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2019-2020年高考生物大二輪復(fù)習(xí) 第一編 專題整合突破 專題9 現(xiàn)代生物科技易錯(cuò)題訓(xùn)練 1．供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問題。而治療性克隆能最終解決這些問題。如圖所示為人類“治療性克隆”的大概過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答。 (1)過(guò)程A表示________，是目前實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵技術(shù)，該技術(shù)的主要操作是應(yīng)用患者的體細(xì)胞作為核供體，由①________細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì)，進(jìn)行人工重組，由此產(chǎn)生的重組細(xì)胞②的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自圖中的________。 (2)過(guò)程B表示的生物技術(shù)是________，C表示定向誘導(dǎo)技術(shù)，其誘導(dǎo)的對(duì)象是[　]________細(xì)胞。 (3)“治療性克隆”的結(jié)果說(shuō)明高度分化的體細(xì)胞的________。相同的胚胎干細(xì)胞，“克隆”的結(jié)果多種多樣，如有的是神經(jīng)細(xì)胞，有的是血細(xì)胞，有的是肌肉細(xì)胞，究其本質(zhì)原因是___________。 (4)中國(guó)政府對(duì)“克隆人”的觀點(diǎn)是________________________?！坝幸荒凶踊加邪籽。?jīng)醫(yī)生利用其出生時(shí)保留的臍帶血進(jìn)行治療后康復(fù)”，你認(rèn)為這種做法符合倫理道德嗎？為什么？___________。 答案　(1)細(xì)胞核移植　(次級(jí))卵母　乙　(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　④　內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(胚胎干)　(3)細(xì)胞核具有全能性　基因的選擇性表達(dá)　(4)禁止生殖性克隆人，不反對(duì)治療性克隆　符合，因?yàn)槟殠а皇莵?lái)自胚胎，其中的造血干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞 解析　(1)過(guò)程A為核移植，是將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中。重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自提供細(xì)胞核的個(gè)體，即乙。(2)過(guò)程B為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，C誘導(dǎo)的對(duì)象是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，因?yàn)閮?nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)要發(fā)育成各種組織和器官。(3)“治療性克隆”說(shuō)明高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。“克隆的結(jié)果多種多樣，是因?yàn)榛虻倪x擇性表達(dá)。(4)中國(guó)政府禁止生殖性克隆人，不反對(duì)治療性克隆。臍帶血中的造血干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，不是來(lái)自胚胎，故用自己的臍帶血治療白血病符合倫理道德。 2．科學(xué)家培育出“三親”胚胎的方法是：先將甲的精子和乙的卵子體外受精，再將受精卵的細(xì)胞核取出，植入丙去核的卵子中，培育成胚胎。回答下列問題： (1)該“三親”胚胎主要可避免攜帶親本________(填“甲” “乙”或“丙”)的線粒體致病基因，培育過(guò)程涉及的動(dòng)物細(xì)胞工程基礎(chǔ)技術(shù)是________。 (2)通過(guò)注射________激素可使乙、丙產(chǎn)生較多的卵子。體外受精時(shí)，________后的精子和處于________期的卵子相遇，首先發(fā)生________反應(yīng)，使精子穿越放射冠和透明帶，進(jìn)入卵細(xì)胞膜。在該過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生________道屏障以防止多精入卵。 (3)當(dāng)胚胎發(fā)育至________個(gè)細(xì)胞時(shí)可進(jìn)行移植。 答案　(1)乙　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　(2)促性腺　獲能　減數(shù)第二次分裂中(MⅡ中)　頂體　兩　(3)8～16 解析　本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程、胚胎工程，難度中等。(1)線粒體位于細(xì)胞質(zhì)中，受精卵的細(xì)胞質(zhì)幾乎全部來(lái)自乙的卵細(xì)胞，去掉受精卵的細(xì)胞質(zhì)，目的是避免攜帶親本乙的線粒體致病基因；動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(2)給雌性動(dòng)物注射促性腺激素，可以使雌性動(dòng)物超數(shù)排卵；獲能的精子和處于減數(shù)第二次分裂中期的卵子才具備受精能力，受精時(shí)先發(fā)生頂體反應(yīng)；在受精過(guò)程中透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的兩道屏障。(3)當(dāng)胚胎發(fā)育至8～16個(gè)細(xì)胞階段可以進(jìn)行移植。 3．加拿大科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因山羊已經(jīng)生產(chǎn)出重組的人類丁酰膽堿酯酶，該酶可用于對(duì)抗生化武器。下圖是轉(zhuǎn)基因山羊的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答問題(山羊?yàn)槎扼w)： (1)在上述操作中，目的基因是________基因，將該基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的方法是________法。 (2)胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物的早期胚胎或________所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。圖中過(guò)程⑦所涉及的胚胎工程技術(shù)是________________。 (3)從雌性山羊卵巢內(nèi)獲取的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到________期才能完成受精作用，此時(shí)細(xì)胞中的染色體組數(shù)是________。為了獲得更多的卵母細(xì)胞，往往需要向雌性山羊體內(nèi)注入________激素。受精過(guò)程中防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和____________。 (4)要同時(shí)獲得多只與此轉(zhuǎn)基因山羊遺傳物質(zhì)相同的小羊，可對(duì)囊胚進(jìn)行________。 (5)下列不屬于生物武器特點(diǎn)的是________。 A．致病力強(qiáng)，傳染性大 B．污染面積大，危害時(shí)間長(zhǎng) C．有潛伏期，傳染途徑多 D．造價(jià)高，技術(shù)難度大 答案　(1)丁酰膽堿酯酶　顯微注射　(2)配子　胚胎移植　(3)MⅡ中(或減數(shù)第二次分裂中)　1　促性腺　卵細(xì)胞膜反應(yīng)　(4)胚胎分割　(5)D 解析　本題考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用及胚胎工程的知識(shí)，解答時(shí)應(yīng)熟知現(xiàn)代生物技術(shù)的原理、方法、步驟等相關(guān)知識(shí)，并能利用所學(xué)知識(shí)分析解答有關(guān)生物學(xué)問題。(1)題中所述目的基因應(yīng)為丁酰膽堿酯酶基因，該基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用顯微注射技術(shù)。(2)胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物的早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作技術(shù)。圖中⑦過(guò)程表示把早期胚胎植入代孕母羊子宮內(nèi)，涉及的技術(shù)是胚胎移植。(3)卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能完成受精作用。為了獲得更多的卵母細(xì)胞，往往需要向雌性山羊體內(nèi)注入促性腺激素，防止多精入卵的屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)。(4)可通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得多只轉(zhuǎn)基因小羊。(5)生物武器的特點(diǎn)是致病力強(qiáng)，傳染性大，污染面積大，危害時(shí)間長(zhǎng)，有潛伏期，傳染途徑多等。 4．以下是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過(guò)程，a～h為操作過(guò)程，據(jù)圖回答有關(guān)問題： (1)“試管?！奔夹g(shù)的操作流程是________(填字母)。 (2)圖中數(shù)字標(biāo)號(hào)代表的結(jié)構(gòu)名稱是：①________，③________。 (3)d操作的名稱是________，過(guò)程h常用的方法是________。 (4)在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，應(yīng)注意_________________。 (5)將③處的細(xì)胞分離進(jìn)行培養(yǎng)，需在培養(yǎng)皿底部鋪設(shè)一層細(xì)胞，稱為飼養(yǎng)層，飼養(yǎng)層的作用是________________________。 (6)在哺乳動(dòng)物早期發(fā)育過(guò)程中，囊胚的后一個(gè)階段是________。 答案　(1)a→b→f→g　(2)滋養(yǎng)層　內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　(3)胚胎移植　顯微注射法　(4)要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割　(5)抑制細(xì)胞分化，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)　(6)原腸胚 解析　(1)“試管?！笔侵竿ㄟ^(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)，圖中“試管?！奔夹g(shù)的操作流程應(yīng)是a→b→f→g。(2)圖中①是滋養(yǎng)層，③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。(3)d操作是胚胎移植；過(guò)程h是將外源基因?qū)胧芫?，常用顯微注射法。(4)在對(duì)囊胚期胚胎進(jìn)行分割時(shí)，應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，以免影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。(5)飼養(yǎng)層細(xì)胞一般為輸卵管上皮細(xì)胞，在干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，可作為干細(xì)胞分裂、增殖的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，能夠維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)。(6)哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育過(guò)程中，囊胚的后一階段是原腸胚。 5．根據(jù)所學(xué)生物學(xué)知識(shí)回答下列問題： (1)若要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的________中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過(guò)DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的________上。 (2)目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素(一種糖蛋白，用于治療腎衰性貧血)主要來(lái)自基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO)。檢測(cè)rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的________細(xì)胞，可由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成，在融合過(guò)程中至少需要進(jìn)行________次篩選。 (3)在“試管?！钡呐嘤^(guò)程中，采用激素處理可使良種母牛一次排出多枚卵母細(xì)胞，最常用的激素是________。從良種公牛采集的精子需________后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為________、________。 (4)生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)即使某個(gè)物種由于某種原因而死亡，也會(huì)很快有其他物種占據(jù)它原來(lái)的生態(tài)位置，從而避免系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能失衡。這體現(xiàn)了生態(tài)工程的什么原理？________。 A．協(xié)調(diào)與平衡原理 B．物種多樣性原理 C．物質(zhì)循環(huán)再生原理 D．整體性原理 (5)下表為幾種限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列和切割的位點(diǎn)。下圖表示某DNA在目的基因的兩端1、2、3、4四處有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位點(diǎn)。現(xiàn)用BamHⅠ和PstⅠ兩種酶同時(shí)切割該DNA片段(假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開)，下列各種酶切位點(diǎn)情況中，可以防止酶切后單個(gè)含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀的是________。 A．1為PstⅠ，2為EcoRⅠ，3為EcoRⅠ，4為BamHⅠ B．1為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為BamHⅠ，4為PstⅠ C．1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為BamHⅠ，4為PstⅠ D．1為EcoRⅠ，2為PstⅠ，3為PstⅠ，4為BamHⅠ (6)運(yùn)用基因工程技術(shù)已經(jīng)創(chuàng)造出了“蜘蛛羊”，該羊的乳汁中含有蛛絲蛋白，高強(qiáng)度的蛛絲蛋白可用于許多重要的特種工業(yè)領(lǐng)域。為保證實(shí)驗(yàn)成功，產(chǎn)生蛛絲蛋白的基因需從cDNA文庫(kù)中獲取，并與____________________等調(diào)控組件重組在一起，然后與載體相連構(gòu)建成為表達(dá)載體；再通過(guò)________方法，將表達(dá)載體導(dǎo)入羊的________，獲得重組細(xì)胞。將獲得的重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎后，移植到經(jīng)過(guò)______處理的受體母羊子宮內(nèi)。因?yàn)槲覀儗?duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)條件還沒有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培養(yǎng)中，往往還需要添加______。 答案　(1)TDNA　染色體DNA　(2)雜交瘤　2　(3)促性腺激素　獲能　透明帶反應(yīng)　卵細(xì)胞膜反應(yīng)　(4)B (5)C　(6)羊的乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子　顯微注射　受精卵　同期發(fā)情　動(dòng)物血清 解析　本題考查現(xiàn)代生物科技的相關(guān)知識(shí)，涉及基因工程、胚胎工程、單克隆抗體的制備及生態(tài)工程等知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解分析能力及綜合運(yùn)用能力。(1)目的基因先插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的TDNA中，然后用該菌感染植物細(xì)胞，將目的基因整合到植物細(xì)胞的染色體DNA中。(2)用rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，以制備單克隆抗體，在此過(guò)程要進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選是在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞)和融合的具有同種核的細(xì)胞(BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，這種雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一的特異性抗體。第二次篩選后可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。(3)用促性腺激素可促使良種母畜超數(shù)排卵；精子需獲能后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次是透明帶反應(yīng)、卵細(xì)胞膜反應(yīng)。(4)題中所述體現(xiàn)物種多樣性原理。(5)由題圖可知三種酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)各不相同，因此要防止酶切后單個(gè)含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀，該DNA分子在圖示的4個(gè)位置被切開后，在位置2和3處應(yīng)不能產(chǎn)生相同的黏性末端，由題意可知，在位置2和3處不能為同一種酶，故答案選C。(6)cDNA文庫(kù)是利用mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得的，除去了基因結(jié)構(gòu)中內(nèi)含子的干擾，實(shí)驗(yàn)容易成功，為讓目的基因在羊的乳汁中表達(dá)，應(yīng)在目的基因前加上羊的乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，構(gòu)建成基因表達(dá)載體；基因表達(dá)載體常用顯微注射法導(dǎo)入受精卵，獲得重組細(xì)胞。胚胎移植時(shí)要對(duì)受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣可以為胚胎移植入受體子宮提供相同的生理環(huán)境；早期胚胎的培養(yǎng)中，除基本營(yíng)養(yǎng)成分外，還需要添加動(dòng)物血清。 6．如圖是一個(gè)人工農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)模式圖(大棚溫度、CO2濃度等可適當(dāng)控制)。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)該生態(tài)工程所遵循的基本原理是________________(寫兩種)。 (2)相對(duì)一般農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)而言，此生態(tài)系統(tǒng)能提高經(jīng)濟(jì)效益，主要原因是充分利用了________中的能量。 (3)沼氣池中的微生物在該生態(tài)系統(tǒng)中的主要功能是________；沼氣燃燒后生成的CO2通入大棚內(nèi)的意義是____________________。 (4)農(nóng)作物青貯的主要操作是：甘薯藤切段→填壓進(jìn)入青貯窖中→密封一段時(shí)間，其目的在于_________________。 (5)請(qǐng)用箭頭和文字表示這個(gè)生態(tài)系統(tǒng)中能量流動(dòng)的圖解(各種生物的呼吸耗能不要求畫出)。 答案　(1)物質(zhì)循環(huán)再生原理、協(xié)調(diào)與平衡原理　(2)糞便等廢物　(3)分解作用　可以增加大棚中CO2濃度，增強(qiáng)植物的光合作用，提高作物的產(chǎn)量　(4)通過(guò)微生物發(fā)酵，初步分解農(nóng)作物秸稈中的有機(jī)物，有利于禽畜的消化吸收 (5) 解析　(1)生態(tài)工程的基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理及系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。該生態(tài)工程依據(jù)的是物質(zhì)循環(huán)再生、物種多樣性和協(xié)調(diào)與平衡原理。(2)一般的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中，糞便直接被分解者分解，秸稈直接燃燒，此人工農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)充分利用了糞便和秸稈中的能量。(3)沼氣池分解了糞便等廢物，產(chǎn)生沼氣。沼氣燃燒產(chǎn)生的CO2進(jìn)入大棚，增強(qiáng)了植物的光合作用。(4)青貯的作用是通過(guò)微生物發(fā)酵，初步分解農(nóng)作物秸稈中的有機(jī)物，有利于禽畜的消化吸收。 7．已知哺乳動(dòng)物的早期胚胎發(fā)育分為受精卵→2細(xì)胞→4細(xì)胞→8細(xì)胞→桑椹胚→囊胚→原腸胚幾個(gè)階段，請(qǐng)回答下列與胚胎發(fā)育及胚胎工程相關(guān)的問題。 (1)從受精卵到桑椹胚階段，細(xì)胞分裂的方式是________。透明帶內(nèi)有機(jī)物總量在________(填“減少”或“增加”)。最早的細(xì)胞分化發(fā)生在________期，其中________發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層發(fā)育成胎兒的________和________。 (2)胚胎移植過(guò)程中需對(duì)供、受體母牛進(jìn)行______，并進(jìn)行______，用激素對(duì)供體母牛做________處理。把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖出來(lái)，叫作________。 (3)胚胎分割是將發(fā)育良好、形態(tài)正常的________或________移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后用分割針或者分割刀進(jìn)行分割。在進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)________分割。胚胎分割產(chǎn)生的個(gè)體具有________(填“相同”或“不同”)的特征。 答案　(1)有絲分裂　減少　囊胚　內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　胎膜　胎盤　(2)選擇　同期發(fā)情處理　超數(shù)排卵　沖卵　(3)桑椹胚　囊胚　均等　相同 解析　從受精卵到桑椹胚階段，細(xì)胞通過(guò)有絲分裂進(jìn)行，透明帶內(nèi)的有機(jī)物總量在減少。囊胚期開始細(xì)胞分化，其中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)發(fā)育成胎兒的各種組織。滋養(yǎng)層發(fā)育成胎兒的胎盤和胎膜。(2)胚胎移植時(shí)對(duì)供體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)母牛作超數(shù)排卵。把供體母牛內(nèi)的胚胎沖出來(lái)叫沖卵。(3)胚胎分割時(shí)選桑椹胚或囊胚，且將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，使產(chǎn)生的個(gè)體具有相同的特征。 8．第三十屆奧運(yùn)會(huì)在英國(guó)倫敦舉行，其中的馬術(shù)比賽被稱為貴族的運(yùn)動(dòng)，英國(guó)純血馬是世界頂級(jí)馬術(shù)比賽的常用馬種，其數(shù)量少，生育力低?，F(xiàn)代生物技術(shù)能有效提高優(yōu)質(zhì)馬的生育效率。請(qǐng)據(jù)此回答有關(guān)問題。 (1)用________激素處理適齡純血母馬，可使其一次性排出比自然情況下多幾倍到幾十倍的卵子。將采集的卵母細(xì)胞人工培育至減數(shù)第二次分裂的中期，在顯微鏡下可觀察到次級(jí)卵母細(xì)胞和________。 (2)體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行一定的處理，使其________。 (3)為獲得同卵雙胎或多胎，可以在胚胎發(fā)育的________期用機(jī)械方法將胚胎分割。 (4)隨著動(dòng)物克隆技術(shù)的發(fā)展，人們可以將純血馬的________移入其他馬的________細(xì)胞中，將其激活并發(fā)育成胚胎，植入代孕母馬體內(nèi)。為保證胚胎移植的成功，胚胎的供體和受體應(yīng)保持____________。 (5)克隆技術(shù)在帶來(lái)巨大社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益的同時(shí)，也對(duì)人們的傳統(tǒng)觀念造成了極大沖擊，我國(guó)政府的態(tài)度是禁止________性克隆人。 (6)把含有某外源基因的受體細(xì)胞培育成為一匹優(yōu)質(zhì)馬還需要用到的技術(shù)有________________________________(至少寫出兩種)。 答案　(1)促性腺　第一極體　(2)獲能　(3)桑椹胚或囊胚　(4)細(xì)胞核　去核卵母　相同的生理環(huán)境　(5)生殖　(6)核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù) 解析　本題綜合考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)。使動(dòng)物多排卵通常用促性腺激素處理。對(duì)采集到的精子要先進(jìn)行獲能處理，然后才能進(jìn)行受精作用。將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，在顯微鏡下可看到次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體。胚胎發(fā)育過(guò)程中要獲得更多的個(gè)體，通常對(duì)桑椹胚期或囊胚期的胚胎進(jìn)行胚胎分割移植。動(dòng)物克隆技術(shù)是將動(dòng)物體細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中，胚胎移植時(shí)要對(duì)供體和受體動(dòng)物作同期發(fā)情處理，使其具有相同的生理環(huán)境。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育過(guò)程中需要用到基因工程技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)(即動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng))技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等。 9．因?yàn)樨i的基因和人類的基因存在一定相似度。據(jù)報(bào)道經(jīng)過(guò)特殊處理的豬皮可在人身上存活3周左右，起到保護(hù)創(chuàng)面免受感染的作用。為了使移植的豬皮存活時(shí)間更長(zhǎng)，有人設(shè)法導(dǎo)入人的相關(guān)基因(用P表示)，獲得轉(zhuǎn)基因小白豬。其簡(jiǎn)單流程如圖所示： (1)過(guò)程①中形成重組DNA常用的酶有_____________________；將目的基因?qū)氤衫w維細(xì)胞常用的方法是_____________________。 (2)過(guò)程②中，常用________酶處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)需要滿足的條件是無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、________、溫度和pH、________。 (3)過(guò)程③中所用的胚胎工程技術(shù)是________，然后將早期胚胎移入另一頭與供體________但未經(jīng)配種的代孕母豬的相應(yīng)部位。 (4)圖中的卵母細(xì)胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到________期。 答案　(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶　顯微注射法 (2)胰蛋白(或膠原蛋白)　營(yíng)養(yǎng)　氣體環(huán)境(或通氣環(huán)境)　(3)早期胚胎培養(yǎng)　同期發(fā)情(或同時(shí)發(fā)情)　(4)減數(shù)第二次分裂中 解析　實(shí)際上，基因工程僅僅創(chuàng)造出工程細(xì)胞，若要轉(zhuǎn)化為產(chǎn)品，需要實(shí)施細(xì)胞工程或胚胎工程。過(guò)程③是將重組細(xì)胞培育為可移植的早期胚胎的過(guò)程，為確保移植成功，需保證代孕母豬的子宮內(nèi)生理狀態(tài)與供卵母體的生理狀態(tài)一致。 10．第41個(gè)世界地球日的主題為“珍惜地球資源，轉(zhuǎn)變發(fā)展方式，倡導(dǎo)低碳生活”，實(shí)質(zhì)就是實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)與生態(tài)環(huán)境的可持續(xù)發(fā)展，如圖是我國(guó)南方開始嘗試的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)模式圖，它利用雛鴨旺盛的雜食性，吃掉稻田里的雜草和害蟲，利用鴨不間斷的活動(dòng)產(chǎn)生中耕渾水效果，刺激水稻生長(zhǎng)，用作物養(yǎng)豬、養(yǎng)鴨，用稻稈培育蘑菇、生產(chǎn)沼氣，豬鴨糞、沼渣肥田，生產(chǎn)出無(wú)公害的大米與蛋肉類。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)沼氣池發(fā)酵產(chǎn)生的沼氣能成為人類的能源物質(zhì)，提高了該生態(tài)系統(tǒng)的能量利用率，這主要遵循了生態(tài)工程的________原理。 (2)從生態(tài)學(xué)角度分析，人們建立圖示的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的主要目的是_________________________________________________。 (3)“低碳生活”正在成為全社會(huì)的共識(shí)，成為人們所期待的最為主導(dǎo)的生存和發(fā)展方式，“低碳”指________。指出圖中體現(xiàn)“低碳”的一個(gè)做法：____________。 (4)若此圖為碳循環(huán)的部分示意圖，與碳循環(huán)有直接關(guān)系的細(xì)胞器是________；在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，若將蘑菇房與蔬菜大棚相通，可提高蔬菜產(chǎn)量，試分析其增產(chǎn)的原因：_____________________。 答案　(1)物質(zhì)循環(huán)再生　(2)實(shí)現(xiàn)生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)能量和物質(zhì)的多級(jí)利用，提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量，減少環(huán)境污染(合理地調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動(dòng)關(guān)系，提高能量利用率，減少環(huán)境污染)　(3)較低(更低)的溫室氣體(二氧化碳為主)排放　秸稈不作燃料，用于培育蘑菇、生產(chǎn)沼氣 (4)葉綠體和線粒體　蘑菇呼吸產(chǎn)生的二氧化碳可以供蔬菜進(jìn)行光合作用，使其光合作用增強(qiáng) 解析　(1)沼氣池發(fā)酵產(chǎn)生沼氣，提高了生態(tài)系統(tǒng)的能量利用率，主要遵循物質(zhì)循環(huán)再生原理。(2)建立生態(tài)農(nóng)業(yè)的目的是實(shí)現(xiàn)生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)能量和物質(zhì)的多級(jí)利用，提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量，減少環(huán)境污染。(3)低碳是指較低的溫室氣體排放。體現(xiàn)“低碳”的作法：如秸稈不作燃料，用于培育蘑菇和生產(chǎn)沼氣。(4)光合作用與呼吸作用參與碳循環(huán)，參與的細(xì)胞器有葉綠體和線粒體。蘑菇為真菌，只能進(jìn)行呼吸作用，產(chǎn)生的CO2可供蔬菜光合作用所利用。 11．隨著人們生活水平的提高，對(duì)乳制品的需求越來(lái)越大，為了擴(kuò)大生產(chǎn)，提高產(chǎn)崽率，要進(jìn)行良種牛的培育。如圖為胚胎移植的基本程序及早期胚胎發(fā)育過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)用________激素處理使供體母牛超數(shù)排卵。 (2)沖卵實(shí)質(zhì)上是用特定裝置將供體母牛子宮內(nèi)的________沖洗出來(lái)。通過(guò)_____和早期胚胎培養(yǎng)也可以獲得胚胎移植所需胚胎，但使用該方法需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，通常采用的方法有培養(yǎng)法和______兩種。卵子也需要有準(zhǔn)備階段，當(dāng)達(dá)到________期時(shí)，才具備與精子受精的能力。 (3)從A到E中，適宜牛的胚胎移植的時(shí)期有________。 (4)圖E中標(biāo)號(hào)1所指為________，它將來(lái)發(fā)育成________。 (5)胚胎早期培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除含有一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需要維生素、________、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及________等物質(zhì)。 答案　(1)促性腺　(2)早期胚胎　體外受精　化學(xué)誘導(dǎo)法　減數(shù)第二次分裂中　(3)D、E　(4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　胎兒的各種組織　(5)激素　血清 解析　常用促性腺激素處理，使供體母牛超數(shù)排卵，沖卵實(shí)質(zhì)上是用特定裝置將供體母牛子宮內(nèi)的早期胚胎沖洗出來(lái)。通過(guò)體外受精和早期胚胎培養(yǎng)也可以獲得早期胚胎。精子獲能處理的方法有化學(xué)誘導(dǎo)法和培養(yǎng)法。卵子通常到減數(shù)第二次分裂中期才具備與精子受精的能力。胚胎移植常用囊胚或桑椹胚進(jìn)行。圖E中標(biāo)號(hào)1所指為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織。胚胎早期培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除含有一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需要維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物質(zhì)。 12．請(qǐng)回答有關(guān)下圖的問題： (1)圖甲中①～⑤所示的生物工程為蛋白質(zhì)工程。該工程是指以______________________________作為基礎(chǔ)，通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)的修飾或合成，對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造出一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)生活的需求。 (2)圖甲中序號(hào)④所示過(guò)程叫做________，該過(guò)程遵循的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則不同于翻譯過(guò)程的是________(請(qǐng)將模板堿基寫在前)。 (3)如圖乙，一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，在基因尾端還必須有[2]________；圖中[3]________的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。 (4)若預(yù)期蛋白質(zhì)欲通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)，則構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，圖乙中序號(hào)[1]代表的是乳腺蛋白基因的________；且在圖甲中⑨過(guò)程之前，要對(duì)精子進(jìn)行篩選，保留含性染色體________的精子。 (5)為獲得較多的受精卵進(jìn)行研究，圖甲中⑥過(guò)程一般用激素對(duì)供體做________處理；為提高培育成功率，進(jìn)行⑩過(guò)程之前，要對(duì)供、受體動(dòng)物做________處理。若圖甲中的卵母細(xì)胞來(lái)自從屠宰場(chǎng)收集的卵巢，則其在⑧之前需進(jìn)行體外培養(yǎng)到________期方能受精。 (6)用________技術(shù)處理發(fā)育到________期或囊胚期的早期胚胎，可獲得同卵雙胎或多胎。若是對(duì)囊胚進(jìn)行處理，要注意將________均等分割。 答案　(1)蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系　(2)反轉(zhuǎn)錄　A—T　(3)終止子　標(biāo)記基因　(4)啟動(dòng)子　X　(5)超數(shù)排卵　同期發(fā)情　MⅡ中　(6)胚胎分割　桑椹胚　內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 解析　本題考查蛋白質(zhì)工程及生物反應(yīng)器的知識(shí)，意在考查識(shí)圖析圖能力和綜合運(yùn)用能力。(1)以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。(2)圖甲中序號(hào)④是由RNA到DNA的過(guò)程，是反轉(zhuǎn)錄，遵循的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則是A—T、G—C、U—A。翻譯過(guò)程堿基互補(bǔ)配對(duì)是A—U、G—C。(3)基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子及標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。(4)圖乙中序號(hào)[1]代表啟動(dòng)子。對(duì)精子進(jìn)行篩選，保留含性染色體X的精子，以便受精后得到雌性個(gè)體，利用乳腺反應(yīng)器生產(chǎn)。(5)對(duì)雌性個(gè)體注射促性腺激素，可達(dá)到超數(shù)排卵的目的。在受精前，精子必須經(jīng)過(guò)特殊的處理，以獲取受精作用的能力，稱為獲能反應(yīng)，卵子要培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期。(6)欲得到同卵雙胎或多胎，可采用胚胎分割技術(shù)對(duì)桑椹胚或囊胚期的胚胎予以分割，但對(duì)囊胚分割時(shí)，需將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。 13．大腸桿菌pUC18質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體。某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中，如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶。當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。下圖表示利用此質(zhì)粒實(shí)施基因工程的主要流程。請(qǐng)分析并回答問題。 (1)對(duì)已獲得的目的基因可利用________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。 (2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，需要DNA連接酶恢復(fù)________鍵。 (3)將試管I中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是_____；大腸桿菌需事先用Ca2＋進(jìn)行處理，目的是_____________。 (4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素的作用是篩選出__________________。 (5)若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)________色菌落，則說(shuō)明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則不利于重組質(zhì)粒的篩選，原因是_________________。 答案　(1)PCR (2)磷酸二酯 (3)進(jìn)行轉(zhuǎn)化 使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài) (4)導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌 (5)白 無(wú)論大腸桿菌中是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，均會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色菌落 解析　(1) PCR技術(shù)能在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，所以已獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2) DNA連接酶連接形成的是磷酸二酯鍵。(3)將試管I中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，即進(jìn)行轉(zhuǎn)化；大腸桿菌需事先用Ca2＋進(jìn)行處理，增大細(xì)胞壁的通透性，使之處于易吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。(4)由于質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌能抗氨芐青霉素，所以培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌。(5)重組質(zhì)粒上的LacZ基因被破壞，不能產(chǎn)生β半乳糖苷酶，若大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，則其在含有IPTG和Xgal的培養(yǎng)基中形成白色菌落。如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則無(wú)論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落，這樣不利于重組質(zhì)粒的篩選。 14．重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過(guò)寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋、互為模板，通過(guò)多次PCR擴(kuò)增，從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴(kuò)增較長(zhǎng)片段的DNA、不同來(lái)源的DNA片段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過(guò)程。其主要設(shè)計(jì)思路是用具有互補(bǔ)配對(duì)片段的引物(圖中引物2、引物3)，分別PCR，獲得有重疊鏈的兩種DNA片段，再在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過(guò)重疊鏈的延伸獲得目的基因。結(jié)合所學(xué)知識(shí)，分析下列問題。 (1)引物中G＋C的含量影響著引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性，引物中G＋C的含量越高，結(jié)合穩(wěn)定性________。 (2)在第一階段獲得兩種具有重疊片段DNA的過(guò)程中，必須將引物1、2和引物3、4置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中，這是因?yàn)開___________。 (3)引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、引物4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制，共產(chǎn)生________種雙鏈DNA分子。 (4)在引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)________次復(fù)制。 (5)若利用微生物擴(kuò)增該目的基因，其基本步驟包括：__________、________________、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取目的基因。 答案　(1)越高　(2)引物2和引物3存在互補(bǔ)配對(duì)片段，置于同一反應(yīng)系統(tǒng)中它們會(huì)發(fā)生結(jié)合而失去作用　(3)3　(4)2　(5)目的基因與載體結(jié)合(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)　將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 解析　本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。(1)G與C配對(duì)需要形成三個(gè)氫鍵，所以引物中G＋C的含量越高，結(jié)合的穩(wěn)定性越高。(2)引物2和引物3存在互補(bǔ)配對(duì)片段，置于同一反應(yīng)系統(tǒng)中它們會(huì)發(fā)生結(jié)合而失去作用，所以必須將引物1、2和引物3、4置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中。(3)由圖分析可知，共產(chǎn)生3種雙鏈DNA分子。(4)在引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)兩次復(fù)制。(5)擴(kuò)增目的基因的基本步驟包括基因與載體結(jié)合(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、微生物的篩選和培養(yǎng)，從菌群中獲取目的基因。 15．抗凍蛋白是一類抑制冰晶生長(zhǎng)的蛋白質(zhì)，能降低水溶液的冰點(diǎn)，從而導(dǎo)致水溶液的熔點(diǎn)和冰點(diǎn)出現(xiàn)差值，這個(gè)溫度差稱為熱滯值。昆蟲抗凍蛋白的熱滯值最高為3～6 ℃，魚的熱滯值為0.7～1.5 ℃，因此，昆蟲抗凍蛋白在實(shí)際應(yīng)用上具有更大的潛力。為了擴(kuò)展一些植物的生存范圍，科學(xué)家利用昆蟲抗凍蛋白(AFPS)的異源表達(dá)，現(xiàn)已成功地提高了煙草的抗凍能力。請(qǐng)分析回答相關(guān)問題： (1)基因工程的核心步驟是______，這一過(guò)程需要的酶是_______。將AFPS基因?qū)霟煵菁?xì)胞中，常用________法，這是因?yàn)闊煵輰儆赺_____(填“單”或“雙”)子葉植物，當(dāng)植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的______，此操作過(guò)程中使用的運(yùn)載體是_______。 (2)若檢測(cè)AFPS基因是否整合到煙草的染色體上，一般采用________技術(shù)，若檢測(cè)是否產(chǎn)生抗凍蛋白，一般采用________方法檢測(cè)雜交帶；還可以從________生物學(xué)水平進(jìn)行抗凍鑒定。 (3)生產(chǎn)上可將上述轉(zhuǎn)基因煙草大范圍種植，提高了農(nóng)民的經(jīng)濟(jì)收入，從生態(tài)工程角度分析，主要體現(xiàn)了________原理。 答案　(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建　限制酶和DNA連接酶　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化　雙　酚類化合物　Ti質(zhì)?！?2)DNA分子雜交　抗原—抗體雜交　個(gè)體　(3)整體性 解析　本題考查基因工程和生態(tài)工程，難度中等。(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，這一過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物；當(dāng)植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞；這一操作過(guò)程中使用的運(yùn)載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒。(2)可以采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否整合到受體細(xì)胞的染色體上；檢測(cè)目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。(3)在追求生態(tài)效益時(shí)考慮到社會(huì)效益、經(jīng)濟(jì)效益，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的整體性原理。 16．Ⅰ.人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如下圖1所示，請(qǐng)據(jù)圖作答： (1)卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可從已處死的雌鼠的________中獲取。 (2)圖1中的高血壓相關(guān)基因作為________，質(zhì)粒作為________，兩者需用________________切割后連接成重組載體，該過(guò)程與質(zhì)粒上含有________________有關(guān)。 (3)子代大鼠如果__________________和__________________，即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說(shuō)明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。 Ⅱ.上圖2是某科學(xué)家利用小鼠纖維母細(xì)胞等獲得單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)①過(guò)程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的________過(guò)程。②過(guò)程的實(shí)質(zhì)是__________________。 (2)③過(guò)程中需用到的生物誘導(dǎo)方法是_____________。 (3)④處需要篩選，其目的是_____________________。 答案?、?(1)卵巢　(2)目的基因　運(yùn)載體　同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶)　限制酶切割位點(diǎn) (3)檢測(cè)到體內(nèi)有相關(guān)蛋白　出現(xiàn)高血壓?、?(1)脫分化　基因的選擇性表達(dá)　(2)用滅活的病毒誘導(dǎo)　(3)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 解析　本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，難度中等。Ⅰ.(1)對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠，如果是從活體輸卵管中采集的卵母細(xì)胞，可以直接與獲能的精子在體外受精，如果是從已處死的雌鼠卵巢中采集的卵母細(xì)胞，需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，才能與獲能的精子受精。(2)圖1中的高血壓相關(guān)基因作為目的基因，質(zhì)粒作為載體，兩者需用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割，并形成相同的黏性末端后才能連接成重組載體，該過(guò)程與質(zhì)粒上有限制酶切割位點(diǎn)有關(guān)。(3)若在子代大鼠的體內(nèi)檢測(cè)出與高血壓相關(guān)的蛋白質(zhì)，則從分子水平上說(shuō)明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)；若子代大鼠的血壓升高，則從個(gè)體水平上說(shuō)明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)。Ⅱ.(1)①過(guò)程可以將細(xì)胞誘導(dǎo)為干細(xì)胞，類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化；②過(guò)程形成了不同的細(xì)胞，為分化過(guò)程，實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。(2)③過(guò)程是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，可以用物理方法、化學(xué)方法或生物方法，其中生物方法可以用滅活的病毒誘導(dǎo)。(3)④處需要篩選，其目的主要是篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。 17．如圖所示為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，動(dòng)物細(xì)胞增殖情況的變化曲線(圖中B、D兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選后繼續(xù)培養(yǎng))。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)OA段的培養(yǎng)稱為________培養(yǎng)，AB段可能發(fā)生了__________現(xiàn)象，需要用________酶處理使組織細(xì)胞分散開來(lái)。 (2)G點(diǎn)之后的細(xì)胞能克服______________________________，并朝著________的方向發(fā)展。 (3)為使進(jìn)行同體細(xì)胞或組織移植時(shí)細(xì)胞的核型不變，實(shí)際使用或冷凍保存的細(xì)胞應(yīng)為圖中________的細(xì)胞。 (4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，就細(xì)胞增殖、分化來(lái)說(shuō)，動(dòng)植物細(xì)胞都要進(jìn)行________，不同的是植物細(xì)胞還要進(jìn)行_______。 (5)為制備單克隆抗體，需將___注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取______細(xì)胞，同時(shí)可選取圖中________點(diǎn)的細(xì)胞與該細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞，所選取的細(xì)胞，其細(xì)胞膜上的________比正常細(xì)胞顯著減少。為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細(xì)胞，可用________培養(yǎng)基達(dá)到目的。 答案　(1)原代　細(xì)胞接觸性抑制(接觸性抑制)　胰蛋白　(2)細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性(含義對(duì)即可) 等同于癌細(xì)胞(癌細(xì)胞)　(3)B～C　(4)細(xì)胞增殖(細(xì)胞分裂)　脫分化和再分化　(5)抗原反復(fù)(抗原)　漿(效應(yīng)B)　G　糖蛋白　選擇 解析　(1)由圖可知：OA段稱為原代培養(yǎng)，AB段增殖代數(shù)不變，說(shuō)明發(fā)生了接觸性抑制。需用胰蛋白酶處理。(2)G點(diǎn)后的細(xì)胞可無(wú)限增殖，說(shuō)明其細(xì)胞克服了細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性。朝著癌細(xì)胞的方向發(fā)展。(3)冷凍保存的細(xì)胞為B～C段的細(xì)胞。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞均要進(jìn)行細(xì)胞增殖、脫分化和再分化。(5)為制備單克隆抗體，需將抗原反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，以獲得漿細(xì)胞，同時(shí)選用G點(diǎn)的細(xì)胞(無(wú)限增殖)與該細(xì)胞融合成雜交細(xì)胞，因?yàn)镚點(diǎn)細(xì)胞可無(wú)限增殖，故其細(xì)胞膜上糖蛋白減少。用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。 18．下圖表示應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請(qǐng)回答下列問題。 (1)①過(guò)程表示________，②過(guò)程用到的工具酶是____________。 (2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的首端必須含有________，③過(guò)程常用的方法是____________________，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是____________________________________。 (3)從分子水平上鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄可采用________技術(shù)，對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和________檢測(cè)，經(jīng)多次篩選獲得足夠數(shù)量的該類細(xì)胞。 (4)細(xì)胞Ⅰ是________，細(xì)胞Ⅱ的特點(diǎn)是_____________________。 (5)若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的________作為疫苗。 答案　(1)逆轉(zhuǎn)錄　限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)　(2)啟動(dòng)子　顯微注射法　轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因　(3)分子雜交　抗體　(4)漿細(xì)胞　既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生抗體　(5)抗原蛋白 解析　本題考查基因工程及單克隆抗體制備的知識(shí)，意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達(dá)形式準(zhǔn)確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容。能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)的觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。(1)據(jù)圖分析可知，①過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，②為從DNA上獲取目的基因的過(guò)程，需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶。(2)基因表達(dá)載體主要由目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子組成。③過(guò)程為重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞，常用顯微注射法，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。(3)可采用分子雜交技術(shù)鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ要進(jìn)行抗體檢測(cè)。(4)小鼠受抗原刺激后，可由B細(xì)胞增殖分化形成漿細(xì)胞，即細(xì)胞Ⅰ，漿細(xì)胞可產(chǎn)生抗體。細(xì)胞Ⅱ?yàn)殡s交瘤細(xì)胞，既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生抗體。(5)圖中抗原蛋白是H7N9病毒基因表達(dá)的產(chǎn)物，可作為疫苗預(yù)防H7N9禽流感。