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2019-2020年高考生物二輪專題復(fù)習(xí) 階段測試四 1．(xx長春調(diào)研)(10分)蘋果醋是指以蘋果汁經(jīng)發(fā)酵而成的蘋果原醋再兌以蘋果汁等原料而制成的飲品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起來非常爽口。下圖是蘋果醋的制作簡圖，據(jù)圖回答： ＋―→ (1)過程①中使用到的微生物是__________，屬于生態(tài)系統(tǒng)成分中的__________。若要檢測是否產(chǎn)生了酒精可用__________試劑進(jìn)行檢測。 (2)過程②中使用到的微生物是__________，該微生物的代謝類型是__________型。 該微生物可以從食醋中分離純化獲得，方法是： 第一步：配制培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基必須含有微生物生長所需要的______________等基本營養(yǎng)成分。 第二步：對培養(yǎng)基用__________方法進(jìn)行滅菌。 第三步：接種。微生物常用的接種方法有：________________、____________。 第四步：培養(yǎng)。溫度控制在__________。 第五步：挑選符合要求的菌落。 解析：(1)過程①利用了酵母菌無氧呼吸分解葡萄糖產(chǎn)生酒精的原理。酵母菌屬于生態(tài)系統(tǒng)中的分解者。(2)過程②中醋酸菌利用培養(yǎng)液中的乙醇生成了醋酸。醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型。對微生物進(jìn)行培養(yǎng)時，要對培養(yǎng)用具、培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。醋酸菌的最適生長溫度為30～35 ℃，故應(yīng)將培養(yǎng)溫度控制在30～35 ℃范圍內(nèi)。 答案：(1)酵母菌　分解者　重鉻酸鉀　(2)醋酸菌　異養(yǎng)需氧　水、碳源、氮源、無機(jī)鹽　高壓蒸汽　平板劃線法　稀釋涂布平板法　30～35 ℃ 2．(xx河南一模)(10分)急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌、病毒通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的。因此檢驗飲用水的細(xì)菌、病毒的含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關(guān)的問題： (1)檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為__________。下圖所示的四種菌落分布圖中，不可能由該方法得到的是________ 。 A　 　B 　　C 　　D (2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要對照組？__________。為什么？__________________________________________。 (3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、燒瓶和吸管；③實驗操作者的雙手。其中需要消毒的是__________，需要滅菌的是__________。 (4)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？____________________________________。 解析： (1)平板劃線法所得菌落集中呈線狀，D的菌落分布情況可判斷為平板劃線法接種。 (2)為判斷培養(yǎng)基滅菌是否合格，本實驗需要對照。 (3)消毒是指使用較溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外，所有的微生物，包括芽孢和孢子。對人的手不能進(jìn)行滅菌。 (4)根據(jù)題目意思大腸桿菌能產(chǎn)生氣體，對培養(yǎng)基進(jìn)行接種觀察有無氣泡產(chǎn)生來判斷大腸桿菌的有無。 答案：(1)稀釋涂布平板法　D (2)需要　因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格) (3)③　①② (4)通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待測水樣。再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37 ℃恒溫箱培養(yǎng)24 h。若試管內(nèi)有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌 3．(xx河南三模)(10分)家庭中泡菜的制作方法是：新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”，密封后置于溫度適宜的地方。有時制作的泡菜會“咸而不酸”或“酸而不咸”，前者是用鹽過多，后者是用鹽過少。 (1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是__________。密封泡菜壇的原因是： ①________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________。 (2)若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是__________________________________________。 (3)加入“陳泡菜水”的作用是__________。 (4)制作泡菜的過程中，有機(jī)物的干重將__________；菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類將__________。 (5)乳酸菌與釀制果醋的菌種在代謝方式上的主要區(qū)別是____________________________________________________________________。 (6)有位同學(xué)在家制作泡菜時，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是____________________________。 (7)若要獲得大量乳酸菌菌種，應(yīng)選用培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有__________、__________、__________和__________等營養(yǎng)物質(zhì)。 解析：(1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒。乳酸菌是厭氧生物，泡菜壇密封后造成缺氧環(huán)境，同時密封可以防止雜菌進(jìn)入。(2)制作泡菜時，若放入的食鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵造成泡菜“咸而不酸”。(3)“陳泡菜水”中含有大量的乳酸菌菌種，制作泡菜時加入“陳泡菜水”可以實現(xiàn)接種乳酸菌菌種的目的。(4)制作泡菜的過程中，由于乳酸菌呼吸作用的消耗有機(jī)物的干重將減少，但壇內(nèi)有機(jī)物的種類將增加。(5)乳酸菌是厭氧細(xì)菌，醋酸菌是好氧型細(xì)菌。(6)青霉素可以殺死乳酸菌，故制作泡菜時加入了青霉素，會造成發(fā)酵失敗。(7)若要獲得大量乳酸菌菌種，應(yīng)選用培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。 答案：(1)消毒?、偃樗峋菂捬跎铮芊夂笤斐扇毖醐h(huán)境?、诜乐闺s菌進(jìn)入 (2)大量的食鹽抑制了乳酸菌發(fā)酵(大量的食鹽殺死了乳酸菌) (3)提供乳酸菌菌種(接種) (4)減少　增加 (5)乳酸菌是厭氧細(xì)菌，醋酸菌是好氧型細(xì)菌 (6)青霉素殺死了乳酸菌 (7)碳源　氮源　水　無機(jī)鹽 4．(xx開封一模)(10分)葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生果酒、果醋，請利用相關(guān)的知識回答以下問題： (1)如圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化，④過程需要__________________________適宜條件。 (2)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)果酒，如圖所示。發(fā)酵過程中，每隔一段時間均需排氣一次。據(jù)圖分析，操作錯誤的是__________，發(fā)酵結(jié)束后，檢驗發(fā)酵過程中產(chǎn)物的方法是______________________________________________________。 甲　 　乙 　　丙 注：各發(fā)酵瓶的左側(cè)管為充氣管右側(cè)管為排氣管 (3)如圖是采用純化酵母菌培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖。 判斷圖A所用接種方法的依據(jù)是__________________________，圖B效果的接種方法是__________。 (4)自己在家中制作的果醋很容易腐敗，而包裝瓶上寫著105 ℃高溫瞬時滅菌的果醋瓶上寫著“不含任何防腐劑，最長保質(zhì)期為一年”，其中的奧秘是__________。 (5)在圖中用曲線表示正常果酒發(fā)酵階段酵母菌種群個體數(shù)量的變化情況。 解析：(1)④過程為制作果醋的階段，用到的醋酸菌為好氧型細(xì)菌，生長的最適溫度為30～35 ℃。(2)酵母菌無氧呼吸可以產(chǎn)生酒精和CO2，是葡萄酒制作過程中發(fā)揮主要作用的微生物。酵母菌只有在無氧條件下，才能進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精；甲裝置的充氣口始終開放，不能創(chuàng)造瓶內(nèi)無氧環(huán)境，不能用來生產(chǎn)果酒；在有氧條件下，醋酸菌可以利用葡萄糖產(chǎn)生醋酸。酵母菌在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2導(dǎo)致裝置中氣壓升高，要定期打開排氣管進(jìn)行放氣，丙裝置瓶中發(fā)酵液過多，淹沒了排氣管在瓶內(nèi)的管口，不利于放氣，同時導(dǎo)致瓶內(nèi)氧氣過少，不利于發(fā)酵前期酵母菌的大量繁殖。(3)根據(jù)菌落特點可以直接判斷出接種方法，詳解見答案。(5)在有氧氣的環(huán)境中，酵母菌大量增殖；在無氧環(huán)境中，酵母菌不能增殖。 答案：(1)氧氣、30～35℃ (2)甲、丙　在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色 (3)稀釋涂布平板法形成的菌落分布較均勻　平板劃線法 (4)高溫殺死了微生物 (5)如圖。若密封培養(yǎng)后期曲線有下降趨勢也給分。 5．(10分)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下： →→→→ 請回答： (1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有______________，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現(xiàn)__________色環(huán)帶。 (2)下列對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是__________滅菌。 A．高壓蒸汽　　　B．紫外燈照射 C．70%酒精浸泡 D．過濾 (3)步驟X表示__________________。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液________________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得__________菌落。 (4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在__________中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致__________。 (5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的__________分解為NH3和14CO2。 解析：(1)幽門螺桿菌中的脲酶能催化尿素分解產(chǎn)生氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導(dǎo)致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指標(biāo)劑呈現(xiàn)紅色，因此在菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶。 (2)對尿素溶液進(jìn)行滅菌應(yīng)用G6玻璃漏斗過濾的方法滅菌；如果用高壓蒸汽滅菌會造成尿素的分解；紫外燈照射不適用于對溶液進(jìn)行滅菌；用70%酒精浸泡不能達(dá)到滅菌的目的，會有一部分芽孢存活。 (3)在培養(yǎng)基上接種微生物，用稀釋涂布平板法能將聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而使其可在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。 (4)對微生物進(jìn)行培養(yǎng)反應(yīng)在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，將培養(yǎng)皿倒置既可防止因冷凝水過多造成的單菌落連片(不能獲得單菌落)，也可避免雜菌孢子落到培養(yǎng)基上。 (5)幽門螺桿菌中的脲酶能將尿素分解形成NH3和CO2,14C標(biāo)記的尿素被分解后產(chǎn)生的14CO2可被檢測到。 答案：(1)脲酶　紅　(2)D　(3)接種　涂布　單 (4)恒溫培養(yǎng)箱　無法形成單菌落　(5)尿素 6．(xx鄭州三模)(10分)請回答下列有關(guān)微生物的一些問題。 (1)微生物的分布：微生物主要分布在富含__________的土壤表層；不同微生物對pH的要求不同，細(xì)菌常生活在酸堿度__________的潮濕土壤中。 (2)微生物的消毒和滅菌：在菊花組織培養(yǎng)中，對外植體常用酒精和__________進(jìn)行消毒。在微生物培養(yǎng)中，對培養(yǎng)基常用__________方法進(jìn)行滅菌。靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能 __________。如果要檢測滅菌是否徹底，可以采用的方法是：_______________________________。 (3)微生物的應(yīng)用：在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，運用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精，請寫出該過程的化學(xué)反應(yīng)式：______________________________。在果醋制作時，運用醋酸菌在__________和糖源充足時，將糖分解成醋酸。 (4)微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是__________和__________。 (5)微生物的計數(shù)：根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計算得出細(xì)菌數(shù)目往往比實際的數(shù)目低，原因是________________________。 (6)微生物的鑒定：為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的__________(選擇、鑒別)培養(yǎng)基中加入__________指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變__________色。 解析：(1)微生物主要分布在有機(jī)質(zhì)豐富的土壤表層，細(xì)菌常生活在酸堿度接近中性的潮濕土壤中。(2)植物組織培養(yǎng)時，對外植體常用酒精和氯化汞消毒，對培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)；可通過在適宜的溫度下放置滅菌過的培養(yǎng)基看其是否有菌落產(chǎn)生來確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底。(3)醋酸菌為需氧型生物。(4)最常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(5)因一個菌落可由多個連在一起的細(xì)菌形成，所以計算得出的細(xì)菌數(shù)一般低于實際數(shù)目。(6)用選擇培養(yǎng)基篩選目的菌——尿素分解菌，加入酚紅指示劑，若存在尿素分解菌，指示劑變紅色。 答案：(1)有機(jī)質(zhì)　接近中性 (2)氯化汞　高壓蒸汽滅菌　損傷DNA的結(jié)構(gòu)　將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 (3)C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋能量　有氧 (4)平板劃線法　稀釋涂布平板法 (5)當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 (6)選擇　酚紅　紅 7．(xx安徽二模)(10分)下圖為制備固定化酵母細(xì)胞用于葡萄酒生產(chǎn)的流程圖。 →→→→→→→ (1)本實驗采用的包埋法，而制備固定化酶則不宜用此方法，原因是______________________________。實驗過程中用CaCl2溶液處理的目的是________。 (2)在利用葡萄酒制作葡萄醋時，除控制好溫度等條件外，還要注意控制氣體條件，因為醋酸菌是__________(好氧/厭氧/兼性厭氧)型細(xì)菌。 (3)為篩選出能高效利用淀粉的轉(zhuǎn)基因釀酒酵母菌，將該工程菌接種在__________________________的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，選擇__________的菌落進(jìn)一步純化培養(yǎng)。 解析：(1)酶分子很小，容易從包埋材料中漏出，因此固定化酶的制作一般不使用包埋法。Ca2＋與海藻酸鈉反應(yīng)形成不溶于水的海藻酸鈣凝膠，故制備固定化酵母細(xì)胞時常用CaCl2溶液處理。 (2)醋酸菌是好氧型細(xì)菌，在利用醋酸菌制作葡萄醋時，除控制好溫度等條件外，還要注意控制氣體條件。 (3)利用淀粉作為唯一碳源的固體平板培養(yǎng)基可以篩選出能高效利用淀粉的轉(zhuǎn)基因釀酒酵母菌，篩選時，加入碘液，能分解淀粉的細(xì)菌處會出現(xiàn)透明圈，其他部分則呈藍(lán)色。 答案：(1)酶分子很小，容易從包埋材料中漏出　Ca2＋與海藻酸鈉反應(yīng)形成不溶于水的海藻酸鈣凝膠 (2)好氧 (3)淀粉作為唯一碳源　透明圈大 8．(xx湖南一模)(10分)請回答下列生物技術(shù)方面的問題。 (1)微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和______法，后者則是將菌液進(jìn)行一系列的__________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，然后進(jìn)行__________。菌落是在固體培養(yǎng)基上由__________繁殖而來的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體。 (2)菊花的組織培養(yǎng)的大致過程如圖所示，請回答下列問題： 圖中BC依次表示__________________________過程(填名稱)，添加的關(guān)鍵激素是______________________________。該實驗操作成功的關(guān)鍵是__________，要對外植體、超凈工作臺等消毒，對__________等滅菌。 解析：(1)微生物接種的方法中有平板劃線法和稀釋涂布平板法。后者則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，然后進(jìn)行恒溫培養(yǎng)。菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個細(xì)菌繁殖而來的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體。 (2)植物組織培養(yǎng)中B表示脫分化形成愈傷組織，C表示再分化形成試管幼苗，添加的關(guān)鍵激素是細(xì)胞分裂素、生長素，二者濃度的配比調(diào)節(jié)分化過程。該實驗成功的關(guān)鍵是無菌操作，要對外植體、超凈工作臺等消毒，對培養(yǎng)基(或培養(yǎng)器具)等滅菌。 答案：(1)稀釋涂布平板　梯度稀釋　恒溫培養(yǎng)　單個細(xì)菌 (2)脫分化、再分化　細(xì)胞分裂素、生長素　無菌操作(或無菌技術(shù))　培養(yǎng)基(或培養(yǎng)器具) 9．(xx山東二模)(10分)下圖為利用胡蘿卜韌皮部組織細(xì)胞在一定的條件下培育形成胡蘿卜幼苗的過程示意圖，其中字母代表過程或結(jié)構(gòu)。請據(jù)圖回答： (1)該技術(shù)過程的原理是__________，a、b分別代表__________；采用的胡蘿卜韌皮部細(xì)胞必須處于__________狀態(tài)，培養(yǎng)基中除加入一定的營養(yǎng)成分外，還需要加入__________。 (2)c代表__________，其優(yōu)點是____________________________。 (3)利用該項技術(shù)可以生產(chǎn)脫毒苗，原因是_________________________。 解析：植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，植物組織培養(yǎng)技術(shù)主要包括兩個步驟，分別是脫分化和再分化，所采用的材料必須是處于離體狀態(tài)，而且需要提供一定的營養(yǎng)和植物激素。人工種子的優(yōu)點是可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)脫毒苗的原因是植物的莖尖和根尖屬于剛剛產(chǎn)生的組織，沒有被病毒侵染，可以利用這部分組織培育無病毒植株。 答案： (1)植物細(xì)胞具有全能性　脫分化和再分化　離體　植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素) (2)人工種子　可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制 (3)植物的莖尖、根尖還沒有來得及被病毒侵染，利用植物的莖尖和根尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以培育無病毒植株 10．(xx河北二模)(10分)在遺傳病及刑偵破案中常需要對樣品DNA進(jìn)行分析，PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段，在幾個小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝，有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進(jìn)行分析研究的問題。據(jù)圖回答相關(guān)問題： (1)在相應(yīng)的橫線上寫出引物Ⅱ，并在復(fù)制這一步驟中將引物Ⅱ置于合適的位置。 (2)在相應(yīng)的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA分子。 (3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記，請分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點：__________________________，循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為__________。 (4)PCR反應(yīng)過程的前提條件是__________，PCR技術(shù)利用DNA的__________原理解決了這個問題。 (5)在對樣品DNA進(jìn)行分析的過程中發(fā)現(xiàn)，DNA摻雜著一些組蛋白，要去除這些組蛋白可加入的物質(zhì)是__________。 解析：(1)DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈，所以引物就提供了3′端，子鏈延伸方向為5′→3′，引物Ⅰ與b鏈部分堿基互補，引物Ⅱ則與a鏈部分堿基互補，且連接到a鏈的3′端，故引物Ⅱ的結(jié)構(gòu)為5′—G—A—OH。(2)經(jīng)過一次循環(huán)后，產(chǎn)生的兩個DNA分子分別含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。(3)由于作為原料的四種脫氧核苷酸被32P標(biāo)記，所以新合成的子鏈均含有放射性，一次循環(huán)后的兩個DNA各有一條鏈含32P，若復(fù)制n次，共產(chǎn)生子鏈2n2；其中只有DNA母鏈不含32P，則其所占比例為2/(2n2)＝1/2n。(4)DNA復(fù)制是以兩條母鏈為模板，按照堿基互補配對原則進(jìn)行的。因此，首先要解旋，使兩條母鏈堿基暴露出來，才能按照堿基互補配對的原則把相應(yīng)的核苷酸一個個地連接起來。DNA分子在80 ℃～100 ℃的溫度范圍內(nèi)變性，雙鏈解開成單鏈，當(dāng)溫度慢慢降低時，又能重新結(jié)合形成雙鏈。(5)本題考查了DNA中雜質(zhì)蛋白質(zhì)的去除，利用酶的專一性，應(yīng)加入蛋白酶。 答案：(1)5′—G—A—OH 　　　　HO—A—G—5′ 5′—G—G……T—C—3′ (2)3′—C—C……A—G—5′　5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′ (3)每個DNA分子各有一條鏈含32P　1/2n (4)DNA解旋　熱變性 (5)蛋白酶