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1、專題整合六專題整合六 選修教材內容選修教材內容（6個常考點，不同省份按考綱要求選用）個常考點，不同省份按考綱要求選用）第十四講第十四講 生物技術實踐（選修一）生物技術實踐（選修一） 【考綱點擊】 1微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測定。3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。4.利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應用。5.運用發(fā)酵加工食品的基本方法。6.測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質。7.從生物材料中提取某些特定的成分。8.植物的組織培養(yǎng)。9.酶的存在和簡單制作方法。10.酶活力測定的一般原理和方法。11.酶在食品制造和洗滌等方面的應用。12.制備和應用固定化酶。13.PCR

2、技術的基本操作和應用。14.蛋白質的提取和分離。 知識互聯(lián)網(wǎng)點擊進入點擊進入word?？键c?？键c19 微生物的利用和生物技術在微生物的利用和生物技術在食品加工中的應用食品加工中的應用 （5年年23考考 ） A不同種類細菌的生長均需要相同碳源 B常用液體培養(yǎng)基分離獲得細菌單菌落 C細菌大量培養(yǎng)過程中，芽孢形成于細菌生長的調整期 D培養(yǎng)基中含有高濃度NaCl有利于金黃色葡萄球菌的篩選 解析：細菌的碳源與其新陳代謝的類型有關，A錯誤；菌落的形成需要固體培養(yǎng)基，B錯誤；芽孢大量形成與衰亡期，C錯誤。金黃色葡萄球菌能耐高鹽，D正確。 答案：D高考經(jīng)典高考經(jīng)典1(2012全國卷全國卷，5)關于細菌的敘述中

3、，正確的是關于細菌的敘述中，正確的是 ()。 2(2012江蘇，21)(多選)下列關于制作果酒、果醋和腐乳的 敘述，合理的是 ()。 A在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長 B條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小 D將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加 大用鹽量 解析：果酒發(fā)酵的后期，營養(yǎng)物質減少，酵母菌代謝減慢，產(chǎn)生的CO2量減少，可以間隔較長的時間再擰開瓶蓋；糖源充足時，醋酸菌可以將葡萄糖分解成醋酸；糖源不足時，則利用酒精與氧反應合成醋酸和水；由于發(fā)酵液的酒精比例越來越高，因而發(fā)酵液的密度逐漸減小，制腐乳時，在擺放豆腐的同時，應逐層加

4、鹽，隨層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。 答案：ABC A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中 B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上 C將轉基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上 D將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上 解析：考查微生物的培養(yǎng)及應用，實驗分析能力。將轉基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上，是進行植物組織培養(yǎng)，必需嚴格的無菌操作，否則會失敗。 答案：C3(2012北京卷北京卷，5)高中生物學實驗中，在接種時不進行嚴高中生物學實驗中，在接種時不進行嚴格格 無菌操作對實驗結果影響最大的一項是無菌操作對實驗結果影響最大的一項是 ()。4(2011課標全國卷，39)有些細菌可分解原油，從而

5、消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。請回答問題。 (1)在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。 (2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。 (3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力_。 (4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術要求實驗操作應在酒精燈_附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 解析：(1)從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株，使用的培養(yǎng)基應是以

6、原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，通過控制碳源這種營養(yǎng)成分，來促進能高效降解原油的菌株的生長，抑制其他微生物的生長。 (2)菌種純化培養(yǎng)時，常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種。 (3)當固體培養(yǎng)基上長出單菌落后，可通過比較菌落周圍分解圈的大小，來判斷菌株降解原油能力的大小。一般來說，分解圈越大說明該菌株的降解能力越強，反之則越弱。 (4)實驗室培養(yǎng)微生物的過程中，常用灼燒滅菌法對接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口等進行滅菌；用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基、試管等進行滅菌；用干熱滅菌法對玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等進行滅菌。實驗操作應在酒精燈火焰旁進行，因為酒精燈火焰旁可形成一個無菌環(huán)境，可防止微生物的

7、污染。 答案：(1)原油選擇 (2)平板劃線法稀釋涂布平板法 (3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰 本考點往往以發(fā)酵食品加工為背景考查微生物的分離、純化和培養(yǎng)過程以及在食品加工中所起的作用，果酒、果醋和泡菜的制作方法和流程，植物有效成分的提取都是命題重點，不同省份對本考點的命題不一樣，有的只出選擇題，有的只出非選擇題，有的題型不限！ 【押題1】 從自然菌樣篩選較理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。 (1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應從_環(huán)境采集。 (2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待

8、分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其在群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇_的培養(yǎng)基，并在_條件下培養(yǎng)。命題猜想命題猜想考查微生物的純化培養(yǎng)和分離技術考查微生物的純化培養(yǎng)和分離技術 (3)下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請分析接種的具體方法。 獲得圖A效果的接種方法是_，獲得圖B效果的接種方法是_。 (4)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行_，接種前要進行_，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在_條件下進行。 破題關鍵 解析(1)嗜鹽菌就生活在高鹽環(huán)境中，如：海灘等環(huán)境。(2)耐高溫淀粉酶應存

9、在于以淀粉為唯一碳源且在高溫環(huán)境中生存的微生物體內。(3)從不同菌落之間的關系可以看出，A純化微生物的接種方法是稀釋涂布平板法，B純化微生物的接種方法是平板劃線法。(4)培養(yǎng)基配制時應先溶化，再調整pH，滅菌。 答案(1)海灘等高鹽 (2)以淀粉為唯一碳源高溫 (3)稀釋涂布平板法平板劃線法 (4)pH調整高壓蒸汽滅菌無菌 1微生物培養(yǎng)技術中的消毒和滅菌消毒消毒滅菌滅菌區(qū)區(qū)別別使用使用手段手段較為溫和的物理或化學方法較為溫和的物理或化學方法強烈的理化因素強烈的理化因素結果結果殺死表面或內部的部分微生物殺死表面或內部的部分微生物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)殺死包括芽孢和殺死包括芽孢和孢子

10、在內的所有孢子在內的所有微生物微生物常用常用方法方法煮沸消毒法、化學藥劑消毒煮沸消毒法、化學藥劑消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒法等法等灼燒滅菌法、干灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法等蒸汽滅菌法等聯(lián)系聯(lián)系都借助理化性質，營造微生物難以生存的不良都借助理化性質，營造微生物難以生存的不良環(huán)境；環(huán)境；作用實質都是通過使蛋白質變性來抑制作用實質都是通過使蛋白質變性來抑制微生物生命活動或殺死微生物微生物生命活動或殺死微生物 2.平板劃線操作的注意事項 (1)每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌。 (2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免 溫度太高殺死菌種。

11、 (3)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。 (4)劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基 劃破。 【押題2】 下圖所示是果酒和果醋制作的實驗流程以及某 同學設計的果酒和果醋的發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下 列問題?？疾楣啤⒐椎闹谱鞴に嚰白⒁馐马椏疾楣?、果醋的制作工藝及注意事項 (1)完成圖1中的制作流程。 (2)沖洗的主要目的是_，沖洗應特別注意不能_，以防止菌種的流失。 (3)圖2裝置中的充氣口在_過程中要關閉，某同學在實驗時為了密閉裝置特意將瓶塞使勁塞緊，并將充氣口和排氣口用夾子夾緊，以便于發(fā)酵。但第二天觀察時，發(fā)現(xiàn)瓶塞松了，他不明白其中的原因，請幫助解釋說明其原因。_。 (4)在醋酸

12、發(fā)酵時，排氣口排出的氣體的來源是_。 (5)若在果汁中含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時期，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說明理由。_。 解析本題主要考查了果酒、果醋制作的基本過程和原理。因酵母菌是兼性厭氧菌，在發(fā)酵初期需要氧氣，進行大量繁殖，等酵母菌繁殖到一定數(shù)量時，關閉充氣口，讓其進行無氧呼吸；酵母菌無氧呼吸除產(chǎn)生酒精外，還產(chǎn)生CO2，所以瓶塞會松；醋酸菌是需氧型細菌，醋酸發(fā)酵過程中，充氣口要連接充氣泵不停地充氣，排氣口則不停地排氣，排出的氣體成分不僅有空氣，還有醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生的CO2；酒精發(fā)酵與醋酸發(fā)酵的條件不同，酒精發(fā)酵時是無氧環(huán)境，而在無氧狀態(tài)下，醋酸菌受到抑制。 答案(1)醋酸發(fā)

13、酵(2)洗去浮塵反復沖洗 (3)酒精發(fā)酵酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生的二氧化碳使瓶中氣體壓強增大(答細胞呼吸或有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳不可) (4)剩余的空氣、醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生的二氧化碳 (5)不能。因為酒精發(fā)酵時缺氧，會抑制醋酸菌的生長，醋酸菌的發(fā)酵條件是氧氣充足 (1)從概念上判斷：發(fā)酵是利用微生物在有氧或無氧條件下的生命活動來制備微生物菌體及各種不同代謝產(chǎn)物的過程。無氧呼吸是生物在無氧條件下的一種細胞呼吸方式。 (2)從分類上判斷：發(fā)酵據(jù)產(chǎn)物不同可分為：酒精發(fā)酵(無氧呼吸)、乳酸發(fā)酵(無氧呼吸)和抗生素發(fā)酵等；據(jù)對氧的需求不同可分為：厭氧發(fā)酵(無氧呼吸)和需氧發(fā)酵；據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)不同可分為：

14、固體發(fā)酵和液體發(fā)酵。判斷發(fā)酵與無氧呼吸的方法判斷發(fā)酵與無氧呼吸的方法 特別提醒果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施。 榨汁機和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要進行消毒。清洗葡萄時要先清洗后除枝梗。發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管，不用直管。一、微生物的基本技術1制備培養(yǎng)基：計算稱量溶化滅菌倒平板。2無菌技術：主要指消毒和滅菌。3倒平板操作：待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時，在酒精燈火焰旁倒平板。4平板劃線操作：平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。考點探源考點探源5稀釋涂布平板法：先將菌液進行一系列梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一

15、起的微生物將被分散到培養(yǎng)基的表面，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如圖： 特別提醒平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)；又可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。二、某種微生物的分離與計數(shù)1分離選擇培養(yǎng)基2計數(shù) (1)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)。 篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 計數(shù)方法：活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)法。 過程：土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察。 (2)分解纖維素的微生物的分離。 實驗原理 即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 流程：土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落。

16、3鑒定方法鑒定分解尿鑒定分解尿素的細菌素的細菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基細菌細菌指示劑變紅，則該菌能分解尿素指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素鑒定纖維素分解菌分解菌 特別提醒平板劃線法適用于微生物的純化，但不能用于微生物的計數(shù)。 稀釋涂布平板法常用于活菌計數(shù)法，而顯微鏡直接計數(shù)法不能區(qū)分細菌的死活。用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)。 土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是否需要，應根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定。 三、微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術中的應用項目項目內容內容果酒和果醋的制作果

17、酒和果醋的制作腐乳制作腐乳制作制作泡菜并檢測亞硝制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量酸鹽含量菌種菌種及來及來源源酵母菌：葡萄皮上野生型酵母菌：葡萄皮上野生型酵母菌與醋酸菌、空氣或酵母菌與醋酸菌、空氣或人工接種人工接種毛霉、青霉、曲毛霉、青霉、曲霉、酵母菌等真霉、酵母菌等真菌，空氣中的生菌，空氣中的生殖孢子殖孢子乳酸菌、空氣中的孢乳酸菌、空氣中的孢子子原理原理無氧：無氧：釀酒釀酒C6H12O62CO22C2H5OH有氧：釀有氧：釀醋醋C2H5OHO2 CH3COOHH2O蛋白質蛋白質 小小分子肽氨基酸分子肽氨基酸脂肪脂肪 甘油甘油脂肪酸脂肪酸亞硝酸鹽對氨基苯亞硝酸鹽對氨基苯磺酸磺酸 重氮化合重氮化合物物N

18、1萘基乙二萘基乙二胺鹽酸鹽胺鹽酸鹽玫瑰紅玫瑰紅色染料色染料原料原料選擇選擇新鮮、無爛籽粒葡萄新鮮、無爛籽粒葡萄(或或蘋果蘋果)豆腐豆腐大白菜、花椰大白菜、花椰菜等新鮮干凈菜等新鮮干凈的蔬菜的蔬菜實驗實驗流程流程挑選葡萄挑選葡萄沖洗沖洗榨汁榨汁酒精酒精發(fā)酵發(fā)酵果酒果酒醋酸醋酸發(fā)酵發(fā)酵 果醋果醋豆腐上長出毛豆腐上長出毛霉霉加鹽腌制加鹽腌制加鹵湯裝瓶加鹵湯裝瓶密封腌制密封腌制制泡菜：選材制泡菜：選材配制鹽水配制鹽水裝壇裝壇發(fā)酵發(fā)酵成品成品測亞硝酸鹽含測亞硝酸鹽含量：配制溶液量：配制溶液制備標準顯制備標準顯色液色液制備樣制備樣品處理液品處理液比比色色操作操作注意注意事項事項(1)材料選擇與處理材料選擇

19、與處理(2)防止發(fā)酵液污染，控防止發(fā)酵液污染，控制好發(fā)酵條件制好發(fā)酵條件(1)材料用量材料用量(2)防止雜菌污防止雜菌污染染(3)控制溫度及控制溫度及酒精含量酒精含量(1)泡菜壇的選泡菜壇的選擇擇(2)腌制條件腌制條件(無無氧氧) (3)測定亞硝酸測定亞硝酸鹽含量的操作鹽含量的操作共同共同點點都是天然的發(fā)酵，利用了微生物新陳代謝過程中代謝產(chǎn)都是天然的發(fā)酵，利用了微生物新陳代謝過程中代謝產(chǎn)物的作用或直接獲取代謝產(chǎn)物物的作用或直接獲取代謝產(chǎn)物 四、植物有效成分的提取 1植物芳香油提取方法的比較提取提取方法方法水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法壓榨法壓榨法有機溶劑萃取法有機溶劑萃取法實驗實驗原理原理利用水蒸氣

20、將利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的揮發(fā)性較強的植物芳香油提植物芳香油提取出來取出來通過機械加壓，壓通過機械加壓，壓榨出果皮中的植物榨出果皮中的植物芳香油芳香油使芳香油溶解在有使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發(fā)溶機溶劑中，蒸發(fā)溶劑獲得植物芳香油劑獲得植物芳香油方法方法步驟步驟(1)水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾(2)分離油層分離油層(3)除水過濾除水過濾(1)石灰水浸泡、漂石灰水浸泡、漂洗洗(2)壓榨、過濾、壓榨、過濾、靜置靜置(3)再次過濾再次過濾(1)粉碎、干燥粉碎、干燥(2)萃取、過濾萃取、過濾(3)濃濃縮縮適用適用范圍范圍適用于提取玫適用于提取玫瑰油、薄荷油瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的等揮發(fā)性強的芳香油芳香油適用

21、于柑橘、檸檬適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提等易焦糊原料的提取取適用范圍廣，要求適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可原料的顆粒要盡可能細小，能充分浸能細小，能充分浸泡在有機溶劑中泡在有機溶劑中優(yōu)點優(yōu)點簡單易行，便簡單易行，便于分離于分離生產(chǎn)成本低，易保生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結構持原料原有的結構和功能和功能出油率高，易分離出油率高，易分離局限局限性性水中蒸餾會導水中蒸餾會導致原料焦糊和致原料焦糊和有效成分水解有效成分水解等問題等問題分離較為困難，出分離較為困難，出油率相對較低油率相對較低使用的有機溶劑處使用的有機溶劑處理不當會影響植物理不當會影響植物芳香油的質量芳香油的質量 2. 實驗流程設計

22、 特別提醒(1)水蒸氣蒸餾的三種常用方法比較 基本原理相同，但原料位置不同。 水中蒸餾：原料放于蒸餾容器的水中，水完全浸沒原料。水上蒸餾：容器中水的上方有篩板，原料置于篩板上，水量以沸騰時不浸濕原料為宜。水氣蒸餾：蒸餾容器下方有一排氣孔，連接外源水蒸氣，上方有篩板，上面放原料。 (2)提取植物有效成分時注意的事項 水蒸氣蒸餾過程中可用明火加熱，萃取過程應該避免明火加熱，采取水浴加熱，這是因為有機溶劑都是易燃物，直接用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。用于萃取的有機溶劑必須事先精制，除去雜質，否則會影響芳香油的質量。在用水蒸氣蒸餾法制取玫瑰精油的過程中油水混合物中加入氯化鈉的目的是增大鹽水的密度，有利

23、于玫瑰精油與水的分層。加入無水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分。橘皮精油的提取過程中，橘皮洗凈晾干后，要浸泡在石灰水中10 h以上，其目的是防止橘皮壓榨時滑脫，從而提高出油率。?？键c?？键c20 酶的應用和生物技術在酶的應用和生物技術在其他方面的應用其他方面的應用 （5年年18考考 ） A.洗滌劑能瓦解細胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍 C.常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取 D.用玻璃棒緩慢攪拌濾液會導致DNA獲得量減少 解析：本題考查DNA提取和鑒定。DNA溶解度與洗滌劑無關，DNA與二苯胺水浴加熱變藍，不需要冷卻；

24、用玻璃棒攪拌，使DNA吸附在玻璃棒上，且DNA量不會減少，所以答案為C。 答案：C高考經(jīng)典高考經(jīng)典1.（2012江蘇江蘇，18）下列關于）下列關于“DNA粗提取與鑒定實驗粗提取與鑒定實驗”的敘的敘 述，正確的是述，正確的是 （）。（）。 2.（2011廣東理綜，5）以下關于豬血紅蛋白提純的描述，不 正確的是 （）。 A.洗滌紅細胞時，使用生理鹽水可防止紅細胞破裂 B.豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少 C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 D.在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋 白移動慢 解析：豬成熟紅細胞中缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少，是提

25、純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步：紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析，其中洗滌紅細胞時，要用生理鹽水反復洗滌，既要將紅細胞洗滌干凈，又要不破壞紅細胞，然后再用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白。分離提純血紅蛋白時用凝膠色譜法，是根據(jù)相對分子質量的大小來分離蛋白質，相對分子質量大的蛋白質移動速度較快；血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動情況，并據(jù)此判斷分離效果。故D不正確。 答案：D3.（2010江蘇生物，25）（多選）圖1表示制備固定化酵母細胞的有關操作，圖2是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵的示意圖，下列敘述正確的是 （）。 A.剛溶化的海藻酸鈉應迅速與活化的

26、酵母菌混合制備混合液 B.圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠 C.圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接 觸 D.圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉移到圖2裝置中 解析：溶化的海藻酸鈉應冷卻至室溫后與活化的酵母菌混合，A項錯誤。海藻酸鈉與酵母菌混合液應滴入CaCl2溶液中，以制備凝膠珠；凝膠珠用蒸餾水沖洗23次后，可轉移到發(fā)酵裝置中；攪拌可使酵母菌與培養(yǎng)液充分接觸，有利于發(fā)酵的順利進行，故B、C、D三個選項正確。 答案：BCD 高考命題?？贾R點有： （1）酶活力測定的一般原理和方法；（2）酶在食品制造和洗滌等方面的應用；（3）植物的組織培養(yǎng)；（4）蛋白

27、質的提取和分離；（5）PCR技術的基本操作和應用。命題多以實驗分析或應用實例分析的形式呈現(xiàn)?！狙侯}1】 在日常洗滌中，普通洗衣粉已經(jīng)逐漸被加酶洗衣粉所代替，加酶洗衣粉中的堿性蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶等可以將粘附在衣物上的奶漬、汗?jié)n、血漬等快速、徹底地清除掉，因此非常受人們的歡迎。 （1）某班同學為探究某復合加酶洗衣粉的最佳洗滌溫度，設計了一個探究實驗，該實驗的自變量應為。實驗過程中，不同的小組選用了含不同污染物的衣物作為實驗材料，最終結果匯總如下表：命題猜想命題猜想酶的研究與應用酶的研究與應用 不同溫度下除去不同污漬所需的時間/min水溫水溫/51525354555657585植物油植

28、物油225110987849352246109牛奶牛奶220103704211344991100漿糊漿糊143996531216349714由上表可知，在洗滌含不同污染物的衣物時要由上表可知，在洗滌含不同污染物的衣物時要。（2）從生物體中提取出的酶首先要檢測）從生物體中提取出的酶首先要檢測，以便更好，以便更好 地將酶應用于實踐。地將酶應用于實踐。（3）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學物質包裹的，遇水后）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學物質包裹的，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用，請說明包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用，請說明這是否運用了酶的固定化技術及其理由。這是否運

29、用了酶的固定化技術及其理由。_ 解析（1）探究溫度對酶活性的影響時，自變量應為溫度。由表格可知，清除不同污染物時所需的最適溫度不同，因此洗滌含不同污染物的衣物時應選用不同溫度的水。（2）只有酶具有活性才能將酶應用于實踐。（3）固定化酶需要把酶固定在一定載體上，使酶既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離，可以反復利用，本題中未運用固定化酶技術。 答案（1）溫度使用不同溫度的水（2）酶的活性 （3）未運用酶的固定化技術，因為酶未固定在不溶于水的載體上，也不能重復利用1. 判斷加酶洗衣粉洗滌效果的方法：可在洗滌后比較污物的殘留狀況，如已消失、顏色變淺、面積縮小等。2. 加酶洗衣粉的洗滌效果的探究方法：實驗

30、設計遵循的原則是對照原則和單一變量原則，如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果有何不同時，以控制洗衣粉的種類為變量，其他條件完全一致；同時，普通洗衣粉處理污物與加酶洗衣粉處理污物形成對照實驗。生物信息題的解答技巧生物信息題的解答技巧3. 變量的分析和控制：影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有水溫、水量、水質、洗衣粉的用量、衣物的材質、衣物大小、浸泡時間、洗滌的方式和洗滌的時間等。在選擇適宜的變量作為探究課題的時候，應注意切合實際，如選擇水溫時，我們可以選擇一年中冬季、春季、秋季和夏季的實際常溫5 、15 、25 和35 進行實驗?！狙侯}2】 .某生物興趣小組在學習完“蛋白質的提取和分離”后

31、，聯(lián)系相關實驗，準備從豬肝臟研磨液中初步提取過氧化氫酶，設計的“過氧化氫酶提取、分離流程”（如下圖）?？疾榈鞍踪|的提取和分離及考查蛋白質的提取和分離及PCR技術技術 請據(jù)圖回答下列有關問題。 （1）向肝細胞懸液中加入一定量的pH7.0的緩沖液并充分攪拌，可以破碎肝細胞，破碎細胞的原理是_。 與使用蒸餾水相比，使用緩沖液的優(yōu)點是 _。 （2）蛋白質粗分離階段透析的目的是 _。 （3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的 等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實現(xiàn)各種分子的分離。 （4）實驗小組以3%過氧化氫溶液和獲得的過氧化氫酶為材料進行溫度對酶催化活性影響的探究，得到下圖所示的結果，根據(jù)實驗結果得出“過氧

32、化氫酶能耐受100 高溫”的結論，請問這一結論是否可靠？為什么？ _。 .如圖表示體外和體內的DNA復制過程。請據(jù)圖分析回答問題。 （1）體內DNA復制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術中用_。 （2）圖1中的DNA聚合酶一般選用從水生耐熱細菌Taq中分離的。 其功能是_。 （3）與體內DNA復制相比較，PCR反應要在中才能進行。 （4）圖2E過程中的堿基互補配對方式與圖1C過程中的不同之處是。假設圖1中的一個模板DNA分子中有 800個堿基對，其中含有腺嘌呤600個，若通過PCR技術共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6 200個，則該模板DNA在PCR擴增儀中已經(jīng)復制了次。 （5

33、）下列各項過程中，遵循UA配對方式的有_。 DNA復制RNA復制轉錄翻譯 逆轉錄 解析.（1）酶的活性受酸堿度、溫度等條件的影響。使用緩沖溶液達到細胞因吸水而漲破的目的，又不會因溶液酸堿度不適宜而影響酶的活性。（2）透析是去除分子量較小的雜質，即樣品的粗分離。（3）電泳技術就是在電場的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質以及分子本身大小、形狀等性質的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達到對樣品進行分離、鑒定或提純的目的。（4）在該實驗中溫度應是實驗變量，所以為了確保實驗結果的可靠性，應該排除其他能導致過氧化氫分解的因素。 .PCR是一種體外快速擴增DNA的技術，其DNA復制的原理和體

34、內基本相同，不同的是PCR通過高溫使DNA分子熱變性而解旋，一般用耐高溫的TaqDNA聚合酶催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。PCR需要模擬體內pH等環(huán)境，故需在一定的緩沖溶液中進行。DNA復制、RNA復制、轉錄、翻譯和逆轉錄均存在堿基互補配對，而遵循UA配對方式的只有RNA復制、翻譯和逆轉錄。 答案.（1）滲透原理（當外界溶液濃度低于動物細胞內液濃度時，細胞吸水漲破）可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定，避免因pH變化影響過氧化氫酶活性 （2）除去小分子化合物（雜質） （3）帶電性質、分子大小、形狀 （4）不可靠，高溫也能使過氧化氫分解 .（1）高溫使DNA分子熱變性 （2）TaqDNA聚合酶催化脫氧

35、核苷酸之間形成磷酸二酯鍵 （3）一定的緩沖溶液 （4）E過程中是UA，C過程中是TA5 （5）,（2）樣品的預處理及粗分離 一、酶的研究及應用 1.酶活性（酶活力）測定的一般原理和方法 （1）酶活性（酶活力）的含義：酶的活性（酶活力）是指酶 催化一定化學反應的能力。 （2）酶活性（酶活力）測定的一般原理和方法：酶的活性（酶活力）通常以單位時間內底物的消耗量或者在單位時間內 產(chǎn)物的生成量來表示?？键c探源考點探源 2. 酶在食品制造和洗滌等方面的應用 （1）纖維素酶與果膠酶組成組成作用作用纖維素纖維素酶酶C1酶酶CX酶酶葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶纖維素在纖維素在C1酶、酶、CX酶的酶的作用下分解成纖維二

36、作用下分解成纖維二糖，再在葡萄糖苷酶的糖，再在葡萄糖苷酶的作用下將纖維二糖分解作用下將纖維二糖分解為葡萄糖為葡萄糖果膠酶果膠酶多聚半乳糖醛、酸酶、多聚半乳糖醛、酸酶、果膠分解酶果膠酯酶果膠分解酶果膠酯酶都能將不溶性果膠分解都能將不溶性果膠分解成可溶性半乳糖醛酸成可溶性半乳糖醛酸 （2）加酶洗衣粉 概念：指含酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四類。 洗滌原理種類種類洗滌原理洗滌原理洗滌的物質種類洗滌的物質種類蛋白蛋白酶酶可將蛋白質水解為易溶解或分可將蛋白質水解為易溶解或分散于洗滌液中的小分子的肽或散于洗滌液中的小分子的肽或氨基酸氨基酸血漬、奶漬及各種食血漬、奶漬及

37、各種食品類的蛋白質污垢品類的蛋白質污垢脂肪脂肪酶酶把脂肪水解為較易溶解的甘油把脂肪水解為較易溶解的甘油和脂肪酸和脂肪酸食品的油漬、人體皮食品的油漬、人體皮脂、口紅脂、口紅淀粉淀粉酶酶能使淀粉分解為可溶性的麥芽能使淀粉分解為可溶性的麥芽糖、葡萄糖糖、葡萄糖來自面條等的污垢來自面條等的污垢纖維纖維素酶素酶使纖維的結構變得蓬松，從而使纖維的結構變得蓬松，從而使?jié)B入到纖維深處的塵土和污使?jié)B入到纖維深處的塵土和污垢能夠與洗衣粉充分接觸，達垢能夠與洗衣粉充分接觸，達到更好的去污效果到更好的去污效果 3.制備和應用固定化酶、固定化細胞 （1）直接使用酶、固定化酶和固定化細胞的差異直接使用酶直接使用酶固定化酶

38、固定化酶固定化細胞固定化細胞酶的種類酶的種類一種或幾種一種或幾種一種一種一系列酶一系列酶常用載體常用載體氧化鋁、高嶺氧化鋁、高嶺土、硅膠、二土、硅膠、二氧化鈦、硅藻氧化鈦、硅藻土等土等明膠、瓊脂明膠、瓊脂糖、海藻酸糖、海藻酸鈉、醋酸纖維鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰素、聚丙烯酰胺等胺等常用方法常用方法包埋法、化學包埋法、化學結合法、物理結合法、物理吸附法吸附法包埋法包埋法營養(yǎng)物質營養(yǎng)物質不需要不需要不需要不需要需要需要化學反應化學反應一種或幾種一種或幾種一種一種一系列一系列底物底物各種物質各種物質各種物質各種物質能進入載體的能進入載體的小分子物質小分子物質優(yōu)點優(yōu)點效率高、耗能效率高、耗能低、無污染低

39、、無污染可回收反復使可回收反復使用用成本低、易操成本低、易操作，可催化一作，可催化一系列化學反應系列化學反應缺點缺點環(huán)境因素影響環(huán)境因素影響大，酶難以回大，酶難以回收利用收利用不利于催化一不利于催化一系列化學反應系列化學反應反應物與細胞反應物與細胞內的酶不容易內的酶不容易接觸，催化效接觸，催化效率下降率下降 特別提醒纖維素酶在洗滌劑中的應用可以說是一項重要的發(fā)明。它的作用對象不是衣物上的污垢，而是織物表面因多次洗滌而在主纖維上出現(xiàn)的微毛和小絨球，添加纖維素酶的洗衣粉具有增白、柔軟兩個獨特功能。 二、DNA和蛋白質技術 1.DNA的粗提取和鑒定方法 （1）材料的選?。哼x用DNA含量相對較高的生物

40、組織。 （2）破碎細胞 動物的紅細胞，吸水破裂。 植物細胞：加入洗滌劑、食鹽后研磨。 （3）除去雜質的方法 方法一：利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不 同，通過調節(jié)NaCl溶液的濃度除去溶于和不溶于NaCl溶液 中的雜質。 方法二：利用DNA對酶的耐受性，直接在濾液中加入嫩肉粉，反應1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質，而不會破壞DNA。 方法三：利用DNA對高溫的耐受性，將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min，使蛋白質變性沉淀而DNA分子還未變性。 （4）DNA的析出：向處理后的濾液中加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液（體積分數(shù)為95%），靜置2

41、3 min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物。 （5）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。 2.血紅蛋白的提取和分離 （1）凝膠色譜法的原理相對分子質量大相對分子質量大相對分子質量小相對分子質量小直徑大小直徑大小大于凝膠顆粒空隙直徑大于凝膠顆?？障吨睆叫∮谀z顆粒空隙直徑小于凝膠顆?？障吨睆竭\動途徑運動途徑 從凝膠顆粒間隙向下移動從凝膠顆粒間隙向下移動從凝膠顆粒內部空隙向從凝膠顆粒內部空隙向下移動下移動運動路程運動路程較短較短較長較長移動速度移動速度較快較快較慢較慢洗脫次序洗脫次序先從凝膠柱洗脫出來先從凝膠柱洗脫出來后從凝膠柱洗脫出來后從凝膠柱

42、洗脫出來 （2）樣品的預處理及粗分離 特別提醒影響DNA提取的因素 對生物材料研磨不充分或加入蒸餾水量不夠，導致核物質沒有充分釋放出來。在破碎細胞或溶解DNA時攪拌太劇烈，使DNA分子斷裂，不易提取。 實驗中最好使用塑料器皿，因為DNA易吸附在玻璃器皿上，容易造成損失。 3.PCR反應的原理、過程及結果 （1）PCR原理 在一定的緩沖溶液中通過控制溫度并提供模板和原料，使 DNA復制在體外反復進行。 （2）PCR反應過程 變性：當溫度上升到90 以上時，雙鏈DNA解聚為單 鏈，如圖所示： 復性：當溫度下降到50 左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合，如圖所示： 延伸：當溫度上升到72 左右時，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，如圖所示： （3）結果 PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要包括變性、復性、延伸三步。 兩個引物之間的固定長度的DNA序列呈指數(shù)擴增。