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2019 年高考生物試題匯編（10 月 下）L 單元 生物工程及技術（含解析） 目錄 L 單元 生物工程及技術 ........................................................1 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與發(fā)酵工程的應用 ..............................................1 L2 微生物的類型、營養(yǎng)和代謝 ..................................................1 L3 微生物的培養(yǎng)與應用 ........................................................1 L4 酶的應用 ..................................................................2 L5 DNA 的粗提取及蛋白質提取技術 ..............................................2 L6 植物有效成分的提取 ........................................................2 L7 基因工程與蛋白質工程 ......................................................2 L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 ..........................................2 L9 動物細胞工程與單克隆抗體 ..................................................2 L10 胚胎工程 .................................................................3 L11 生物技術的安全性和倫理問題 ................................................3 L12 生態(tài)工程 ..................................................................3 L13 生物工程及技術綜合 ........................................................3 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與發(fā)酵工程的應用 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】19．亞硝 酸鹽在酸性條件下與對氨基苯磺酸重氮化后,再與 α-萘胺反應生成的溶液呈( ) A．紫紅色 Ｂ．藍色 Ｃ．磚紅色 Ｄ．橘紅色 【答案】【知識點】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與發(fā)酵工程的應用 【答案解析】A 解析：在酸性條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化反應后，再與 N-1-萘 基乙二胺鹽酸鹽結合生成紫紅色復合物，A 正確。 【典型總結】本題是考查泡菜中亞硝酸鹽含量測定的原理，亞硝酸鹽含量測定的原理是在酸 性條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化反應后，再與 N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合生成紫 紅色復合物，根據顏色的深淺與標準比色卡比色估算出亞硝酸鹽的含量。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10）】18．腐乳 味道鮮美，易于消化、吸收，是因為其內主要含有的營養(yǎng)成分是（ ） A．無機鹽、水、維生素 B．NaCl、水、蛋白質 C．多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸 D．蛋白質、脂肪、NaCl、水 【答案】【知識點】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與發(fā)酵工程的應用 【答案解析】C 解析：豆腐的主要營養(yǎng)成分是蛋白質和脂肪，都是大分子有機化合物，難以 消化、吸收，毛霉、酵母菌等多種微生物分泌的蛋白酶，能將蛋白質分解成小分子的肽和氨 基酸，脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多種微生物的協同下，豆腐轉變成腐乳。C 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10）】17．下列 關于果醋的制作，錯誤的是( ) A．果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，所以在制作過程中需通氧氣 B．醋酸菌是一種嗜溫菌，溫度要求較高，一般在 50 ℃左右 C．醋酸菌能將果酒變成果醋 D．當氧氣、糖源充足時，醋酸菌可將葡萄中的糖分解成醋酸 【答案】【知識點】L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與發(fā)酵工程的應用 【答案解析】B 解析：醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，所以在制作過程中需適 時通氧氣，A 正確；醋酸菌是一種嗜溫菌，溫度要求較高，一般在 30-35℃左右，B 錯；醋酸 菌能在氧氣充足，糖源不足的條件下將果酒變成果醋，C 正確；當氧氣、糖源充足時，醋酸 菌可將葡萄中的糖分解成醋酸，D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】2.制果醋 時，要適時通過充氣口進行充氣是因為（ ） A.醋酸菌是好氧菌，將酒精變成醋酸時需要氧氣的參與 B.酵母菌進行酒精發(fā)酵時需要氧氣 C.通氣可防止發(fā)酵液霉變 D.防止發(fā)酵時產生的二氧化碳氣體過多而引起發(fā)酵瓶的爆裂 【答案】【知識點】C4 細胞呼吸 L1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術與發(fā)酵工程的應用 【答案解析】A 解析：醋酸菌屬于好氧菌，將酒精變成醋酸時需要 O2的參與，所以要適時通 過充氣口進行充氣，故 A 正確；酵母菌酒精發(fā)酵是利用的酵母菌無氧呼吸，故 B 錯誤；充氣 是為了保證醋酸菌有充足的氧氣進行有氧發(fā)酵，故 C 錯誤；酒精發(fā)酵過程中由于產生二氧化 碳要設置出氣口，而醋酸發(fā)酵過程中不產生氣體，故 D 錯誤。 L2 微生物的類型、營養(yǎng)和代謝 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】14.甲、乙、 丙是三種微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中 正常生長繁殖；甲能在 I 中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、 丙都不能。下列說法正確的是 A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物 B．甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物 C．甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物 D．甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物 【答案】【知識點】L2 微生物的類型、營養(yǎng)和代謝 【答案解析】D 解析：從表中所列的三種培養(yǎng)基成分著手，培養(yǎng)基 I 中缺少氮源，培養(yǎng)基Ⅱ 中缺少有機碳，培養(yǎng)基Ⅲ中營養(yǎng)成分最全．由題意中所給的情況分析，只有甲能在培養(yǎng)基 I 中生長，而乙、丙不能說明甲能自行固氮；乙能在Ⅱ中生長，說明乙可自行合成有機碳，是 一種自養(yǎng)微生物；而丙只能在Ⅲ中生長，說明它既不能固氮也不能自行合成有機物。由此可 知甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物，D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】4．微生物 培養(yǎng)過程中，肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據是（ ） A．細菌的大小、形狀、顏色 B．菌落的大小、形狀、顏色 C．有無鞭毛 D．培養(yǎng)基的不同 【答案】【知識點】L2 微生物的類型、營養(yǎng)和代謝 【答案解析】B 解析：肉眼觀察不到細菌的大小、形狀、顏色，A 錯；鑒別金黃色葡萄球菌 和枯草桿菌的重要依據是菌落形態(tài)，如菌落的大小、形態(tài)、顏色，B 正確；肉眼無法觀察到 細菌的鞭毛，C 錯；培養(yǎng)基不同不是鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據，D 錯。 【思路點撥】鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據是菌落形態(tài)，金黃色葡萄球菌為圓 形光滑較小菌落，直徑一般只有 1mm 左右，白色或金黃色．而枯草桿菌的菌落表面為不規(guī)則 隆起，菌落較大，直徑有 5mm 左右，表面粗糙，白色或略帶一些暗黃色。 L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【生物卷（解析）xx 屆江西省師大附中高三 10 月月考（xx10） 】29 下面是弗來明對青霉 素的早期研究過程。發(fā)現問題：在培養(yǎng)細菌的器具中發(fā)現一種青霉菌，在這種青霉菌的周圍 有沒有其它細菌生存。為什么會產生這種現象？提出假設： 。設計實驗：用 培養(yǎng)液培養(yǎng)青霉菌后，考察這種液體對細菌增殖的影響。實驗結果：培養(yǎng)液使細菌的增殖停 止。結論：下面幾項最適合作為該實驗假設的是（ ） A．青霉菌與細菌之間是共生關系 B．青霉菌污染了細菌生存的環(huán)境 C．青霉菌產生了對人體有益的物質 D．青霉菌能產生抑制細菌增殖的物質 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】D 解析：弗萊明在培養(yǎng)細菌的器具中發(fā)現一種青霉菌，在這種青霉菌的周圍沒 有其他細菌生存，因此，他提出的問題應該是：青霉菌產生的處為什么沒有細菌？作出假設 是對提出問題的回答，弗萊明針對青霉菌處沒有細菌的事實作出的假設應該是：青霉菌能產 生抑制細菌增殖的物質。D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆江蘇省鹽城中學高三 10 月月考（xx10） 】18. 下列有關微生物培養(yǎng) 的說法，正確的是 A．制備固體培養(yǎng)基的操作順序為計算、稱量、溶化、消毒、倒平板 B．分離能分解纖維素的細菌，要以纖維素作為培養(yǎng)基中唯一碳源 C．配置培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基時都要將 pH 調至中性或微堿性 D．在無氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可用來鑒定尿素分解菌 【答案】 【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】B 解析：制備固體培養(yǎng)基的操作順序應為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板； 配置培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基時 PH 應有所不同；在以尿素為唯一尿源的培養(yǎng)基中加入酚紅 指示劑可用來鑒定尿素分解菌。 【思路點撥】根據微生物培養(yǎng)分離的實驗進行分析。 【生物卷（解析）xx 屆甘肅省蘭州一中高三 9 月月考（xx09） 】39、 [生物——選修 1： 生物技術實驗] （每空 2 分，共 16 分） 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}: （1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由 3 種組分組成的復合酶，其中 的葡萄糖苷酶可將 分解成 。 （2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時，CR 可與纖維素形成 色復合物。 用含有 CR 的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現以該菌的菌落為中心的 。 （3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種 培養(yǎng)基： （注：“+”表示有， “－”表示無） 據表判斷，培養(yǎng)基甲 （填“能”或“不能” ）用于分離和鑒別纖維素分解菌， 原因是 ；培養(yǎng)基乙 （填“能”或“不能” ）用于分 離和鑒別纖維素分解菌，原因是 。 【答案】 【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】 （1）纖維二糖 葡萄糖（2）紅色 透明圈 （3）不能 液體培養(yǎng)基不能分離 單菌落 不能 乙培養(yǎng)基中沒有纖維素，不能形成 CR 纖維素紅色復合物，即使出現單菌落 也不能確定為纖維素分解菌 解析：葡萄糖苷酶的作用是將纖維二糖分解成葡萄糖；CR 可與纖維素形成紅色復合物，纖 維素被纖維素分解菌分解后不會與 CR 形成紅色復合物，因而該菌落分布的位置為透明的； 培養(yǎng)基甲中沒有加瓊脂，可知為液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基不能分離單菌落，不能用于分離和 鑒別纖維素分解菌；培養(yǎng)基乙中沒有纖維素，不能用于分離鑒別纖維素分解菌。 【思路點撥】根據纖維素分解菌的培養(yǎng)與分離進行分析。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】47． （每空 2 分，共 14 分）某同學在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混合在一起，圓褐 固氮菌屬于固氮細菌。請你完成分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌的實驗步驟，并回 答有關問題： ⑴主要步驟： ①制備兩種培養(yǎng)基：一種是___________培養(yǎng)基，另一種___________的培養(yǎng)基。分別分成兩 份，依次標上 A，A ／ 的 B，B ／ ，備用。 ②分別向 A、B 培養(yǎng)基中接種___________。 ③接種后，放在恒溫箱中培養(yǎng) 3～4 天。 ④分別從 A、B 培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌種，接種到 A／ 、B ／ 培養(yǎng)基中。 ⑤接種后，把 A／ 、B ／ 培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng) 3～4 天。 ⑵回答問題： 在步驟①中，為保證無雜菌污染，實驗中應采用的主要措施有 、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 第④⑤兩個步驟的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】（1）無氮 加青霉素 混合菌 （2）培養(yǎng)基高壓蒸氣滅菌 接種環(huán)在酒精燈火焰上滅菌 接種過程在酒精燈火焰附近 進行 獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌 解析：（1）將微生物進行分離一般采用選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化 學物質，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長。圓褐固氮菌是自生固 氮菌，能在無氮培養(yǎng)基上生長繁殖，而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁 殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖。根據這一原理可將兩種微生物分離開來。 （2）在微生物培養(yǎng)過程中的滅菌措施有：培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿的高壓蒸氣滅菌、金屬用具的灼 燒滅菌、接種過程在酒精燈火焰附近進行等。為獲得純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌，可以 用選擇培養(yǎng)基重復進行選擇培養(yǎng)。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】16．通過 選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微牛物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分 微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入 10％酚可 以抑制細菌和霉菌。利用下述方法不能從混雜的微生物群體中分別分離出（ ） A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細菌 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】A 解析：大腸桿菌需要氮源、青霉素抑制大腸桿菌生長、酚也抑制細菌的生長； 霉菌是真菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素后，青霉素可以抑制細菌和放線菌，但是不抑制真菌， 所以加入青霉素的培養(yǎng)基可以選擇出霉菌；培養(yǎng)基中加入 10%酚可以抑制細菌和霉菌，所以 可以篩選放線菌；固氮菌的氮源氮氣，在培養(yǎng)基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培養(yǎng)基上大 部分微生物無法生長，但是固氮細菌可以生長。A 符合題意。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】15．農田 土壤的表層，自生固氮菌的含量比較多，將用表層土制成的稀泥漿，接種到特制的培養(yǎng)基上 培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其它細菌分開，對培養(yǎng)的要求是（ ） ①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒溫箱培養(yǎng) ⑧28 ℃--30℃溫度下培養(yǎng) A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦ 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：自生固氮菌是異養(yǎng)菌，生長繁殖需要有機碳源；自生固氮菌能利用空 氣中的氮氣，培養(yǎng)基中不加氮源，固氮菌能生長繁殖，不能固氮的菌不能生長繁殖，；自生 固氮菌的生長繁殖的最適宜溫度是 28～30℃；自生固氮菌對青霉素敏感，培養(yǎng)基中不能加青 霉素．所以如果從土壤浸出液中分離出自生固氮菌對培養(yǎng)基的要求是②不加抗生素、④不加 氮素、⑤加葡萄糖、⑧28～30℃恒溫箱中培養(yǎng)。C 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】13．能排 除培養(yǎng)基是否有雜菌污染的方法是（ ） A.將未接種的培養(yǎng)基放在實驗桌上培養(yǎng) B.將未接種的培養(yǎng)基放在窗臺上培養(yǎng) C.將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng) D.將已接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng) 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：實驗桌旁本身就有許多微生物，沒法判斷培養(yǎng)基上的菌落是來自培養(yǎng) 基本身還是來自培養(yǎng)環(huán)境，A 錯；窗臺上周圍含有微生物，無法判斷培養(yǎng)基上的菌落是來自 培養(yǎng)基本身還是來自培養(yǎng)環(huán)境，B 錯；將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)，一段時間后若 有菌落說明培養(yǎng)基被污染，若無菌落說明培養(yǎng)基沒有被污染，C 正確；培養(yǎng)基已經接種微生 物，無法判斷培養(yǎng)基上的菌落是來自培養(yǎng)基本身還是來接種的微生物，D 錯。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】11．下列 敘述錯誤的是（ ） Ａ．培養(yǎng)乳酸菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素 Ｂ．培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的 PH 調至堿性 Ｃ．培養(yǎng)細菌時需將 PH 調至中性或微堿性 Ｄ．培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】B 解析：維生素是乳酸菌生長繁殖所必須的，在體內又不能合成，因此要在培 養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中添加維生素，A 正確；霉菌生長所需要的 PH 是酸性，培養(yǎng)霉菌時應將 PH 調至酸性，在堿性情況下不易繁殖，甚至會導致霉菌死亡，培養(yǎng)霉菌時應將 PH 調至酸性， C 錯；細菌生長繁殖所需要的 PH 是中性或微堿性，所以培養(yǎng)細菌時需將 PH 調至中性或微堿 性，C 正確；厭氧微生物在有氧時無氧呼吸受抑制，因此培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧 的條件，D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】10.涂布平 板操作需要用到（ ） A.接種環(huán)、滴管、酒精燈 B.接種環(huán)、移液管、酒精燈 C.涂布器、移液管、酒精燈 D.涂布器、接種環(huán)、酒精燈 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：涂布平板時，需要移液管將菌液進行一系列梯度的稀釋；需要用酒精 燈對涂布器進行灼燒滅菌；進行涂布時，需要用涂布器將菌液涂布均勻，該操作要在酒精燈 的火焰旁進行。C 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】9．有關倒 平板的操作錯誤的是（ ） Ａ．將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上 B．使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰 C．將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上 D．等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：將過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，防止培養(yǎng)皿被污染，A 正確； 使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰，對錐形瓶的口徑處進行灼燒滅菌，防止空氣中的雜菌污 染，B 正確；倒平板時不能把培養(yǎng)皿蓋完全打開并放到桌面上，這樣會污染培養(yǎng)皿中的培養(yǎng) 基，C 錯；倒平板后冷卻需要倒過來放置，防止皿蓋上的水珠滴落到培養(yǎng)基上，D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】8.關于制 備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯誤的是 【生物卷(解析)xx 屆江蘇省揚州中學高三 10 月質量檢測（xx10） 】32、 （ 9 分）固定化酶 技術運用工業(yè)化生產前，需要獲得酶的有關參數。如右圖：曲線①表示某種酶在各種溫度下 酶活性相對最高酶活性的百分比；曲線②是將該種酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在 酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到酶的熱穩(wěn)定性數據。請回答下列問題： （1）與普通酶制劑相比，固定化酶在生產中的優(yōu)點是 。 （2）曲線②中，35℃和 80℃的數據點是在 ℃時測得的。通過本實驗，你對酶的最 適溫度的認識是 。該種酶固定化后運用于生產，最佳溫度范圍是 。 （3）研究發(fā)現有甲、乙兩種物質能降低該種酶的催化效率，該酶催化的底物濃度變化會改 變甲物質對酶的影響，而不會改變乙物質對酶的影響。下圖是降低酶活性的兩種機制模型， 符合甲、乙物質對酶影響的模型分別是 、 。 （4）在酶的活性不受抑制時，起始反應速率與底物濃度的關系如下圖所示。請在答題卡的 指定位置畫出加入甲物質時，起始反應速率與底物濃度之間的關系曲線。 【答案】 【知識點】L4 酶的應用 【答案解析】 （1）可反復使用 （2）80 既能使酶具有高的催化活性，又能維持較長時間 60～70℃ （3）A B （4）曲線如下圖 （1）與普通酶制劑相比，固定化酶的優(yōu)點是：可以反復使用。 （2）由于曲線②是將該種酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測 其殘余酶活性，而酶的最適溫度為 80℃，因此曲線中數據均為 80℃下的數據；結合曲線② 可知，酶的最適溫度可以認為是既能使酶具有高的催化活性，又能維持較長時間的溫度；該 酶的最適溫度范圍是 60～70℃。 （3）觀察兩個模型可知，圖 A 中抑制劑和底物都可以和酶結合，因此底物濃度的變化，可 以影響酶的催化效率；圖 B 中抑制劑與酶結合后，酶的結構發(fā)生改變，不能和底物結合，因 此底物濃度升高，也不能影響酶的催化效率。故甲乙分別對應圖 A 和圖 B 中模型。 （4）根據甲模型，加入抑制劑甲后，起始反應速率變小，但是隨著底物濃度的增加，起始 反應速率加快，但不能超過不加抑制劑時的起始反應速率。 A. 操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B. 將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯 C. 待培養(yǎng)基冷卻至 50℃左右時進行倒平板 D. 待平板冷卻凝固約 5∽10min 后將平板倒過來放置 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】A 解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒 平板，A 錯；將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，B 正確；待 培養(yǎng)基冷卻至 50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，C 正確；待平板冷卻凝固約 5～10min 后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿低在上，D 正確。 【思路點撥】用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基進行大腸桿菌的純化培養(yǎng)，可分為制備培養(yǎng)基和純 化大腸桿菌兩個階段進行，其中制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、 滅菌、倒平板．微生物接種的核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10）】7.細菌培 養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精消毒、火焰灼燒滅菌的幾種不同的處理，這些方法 可依次用于殺死哪些部位的雜菌（ ） A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種環(huán) C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、培養(yǎng)基、手 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：高壓蒸汽氣滅菌通常用于培養(yǎng)基的滅菌；用酒精擦拭雙手是消毒的一 種方法；火焰灼燒可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種環(huán)等金 屬用具。C 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】6．細菌培 養(yǎng)基通常在 121℃壓力鍋中滅菌。如果只有在 100℃的溫度下將細菌培養(yǎng)基滅菌，以下哪一 種生物仍會存活？（ ） A．大腸桿菌 B．一種青霉菌 C．枯草芽孢桿菌 D．鼠傷寒沙門氏菌 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：芽孢桿菌能形成芽孢（內生孢子），對外界有害因子的抵抗力強，大 腸桿菌、青霉菌、鼠傷寒沙門氏菌不能形成芽孢，在 100℃的溫度下可以滅活；枯草芽孢桿 菌能形成芽孢，抵抗高溫的能力強，在 100℃的溫度下仍可能存活。C 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】5．下列有 關平板劃線接種法的操作錯誤的是 （ ） A．將接種環(huán)放在火焰上灼燒 B．將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液 C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行 D．劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】D 解析：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他的金屬用具，直接在 酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，A 正確；接種環(huán)必須冷卻后，才可以 伸入菌液中蘸取一環(huán)液，否則會燒傷或燒死微生物，B 正確；蘸取菌液和劃線要在火焰旁進 行，防止空氣中的雜菌，C 正確；劃線時要避免最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)線連． 因為最后一 區(qū)是細菌最稀少的，而第一區(qū)是細菌最致密的，如果連在一起則有可能影響單個菌落的分離 效果，D 錯。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】3. 發(fā)酵工 程的第一個重要工作是選種優(yōu)良的單一純種。消滅雜菌，獲得純種的方法不包括（ ） A．根據微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基 B．根據微生物缺乏生長因子的種類，在培養(yǎng)基中增減不同的生長因子 C．根據微生物遺傳組成的差異，在培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸 D．根據微生物對抗菌素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗菌素 【答案】【知識點】L3 微生物的培養(yǎng)與應用 【答案解析】C 解析：根據微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基可以選擇微 生物種類，能獲得純種，所以 A 正確；在培養(yǎng)基中增減不同的生長因子作用也是選擇微生物， 所以 B 正確；抗生素也可對生物起選擇作用，抗生素殺菌，但對真核生物無效果，所以 D 正 確；根據微生物遺傳組成的差異，在培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸，核酸就是 DNA 和 RNA， 它不會直接影響到微生物自身的遺傳組成，即使被微生物利用，也是被分解為核苷酸后利用， 所以培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸（DNA、RNA） ，不會對微生物起選擇作用， C 錯誤。 L4 酶的應用 【生物卷（解析）xx 屆江蘇省鹽城中學高三 10 月月考（xx10） 】19. 在 DNA 的粗提取和鑒 定實驗中，以下操作步驟錯誤的是 A．將雞血細胞置于蒸餾水中并用玻棒快速攪拌釋放出 DNA 等核物質 B．在 DNA 析出和再溶解過程中要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動 C．在用酒精析出 DNA 時，要使用冷酒精，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻 D．鑒定 DNA 時，需要將甲基綠試劑加入到含 DNA 溶液中并進行水浴加熱 【答案】 【知識點】L5 DNA 的粗提取及蛋白質提取技術 【答案解析】D L5 DNA 的粗提取及蛋白質提取技術 L6 植物有效成分的提取 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】4 6.（ 每 空 1 分 ， 共 1０ 分 ） 降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等。人的降鈣素活 性很低，半衰期較短。某科學機構為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預期新 型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條 72 個堿基的 DNA 單 鏈，兩條鏈通過 18 個堿基對形成部分雙鏈 DNA 片段，再利用 Klenow 酶補平，獲得雙鏈 DNA，過程如下圖。在此過程中發(fā)現，合成較長的核苷酸單鏈易產生缺失堿基的現象。分析 回答下列問題： （1）Klenow 酶是一種________酶，合成的雙鏈 DNA 有________個堿基對。 （2）獲得的雙鏈 DNA 經 EcoRⅠ（識別序列和切割位點-G ↓ AATTC-）和 BamHⅠ（識別序列和 切割位點-G ↓ GATCC-）雙酶切后插入到大腸桿菌質粒中，篩選含重組質粒的大腸桿菌并進行 DNA 測序驗證。 ①大腸桿菌是理想的受體細胞，這是因為它 ___________,___________,_________________________。 ②設計 EcoRⅠ和 BamHⅠ雙酶切的目的是___________________________。 ③要進行重組質粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質粒中含有_______________。 （3）經 DNA 測序表明，最初獲得的多個重組質粒，均未發(fā)現完全正確的基因序列，最可能 的原因是__________________________________________________________。 （4）上述制備該新型降鈣素，運用的現代生物工程技術是____________________。 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 【答案解析】(1)DNA 聚合酶 126 (2)①繁殖快、單細胞、遺傳物質相對較少 ②保證目的基因和載體定向連接(或防止目的基因和載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接) ③標記基因 (3)合成的核苷酸單鏈仍較長，產生缺失堿基的現象 (4)蛋白質工程 解析：本題從預期蛋白質功能出發(fā)，通過改造基因，合成所需蛋白質，所以應用的現代生物 工程技術為蛋白質工程。 (1)由題干可知，由單鏈 DNA 合成雙鏈 DNA 需要酶，相當于 DNA 復制，所以 Klenow 酶是一種 DNA 聚合酶，合成雙鏈 DNA 堿基對數為(72－18)＋72＝126。 (2)選用原核生物作為受體細胞是因為其為單細胞，繁殖快，遺傳物質相對較少。用兩種酶 切割目的基因是為了防止目的基因和載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接。 (3)最初重組質粒未發(fā)現完全正確的基因序列，可能是合成較長的核苷酸單鏈易產生缺失堿 基的現象。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】38．在用 基因工程技術構建抗除草劑的轉基因煙草過程中，下列操作錯誤的是（ ） A．用限制性核酸內切酶切割煙草花葉病毒的核酸 B．用 DNA 連接酶連接經切割的抗除草劑基因和載體 C．將重組 DNA 分子導入煙草原生質體 D．用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉基因煙草細胞 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 【答案解析】A 解析：限制性核酸內切酶只能切割特定的脫氧核苷酸序列，而煙草花葉病毒 的核酸是核糖核苷酸，A 錯；構建基因表達載體時，需要用限制酶切割得到抗除草劑基因和 切開載體，再用 DNA 連接酶將兩者連接形成重組 DNA，B 正確；基因表達載體構建好之后， 需要將重組 DNA 分子導入受體細胞（煙草原生質體），C 正確；基因工程的最后一步是目的 基因的檢測和鑒定，可以用含有除草劑的培養(yǎng)基篩選轉基因煙草細胞，D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】37．下列 敘述符合基因工程概念的是（ ） A．B 淋巴細胞與腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有 B 淋巴細胞中的抗體基因 B．將人的干擾素基因重組到質粒后導入大腸桿菌，獲得能產生人干擾素的菌株 C．用紫外線照射青霉菌，使其 DNA 發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產菌株 D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其 DNA 整合到細菌 DNA 上 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 【答案解析】B 解析：B 淋巴細胞與腫瘤細胞融合，這屬于細胞工程的范疇，A 錯；將人的干 擾素基因重組到質粒后導入大腸桿菌，符合基因工程概念，B 正確；用紫外線照射青霉菌， 使其 DNA 發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產菌株，屬于誘變育種，不符合基因工程概念， C 錯；基因工程是按照人們的意愿，對生物進行的定向改造，而自然界中天然存在的噬菌體 自行感染細菌后其 DNA 整合到細菌 DNA 上不符合基因工程的概念，D 錯。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】21. 有關 基因工程的敘述正確的是 （ ） A.限制性內切酶只在獲得目的基因時才用 B.重組質粒的形成在細胞內完成 C.質粒都可作運載體 D.蛋白質的結構可為合成目的基因提供資料 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 【答案解析】D 解析：基因工程又叫 DNA 重組技術，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計， 并通過體外 DNA 重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需 要的新的生物類型和生物產品。限制性內切酶在獲得目的基因和基因表達載體的構建時都要 用到；重組質粒的形成在細胞外完成的；質粒有的可作運載體，天然的質粒不能直接作為載 體，基因工程中用到的質粒都是在天然質粒的基礎上進行過人工改造的。所以 A、B、C 不正 確。蛋白質的結構可為合成目的基因提供資料，通過逆轉錄人式合成目的基因，故 D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】20．人們 常選用的細菌質粒分子往往帶有一個抗菌素抗性基因，該抗性基因的主要作用是( ) A.提高受體細胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B.有利于對目的基因是否導入進行檢測 C.增加質粒分子的分子量 D.便于與外源基因連接 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 【答案解析】B 解析：抗性基因的作用是帥選重組子，A 錯；抗性基因是標記基因，有利于 對目的基因是否導入進行檢測，B 正確；細菌質粒分子往往帶有一個抗菌素抗性基因，其作 用不是增加質粒分子的分子量，C 錯；質粒上含有限制酶切割位點時，便于與外源基因連接， D 錯。 L7 基因工程與蛋白質工程 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】49.（每空 1 分,共 11 分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。 用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原 生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。 流程如下圖。 據圖回答下列問題： （1）過程①所需的酶是 。 （2）過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的 存在，這一特征可作 為初步篩選雜種細胞的標志。 （3）原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是 。原生質體經過 再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。 （4）若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和 植株的根尖， 通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色 體的形態(tài)和數目。 （5）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組 DNA 進行 PCR 擴增，得到兩親本的差異性條帶， 可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株 1—4 進行 PCR 擴增的結果。據 圖判斷，再生植株 1—4 中一定是雜種植株的有 ， ， 。 （6）對雜種植株進行 接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】（1）纖維素酶和果膠酶 （2）葉綠體 （3）保持原生質體完整性 （4）雙親（或花椰菜和黑芥） 解離 漂洗 （5）1、2、4 （6）黑腐病菌 解析：（1）①表示去除植物細胞壁獲得原生質體的過程，需要用纖維素酶和果膠酶處理細 胞。 （2）由于要培養(yǎng)的是抗黑腐病的花椰菜，所以需要供體含有黑腐病抗性基因，供體是由光 照培養(yǎng)的黑芥苗提供的，所以供體一定含有葉綠體。 （3）原生質體培養(yǎng)液中加入甘露醇可以保持一定的滲透壓，防止原生質體吸水漲破，這樣 可以保持原生質體的完整性。 （4）要分析再生植株染色體變異類型，需要觀察再生植株與雙親的染色體差異，觀察染色 體需要經過解離、漂洗、染色和制片幾個過程。 （5）再生植株 1、2、4 同時含有花椰菜和黑芥的基因組，所以一定是雜種植株，而植株 3 只含黑芥的基因組，所以其一定不是雜種植株。 （6）黑腐病菌的抗性基因進入到雜種植物體內，雜種植株能抗黑腐病，所以對雜種植株進 行黑腐病菌接種實驗，是篩選雜種植株的方法。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】44.為獲得 純和高蔓抗病番茄植株，采用了下圖所示的方法：圖中兩對相對性狀獨立遺傳。據圖分析， 不正確的是( ) A、過程①的自交代數越多，純合高蔓抗病植株的比例越高 B、過程②可以任取一植株的適宜花藥作培養(yǎng)材料 C、過程③包括脫分化和再分化兩個過程 D、圖中篩選過程不改變抗病基因頻率 【答案】【知識點】G4 雜交育種與誘變育種 L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】D 解析：①表示連續(xù)自交過程，這樣可以提高高蔓抗病植株的純合度，A 正確； 由于 F1植株的基因型都相同，所以過程②可以任取一植株的適宜花藥作培養(yǎng)材料，B 正確； ③是植物組織培養(yǎng)獲得轉基因植株的過程，包括脫分化和再分化過程兩個階段，C 正確；篩 選純合高蔓抗病植株的過程實質就是定向改變基因頻率的過程，即使抗病基因頻率升高，D 錯。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】41.在細胞 工程中，需要利用細胞的全能性，下列細胞中全能性最高的是（ ） A.胡蘿卜的韌皮部 B.水稻的花粉 C.綿羊的乳腺 D.大白鼠的受精卵 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】D 解析：細胞的全能性最高的是受精卵細胞，其次是生殖細胞，最差的是體細 胞．胡蘿卜韌皮部細胞屬于體細胞，水稻的花粉細胞屬于生殖細胞，大白鼠的受精卵全能性 高于生殖細胞和胡蘿卜韌皮部細胞．綿羊的乳腺細胞全能性受到限制。D 正確。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】40.下列屬 于植物細胞工程實際應用的是：（ ） ①制造人工種子 ②培育抗鹽植物 ③制作“生物導彈” ④培育單倍體 ⑤生產脫毒植株 A.①②③④ B.①③④⑤ C.①②④⑤ D.②③④⑤ 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】C 解析：通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，通 過人工薄膜包裝得到的種子，故①正確；利用基因工程獲得含抗鹽基因的重組細胞，經過植 物組織培養(yǎng)獲得抗鹽植物，故②正確； “生物導彈”由單克隆抗體和放射性同位素、化學 藥物或細胞毒素組成，涉及的技術是動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)，故③錯誤；利用花粉離 體培養(yǎng)技術培育單倍體幼苗，故④正確；利用分生區(qū)（如莖尖）細胞進行組織培養(yǎng)，形成脫 毒苗，故⑤正確。 【思路點撥】植物細胞工程技術的應用：（1）植物繁殖的新途徑：微型繁殖、作物脫毒、 制造人工種子；（2）作物新品種的培育：培育單倍體、突變體的利用；（3）細胞產物的工 廠化生產。培育抗鹽植物是基因工程的應用；制作“生物導彈”是動物細胞工程的應用。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】39．在下 列選項中，沒有采用植物組織培養(yǎng)技術的是（ ） A．利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到多倍體植株 B．利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株 C．利用基因工程培育抗寒的番茄植株 D．利用細胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】A 解析：利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到多倍體植株，原理是染色 體變異，A 正確；花藥離體培養(yǎng)得到單倍體，由配子發(fā)育形成個體，體現植物細胞的全能性， B 錯誤；通過基因工程的方法獲取含抗寒基因的重組細胞，經過植物組織培養(yǎng)獲得抗寒的番 茄植株，C 錯誤；植物體細胞雜交形成“番茄-馬鈴薯”雜種細胞，經過植物組織培養(yǎng)形成雜 種植株，故 D 錯。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】30. 以下 四種生物工程技術中培育出的新個體，只有一個親本遺傳性狀的是 ( ) A．植物組織培養(yǎng) B．細胞融合 C．動物胚胎移植 D．細胞核移植 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】A 解析：植物組織培養(yǎng)是高度分化的植物細胞、組織、器官離體培養(yǎng)技術，是 無性生殖，A 正確；細胞融合含有兩細胞的全部遺傳物質，B 錯誤；動物胚胎移植中的胚胎 是由精子和卵細胞結合成發(fā)育而成的，經動物胚胎移植培育出的新個體的遺傳物質來自于兩 個親本，C 錯誤；經細胞核移植形成的重組細胞，細胞核是來自于供體細胞，細胞質來自于 受體細胞，重組細胞中的遺傳物質來自于兩個親本，所以培育培育出的新個體具有兩個親本 的遺傳性狀，D 錯誤。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】28.在植物 組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織的形成和形態(tài)發(fā)生是十分關鍵的一步。而這除需要必備的營養(yǎng)和 一些刺激因素外，還需要有起誘導作用的物質，它是 ( ) A．銅、鋅等微量元素 B．細胞分裂素和生長素 C．蔗糖和葡萄糖 D．維生素和氨基酸 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【答案解析】B 解析：在植物組織培養(yǎng)時，通過調節(jié)生長素和細胞分裂素的比值能影響愈傷 組織分化出根或芽。生長素用量與細胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的 形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的生長。B 正確。 【生物卷（解析）xx 屆陜西省西安一中高三上學期二模考試（xx10） 】25．圖 1 表示含有 目的基因 D 的 DNA 片段長度（bp 即堿基對）和部分堿基序列，圖 2 表示一種質粒的結構和部 分堿基序列。現有 MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4 種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基 序列和酶切位點分別為 C↓ CGG、G ↓ GATCC、 ↓ GATC、CCC ↓ GGG。下列分析中正確的是 A. 若用限制酶 SmaⅠ完全切割圖 1 中 DNA 片段，能產生 2 個黏性末端 B. 若單純?yōu)榱双@取目的基因，也可以選擇限制酶 MspⅠ C. 若需將目的基因 D 導入圖 2 中的質粒，應選擇的限制酶是 BamHⅠ D. 為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基上需添加抗生素 A 和抗生素 B 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 【答案解析】C 解析：限制酶 SmaⅠ的識別序列為 CCC↓ GGG，用限制酶 SmaⅠ完全切割圖 1 中 DNA 片段，能產生 2 個平末端，而不是黏性末端，A 錯；限制酶 MspⅠ的識別序列是 C↓ CGG， 在目的基因上，用該限制酶切割目的基因會破壞末端基因，所以為了獲取目的基因，不能選 擇限制酶 MspⅠ，而應選擇限制酶 BamHⅠ，B 錯；限制酶 MspⅠ和 SmaⅠ切割會破壞目的基因， 用限制酶 MboⅠ切割會將質粒上的兩個標記基因都破壞，但在目的基因兩側和質粒上都含有 限制酶 BamHⅠ的識別序列，所以將目的基因 D 導入圖 2 中的質粒，應選擇的限制酶是 BamHⅠ，C 正確；用限制酶 BamHⅠ切割破壞了抗生素 A 抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素 B 抗性 基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素 B，但不能抗抗生素 A，所以為了篩選出含 重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基上需分別添加抗生素 B 和抗生素 A，D 錯。 L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 【生物卷（解析）xx 屆江蘇省鹽城中學高三 10 月月考（xx10） 】25．下圖表示抗人體胃癌 的單克隆抗體的制備過程，有關敘述正確的是 A．圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結合的抗原 B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導細胞融合獲得乙 C．用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合細胞均能增殖，未融合細胞均不能增殖 D．丙需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 【答案】 【知識點】L9 動物細胞工程與單克隆抗體 【答案解析】ABD 解析：乙細胞中兩兩融合的有三種：B 淋巴細胞與 B 淋巴融合的細胞、骨 髓瘤細胞與骨髓瘤細胞的融合，雜交瘤細胞，其中 B 淋巴細胞與 B 淋巴融合的細胞不能增殖， 未融合細胞有 B 淋巴細胞和骨髓瘤細胞，其中骨髓瘤細胞能增殖。 【思路點撥】根據單克隆抗體的制備原理及過程分析，了解相關細胞的特點。 第 II 卷 非選擇題 (共 65 分) 三．非選擇題：本部分包括 7 小題，共 65 分。 【生物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】48． （每空 1 分，共 10 分）克隆豬成功率較低，與早期胚胎細胞的異常凋亡有關。 Bcl-2 基因是細胞凋 亡抑制基因，用 PCR 技術可以檢測該基因轉錄水平，進而了解該基因與不同胚胎時期細胞凋 亡的關系。克隆豬的培育及該基因轉錄水平檢測流程如圖。請回答： （1）圖中重組細胞的細胞核來自 細胞，早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育， 經桑椹胚、囊胚和 胚最終發(fā)育為克隆豬。 （2）在 PCR 過程中可檢測出 cDNA 中 Bcl-2 cDNA 的分子數，進而計算總 mRNA 中 Bcl-2 mRNA 的分子數，從而反映出 Bcl-2 基因的轉錄水平。 ①圖中 X 表示 過程。 ②從基因組數據庫中查詢 Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列，以便根據這一序列設計合成 用于 PCR 擴增，PCR 擴增過程第一輪循環(huán)的模板是 ③在 PCR 過程中利用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技術可檢測出 cDNA 中 Bcl-2 cDNA 的分子數。 (３)該過程所涉及的現代生物技術有 ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 和 ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。 （４）目前使用的供體細胞一般都選擇傳代 10 代以內的細胞，原因是； ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 【答案】【知識點】L7 基因工程與蛋白質工程 L9 動物細胞工程與單克隆抗體 L10 胚胎 工程 【答案解析】（1）體 原腸 （2）①反轉錄 ②引物 Bcl-2 cDNA （3）動物細胞培養(yǎng)、核移植技術、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植 （4）10 代以內的細胞保持 正常的二倍體核型 解析：（1）圖中卵母細胞是受體細胞，良種豬的體細胞是供體細胞提供細胞核，形成重組 細胞；早期胚胎發(fā)育經過桑椹胚、囊胚和原腸胚，最終形成克隆豬。 （2）①mRNA→cDNA 的過程表示反轉錄過程。 ②PCR 技術獲取目的基因的前提是已知 Bcl-2 基因或者 Bcl-2mRNA 的核苷酸，以便合成引物； 條件包括模板 DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶，根據題中流程圖，第 一輪循環(huán)的模板式 cDNA。 （3）據圖分析，涉及的現代生物技術有動物細胞培養(yǎng)、核移植技術、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎 移植。 （4）供體細胞一般都選擇傳代 10 代以內的細胞，原因是傳代 10 代以內的細胞一般能保持 正常的二倍體核型，10 代之后，細胞發(fā)生遺傳物質改變的概率增加，到 50 代后，細胞發(fā)生 突變形成的癌細胞。 物卷（解析）xx 屆安徽省黃山市屯溪一中高三上學期第二次月考（xx10） 】45.下列關于細 胞工程的敘述，錯誤的是( ) A.電刺激可誘導植物原生質體融合或動物細胞融合 B.去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理 C.小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫小鼠的 B 淋巴細胞融合可制備單克隆抗體 D.某種植物甲乙兩品種的體細胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數目相同 【答案】【知識點】L8 植物細胞工程與植物的組織培養(yǎng)技術 L9 動物細胞工程與單克隆抗 體 【答案解析】D 解析：電刺激可誘導植物原生質體融合或動物細胞融合，體現細胞膜的流動 性，A 正確；纖維素酶或者果膠酶去除植物細胞的細胞壁，用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理， 將動物組織分散成單個細胞，B 正確；小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫小鼠的 B 淋巴細胞融合 形成的雜交瘤細胞，即能無限繁殖，又能產生特異性抗體，C 正確；甲染色體數目 2M，乙為 2N，體細胞雜種染色體數目為 2M+2N，甲乙兩品種雜交后代的染色體數目為 M