǎng)基等需采取______________(2分)滅菌；實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為____________________(2分)（填“無(wú)機(jī)碳”或“有機(jī)碳”）。 (3)接種可疑菌后，35 ℃培養(yǎng)24 h，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是__________________(2分)，對(duì)照組試管中應(yīng)加入__________(2分)，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6 h后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組______________(2分)（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。 (4)對(duì)排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細(xì)胞除T細(xì)胞、B細(xì)胞外，還有_____________(2分)和_______________(2分)。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】(1)顯微鏡（1分）(2)高壓蒸汽　有機(jī)碳　　(3)細(xì)菌大量繁殖　等量生理鹽水　低　(4)吞噬細(xì)胞、漿細(xì)胞 解析：(1) 炭疽桿菌是原核生物，為單細(xì)胞生物，觀察它的結(jié)構(gòu)應(yīng)借助于顯微鏡。 （2）微生物培養(yǎng)基需采用高壓蒸汽滅菌。實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為有機(jī)碳，因?yàn)樘烤覘U菌為異養(yǎng)型生物。 (3)35℃培養(yǎng)24小時(shí)，細(xì)菌大量繁殖會(huì)導(dǎo)致液體培養(yǎng)基變渾濁，對(duì)照組不能含有細(xì)菌，根據(jù)等量原則故應(yīng)該是等量的生理鹽水，加入噬菌體后，由于噬菌體能夠使炭疽桿菌死亡，故實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低 （4）抗體是由體液免疫過(guò)程產(chǎn)生，參與體液免疫的細(xì)胞有T細(xì)胞、B細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、漿細(xì)胞等。 【生物卷（解析）xx屆江西省師大附中等五校高三第一次聯(lián)考（xx08）】31、[生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)]（10分） 無(wú)菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵；傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物分離、純化、應(yīng)用過(guò)程及植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，均要無(wú)菌操作?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題： （1）消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。下列哪些事物適用于消毒處理 。 ①皮膚　 ②飲用水　 ③牛奶　 ④注射器　 ⑤培養(yǎng)皿　 ⑥接種環(huán)　 ⑦培養(yǎng)基　 ⑧果汁　 ⑨醬油　 ⑩手術(shù)刀 A．①②③⑧⑨　B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部 （2）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行 ，接種前要進(jìn)行 ，在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行。 （3）在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是____ 。右圖是利用 法進(jìn)行大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意： ① 每次劃線前要 ； ② 冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃； ③ 首尾區(qū) 。 （4）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 ，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。 （5）利用培養(yǎng)基不僅可以分離培養(yǎng)大腸桿菌，也可以進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入 。 （6）有位同學(xué)在家制作泡菜時(shí)，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是 。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（1）A （2）調(diào)整pH 高壓蒸汽滅菌 （3）防止外來(lái)雜菌的入侵 平板劃線 灼燒接種環(huán) 不連接（不重疊） （4）將未接種（接種等量無(wú)菌水）的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間 （5）植物激素(或生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)（6）青霉素殺死了乳酸菌 解析：（1）皮膚、飲用水、牛奶、果汁、醬油應(yīng)消毒處理，注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術(shù)刀應(yīng)滅菌處理。 （2）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)整pH，接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行。 （3）在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵。微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線進(jìn)行時(shí)應(yīng)每次劃線前要灼燒接種環(huán)，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃，首尾區(qū)不連接。 （4）接種前檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染的方法為將未接種（接種等量無(wú)菌水）的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。 （5）與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入植物激素(或生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)。 （6）制作泡菜利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵，但乳酸菌對(duì)青霉素敏感，會(huì)導(dǎo)致死亡。 【理綜卷(解析)xx屆廣西桂林中學(xué)高三8月月考（xx08）】39.[生物—選修1：生物技術(shù)實(shí)踐]（8分） 有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答問(wèn)題： （1）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 （2）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力_________________。通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_______和__________。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈___________附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 （3）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________和____________。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（1）原油 選擇 （2）強(qiáng) 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰 （3） 平板劃線法 稀釋涂布平板法 （1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無(wú)其它碳源，不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 （2）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大；實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無(wú)菌操作要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍微生物的污染。 （3）分離純化菌種時(shí)，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細(xì)菌細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便純化菌種。 【思路點(diǎn)撥】本題的知識(shí)點(diǎn)是微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。 【典型總結(jié)】（1）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說(shuō)明有大腸桿菌。 （2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。 （3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。 【理綜卷（生物解析）xx屆寧夏銀川一中高三上學(xué)期第一次月考（xx08）】39．【生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)踐專題】（15分） 炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病，炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對(duì)炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確診。 (1)細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。 (2)細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如下圖所示 ①對(duì)配制的液體培養(yǎng)基需采取 方法滅菌；實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為 (填“無(wú)機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。在提供主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足炭疽桿菌生長(zhǎng)對(duì) 、 以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求。 ②挑選可疑菌落制片后，用 觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 ③接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是 ，對(duì)照組試管中應(yīng)加入 ，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的 比對(duì)照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。 ④對(duì)排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細(xì)胞除T細(xì)胞、B細(xì)胞外，還有 、 。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L3 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 【答案解析】（除標(biāo)明外，其余每空2分，共15分） ①高壓蒸汽（1分） 有機(jī)碳　 pH、氧氣 ②顯微鏡　 ③細(xì)菌大量繁殖　 等量生理鹽水　 渾濁度　 ④吞噬細(xì)胞、漿細(xì)胞 解析：液體培養(yǎng)基采用高壓蒸汽法滅菌，由于炭疽桿菌是異養(yǎng)型生物，因而液體培養(yǎng)基中的碳源為有機(jī)碳；培養(yǎng)基除了必需的營(yíng)養(yǎng)外，還需適宜的PH及氧氣。炭疽桿菌需通過(guò)顯微鏡才能觀察；對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量的生理鹽水，通過(guò)比較兩試管的混濁度可判斷疑似患者被炭疽桿菌感染，抗體是在體液免疫中產(chǎn)生的，抗原先被吞噬細(xì)胞識(shí)別、處理、呈遞給T細(xì)胞，T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子及抗原共同刺激B細(xì)胞，使其增殖分化形成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞合成并分泌抗體。 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)微生物培養(yǎng)及免疫知識(shí)分析 L4 酶的應(yīng)用 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】18、在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)敘述正確的是 A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L，濾去析出物 B．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì) C．將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 D．用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L4 DNA的粗提取及蛋白質(zhì)提取技術(shù) 【答案解析】B解析：DNA在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時(shí)溶解度最低，將會(huì)析出，A錯(cuò)；調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度可以去除部分雜質(zhì)，加入木瓜蛋白酶可以分解蛋白質(zhì)，B正確；用二苯胺試劑檢測(cè)DNA時(shí)，需水浴加熱，C錯(cuò)；用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，應(yīng)首先去除細(xì)胞壁，D錯(cuò)。 L5 DNA的粗提取及蛋白質(zhì)提取技術(shù) L6 植物有效成分的提取 【理綜卷（生物解析）xx屆廣東省廣州市海珠區(qū)高三摸底考試（xx08）】6．關(guān)于“克隆羊”、“試管羊”、“轉(zhuǎn)基因羊”的說(shuō)法，合理的是 A．它們的遺傳物質(zhì)都只來(lái)自于一個(gè)親本 B．它們?cè)谛纬蛇^(guò)程中一般都有卵細(xì)胞的參與 C．它們是通過(guò)相同的生殖方式獲得親本的優(yōu)良性狀 D．培育過(guò)程都用到核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù) 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L6 基因工程與蛋白質(zhì)工程L9 胚胎工程 【答案解析】B解析：轉(zhuǎn)基因羊：在羊的受精卵內(nèi)加入了其他物種的基因后誕生的羊。試管羊：將羊的精子和卵子在體外進(jìn)行受精然后植入母體而誕生的羊?？寺⊙颍簩⒀虻募?xì)胞核植入另一只羊的去核卵細(xì)胞中，然后植入母體而誕生的羊，A錯(cuò)誤；B正確；克隆羊是無(wú)性生殖，另外兩個(gè)屬于有性生殖，C錯(cuò)誤；三者都用到了胚胎移植，只有克隆羊用到了核移植，D錯(cuò)誤 L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【生物卷（解析）xx屆江西省南昌二中高三上學(xué)期第一次考試（xx08）】41．【生物選修3 現(xiàn)代生物技術(shù)】（15分） 回答下列與基因工程有關(guān)的問(wèn)題： （1）切割DNA的工具是 酶，這類酶主要是從 中分離純化出來(lái)的。若切割形成的是平末端，則需要用 DNA連接酶連接。 （2）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有 ________ 、 _ 以及標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因的作用是 。 （3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是 ，此外還可以采用 法和 法。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)基因工程的操作步驟內(nèi)容進(jìn)行分析。 南昌二中xx學(xué)年度上學(xué)期第一次考試 高三生物試卷參考答案 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】30、（9分）下圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過(guò)程；圖2表示體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程；圖3表示番茄和馬鈴薯植物體細(xì)胞融合和再生植株的過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問(wèn)題： （1）圖1中注射到小鼠體內(nèi)的物質(zhì)是____________。融合后的細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次篩選才能獲得理想的細(xì)胞，此類細(xì)胞的特點(diǎn)是___________。該過(guò)程所用的生物技術(shù)有__________。 （2）圖2中參與體外受精的精子需要經(jīng)過(guò)成熟和___________的過(guò)程，才能使卵細(xì)胞受精。若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對(duì)圖2囊胚中的___________均等分割后進(jìn)行胚胎移植，暫不移入的胚胎可使用________________方法保存。 （3）圖3中過(guò)程①是植物細(xì)胞形成__________________________的階段，該過(guò)程所用的酶是______________。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的重要意義是__________________。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù)L8動(dòng)物細(xì)胞工程與單克隆抗體 【答案解析】（1）抗原X　 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體　 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) （2）獲能 　內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　 　冷凍(或低溫) （3）原生質(zhì)體　 纖維素酶和果膠酶　 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 解析：（1）圖1是制備抗X抗原的單克隆抗體的過(guò)程，要想獲得分泌抗X抗原的抗體，需要對(duì)小鼠注射相應(yīng)的抗原即X抗原。融合后經(jīng)篩選的細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，具備雙親細(xì)胞的遺傳特性，此類細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體。兩類細(xì)胞融合需要細(xì)胞融合技術(shù)，雜交瘤細(xì)胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)，需要細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，所以該過(guò)程所用的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。 （2）圖2精子需要成熟和獲能的過(guò)程才具備受精的能力．若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可以在體外進(jìn)行胚胎分割，胚胎分割需要對(duì)囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均分。，暫不移入的胚胎可使用冷凍(或低溫)方法保存。 （3）圖3所示為植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)過(guò)程。體細(xì)胞雜交的第一步就是制備原生質(zhì)體，可以利用纖維素酶和果膠酶將植物細(xì)胞壁分解掉。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的重要意義是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。 【思路點(diǎn)撥】圖1所示為單克隆抗體的制備過(guò)程．小鼠的B細(xì)胞經(jīng)過(guò)免疫，再與能無(wú)限增殖的骨髓瘤細(xì)胞融合，形成的雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具備了分泌抗體和無(wú)限增殖的能力。 圖2所示為胚胎工程中的體外受精和胚胎移植技術(shù)．精子只有經(jīng)過(guò)獲能處理后才具備使卵細(xì)胞受精的能力．將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等切割后，每個(gè)部分都可以再發(fā)育成一個(gè)個(gè)體。 圖3分析，①表示去除細(xì)胞壁，②表示原生質(zhì)體的融合，③表示再生細(xì)胞壁，④表示脫分化，⑤表示再分化，⑥表示移栽。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】24、下列屬于植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必需條件的是 Ａ．適宜的營(yíng)養(yǎng) Ｂ．適宜的光照和溫度 Ｃ．導(dǎo)入相關(guān)的外源基因 Ｄ．脫離母體 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】ABD解析: 植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必需條件有脫離母體、適宜的營(yíng)養(yǎng)、適宜的光照和溫度等，A、B、D正確，C錯(cuò)。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】42.（13分）多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)中，PG合成顯著增加，能使果實(shí)變紅變軟，不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達(dá)，可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期?？茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1) 若已獲取PG的mRNA，可通過(guò) 獲取PG基因。 (2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有________的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，理由是______________。之后，還需將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中，觀察細(xì)胞________現(xiàn)象來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。 (3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與________互補(bǔ)結(jié)合，因此可抑制PG基因的正常表達(dá)。若________，則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。 (4)將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細(xì)胞培育成完整的植株，需要用________技術(shù)；其中，愈傷組織經(jīng)________形成完整植株，此過(guò)程除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加____________________。 (5)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時(shí)間后，單株鮮重和光合作用強(qiáng)度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是__________，單株鮮重的變化趨勢(shì)是________________________。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí)，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量______(能、不能)滿足自身最佳生長(zhǎng)的需要。 (6)據(jù)圖推測(cè)，若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過(guò)程中提高其光合作用能力，應(yīng)________(降低，增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程L8 植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】 解析：利用mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄法可獲取目的基因，觀察圖示可知，質(zhì)粒上有2個(gè)標(biāo)記基因，但四環(huán)素抗性基因插入了目的基因，結(jié)構(gòu)被破壞，而卡哪霉素抗性基因正常作為標(biāo)記基因，因而在培養(yǎng)基中加入卡哪霉素可篩選出含目的基因的原生質(zhì)體，原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁可通過(guò)質(zhì)壁分離現(xiàn)象判斷；目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA能與天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)，形成雙鏈RNA，抑制翻譯過(guò)程，基因不能表達(dá)，目的基因表達(dá)成功的標(biāo)志是番茄果實(shí)的保質(zhì)期延長(zhǎng)。番茄細(xì)胞培育成植株需用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)再分化形成完整植株，此過(guò)程除需要必需的營(yíng)養(yǎng)外還需加植物激素調(diào)節(jié)；從曲線圖中觀察可知，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是逐漸減小，單株鮮重的變化趨勢(shì)是先增加后下降，據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí)，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量不能滿足自身最佳生長(zhǎng)的需要。從圖中可知，降低培養(yǎng)基中蔗糖濃度可提高試管苗的自養(yǎng)能力， 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)基因工程知識(shí)分析，注意比較曲線與變量間的關(guān)系。 【典型總結(jié)】識(shí)圖題必需先讀懂圖示內(nèi)容，并獲取正確的信息，然后結(jié)合相關(guān)知識(shí)進(jìn)行分析。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】39.人類 B 型血友病屬于伴 X 隱性遺傳病，因?yàn)檠褐腥鄙倌蜃英鶎?dǎo)致凝血異常。下列關(guān)于對(duì)患者進(jìn)行基因治療的設(shè)計(jì)，正確的是 A．逆轉(zhuǎn)錄病毒的核酸可直接用作載體 B．需將凝血因子Ⅸ和載體連接起來(lái) C．必須把目的基因插入到 X 染色體 D．需選擇患者自身細(xì)胞作為受體細(xì)胞 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】D 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】30．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán)：95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性（引物與DNA模板鏈結(jié)合）→72℃下引物鏈延伸（形成新的脫氧核苷酸鏈）。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是： A．變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵，也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn) B．復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成 C．延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸 D．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】C 解析：延伸過(guò)程中需要的是四種脫氧核糖核苷酸而不是核糖核苷酸。 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)進(jìn)行分析。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】27.報(bào)道稱深圳某生物制品公司將人的乙肝抗原基因?qū)虢湍妇?，生產(chǎn)出的乙型肝炎疫苗，致使嬰兒接種后發(fā)生疑似預(yù)防接種異常反應(yīng)，并已出現(xiàn)死亡病例。下列關(guān)于此乙肝疫苗的說(shuō)法正確的是 A．乙肝抗原基因可從酵母菌基因文庫(kù)中獲得 B．轉(zhuǎn)基因過(guò)程中用到的質(zhì)粒是一種類似于染色體的鏈狀DNA的遺傳物質(zhì) C．轉(zhuǎn)基因酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的理論基礎(chǔ)之一是生物共用一套遺傳密碼 D．將乙肝抗原基因?qū)虢湍妇鷷r(shí)用CaCl2處理酵母菌，可增大細(xì)胞膜的通透性 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】C 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】26.某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a，通過(guò)基因工程的方法，將a轉(zhuǎn)到馬鈴薯植株中，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在，下列說(shuō)法正確的是 A．基因a只有導(dǎo)入到馬鈴薯受精卵中才能表達(dá) B．目的基因來(lái)自細(xì)菌，可以不需要載體直接導(dǎo)入受體細(xì)胞 C．基因a導(dǎo)入成功后，將抑制細(xì)胞原有的新陳代謝，開辟新的代謝途徑 D．目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，可隨著馬鈴薯的DNA分子的復(fù)制而復(fù)制，傳給子代細(xì)胞并表達(dá) 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】D 解析：基因a導(dǎo)入到馬鈴薯體細(xì)胞中也可表達(dá)，目的基因必需與載體結(jié)合才能導(dǎo)入受體細(xì)胞，不能直接導(dǎo)入受體細(xì)胞；基因a導(dǎo)入成功后，不會(huì)抑制細(xì)胞原有的新陳代謝。 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)基因工程的知識(shí)分析。 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】15．人的糖蛋白必須經(jīng)內(nèi)質(zhì)和高爾基體加工合成。通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)，可以使人的糖蛋白基因得以表達(dá)的受體細(xì)胞是 A．大腸桿菌 B．酵母菌 C．T4噬菌體 D．質(zhì)粒DNA 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】B 【生物卷（解析）xx屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三上學(xué)期第一次統(tǒng)練（xx09）】14.下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)。 A．目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物 B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶 C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性 D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá) 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】D 解析：載體上的抗體基因不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。 【思路點(diǎn)撥】根據(jù)基因工程的知識(shí)分析。 【生物卷（解析）xx屆江西省師大附中等五校高三第一次聯(lián)考（xx08）】32、[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]（10分） 應(yīng)用生物工程技術(shù)獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1) 在培育轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛過(guò)程中，②過(guò)程常用的方法是 ，采用 技術(shù)可以獲得多頭基因型相同的轉(zhuǎn)基因牛。 (2) 轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因?？赏ㄟ^(guò)乳腺細(xì)胞分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，人生長(zhǎng)激素基因的首端必須含有 。 (3) prG能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂，通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體，Ⅲ代表的細(xì)胞具有 的特點(diǎn)。 (4) 在抗蟲棉培育過(guò)程中，④過(guò)程常采用的方法是 ；⑤過(guò)程采用的技術(shù)是 ；在分子水平上可采用 方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的抗蟲基因是否成功表達(dá)。 (5) 下面是獲取目的基因的幾種方法，其中需要模板的是_______。 ① 從基因組文庫(kù)中獲取目的基因 ② 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ③ 構(gòu)建cDNA文庫(kù) ④ 通過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成目的基因 A．①② B．②③ C．①③ D．①④ (6) 當(dāng)獲能后的精子與卵子相遇時(shí)，首先發(fā)生 ，釋放出有關(guān)的酶直接溶解卵丘細(xì)胞間的物質(zhì)，形成精子穿越放射冠的通路。防止多精入卵的生理反應(yīng)依次有透明帶反應(yīng)、 。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程L9 動(dòng)物細(xì)胞工程與單克隆抗體E4 減數(shù)分裂和受精作用L8 植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】(1) 顯微注射法 胚胎分割 (2) 牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子 (3) 既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體 (4) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng) 抗原--抗體雜交 (5) B (6) 頂體反應(yīng) 卵細(xì)胞膜的封閉作用 解析：（1）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。采用胚胎分割技術(shù)可以獲得多頭基因型相同的轉(zhuǎn)基因牛。 （2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，人生長(zhǎng)激素基因的首端必須含有牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子。 （3）由圖可知，Ⅲ為雜交瘤細(xì)胞，其既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體。 （4）在抗蟲棉培育過(guò)程中，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。將棉花受體細(xì)胞培育成抗蟲棉植株常采用植物組織培養(yǎng)的方法。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的抗蟲基因是否成功表達(dá)可采用抗原--抗體雜交法。 （5）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因、構(gòu)建cDNA文庫(kù)需要模板。 （6）當(dāng)獲能后的精子與卵子相遇時(shí)，首先發(fā)生頂體反應(yīng)，釋放出有關(guān)的酶直接溶解卵丘細(xì)胞間的物質(zhì)，形成精子穿越放射冠的通路。防止多精入卵的生理反應(yīng)依次有透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜的封閉作用。 【理綜卷(解析)xx屆廣西桂林中學(xué)高三8月月考（xx08）】40.（8分） 下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答： （1）甲圖所示為 技術(shù)，可以用來(lái)擴(kuò)增目的基因。此過(guò)程中所使用的酶是。 （2）乙圖為獲得抗蟲棉技術(shù)的流程。A過(guò)程需要的酶有________、________。圖中將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞采用的方法是 。 在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。則C過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入________。 （3） 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的具體方法是使用標(biāo)記的______與提取出的_____做分子雜交。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】（1）PCR、Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）； （2）限制酶、DNA連接酶；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；卡那霉素； （3）目的基因 mRNA 分子 （1）由甲圖的反應(yīng)過(guò)程可知是體外獲得目的基因的方法即PCR技術(shù)，在這個(gè)過(guò)程中所使用的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。 （2）圖乙中A過(guò)程是獲得重組質(zhì)粒的過(guò)程，該過(guò)程需要用限制性內(nèi)切酶對(duì)質(zhì)粒、目的基因進(jìn)行切割，再在DNA連接酶的催化作用下形成重組質(zhì)粒。因土壤農(nóng)桿菌易侵染植物細(xì)胞，故一般用土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞。培養(yǎng)基中加入卡那霉素是為了篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。 （3）因mRNA堿基可以與目的基因模板鏈堿基互補(bǔ)配對(duì)，故可用標(biāo)記的目的基因作探針對(duì)細(xì)胞中的mRNA進(jìn)行檢測(cè)，以確定目的基因是否轉(zhuǎn)錄。 【典型總結(jié)】1、檢測(cè)受體細(xì)胞中的標(biāo)記基因是否表達(dá)，即是否表現(xiàn)出標(biāo)記基因的性狀，從而判斷受體細(xì)胞中是否已導(dǎo)入含有目的基因的運(yùn)載體。如果檢測(cè)出標(biāo)記基因表達(dá)的性狀，說(shuō)明運(yùn)載體已導(dǎo)入受體細(xì)胞。 2、檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因，這是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。 檢測(cè)方法是：采用DNA分子雜交技術(shù)。先將轉(zhuǎn)基因生物的基因組提取出來(lái)；把目的基因的DNA片段用放射性同位素作標(biāo)記做成探針；使探針與基因組DNA雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，就表明目的基因已插入染色體DNA中。 3、檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，這是檢測(cè)目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步。采用DNA與RNA分子雜交技術(shù)。從轉(zhuǎn)基因生物中提取出mRNA，把目的基因的DNA片段用放射性同位素作標(biāo)記做成探針；使探針與mRNA雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，就表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA。 4、檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體（對(duì)抗進(jìn)行同位素標(biāo)記）進(jìn)行抗原——抗體雜交；如果出現(xiàn)雜交帶，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。 【理綜卷(解析)xx屆廣西桂林中學(xué)高三8月月考（xx08）】3.下列關(guān)于各種酶的敘述，不正確的是: A.DNA解旋酶能斷裂堿基對(duì)之間氫鍵 B.RNA聚合酶能催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄 C.一種DNA限制酶能切割出多種黏性末端 D.胰蛋白酶可以將離體的動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】F3 L7基因的結(jié)構(gòu)和基因的表達(dá) 基因工程與蛋白質(zhì)工程 【答案解析】C DNA解旋酶用來(lái)打開堿基間的氫鍵，使雙鏈變?yōu)閱捂?，A正確；RNA聚合酶是DNA轉(zhuǎn)錄時(shí)與啟動(dòng)子結(jié)合，使轉(zhuǎn)錄開始，B正確；DNA限制酶具有專一性，一種限制酶只能切出一種粘性末端，C錯(cuò)誤；胰蛋白酶可以將離體組織分散成單個(gè)細(xì)胞，D正確； 【理綜卷（生物解析）xx屆廣東省廣州市第六中學(xué)高三上學(xué)期第一次質(zhì)量檢測(cè)（xx09）】24．關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是 A．蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì) B．動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體 C．體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精 D．選取原腸胚進(jìn)行胚胎分割成功率較高 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7 L10基因工程與蛋白質(zhì)工程 胚胎工程 【答案解析】BD蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)，A正確；克隆動(dòng)物的技術(shù)是核移植，單克隆抗體是體細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精，C正確；桑葚期和囊胚期胚胎分割成功率高，D錯(cuò)誤。 L8 植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【生物卷(解析)xx屆廣西桂林十八中高三上學(xué)期第一次月考】29、在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過(guò)程中，下列生命活動(dòng)不會(huì)同時(shí)發(fā)生的是 (　　) A.細(xì)胞的增殖和分化 B.光能的吸收與轉(zhuǎn)化 C.ATP的合成與分解 D.基因的突變與重組 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L8 植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 【答案解析】D 離體菊花莖段形成幼苗的過(guò)程中，涉及到脫分化和再分化過(guò)程；整個(gè)過(guò)程都伴隨著細(xì)胞的分裂，A不符合題意。葉綠素的形成過(guò)程需要光照，形成幼苗的過(guò)程需要光照；愈傷組織形成的幼苗會(huì)開始進(jìn)行光合作用，有光能的吸收和轉(zhuǎn)化，B不符合題意。ATP是直接能源物質(zhì)，整個(gè)過(guò)程中需要ATP提供能量，伴隨有ATP的合成和分解，C不符合題意。基因重組只發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中，菊花莖段形成幼苗的過(guò)程中不進(jìn)行減數(shù)分裂，D符合題意。 【生物卷（解析）xx屆江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高三8月開學(xué)考試】30、（9分）下圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過(guò)程；圖2表示體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程；圖3表示番茄和馬鈴薯植物體細(xì)胞融合和再生植株的過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問(wèn)題： （1）圖1中注射到小鼠體內(nèi)的物質(zhì)是____________。融合后的細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次篩選才能獲得理想的細(xì)胞，此類細(xì)胞的特點(diǎn)是___________。該過(guò)程所用的生物技術(shù)有__________。 （2）圖2中參與體外受精的精子需要經(jīng)過(guò)成熟和___________的過(guò)程，才能使卵細(xì)胞受精。若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對(duì)圖2囊胚中的___________均等分割后進(jìn)行胚胎移植，暫不移入的胚胎可使用________________方法保存。 （3）圖3中過(guò)程①是植物細(xì)胞形成__________________________的階段，該過(guò)程所用的酶是______________。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的重要意義是__________________。 【答案】【知識(shí)點(diǎn)】L7植物細(xì)胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術(shù)L8動(dòng)物細(xì)胞工程與單克隆抗體 【答案解析】（1）抗原X　 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體　 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) （2）獲能 　內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　 　冷凍(或低溫) （3）原生質(zhì)體　 纖維素酶和果膠酶　 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 解析：（1）圖1是制備抗X抗原的單克隆抗體的過(guò)程，要想獲得分泌抗X抗原的抗體，需要對(duì)小鼠注射相應(yīng)的抗原即X抗原。融合后經(jīng)篩選的細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，具備雙親細(xì)胞的遺傳特性，此類細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗X的抗體。兩類細(xì)胞融合需要細(xì)胞融合技術(shù)，雜交瘤細(xì)胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)，需要細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，所以該過(guò)程所用的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。 （2）圖2精子需要成熟和獲能的過(guò)程才具備受精的能力．若要獲得