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1、 選修選修1生物技術(shù)實踐生物技術(shù)實踐 最新考綱最新考綱高頻考點高頻考點1.微生物的分離與培養(yǎng)微生物的分離與培養(yǎng) 2某種微生物數(shù)量的測定某種微生物數(shù)量的測定3培養(yǎng)基對微生物的選擇作培養(yǎng)基對微生物的選擇作用用 4利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用微生物在其他方面的應(yīng)用 1.制作果酒和果醋的基本原理和方法制作果酒和果醋的基本原理和方法，以及發(fā)酵的條件，以及發(fā)酵的條件2設(shè)計安裝簡單的生產(chǎn)果酒、果醋設(shè)計安裝簡單的生產(chǎn)果酒、果醋的裝置的裝置3腐乳制作的原理、方法和制作流腐乳制作的原理、方法和制作流程中各步措施的作用，以及質(zhì)量評價程中各步措施的作用，以

2、及質(zhì)量評價4泡菜制作原理及其實驗流程泡菜制作原理及其實驗流程5亞硝酸鹽含量的檢測方法亞硝酸鹽含量的檢測方法6培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要求及配制培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要求及配制原則原則7無菌技術(shù)的具體操作及應(yīng)用無菌技術(shù)的具體操作及應(yīng)用8運用相關(guān)技術(shù)解決微生物的分離運用相關(guān)技術(shù)解決微生物的分離與培養(yǎng)等實際問題與培養(yǎng)等實際問題 一、發(fā)酵及發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及過程果酒和果果酒和果醋的制作醋的制作腐乳的腐乳的制作制作泡菜的泡菜的制作制作主要主要菌種菌種果酒：酵果酒：酵母菌母菌果醋：醋果醋：醋酸菌酸菌毛霉等毛霉等乳酸菌乳酸菌果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作腐乳的制作腐乳的制作泡菜的泡

3、菜的制作制作原原理理(1)果酒：酵母菌無氧果酒：酵母菌無氧呼吸呼吸C6H12O6 2C2H5OH2CO2(2)果醋：醋酸菌有氧果醋：醋酸菌有氧呼吸呼吸當氧氣、糖源都充當氧氣、糖源都充足時，糖足時，糖醋酸醋酸當缺少糖源時，乙當缺少糖源時，乙醇醇乙醛乙醛醋酸醋酸毛霉等微生物能產(chǎn)毛霉等微生物能產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶生蛋白酶和脂肪酶，作用如下：，作用如下：乳酸菌乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)生乳酸生乳酸果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作腐乳的制作腐乳的制作泡菜的制作泡菜的制作實實驗驗流流程程挑選葡萄挑選葡萄沖洗沖洗榨汁榨汁酒精發(fā)酵酒精發(fā)酵果酒果酒醋酸發(fā)酵醋酸發(fā)酵果醋果醋讓豆腐上長出讓豆腐上長出毛霉毛霉加鹽腌制加鹽腌制加

4、鹵湯裝瓶加鹵湯裝瓶密封腌制密封腌制注意注意的問的問題題(1)材料的選擇與處材料的選擇與處理理(2)防止發(fā)酵液被污防止發(fā)酵液被污染染(3)控制好發(fā)酵的條控制好發(fā)酵的條件件(1)控制好材料控制好材料的用量的用量(2)防止雜菌污防止雜菌污染染(1)泡菜壇的選泡菜壇的選擇擇(2)腌制的條件腌制的條件發(fā)酵技術(shù)中常用菌種的比較菌種菌種項目項目酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌生物學生物學分類分類真核生物真核生物原核生原核生物物真核生真核生物物原核生原核生物物代謝類型代謝類型異養(yǎng)兼性異養(yǎng)兼性厭氧厭氧異養(yǎng)需異養(yǎng)需氧氧異養(yǎng)需異養(yǎng)需氧氧異養(yǎng)厭異養(yǎng)厭氧氧生產(chǎn)應(yīng)用生產(chǎn)應(yīng)用釀酒釀酒釀醋釀醋制作腐制作腐乳乳制作

5、泡制作泡菜菜發(fā)酵條件發(fā)酵條件前期需氧，前期需氧，后期不需氧后期不需氧一直需一直需氧氧一直需一直需氧氧無氧無氧果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施：(1)榨汁機和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要進行消毒。(2)清洗葡萄時要先清洗后除枝梗。(3)發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管不用直管。2亞硝酸鹽及其含量測定(1)與人體健康的關(guān)系亞硝酸鹽在膳食中普遍存在，在人體內(nèi)以“過客”的形式隨尿排出，但當攝入總量較多時，可引起中毒或死亡。亞硝酸鹽在一定條件下可轉(zhuǎn)化為能致癌、致畸和致突變的物質(zhì)亞硝胺。(2)含量的測定原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料

6、，通過目測比較，大致估算其含量。測定操作：配制溶液制備標準顯色液制備樣品處理液比色。1生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用十分廣泛，如果酒、果醋、腐乳、泡菜就是生活中常見的例子。右圖是果酒制果醋的發(fā)酵裝置，分析回答下列問題：(1)果酒制作的原材料通常是葡萄，但對葡萄不能進行反復沖洗，其原因是_。(2)在圖乙中遺漏了一個裝置，請以文字加以補在圖乙中遺漏了一個裝置，請以文字加以補充。充。_。(3)如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，則溫度如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，則溫度應(yīng)該控制在應(yīng)該控制在_。此時裝置需要修改的地。此時裝置需要修改的地方是方是_。果酒制果醋的反應(yīng)式為：。果酒制果醋的反應(yīng)式為：_。(4)在果

7、醋發(fā)酵過程中，用在果醋發(fā)酵過程中，用_檢測是否有檢測是否有醋酸生成。醋酸生成?！窘馕觥?1)果酒是以葡萄為原料，通過酵母菌發(fā)酵獲得的，而酵母菌主要存在于果實的表面，所以不能對葡萄進行反復沖洗。(2)乙裝置沒有排氣管道，所以應(yīng)添加排氣口，并連上一根長而彎曲的管子，保證酵母菌開始時進行有氧呼吸。(3)酵母菌生產(chǎn)酒精需進行無氧呼吸，所以生產(chǎn)酒精不需通入空氣。酶的活性在1825 時最高，所以裝置中溫度控制在1825 。(4)用pH試紙檢測裝置中培養(yǎng)液的pH，以檢測是否有醋酸生成。【答案】(1)葡萄上存在酵母菌，反復沖洗，會洗去大量的酵母菌，不利于酒精發(fā)酵(2)缺少一個排氣口，應(yīng)補上一個排氣口裝置，并連

8、上一根長而彎曲的管子(3)1825不需要通入空氣C2H5OHO2CH3COOHH2O(4)pH試紙2臘肉、腌白菜、腐乳等是家庭中常見的一些腌制品，其味道鮮美，便于保存。請聯(lián)系生活實際，回答下列問題：(1)臘肉和腌白菜能保存較長時間而不腐敗，原因是_。(2)腐乳制作的原理是_。(3)制作腐乳的鹵湯中通常要加入料酒、黃酒等，含量一般控制在12%左右，其目的是_。(4)腌白菜味道鮮美，但最好是等腌制好后再食用，若過早食用會影響人體健康，請分析原因。【解析】臘肉和腌白菜的腌制液中鹽濃度過高，微生物因失水而不能生存，所以能保存較長時間而不腐敗。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和

9、氨基酸；脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸。腐乳的鹵湯中酒精的含量越高，對蛋白酶的抑制作用越大，使腐乳的成熟期延長；相反，鹵湯中酒精的含量越低，則蛋白酶活性越高，能加快蛋白質(zhì)分解，但雜菌繁殖快，豆腐易腐敗。未腌制成熟的白菜中，亞硝酸鹽等致癌物質(zhì)的含量過高，食用后可能會影響人體健康?！敬鸢浮?1)腌制液鹽濃度過高，微生物因失水而不能生存(2)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸(3)抑制微生物的生長，同時使腐乳具有獨特的香味(4)未腌制成熟的白菜中，亞硝酸鹽等致癌物質(zhì)的含量過高，食用后可能會影響人體健康。二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1微生物的實驗

10、室培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。分類和應(yīng)用劃分劃分標準標準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途物理物理性質(zhì)性質(zhì)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固不加凝固劑劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)半固體培養(yǎng)基基加凝固劑加凝固劑，如瓊脂如瓊脂觀察微生物觀察微生物的運動、分的運動、分類、鑒定類、鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離微生物分離、鑒定、活、鑒定、活菌計數(shù)菌計數(shù)劃分劃分標準標準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途根據(jù)根據(jù)用途用途選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入了抑培養(yǎng)基中加入了抑制或促進微生物生制或促進微生物生長的化學物質(zhì)長的化學物質(zhì)培養(yǎng)、分培養(yǎng)、分離

11、出特定離出特定微生物微生物鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品指示劑或化學藥品鑒別不同鑒別不同種類的微種類的微生物生物制備：計算制備：計算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板(2)無菌技術(shù)具體操作對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。2純化大腸桿菌以及菌種的保藏(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)純化大腸桿菌原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個

12、細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是一個純化的細菌菌落。 方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法。 平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面；稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。 (3)菌種的保藏 短期保存：固體斜面培養(yǎng)基上4 保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。 長期保存：20 甘油管在冷凍箱中保藏。平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。3分析下面培養(yǎng)基的配

13、方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂。請回答：(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是_和_。(2)想一想這種培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，又是如何進行選擇的？_。(3)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是() 化學消毒灼燒滅菌干熱滅菌紫外線滅菌高壓蒸汽滅菌巴氏消毒法ABC D 【解析】碳源是提供碳元素的物質(zhì)，氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖。但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的原則是只有

14、能夠利用尿素的微生物才能夠生長。培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；實驗操作者的雙手可用化學藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法?！敬鸢浮?1)葡萄糖尿素(2)有選擇作用。因為此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(3)A三、微生物的分離與計數(shù)1土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù).分離分解尿素的細菌所使用的特定培養(yǎng)基分離分解尿素的細菌的培養(yǎng)基應(yīng)為選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的氮源只有尿素，理論上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生長。其配方如下：KH2PO41.4gNa

15、2HPO42.1gMgSO47H2O0.2g葡萄糖葡萄糖10.0g尿素尿素(唯一氮源唯一氮源)1.0g瓊脂瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定溶到1 000mL。.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量。方法：用計數(shù)板計數(shù)。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。操作：a設(shè)置重復組，增強實驗的說服力與準確性。b為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在303

16、00的平板進行計數(shù)。計算公式：每克樣品中的菌株數(shù) M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。2分解纖維素的微生物的分離(1)分解纖維素的微生物的分離實驗原理即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 實驗流程 土壤取樣：富含纖維素的環(huán)境 選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量 梯度稀釋 涂布平板：將樣品涂布于鑒別含CR的纖維素分解菌的培養(yǎng)基(固體) 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍出現(xiàn)透明圈。 (2)兩種剛果紅染色法的比較 方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)，過程如下：培養(yǎng)基經(jīng)涂布培養(yǎng)長

17、出菌落覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mL的CR溶液倒去CR溶液加入1 mol/L的NaCl溶液 倒掉NaCl溶液出現(xiàn)透明圈。 方法二：倒平板時就加入剛果紅，過程如下：配制質(zhì)量濃度為10 mg/mL的CR溶液滅菌按照每200 mL培養(yǎng)基加入1 mL的比例加入CR溶液混勻倒平板接種后培養(yǎng)出現(xiàn)透明圈。4(2009年煙臺模擬)可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是()A以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑【解析】在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲得氮源的細菌不能生長，而分解尿素

18、的細菌能利用尿素作氮源，將尿素分解為氨，使pH升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又屬于鑒別培養(yǎng)基?！敬鸢浮緼 5下圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關(guān)問題： (1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫熱泉中尋找耐熱菌，這說明_。(2)某同學根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整個實驗過程嚴格執(zhí)行無菌操作。如果將其中的纖維素粉換成_，菌落數(shù)_，即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。纖維素粉纖維素粉NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO45 g1 g1.2 g0.9 gMgSO47H2OKCl酵母膏、水解酪酵母膏、水解酪素素0.5

19、g0.5 g適量適量(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用_法，原因是_。 【解析】(1)因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習性，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。(2)因為葡萄糖是纖維素水解的、能被微生物直接利用的有機小分子，所以如果將其中的纖維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細菌會生長繁殖得更快，故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基。(3)因為稀釋涂布平板法要將菌液進行一系列的梯度稀釋，故該法可根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所以本實驗宜采用稀釋涂布平板法?！敬鸢浮?1)根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求

20、，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找(2)葡萄糖明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)(3)稀釋涂布平板平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù)(2009年高考浙江卷)下面是有關(guān)食醋和泡菜制作的實驗。請回答：(1)食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作：第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的淀粉分解成_(填中間產(chǎn)物)，然后進一步分解成葡萄糖，這一過程可用_(填淀粉指示劑)來檢測，因為該試劑遇淀粉呈藍色，遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。 第二步：用_菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā)酵過程中，玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是_。 第三步：用_菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，這一過程_氧氣。 (2)泡菜發(fā)酵過程中，會產(chǎn)生多種酸，其中

21、主要是_，還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽的定量測定可以用_法，因為亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N1萘基乙二胺偶聯(lián)成_色化合物。進行樣品測定時，還要取等量水進行同樣的測定，目的是_?！窘馕觥康矸墼诘矸勖傅淖饔孟驴上人獬珊?，然后再淀粉酶、糖化淀粉酶的作用下最后水解成葡萄糖；酵母菌可以進行有氧呼吸，也可以進行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇；在泡菜發(fā)酵過程中，雜菌可能產(chǎn)生乳酸、乙酸等；醋酸桿菌在有氧條件下可以將乙醇轉(zhuǎn)化成醋酸?！敬鸢浮?1)糊精碘液(KII2溶液)酵母發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量CO2，使瓶內(nèi)壓力升高而可能引起爆裂醋酸醋桿(醋酸桿)需要消耗(2)乳酸(或有機酸)(光電)比色玫瑰紅作為對照(2009

22、年高考寧夏理綜卷)(1) 在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點，因此常作為遺傳學研究的實驗材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_(消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進行清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。 (3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。 (4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的_。 (

23、5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。 (6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。【解析】本題主要考查微生物培養(yǎng)的綜合知識。消毒一般只是消滅體表的微生物，而滅菌是殺滅所有的微生物及孢子等。觀察細菌等微生物的有無通常是通過培養(yǎng)來觀察菌落的形狀、顏色等。【答案】(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌消毒與滅菌的不同項目項目消毒消毒滅菌滅菌條件條件使

24、用較為溫和的理化使用較為溫和的理化方法方法使用強烈的理化因素使用強烈的理化因素結(jié)果結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)部殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的一部分對人體有害的微生物微生物(不包括芽孢和不包括芽孢和孢子孢子)殺死物體內(nèi)外所有的微殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子生物，包括芽孢和孢子適用適用實驗操作的空間、操實驗操作的空間、操作者的衣著和手作者的衣著和手微生物的培養(yǎng)器皿、接微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等種用具和培養(yǎng)基等項項目目消毒消毒滅菌滅菌常常用用方方法法煮沸消毒法煮沸消毒法(如如100 ，5 min6 min)，巴氏消，巴氏消毒法毒法(80 ，15 min)，酒精、氯，酒精、氯氣、

25、石炭酸等化氣、石炭酸等化學藥劑消毒法學藥劑消毒法灼燒滅菌、干熱灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌滅菌(2009年高考安徽理綜卷)下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是() A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上 C將實驗組和對照組平板倒置，37 恒溫培養(yǎng)2448小時 D確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)【解析】配制培養(yǎng)基時要用蒸餾水，而不能用自來水，防止雜菌污染；培養(yǎng)微生物時要選擇適宜的溫度37 ，持續(xù)時間2448小時；土壤中微生

26、物的量相對穩(wěn)定，由于實驗原因，很容易引起數(shù)量的劇烈變化，所以要選擇30300左右進行計數(shù)。【答案】D1(2009年高考重慶理綜卷)下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是()A大腸桿菌以復制方式進行繁殖，其擬核是一個環(huán)狀DNA分子B在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上，大腸桿菌首先利用乳糖作碳源C用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時，應(yīng)及時添加核酸等生長因子D處于對數(shù)期的大腸桿菌，常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料【解析】大腸桿菌以二分裂的方式進行繁殖，其擬核是一個大型環(huán)狀DNA分子。對大腸桿菌來說，分解葡萄糖的酶是組成酶，分解乳糖的酶是誘導酶，在葡萄糖和乳糖共同存在時，大腸桿菌只利用葡萄糖。用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時，

27、應(yīng)及時添加氨基酸等生長因子。處于對數(shù)期的大腸桿菌，代謝旺盛，菌體的形態(tài)和生理特性較穩(wěn)定，常作為生產(chǎn)用的菌種和科研材料。【答案】D2(2009年高考四川理綜卷)下列關(guān)于幾種微生物的營養(yǎng)代謝和生長繁殖的描述，正確的是()A根瘤菌通過生物固氮，制造了含氮養(yǎng)料和含碳有機物B接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進入對數(shù)期能大量積累青霉素C培養(yǎng)液中溶氧量的變化，會影響酵母菌的生長繁殖和代謝途徑D用32P標記的噬菌體感染細菌，在新形成的噬菌體中都能檢測到 32P 【解析】根瘤菌通過生物固氮，制造了植物可利用的含氮無機物NH3，但不能制造含碳有機物。接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，穩(wěn)定期能大量積累青霉素。噬菌體只有一個DNA分子

28、，用32P標記噬菌體后，在細菌內(nèi)繁殖，因半保留復制，子一代均含32P，但從子二代開始將出現(xiàn)不含32P的子代噬菌體。酵母菌為兼性厭氧型微生物，在溶氧充足時，主要進行有氧呼吸，以出芽生殖的方式進行繁殖；溶氧不足時，進行無氧呼吸，以孢子生殖方式進行繁殖。 【答案】C3(2009年高考全國卷)下列關(guān)于通過發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述，錯誤的是()A發(fā)酵時需不斷通入無菌空氣，否則會積累乳酸B發(fā)酵時常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基C從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)D當菌體生長進入穩(wěn)定期時，補充營養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量【答案】C4(2008年高考江蘇卷)下列關(guān)于腐乳制作的描述中，錯誤的是()A在腐乳制作過程中

29、必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與B含水量大于85%的豆腐利于保持濕度，適宜制作腐乳C加鹽和加酒都能抑制微生物的生長D密封瓶口前最好將瓶口通過火焰以防雜菌污染【解析】腐乳的制作原理是利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成小分子的肽、氨基酸和甘油、脂肪酸。一般說來，含水量為70%的豆腐最為適宜，水分過多則腐乳不易成形?！敬鸢浮緽5(2008年高考江蘇卷)圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期接種醋酸菌，適當升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個發(fā)酵過程培養(yǎng)液pH變化的曲線是()ABC D【解析】果醋的制作是利用醋酸菌將葡萄糖或乙醇生成醋酸的原理進行的。本題中的醋酸菌利用的原料是發(fā)酵初期產(chǎn)生的酒精，故在整個發(fā)酵過程中，培養(yǎng)液pH一直降低，如曲線所示。【答案】B