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2019-2020年高二生物 實(shí)驗(yàn)三 觀察植物細(xì)胞的有絲分裂 人教版 Ⅰ　實(shí)驗(yàn)程序 一、實(shí)驗(yàn)原理 在植物體中，有絲分裂常見(jiàn)于根尖、莖尖形成層等分生組織的細(xì)胞。 高等植物細(xì)胞有絲分裂的過(guò)程分為分裂間期和有絲分裂的前期、中期、后期、末期?？梢杂酶弑讹@微鏡觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過(guò)程，根據(jù)各個(gè)細(xì)胞內(nèi)染色體(or 染色質(zhì))的變化變化情況,識(shí)別該細(xì)胞處于有絲分裂過(guò)程及哪個(gè)時(shí)期。 細(xì)胞核內(nèi)染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色。 二、目的要求 1.觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過(guò)程，識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期。 2.初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技術(shù)。 3.初步掌握繪制生物圖的方法。 三、材料用具試劑 1.材料:洋蔥(可以用蒜、蔥代替)。 2.用具:顯微鏡/載玻片/蓋玻片/玻璃皿3個(gè)/鑷子/剪刀/滴管。 3.試劑:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%HCl、體積分?jǐn)?shù)為95%的C2H5OH溶液、質(zhì)量濃度為0.01g/mL龍膽紫溶液(or 醋酸洋紅液)。 四、重點(diǎn)難點(diǎn) 重點(diǎn):有絲分裂過(guò)程中各個(gè)期的特征、各期圖形的辨認(rèn)，有絲分裂實(shí)驗(yàn)過(guò)程。 難點(diǎn):觀察有絲分裂實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題。 五、實(shí)驗(yàn)步驟 （1）培養(yǎng)洋蔥根尖：注意經(jīng)常換水是防止?fàn)€根。放在溫暖處。因?yàn)榧?xì)胞分裂需要水、空氣、適宜空氣。 （2）取樣解離：鹽酸解離是使根尖細(xì)胞相互分散開(kāi)，以免制片時(shí)細(xì)胞重疊，影響觀察。 （3）漂洗：洗去酸液，以利染色。 （4）染色：染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，鏡下觀察到的全是紫色，時(shí)間過(guò)短，沒(méi)有將染色體染色。 （5）制片：制作的是臨時(shí)裝片。（怎樣制片？） 低倍鏡 （找分生區(qū)） 高倍鏡 （觀察細(xì)胞分裂不同時(shí)期的圖象） （6）觀察： 拓展： 解離的目的 染色的目的 為什么要切取2—3mm？ 為什么在顯微鏡下，多數(shù)細(xì)胞處于間期？ 六、結(jié)論: 在顯微鏡的一個(gè)視野中看到的細(xì)胞，多數(shù)處于細(xì)胞有絲分裂的間期，因?yàn)樵谝粋€(gè)細(xì)胞周期中，間期所占的時(shí)間占整個(gè)細(xì)胞周期的90%～95%，時(shí)間與細(xì)胞數(shù)目成正比。另外，在一個(gè)視野中，往往不容易找全有絲分裂過(guò)程中各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞，可以慢慢地移動(dòng)裝片，從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。 Ⅱ　注意事項(xiàng) (1)培養(yǎng)產(chǎn)生洋蔥根尖的材料是洋蔥鱗莖。鱗莖底部接觸水，不能離開(kāi)水，也不能被水淹。其目的是同時(shí)滿足其對(duì)水和空氣的需要。同時(shí)要經(jīng)常換水，因?yàn)樗杏捎谖⑸锏幕顒?dòng)和根細(xì)胞的活動(dòng)，代謝產(chǎn)物增多和礦質(zhì)素的減少；此外，還由于根細(xì)胞的呼吸不斷產(chǎn)生CO2，使水中H2C03增多，氧氣缺少；微生物，如細(xì)菌的大量繁殖也使水質(zhì)受到污染，這些都不利于根尖生長(zhǎng)，所以要經(jīng)常換水。一般一天至少一次，還要提供適宜的溫度。 (2)剪取洋蔥根尖材料時(shí)，應(yīng)該在洋蔥一天之中分裂最活躍的時(shí)間，一般在上午1l點(diǎn)左右。如果因氣溫影響或不在上述時(shí)間做實(shí)驗(yàn)的話，可以在細(xì)胞有絲分裂最盛時(shí)取材，放人盛有固定液的培養(yǎng)皿中固定，即浸泡半天到一天。固定后用70%乙醇沖洗幾次，再放人盛有70%乙醇的小廣口瓶中保存。注意要等根尖長(zhǎng)到1～5cm時(shí)才能切取，而切取的洋蔥根尖長(zhǎng)度是2～3mm。這是因?yàn)?，根?jù)實(shí)驗(yàn)得知，根長(zhǎng)到1～5cm時(shí)，根的長(zhǎng)勢(shì)最佳，此時(shí)細(xì)胞分裂最旺盛，容易找到不同時(shí)期的分裂圖像。此時(shí)可 取生長(zhǎng)健壯的根進(jìn)行觀察，切取洋蔥根尖2～3mm，這個(gè)長(zhǎng)度要從根的頂端(根冠)開(kāi)始算起向上的距離，這個(gè)長(zhǎng)度已將分生區(qū)包括了進(jìn)來(lái)。若長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)，在低倍鏡下尋找分生區(qū)就會(huì)很困難。 (3)根尖培養(yǎng)好以后，裝片制作是否成功，關(guān)鍵的步驟是解離。15%的鹽酸溶液能溶解細(xì)胞壁之間的中層物質(zhì)(胞間質(zhì))，使組織中的細(xì)胞相互分開(kāi)。否則，在顯微鏡下觀察時(shí)，細(xì)胞將發(fā)生重疊現(xiàn)象，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。解離不充分，細(xì)胞重疊；解離過(guò)度，細(xì)胞會(huì)腐爛，所以解離要適度。為達(dá)到這一目的，配制的鹽酸濃度要適宜，切取的根尖應(yīng)立即放人15%的鹽酸中，在室溫下解離10～15min。解離時(shí)間要視室內(nèi)溫度而定，溫度低，時(shí)間稍長(zhǎng)，溫度高，時(shí)間短。也可手拿鑷子，輕輕按正在解離的根尖，感覺(jué)酥軟即可。 (4)漂洗的目的是洗去根中多余的解離液。如果不把多余的解離液洗去，一方面會(huì)影響染色效果，因?yàn)榻怆x液中含HCl，而用染色的染料呈堿性；另一方面還會(huì)腐蝕顯微鏡的鏡頭。 (5)染色時(shí)，染色液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好。特別是染色不能過(guò)深，否則鏡下一片紫色，無(wú)法觀察。也不能過(guò)淺，否則染色質(zhì)和染色體的形態(tài)和數(shù)目不易辨清。 (6)制片時(shí)，一方面要用鑷子把洋蔥根尖弄碎，另一方面要壓片，這樣可以使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。壓片時(shí)，在蓋玻片上再加一片載玻片的目的，一是避免壓碎和污染蓋玻片。二是使壓力均勻，從而使組織細(xì)胞均勻分散。同時(shí)用力必須恰當(dāng)，過(guò)重時(shí)會(huì)將組織壓爛，過(guò)輕則細(xì)胞未分散開(kāi)，二者都將影響觀察。 Ⅲ　隨堂演練、 1（ ）在顯微鏡下觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片，圖中表示著絲點(diǎn)分裂、染色體移向兩極時(shí)的形態(tài)是：A 　　 　　　　　　　　　　染色體形態(tài)的示意圖 2 ( )經(jīng)過(guò)漂洗的洋蔥根尖放入盛有1%(即質(zhì)量濃度為0.01g／mL)龍膽紫溶液的玻璃皿中染色，被染色的細(xì)胞構(gòu)造是 A.整個(gè)細(xì)胞 B.細(xì)胞核 C.核仁 D.染色質(zhì)和染色體 3( )右圖是一學(xué)生繪出的某高等植物的細(xì)胞分裂圖像。 其中錯(cuò)誤的是 A.a和b B.c和d C.b和d D.e和f 4( )洋蔥根尖有絲分裂裝片的制作步驟是 A.解離→漂洗→染色→制片 B.解離→染色→漂洗→制片 C.染色→漂洗→解離→制片 D.染色→制片→解離→漂洗 5( )細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中，DNA分子的復(fù)制和分離發(fā)生在 A.間期和末期 B.前期和后期 C.間期和中期 D.間期和后期 Ⅳ　課后作業(yè) 1（　?。┯^察細(xì)胞中染色體行為并計(jì)數(shù)時(shí)，使用光學(xué)顯微鏡的正確方法是 A．低倍鏡對(duì)焦．將觀察目標(biāo)移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并增加進(jìn)光量，調(diào)焦觀察 B．低倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并減少進(jìn)光最．調(diào)焦觀察 C．低倍鏡對(duì)焦，轉(zhuǎn)用高倍鏡，將觀察目標(biāo)移至視野中央，減少進(jìn)光量，調(diào)焦觀察 D．高倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野中央，增加進(jìn)光量，綢焦觀察 ２( )取生長(zhǎng)健壯的小麥根尖，經(jīng)過(guò)解離、漂洗、染色、制片過(guò)程，制成臨時(shí)裝片，放在顯微鏡下觀察。欲觀察到細(xì)胞有絲分裂的前、中、后、末幾個(gè)時(shí)期 A. 應(yīng)該選一個(gè)處于間期的細(xì)胞，持續(xù)觀察它從間期到末期的全過(guò)程 B．如果在低倍鏡下看不到細(xì)胞，可改用高倍物鏡繼續(xù)觀察 C. 如果在一個(gè)視野中不能看全各個(gè)時(shí)期，可移動(dòng)裝片從周?chē)?xì)胞中尋找 D. 如果視野過(guò)暗，可以轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋增加視野的亮度 3（ ）用光學(xué)顯微鏡觀察發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象的洋蔥表皮細(xì)胞，不能檢視到染色體的原因是 A．沒(méi)有用龍膽紫染色 B．試劑破壞了染色體結(jié)構(gòu) C．無(wú)染色體形成 D．顯微鏡倍率不夠 4( )用顯微簡(jiǎn)的一個(gè)目鏡分別與4個(gè)不同倍數(shù)的物鏡組合來(lái)觀察血細(xì)胞涂片。當(dāng)成像清晰時(shí)，每一物鏡與載玻片的距離如圖所示。如果載玻片位置不變，用哪一物鏡在一個(gè)視野中看到的細(xì)胞最多D 5( )下列可以用來(lái)觀察植物細(xì)胞有絲分裂的是 A.番茄果實(shí) B.洋蔥鱗片葉 C.洋蔥根尖 D.葉表皮細(xì)胞 6( )做洋蔥根尖有絲分裂臨時(shí)裝片時(shí)要進(jìn)行染色，染色的目的是為了 A.辨認(rèn)染色體 B.辨認(rèn)細(xì)胞核 C.辨認(rèn)細(xì)胞質(zhì) D.辨認(rèn)分生區(qū)細(xì)胞 7( )在本實(shí)驗(yàn)中，先用低倍鏡觀察，需要找出 A.根毛區(qū) B.伸長(zhǎng)區(qū) C.根冠 D.分生區(qū) 8( )一同學(xué)觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片時(shí)發(fā)現(xiàn)被觀察的材料邊緣為淺藍(lán)色，中間為白色，下列有關(guān)對(duì)這一現(xiàn)象的分析，正確的是 A.染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng) B.染色時(shí)間過(guò)短 C.解離不充分 D.漂洗不徹底 9( )洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞有絲分裂末期，在細(xì)胞中央位置出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)及其與此結(jié)構(gòu)向四周擴(kuò)展為細(xì)胞壁有關(guān)的細(xì)胞器是 A.赤道板和高爾基體 B.細(xì)胞板與中心體 C.細(xì)胞壁和高爾基體 D.細(xì)胞板與高爾基體 10( )馬蛔蟲(chóng)受精卵有絲分裂、洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞有絲分裂差別的最根本原因是 A.前者細(xì)胞為圓球形，后者為正方形 B.前者細(xì)胞中有中心體，后者細(xì)胞具有細(xì)胞壁 C.前者由精子和卵細(xì)胞結(jié)合而成，后者則是有絲分裂形成的后代細(xì)胞 D.前者細(xì)胞中無(wú)高爾基體，后者細(xì)胞中有高爾基體 11( )有絲分裂中期細(xì)胞的核、質(zhì)分裂相的典型特征是 A.紡錘體結(jié)構(gòu)形成 B.染色體的形態(tài)和數(shù)目易于辨別 C.染色體的著絲點(diǎn)與牽引絲相連接 D.染色體呈有序排列在紡錘體中央的赤道板上 12( )下面的示意圖中，表示根尖生長(zhǎng)點(diǎn)后期細(xì)胞分裂相的是 D 13( )用光學(xué)顯微鏡觀察有絲分裂過(guò)程，參照下表應(yīng)選擇下列哪種植物作為最佳實(shí)驗(yàn)材料 植物種別 細(xì)胞周期時(shí)間（小時(shí)） 分裂間期 分裂期 合計(jì) A物種 10.6 0.4 11 B物種 18 0.5 18.5 C物種 16.5 2 18.5 D物種 10.4 2.3 12.7 14( )細(xì)胞在進(jìn)行正常的有絲分裂過(guò)程中，染色體、染色單體、DNA分子三者的數(shù)量比為1∶2∶2時(shí)，該細(xì)胞所處的時(shí)期是 A.中期或后期 B.后期或末期 C.前期或末期 D.前期或中期 15( )有絲分裂中期細(xì)胞與后期細(xì)胞的劃分標(biāo)志是 A.著絲點(diǎn)分裂、染色單體分開(kāi) B.細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍 C.子染色體分別移向兩極 D.子染色體間出現(xiàn)中間絲 16.用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，觀察植物細(xì)胞的有絲分裂。 ①培養(yǎng)洋蔥根尖時(shí)，如果沒(méi)有經(jīng)常換水，常會(huì)出現(xiàn)爛根現(xiàn)象，原因是 。 ②制作裝片時(shí)，如果用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸在10℃下解離5分鐘，然后按正常要求進(jìn)行漂洗、染色、制片。結(jié)果在觀察中，發(fā)現(xiàn)根尖細(xì)胞沒(méi)有較好地分散開(kāi)，原因是 。 ③觀察裝片時(shí)，分生區(qū)細(xì)胞中處于哪一時(shí)期的細(xì)胞最多 ，原因是 。 ④如果你觀察的某細(xì)胞物像在視野的右上方，要把細(xì)胞物像移到視野中央，應(yīng)把玻片向 方移動(dòng)。 ⑤制片的操作要求是所制裝片中無(wú)氣泡，細(xì)胞要分散開(kāi)，為此采取的措施是： 。 ①水中氧氣不足，根尖細(xì)胞進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精毒害細(xì)胞 ②解離液不合要求，特別是鹽酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)太低(應(yīng)為15％) ③間期，細(xì)胞在間期的時(shí)間最長(zhǎng) ④右上 ⑤加一滴清水于載玻片中央，將染色后的洋蔥根尖放在載玻片上清水中，用鑷子將根尖弄碎，蓋上蓋玻片，注意盡可能不產(chǎn)生氣泡(斜向慢慢放下)，在蓋玻片上加載玻片后用手輕壓。