高考生物大一輪復(fù)習(xí) 高考預(yù)測(cè) 現(xiàn)代生物科技專題 3.3 動(dòng)物細(xì)胞工程課件(選修3)
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1、第3課動(dòng)物細(xì)胞工程考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)核心知識(shí)回顧核心知識(shí)回顧1.1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ):動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ):(1)(1)原理:原理:_。細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖(2)(2)過程:過程:胰蛋白酶胰蛋白酶細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁、接觸抑制細(xì)胞貼壁、接觸抑制胰蛋白酶胰蛋白酶保持正常核型保持正常核型獲得不死性獲得不死性(3)(3)培養(yǎng)條件。培養(yǎng)條件。無菌、無毒的環(huán)境:對(duì)無菌、無毒的環(huán)境:對(duì)_和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理;添加無菌處理;添加_;定期更換培養(yǎng)液以清除;定期更換培養(yǎng)液以清除_。營養(yǎng):除正常的有機(jī)
2、和無機(jī)營養(yǎng)外,還需加入營養(yǎng):除正常的有機(jī)和無機(jī)營養(yǎng)外,還需加入_等一些天然成分。等一些天然成分。培養(yǎng)液培養(yǎng)液抗生素抗生素代代謝產(chǎn)物謝產(chǎn)物血血清、血漿清、血漿溫度和溫度和pHpH:適宜溫度為:適宜溫度為_( (哺乳動(dòng)物哺乳動(dòng)物) ),pHpH為為_。氣體環(huán)境:氣體環(huán)境:95%95%空氣加空氣加_( (維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pH)pH)。(4)(4)應(yīng)用:生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)應(yīng)用:生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)_、醫(yī)學(xué)研、醫(yī)學(xué)研究。究。2.2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物:動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物:(1)(1)原理:原理:_。36.536.50.50.57.27.27.47.45%CO5%CO2
3、2有毒物質(zhì)有毒物質(zhì)動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性(2)(2)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程:動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程:細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)重組細(xì)胞重組細(xì)胞去核去核供體供體(3)(3)結(jié)果:獲得與供體結(jié)果:獲得與供體_基本相同的個(gè)體。基本相同的個(gè)體。(4)(4)應(yīng)用。應(yīng)用。加速家畜加速家畜_進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。保護(hù)保護(hù)_。生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。作為異種移植的供體。作為異種移植的供體。用于組織器官的移植。用于組織器官的移植。遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)遺傳改良遺傳改良瀕危物種瀕危物種(5)(5)存在問題:存在問題:_、克隆動(dòng)物存在健康問題、克隆動(dòng)物存在健康問題、動(dòng)物食
4、品的安全性問題等。動(dòng)物食品的安全性問題等。成功率低成功率低【教材易漏邊角知識(shí)【教材易漏邊角知識(shí)】選修選修3 P44“3 P44“尋根問底尋根問底”胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,對(duì)細(xì)胞的消化有兩種情況:胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,對(duì)細(xì)胞的消化有兩種情況:(1)(1)短時(shí)間內(nèi)短時(shí)間內(nèi)_( (填填“會(huì)會(huì)”或或“不會(huì)不會(huì)”) )被消化,原被消化,原因是因是_。不會(huì)不會(huì)細(xì)胞表面具有糖蛋白,對(duì)細(xì)胞具有一定的保護(hù)作細(xì)胞表面具有糖蛋白,對(duì)細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用用(2)(2)長時(shí)間后細(xì)胞長時(shí)間后細(xì)胞_( (填填“會(huì)會(huì)”或或“不會(huì)不會(huì)”) )被消化,被消化,原因是原因是_。會(huì)會(huì)細(xì)胞表面糖蛋白的保護(hù)作用是有限的;細(xì)胞細(xì)胞表面糖蛋
5、白的保護(hù)作用是有限的;細(xì)胞膜的主要成分包括磷脂和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)可被胰蛋膜的主要成分包括磷脂和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)可被胰蛋白酶水解白酶水解【思維診斷【思維診斷】(1)(1)在在2525的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)。養(yǎng)。( (北京高考北京高考) )( )( )分析:分析:哺乳動(dòng)物和人類神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)的適宜環(huán)境溫哺乳動(dòng)物和人類神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)的適宜環(huán)境溫度是度是36363737。(2)(2)肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%5%的的COCO2 2刺刺激細(xì)胞呼吸。激細(xì)胞呼吸。( )( )分析:分析:培養(yǎng)液中通入培養(yǎng)液中通入
6、5%5%的的COCO2 2,目的是維持培養(yǎng)液的,目的是維持培養(yǎng)液的pHpH。(3)(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶。白酶。( )( )分析:分析:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要用到胰蛋白酶,植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要用到胰蛋白酶,植物組織培養(yǎng)過程中不需要胰蛋白酶。過程中不需要胰蛋白酶。(4)(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì),莖尖培養(yǎng)可用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì),莖尖培養(yǎng)可用于植物脫毒。于植物脫毒。( )( )分析:分析:通過培養(yǎng)過程中細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)或染色體的變通過培養(yǎng)過程中細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)或染色體的變化可檢測(cè)有毒物質(zhì),莖尖幾乎不含病毒,
7、可用于培養(yǎng)化可檢測(cè)有毒物質(zhì),莖尖幾乎不含病毒,可用于培養(yǎng)脫毒苗。脫毒苗。(5)(5)克隆動(dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完全相同??寺?dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完全相同。( )( )分析:分析:克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)個(gè)體,性狀與供克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)個(gè)體,性狀與供體動(dòng)物基本相同。體動(dòng)物基本相同。(6)(6)動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵細(xì)胞。( )( )分析:分析:動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是處于減數(shù)第二次動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞。分裂中期的卵母細(xì)胞。(7)(7)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因
8、動(dòng)物的培育。 ( )( )分析:分析:目的基因轉(zhuǎn)入受精卵后需要培養(yǎng)為早期胚胎才目的基因轉(zhuǎn)入受精卵后需要培養(yǎng)為早期胚胎才能進(jìn)行胚胎移植。能進(jìn)行胚胎移植。(8)(8)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞。細(xì)胞。( )( )分析:分析:培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上只能形培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上只能形成單層細(xì)胞。成單層細(xì)胞。高考角度全練高考角度全練角度角度1 1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)1.(20171.(2017濟(jì)南模擬濟(jì)南模擬) )回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:題:(1)(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
9、過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面胞表面_時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的稱為細(xì)胞的_。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞是。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞是_層的。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來,層的。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來,需要用酶處理,可用的酶是需要用酶處理,可用的酶是_。(2)(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)進(jìn)而出現(xiàn)_現(xiàn)象;但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,現(xiàn)象;但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳
10、物質(zhì)發(fā)生改變而變成_細(xì)胞,該種細(xì)胞的黏著性細(xì)胞,該種細(xì)胞的黏著性_,細(xì)胞膜表面糖蛋,細(xì)胞膜表面糖蛋白的量白的量_。(3)(3)現(xiàn)用某種大分子染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),觀察到死現(xiàn)用某種大分子染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),觀察到死細(xì)胞被染色,而活細(xì)胞不被染色,原因是細(xì)胞被染色,而活細(xì)胞不被染色,原因是_。(4)(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目,最好檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目,最好選用分裂選用分裂_期的細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察。期的細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察。(5)(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,通常在在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,通常在_條件下保存細(xì)條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下,細(xì)胞中胞。因?yàn)樵谶@種條件下,
11、細(xì)胞中_的活性降的活性降低,細(xì)胞低,細(xì)胞_的速率降低。的速率降低。(6)(6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作排斥現(xiàn)象,這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作_進(jìn)行攻擊。進(jìn)行攻擊。【解題指南【解題指南】解答本題需要明確兩點(diǎn):解答本題需要明確兩點(diǎn):(1)(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程及各階段的細(xì)胞特點(diǎn)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程及各階段的細(xì)胞特點(diǎn)。(2)(2)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、代謝及增殖的相關(guān)知識(shí)。細(xì)胞結(jié)構(gòu)、代謝及增殖的相關(guān)知識(shí)?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出接在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出接觸抑
12、制現(xiàn)象,此時(shí)瓶壁上是單層細(xì)胞。用胰蛋白酶可觸抑制現(xiàn)象,此時(shí)瓶壁上是單層細(xì)胞。用胰蛋白酶可以使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來。以使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來。(2)(2)隨著細(xì)胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂隨著細(xì)胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象,但有些細(xì)胞會(huì)停止,進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象,但有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)改變而獲得不死性,等同于癌細(xì)胞,細(xì)胞因遺傳物質(zhì)改變而獲得不死性,等同于癌細(xì)胞,細(xì)胞表面糖蛋白減少,細(xì)胞之間的黏著性降低。表面糖蛋白減少,細(xì)胞之間的黏著性降低。(3)(3)由于活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性,大分子染料由于活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性,大
13、分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi),而死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失選擇透過不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi),而死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失選擇透過性,大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而使其著色。性,大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而使其著色。(4)(4)由于中期染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰,因此檢測(cè)有由于中期染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰,因此檢測(cè)有毒物質(zhì)是否能改變細(xì)胞染色體數(shù)目,最好選用分裂中毒物質(zhì)是否能改變細(xì)胞染色體數(shù)目,最好選用分裂中期的細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察。期的細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察。(5)(5)由于在冷凍、超低溫或液氮環(huán)境下,細(xì)胞中酶的活由于在冷凍、超低溫或液氮環(huán)境下,細(xì)胞中酶的活性降低,細(xì)胞新陳代謝的速率降低,因此通常在此條性降低,細(xì)胞新陳代謝的
14、速率降低,因此通常在此條件下保存細(xì)胞。件下保存細(xì)胞。(6)(6)皮膚移植后,機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作抗原進(jìn)行皮膚移植后,機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作抗原進(jìn)行攻擊,發(fā)生排斥現(xiàn)象。攻擊,發(fā)生排斥現(xiàn)象。答案:答案:(1)(1)相互接觸接觸抑制單相互接觸接觸抑制單( (或一或一) )胰蛋白酶胰蛋白酶(2)(2)衰老甚至死亡不死性降低減少衰老甚至死亡不死性降低減少(3)(3)活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性,大分子染料不能活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性,大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)( (或死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失了選擇透過性,或死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失了選擇透過性,大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而使其著色大分子染料能夠
15、進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而使其著色) )(4)(4)中中(5)(5)冷凍冷凍( (或超低溫、液氮或超低溫、液氮) )酶新陳代謝酶新陳代謝(6)(6)抗原抗原【延伸探究【延伸探究】(1)(1)要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來,能否使用胃蛋白要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來,能否使用胃蛋白酶?為什么?酶?為什么?提示:提示:不能。胃蛋白酶適于在較強(qiáng)的酸性條件下發(fā)揮不能。胃蛋白酶適于在較強(qiáng)的酸性條件下發(fā)揮作用,而較強(qiáng)的酸性條件會(huì)對(duì)細(xì)胞造成傷害。作用,而較強(qiáng)的酸性條件會(huì)對(duì)細(xì)胞造成傷害。(2)(2)細(xì)胞培養(yǎng)過程中的極少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變后,細(xì)胞培養(yǎng)過程中的極少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變后,失去正常培養(yǎng)細(xì)胞的哪些特點(diǎn)?失去正
16、常培養(yǎng)細(xì)胞的哪些特點(diǎn)?提示:提示:失去貼壁生長、接觸抑制的特點(diǎn)。失去貼壁生長、接觸抑制的特點(diǎn)?!疽族e(cuò)提醒【易錯(cuò)提醒】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同用不同第一次用胰蛋白酶處理是使剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)第一次用胰蛋白酶處理是使剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞;第二次用胰蛋白酶處理是使貼壁細(xì)胞從瓶壁上脫胞;第二次用胰蛋白酶處理是使貼壁細(xì)胞從瓶壁上脫落下來。落下來。角度角度2 2核移植技術(shù)核移植技術(shù)2.(20162.(2016全國卷全國卷)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物某種克隆哺乳動(dòng)物( (二倍體二倍體) )的流程。的流程。
17、回答下列問題:回答下列問題:世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)7798223177982231(1)(1)圖中圖中A A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n2n,則其性染,則其性染色體的組成可為色體的組成可為_。過程。過程表示去除細(xì)胞表示去除細(xì)胞核,該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,核,該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采用去核時(shí)常采用_的方法。的方法。代表的過程是代表的過程是_。(2)(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中_的穩(wěn)定性的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。會(huì)降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)(3)若獲
18、得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_。(4)(4)與克隆羊與克隆羊“多莉多莉( (利利)”)”培育成功一樣,其他克隆動(dòng)培育成功一樣,其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了物的成功獲得也證明了_?!窘忸}指南【解題指南】(1)(1)關(guān)鍵詞:核移植、性染色體的組成、關(guān)鍵詞:核移植、性染色體的組成、遺傳物質(zhì)的角度。遺傳物質(zhì)的角度。(2)(2)解題思路:以流程圖為依據(jù),逐一分析各環(huán)節(jié)的要解題思路:以流程圖為依據(jù),逐一分析各環(huán)節(jié)的要求、目的。求、目的?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)流程圖中沒有說明該哺乳動(dòng)物的供體是雄
19、流程圖中沒有說明該哺乳動(dòng)物的供體是雄性還是雌性,故性染色體組成有性還是雌性,故性染色體組成有XXXX或或XYXY兩種可能。兩種可能。過程表示去核過程,通常做法是將培養(yǎng)至過程表示去核過程,通常做法是將培養(yǎng)至M M期的卵期的卵母細(xì)胞利用顯微操作法去除細(xì)胞核。重組細(xì)胞在體外母細(xì)胞利用顯微操作法去除細(xì)胞核。重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)至囊胚或桑椹胚時(shí),需通過胚胎移植轉(zhuǎn)入代孕母培養(yǎng)至囊胚或桑椹胚時(shí),需通過胚胎移植轉(zhuǎn)入代孕母體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。(2)(2)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至1010代后就不易培養(yǎng)下去了,代后就不易培養(yǎng)下去了,在傳到在傳到10105050代左右時(shí),細(xì)胞增殖就會(huì)逐漸緩慢
20、,以代左右時(shí),細(xì)胞增殖就會(huì)逐漸緩慢,以至于完全停止,這時(shí)部分細(xì)胞的核型至于完全停止,這時(shí)部分細(xì)胞的核型( (遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)) )會(huì)發(fā)會(huì)發(fā)生變化。故選擇細(xì)胞時(shí)一般選用生變化。故選擇細(xì)胞時(shí)一般選用1010代以內(nèi)的細(xì)胞,以代以內(nèi)的細(xì)胞,以保證正常的二倍體核型保證正常的二倍體核型( (遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)) )。(3)(3)動(dòng)物性狀的表現(xiàn)是細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同作動(dòng)物性狀的表現(xiàn)是細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果,克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因全部來自供體,而用的結(jié)果,克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因全部來自供體,而細(xì)胞質(zhì)基因則來自卵母細(xì)胞,所以克隆動(dòng)物與供體動(dòng)細(xì)胞質(zhì)基因則來自卵母細(xì)胞,所以克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物的性狀會(huì)有
21、所差異。物的性狀會(huì)有所差異。(4)(4)克隆動(dòng)物的成功培育說明了動(dòng)物高度分化的體細(xì)胞克隆動(dòng)物的成功培育說明了動(dòng)物高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性。的細(xì)胞核仍具有全能性。答案:答案:(1)XX(1)XX或或XYXY顯微操作胚胎移植顯微操作胚胎移植(2)(2)遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)(3)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響狀產(chǎn)生影響(4)(4)動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性3.(20173.(2017濰坊模擬濰坊模擬) )下面是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治下面是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病
22、療遺傳性糖尿病( (基因缺陷導(dǎo)致胰島基因缺陷導(dǎo)致胰島B B細(xì)胞不能正常合細(xì)胞不能正常合成胰島素成胰島素) )的過程設(shè)計(jì)圖解,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:的過程設(shè)計(jì)圖解,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)(1)圖中圖中所示的結(jié)構(gòu)分別是所示的結(jié)構(gòu)分別是_、_。(2)(2)圖中圖中所示的生物工程技術(shù)分別是所示的生物工程技術(shù)分別是_、_,此外圖示過程還應(yīng)用的工程技術(shù)有,此外圖示過程還應(yīng)用的工程技術(shù)有_(_(只需寫一種只需寫一種) )。(3)(3)過程過程通常用去核卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了通常用去核卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作外,還因?yàn)樗w積大、易操作外,還因?yàn)開。(4)(4)過程過程通常用通常用作
23、受體細(xì)胞的原因是這些細(xì)胞沒有作受體細(xì)胞的原因是這些細(xì)胞沒有分化,具有分化,具有_,可以定向誘導(dǎo)分化成各類細(xì),可以定向誘導(dǎo)分化成各類細(xì)胞、組織和器官。胞、組織和器官。(5)(5)過程過程的完成需要用到的基因操作工具有的完成需要用到的基因操作工具有_。(6)(6)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是_?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)圖中圖中依次為細(xì)胞核、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、核依次為細(xì)胞核、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)。移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)。(2)(2)圖中涉及的技術(shù)包括核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)圖中涉及的技術(shù)包括核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)( (動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
24、) )、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎干細(xì)胞移植等。、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎干細(xì)胞移植等。(3)(3)用去核卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、用去核卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作外,還因?yàn)槠錉I養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)細(xì)胞核易操作外,還因?yàn)槠錉I養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。全能性表達(dá)的物質(zhì)。(4)(4)囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞和受精卵一樣具有全能性,常囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞和受精卵一樣具有全能性,常用作基因工程的受體細(xì)胞。用作基因工程的受體細(xì)胞。(5)(5)基因工程需要用到的工具包括限制酶、基因工程需要用到的工具包括限制酶、DNADNA連接酶連接酶和載體。和載體。(6)(6)圖示方法是用患者的體細(xì)
25、胞進(jìn)行克隆,然后導(dǎo)入健圖示方法是用患者的體細(xì)胞進(jìn)行克隆,然后導(dǎo)入健康基因,與異體移植相比,一般不會(huì)發(fā)生免疫排斥反康基因,與異體移植相比,一般不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。應(yīng)。答案:答案:(1)(1)細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(2)(2)核移植技術(shù)轉(zhuǎn)基核移植技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)因技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)( (早期胚胎培養(yǎng)、胚胎干細(xì)胞移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎干細(xì)胞移植、顯微操作技術(shù)等顯微操作技術(shù)等) )(3)(3)營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)細(xì)胞營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)核全能性表達(dá)的物質(zhì)(4)(4)全能性全能性(5)(5)限制酶、限制酶、DNADNA連連接酶和載體接酶和載體(6)(6)一般不會(huì)發(fā)生免
26、疫排斥反應(yīng)一般不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)【知識(shí)總結(jié)【知識(shí)總結(jié)】選選MM期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因(1)(1)體積較大,易操作。體積較大,易操作。(2)(2)卵黃多,營養(yǎng)豐富,能為重組細(xì)胞分裂、分化提供卵黃多,營養(yǎng)豐富,能為重組細(xì)胞分裂、分化提供充足的營養(yǎng)。充足的營養(yǎng)。(3)(3)能激發(fā)重組細(xì)胞分裂、分化。能激發(fā)重組細(xì)胞分裂、分化。【加固訓(xùn)練【加固訓(xùn)練】動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理過程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟過程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請(qǐng)回答下列問題
27、。小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請(qǐng)回答下列問題。(1)(1)肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細(xì)胞肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細(xì)胞_。(2)(2)培養(yǎng)液中的葡萄糖和氨基酸的主要作用分別是培養(yǎng)液中的葡萄糖和氨基酸的主要作用分別是_、_。(3)(3)氣室中充入氣室中充入O O2 2的主要作用是的主要作用是_。(4)(4)培養(yǎng)液中添加抗生素,能否抑制病毒的侵染?培養(yǎng)液中添加抗生素,能否抑制病毒的侵染?_。(5)(5)有機(jī)物有機(jī)物X X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具,探究肝臟小塊對(duì)有機(jī)示裝置和提供的下列材料用具,探究肝臟小塊對(duì)有機(jī)物物X X是否具有解
28、毒作用。是否具有解毒作用。材料用具:肝臟小塊,外周血淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞培材料用具:肝臟小塊,外周血淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液,植物凝集素養(yǎng)液,植物凝集素( (刺激淋巴細(xì)胞分裂刺激淋巴細(xì)胞分裂) );顯微鏡,載;顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆薩染液玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆薩染液( (使染色體使染色體著色著色) ),有機(jī)物,有機(jī)物X X溶液等。溶液等。實(shí)驗(yàn)過程:實(shí)驗(yàn)過程:在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞,在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞,取取4 4等份,備用。等份,備用。利用甲、乙、丙、丁利用甲、乙、丙、丁4 4組上圖所示裝置,按下表步驟組上圖所示裝置,按
29、下表步驟操作操作(“”(“”表示已完成的步驟表示已完成的步驟) )。上表中還需進(jìn)行的操作是上表中還需進(jìn)行的操作是_。 組別組別甲甲乙乙丙丙丁丁步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液步驟二:加入有機(jī)物步驟二:加入有機(jī)物X X溶液溶液步驟三:放置肝臟小塊步驟三:放置肝臟小塊培養(yǎng)一段時(shí)間后,取培養(yǎng)一段時(shí)間后,取4 4組裝置中的等量培養(yǎng)液,分別組裝置中的等量培養(yǎng)液,分別添加到添加到4 4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察下觀察_,并對(duì)比,并對(duì)比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異
30、常,而甲組的淋巴細(xì)胞分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常,而甲組的淋巴細(xì)胞正常,則說明正常,則說明_?!窘馕觥窘馕觥勘绢}考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。(1)(1)把肝臟切成小薄片,有利于肝臟細(xì)胞的呼吸代謝,把肝臟切成小薄片,有利于肝臟細(xì)胞的呼吸代謝,即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。(2)(2)培養(yǎng)液中葡萄糖的主要作用是作為細(xì)胞的能源物質(zhì),培養(yǎng)液中葡萄糖的主要作用是作為細(xì)胞的能源物質(zhì),氨基酸的主要作用是參與細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成。氨基酸的主要作用是參與細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成。(3)(3)氣室中充入氣室中充入O O2 2的主要作用是滿足細(xì)胞有氧
31、呼吸的需的主要作用是滿足細(xì)胞有氧呼吸的需要。要。(4)(4)抗生素能抑制細(xì)菌生長,但不能抑制病毒侵染??股啬芤种萍?xì)菌生長,但不能抑制病毒侵染。(5)(5)向乙向乙( (或丁或丁) )組裝置中放置肝臟小塊作為對(duì)照實(shí)驗(yàn);組裝置中放置肝臟小塊作為對(duì)照實(shí)驗(yàn);有機(jī)物有機(jī)物X X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂,所以要觀察淋巴有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂,所以要觀察淋巴細(xì)胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否發(fā)生變化。甲組添加肝細(xì)胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否發(fā)生變化。甲組添加肝臟小塊,淋巴細(xì)胞染色體正常,丙組沒有添加肝臟小臟小塊,淋巴細(xì)胞染色體正常,丙組沒有添加肝臟小塊,出現(xiàn)染色體異常,說明肝臟小塊對(duì)有機(jī)物塊,出現(xiàn)染色體異常,說明肝
32、臟小塊對(duì)有機(jī)物X X具有解具有解毒作用。毒作用。答案:答案:(1)(1)吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物(2)(2)作為細(xì)胞的能源物質(zhì)參與細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成作為細(xì)胞的能源物質(zhì)參與細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成(3)(3)滿足細(xì)胞有氧呼吸的需要滿足細(xì)胞有氧呼吸的需要(4)(4)不能不能(5)(5)向乙向乙( (或丁或丁) )組裝置中放置肝臟小塊組裝置中放置肝臟小塊染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對(duì)有機(jī)物染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X X具有解毒作具有解毒作用用考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體核心知識(shí)回顧核心知識(shí)回顧1.1.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的
33、比較:植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較:項(xiàng)目項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合原理原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、性、_融合前融合前處理處理除去細(xì)胞壁除去細(xì)胞壁使細(xì)胞分散開使細(xì)胞分散開細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖項(xiàng)目項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合相關(guān)酶相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶_誘導(dǎo)誘導(dǎo)方法方法 物理法:離心、電物理法:離心、電激、振動(dòng)化學(xué)法:激、振動(dòng)化學(xué)法:聚乙二醇等試劑誘聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)導(dǎo)物理法:離心、電物理法:離心、電激、振動(dòng)激、振動(dòng)化學(xué)法:聚乙二醇化學(xué)法:聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)等試劑
34、誘導(dǎo)生物法生物法_胰蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶或膠原蛋白酶用滅活的用滅活的病毒誘導(dǎo)病毒誘導(dǎo)項(xiàng)目項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株_應(yīng)用應(yīng)用培育植物新品種培育植物新品種主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體意義意義突破突破_,打破了生,打破了生殖隔離,擴(kuò)展了雜交的親本組合殖隔離,擴(kuò)展了雜交的親本組合相同點(diǎn)相同點(diǎn)原生質(zhì)體融合原理相同,原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合原理相同,原生質(zhì)體融合的方法相似的方法相似雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙2.2.單克隆抗體:?jiǎn)慰寺】贵w:(1)(1)制備過程:制備過程:抗原抗原雜交雜交體內(nèi)體內(nèi)單克隆
35、抗體單克隆抗體(2)(2)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能_,又能產(chǎn)生,又能產(chǎn)生_。(3)(3)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、_,并可能大量制備。,并可能大量制備。(4)(4)用途:作為用途:作為_;用于治療疾病和;用于治療疾病和_。無限增殖無限增殖單單一抗體一抗體靈敏度高靈敏度高診斷試劑診斷試劑運(yùn)載藥運(yùn)載藥物物【特別提醒【特別提醒】單克隆抗體制備的關(guān)鍵環(huán)節(jié)單克隆抗體制備的關(guān)鍵環(huán)節(jié)(1)(1)取相應(yīng)取相應(yīng)B B淋巴細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原,否則不淋巴細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原,否則不能獲得單克隆抗體。能獲得單克隆抗體。(2)(2)細(xì)胞融合后需經(jīng)兩次篩選。細(xì)胞融合后需經(jīng)兩次篩選。第一
36、次:在特定的選擇培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞第一次:在特定的選擇培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞(B(B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞) )和融合的具有同種核的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞(BB(BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞) )都會(huì)死亡,只有融合的都會(huì)死亡,只有融合的雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞( (雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞) )才能生長。這種雜種細(xì)胞的特才能生長。這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。點(diǎn)是既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。第二次:經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌第二次:經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞所需抗體的細(xì)胞(
37、(很多種雜交瘤細(xì)胞很多種雜交瘤細(xì)胞) ),需經(jīng)克隆化培,需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)篩選后才可獲得足夠數(shù)量的、能分養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)篩選后才可獲得足夠數(shù)量的、能分泌所需抗體的細(xì)胞。泌所需抗體的細(xì)胞。高考角度全練高考角度全練1.(20141.(2014全國卷全國卷)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)(A)分別免疫分別免疫3 3只只同種小鼠同種小鼠(X(X、Y Y和和Z)Z),每只小鼠免疫,每只小鼠免疫5 5次,每次免疫次,每次免疫1 1周周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)( (能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)的血清最大稀釋倍數(shù)) ),結(jié)果如圖所示。若要
38、制備雜交,結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (染色體數(shù)目染色體數(shù)目4040條條) ),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞,并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞( (染色染色體數(shù)目體數(shù)目6060條條) )按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗泌抗A A抗體的雜交瘤細(xì)胞??贵w的雜交瘤細(xì)胞?;卮鹣铝袉栴}:回答下列問題:世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)世紀(jì)金榜導(dǎo)學(xué)號(hào)7798223277982232(1)(1)制備融合所需的制
39、備融合所需的B B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到清抗體效價(jià)需達(dá)到16 00016 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過以上,則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的的X X、Y Y、Z Z這這3 3只免疫小鼠中,最適合用于制備只免疫小鼠中,最適合用于制備B B淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞的是胞的是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。(2)(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是,體系
40、中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。(3)(3)雜交瘤細(xì)胞中有雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是最多是_條。條。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是原因是_?!窘忸}指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞:題干關(guān)鍵詞:“效價(jià)效價(jià)”“”“雜交瘤細(xì)雜交瘤細(xì)胞胞”“”“傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)”。(2)(2)隱含信息:柱形圖中效價(jià)越高,能檢測(cè)出抗原抗體隱含信息:柱形圖中效價(jià)越高,能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)越大,說明免疫后小鼠的反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)越大,說明免疫后小鼠的B B淋淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力越
41、強(qiáng)。巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力越強(qiáng)。(3)(3)關(guān)鍵知識(shí):制備單克隆抗體的技術(shù)流程和動(dòng)物細(xì)胞關(guān)鍵知識(shí):制備單克隆抗體的技術(shù)流程和動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的過程。體外培養(yǎng)的過程?!窘馕觥窘馕觥勘绢}考查制備單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)。本題考查制備單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)。(1)(1)據(jù)圖中數(shù)據(jù)分析,第四次注射后據(jù)圖中數(shù)據(jù)分析,第四次注射后Y Y、Z Z小鼠的血清抗小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到體效價(jià)均達(dá)到16 00016 000以上,免疫后小鼠以上,免疫后小鼠Y Y的血清抗體效的血清抗體效價(jià)最高,最適用于制備單克隆抗體。價(jià)最高,最適用于制備單克隆抗體。(2)B(2)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合在一起時(shí),可能發(fā)生淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)
42、胞混合在一起時(shí),可能發(fā)生B B淋巴細(xì)胞之間的融合、骨髓瘤細(xì)胞之間的融合及淋巴細(xì)胞之間的融合、骨髓瘤細(xì)胞之間的融合及B B淋巴淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。的細(xì)胞。(3)(3)雜交瘤細(xì)胞形成后,小鼠的雜交瘤細(xì)胞形成后,小鼠的B B淋巴細(xì)胞核與骨髓瘤淋巴細(xì)胞核與骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成細(xì)胞核會(huì)融合形成1 1個(gè)細(xì)胞核,個(gè)細(xì)胞核,1 1個(gè)細(xì)胞核中染色體數(shù)個(gè)細(xì)胞核中染色體數(shù)目最多可達(dá)目最多可達(dá)100100條。條。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞,分
43、裂次數(shù)是有限的。能惡性增殖的細(xì)胞,分裂次數(shù)是有限的。答案:答案:(1)4(1)4Y YY Y小鼠的抗體效價(jià)最高小鼠的抗體效價(jià)最高(2)B(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,沒有特異性且融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,沒有特異性且融合率達(dá)不到融合率達(dá)不到100%100%(3)1(3)1100100(4)(4)不能無限增殖不能無限增殖2.(20172.(2017武漢模擬武漢模擬) )下圖是某實(shí)驗(yàn)室做的通過動(dòng)物纖下圖是某實(shí)驗(yàn)室做的通過動(dòng)物纖維母細(xì)胞等獲得單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)研究。據(jù)圖回答相維母細(xì)胞等獲得單克隆抗體的實(shí)
44、驗(yàn)研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題:關(guān)問題:(1)X(1)X、Y Y、Z Z細(xì)胞的名稱分別是細(xì)胞的名稱分別是_、_、_。(2)(2)過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的_過程。過程。與纖維母細(xì)胞相比,誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較與纖維母細(xì)胞相比,誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較_。(3)(3)過程中需用到的化學(xué)誘導(dǎo)劑是過程中需用到的化學(xué)誘導(dǎo)劑是_。(4)(4)處需要篩選,其目的是處需要篩選,其目的是_。(5)(5)用含用含3232P P標(biāo)記的脫氧核苷酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)標(biāo)記的脫氧核苷酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)Z Z細(xì)胞,細(xì)細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)中能測(cè)到胞質(zhì)中能測(cè)到3232P P的細(xì)胞器是的細(xì)胞器是_?!窘馕觥窘馕觥?1)X(1
45、)X、Y Y、Z Z細(xì)胞的名稱分別是骨髓瘤細(xì)胞、細(xì)胞的名稱分別是骨髓瘤細(xì)胞、抗原刺激過的抗原刺激過的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (或漿細(xì)胞或漿細(xì)胞) )、雜交瘤細(xì)胞。、雜交瘤細(xì)胞。(2)(2)過程是將甲小鼠的纖維母細(xì)胞誘導(dǎo)成誘導(dǎo)干細(xì)過程是將甲小鼠的纖維母細(xì)胞誘導(dǎo)成誘導(dǎo)干細(xì)胞,相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化過程。與纖胞,相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化過程。與纖維母細(xì)胞相比,誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高。維母細(xì)胞相比,誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高。(3)(3)誘導(dǎo)動(dòng)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合,需用到的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。物細(xì)胞融合,需用到的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。(4)(4)將將Z Z細(xì)胞進(jìn)行選擇培養(yǎng),才能篩選出能產(chǎn)
46、生特異性抗體的細(xì)胞進(jìn)行選擇培養(yǎng),才能篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞。(5)(5)脫氧核苷酸是脫氧核苷酸是DNADNA的基本組成單位,的基本組成單位,動(dòng)物細(xì)胞的線粒體中含有少量動(dòng)物細(xì)胞的線粒體中含有少量DNADNA。答案:答案:(1)(1)骨髓瘤細(xì)胞抗原刺激過的骨髓瘤細(xì)胞抗原刺激過的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (或漿或漿細(xì)胞細(xì)胞) )雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞(2)(2)脫分化高脫分化高(3)(3)聚乙二醇聚乙二醇(4)(4)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞(5)(5)線粒體線粒體【加固訓(xùn)練【加固訓(xùn)練】1.(20171.(2017廣州模擬廣州模擬) )
47、單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備,已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷靈敏度高、可大量制備,已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和治療。用和治療。用H7N9H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如下圖所病毒制備單克隆抗體的流程如下圖所示:示:(1)(1)過程過程常用的方法是常用的方法是_。(2)(2)向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白,使小鼠產(chǎn)生向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白,使小鼠產(chǎn)生_免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞是是_。(3)(3)體外培養(yǎng)細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞,首先應(yīng)保證其處于,首先應(yīng)保證其處于_的環(huán)境中,其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度。的環(huán)境中,其次需要提供充足的營養(yǎng)和
48、適宜的溫度。(4)(4)對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_檢測(cè)。檢測(cè)?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)將重組將重組DNADNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞,常用顯微注導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞,常用顯微注射法。射法。(2)(2)向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白,使小鼠產(chǎn)生相應(yīng)向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白,使小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞,這是體液免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞的漿細(xì)胞,這是體液免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞是是B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (漿細(xì)胞或已免疫的漿細(xì)胞或已免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞) )。(3)(3)體外體外培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞,首先應(yīng)保證其處于無菌、無毒的環(huán)境,首先應(yīng)保證其處于無菌、無毒的環(huán)
49、境中,其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度。中,其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度。(4)(4)對(duì)于對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和( (專一專一) )抗抗體檢測(cè)。體檢測(cè)。答案:答案:(1)(1)顯微注射法顯微注射法(2)(2)體液體液( (只答特異性不可只答特異性不可) )B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (漿細(xì)胞或已免漿細(xì)胞或已免疫的疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞) )(3)(3)無菌、無毒無菌、無毒( (缺一不可缺一不可) )(4)(4)(專一專一) )抗體抗體2.2.人絨毛膜促性腺激素人絨毛膜促性腺激素(HCG)(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層是女性懷孕后
50、胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCGHCG單克隆抗體可用于單克隆抗體可用于早孕的診斷。下面是抗早孕的診斷。下面是抗HCGHCG單克隆抗體制備流程示意圖,單克隆抗體制備流程示意圖,請(qǐng)分析回答問題:請(qǐng)分析回答問題:(1)(1)制備單克隆抗體過程中要用到制備單克隆抗體過程中要用到_和和_技術(shù)。技術(shù)。(2)(2)制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的HCGHCG相當(dāng)于相當(dāng)于_,使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng),使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)_的的B B淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞,此過程屬于特異性免疫中的胞,此過程屬于特異性免疫中的_免疫。免疫。(3)(3)在細(xì)胞內(nèi)在細(xì)胞內(nèi)D
51、NADNA的合成一般有兩條途徑,主要途徑是的合成一般有兩條途徑,主要途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進(jìn)而合成在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進(jìn)而合成DNADNA,而,而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用合成合成DNADNA,而骨髓瘤細(xì)胞的,而骨髓瘤細(xì)胞的DNADNA合成沒有此輔助途徑。合成沒有此輔助途徑。利用利用DNADNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HATHAT培養(yǎng)基含有培養(yǎng)基含有多種成分,其中添加的多種成分,其中添加的_
52、具有篩選雜交瘤細(xì)胞具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。的作用。最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_。(4)(4)此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與_特異性結(jié)特異性結(jié)合,從而診斷早孕。合,從而診斷早孕。【解析【解析】(1)(1)制備單克隆抗體過程中要用到動(dòng)物細(xì)胞培制備單克隆抗體過程中要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(2)(2)給小鼠注射給小鼠注射HCGHCG,使小鼠,使小鼠進(jìn)行體液免疫,產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的進(jìn)行體液免疫,產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的B B淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。(3)(3)骨髓瘤細(xì)胞的骨髓瘤細(xì)胞的DNADNA合成只有一條途
53、徑,在培養(yǎng)基中合成只有一條途徑,在培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤,阻斷了骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合加入氨基嘌呤,阻斷了骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合體的增殖。雜交瘤細(xì)胞有兩條合成體的增殖。雜交瘤細(xì)胞有兩條合成DNADNA的途徑,因此在的途徑,因此在選擇培養(yǎng)基上雜交瘤細(xì)胞能生存并無限增殖。選擇培養(yǎng)基上雜交瘤細(xì)胞能生存并無限增殖。B B淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖,胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖,又能產(chǎn)生單一抗體。又能產(chǎn)生單一抗體。(4)(4)此單克隆抗體是人絨毛膜促性此單克隆抗體是人絨毛膜促性腺激素腺激素(HCG)(HCG)作抗原刺激產(chǎn)生的,故可以與人絨毛膜促作抗原刺激產(chǎn)生的,故可以與人絨毛膜促性腺激素性腺激素(HCG)(HCG)特異性結(jié)合。特異性結(jié)合。答案:答案:(1)(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合(2)(2)抗原抗體體液抗原抗體體液(3)(3)氨基嘌呤氨基嘌呤能無限增殖并分泌特異性抗體能無限增殖并分泌特異性抗體(4)(4)人絨毛膜促性腺激素人絨毛膜促性腺激素( (或或HCG)HCG)
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