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1、第十章尿液分析儀及其臨床應用 考綱:
?尿液干化學分析儀
?尿液有形成分分析儀
?方法學評價
尿液干化學分析儀
④KET ⑤N門
(二)檢測原理
1. 尿液分析儀組成尿液分析儀通常由機械系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、電路系統(tǒng) 三部分組成。
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2. 尿液分析儀檢測試帶。
空白塊的目的是為了消除尿液本身的顏色在試劑塊上分布不均等所產(chǎn)生的測試誤差,以提
2、高測試準確 性;
固定塊的目的是在測試過程中,使每次測定試劑塊的位置準確,減低由此而引起的誤差。
3. 尿液分析儀檢測原理
試劑模塊顏色深淺
光源照射
0
光吸收
光反射
0
本質(zhì):光吸收和光反射相關(guān)。
顏色越深,光吸收越大,光反射越小,反射率越小,被測成分濃度越高。
R(%)二書盤 X100%
式中:R,反射率;Tm試劑膜塊對測定波長的反射強度; Ts,試劑膜塊對參考波長的反射強度; Cm 標準膜塊對測定波長的反射強度; Cs,標準膜塊對參考波長的反射強度。
(三)檢測參數(shù)及注意事項
項目
反應原理
注意事項
pH
pH指示劑
標本時間過長,pH
3、f
Pro
pH指示劑蛋白質(zhì)誤差法
GLU
清蛋白敏感
葡萄糖氧化酶
VitC、SG過高假陰性
過、次、強污染假陽性
BLD
BIL
URO
Hb類過氧化酶法
VitC (> 100mg/L)假陰性
偶氮反應法
避免陽光照射、VitC-假陰性
醛反應法
KET
亞硝基鐵氰化鈉法
不與3-羥丁酸反應
NIT
硝酸鹽還原法
3個條件:硝酸鹽、硝酸鹽還原酶及停留〉 4h。VitC-假陰性
LEU
白細胞酯酶法(粒細胞)
中性粒細胞
SG
VitC
多聚電解質(zhì)離子解離法
尿液pH> 7.0時,干化學測定結(jié)果的基礎(chǔ)上增加 0.005
4、還原法 血紅蛋白、膽紅素、葡萄糖及亞硝酸鹽可產(chǎn)生嚴重的負干擾
尿有形成分分析儀
(一) 檢測原理
應用流式細胞術(shù)和電阻抗分析的原理:尿液中有形成分經(jīng)熒光色素(如菲啶與羧化氰等)染料染色后, 在鞘流液的作用下,形成單列、快速通過氬激光檢測區(qū),儀器檢測熒光、散射光和電阻抗的變化。
前向散射光強度(Fsc):細胞大小
前向散射光脈沖寬度(Fscw):細胞長度
熒光強度(FI ):染色質(zhì)強度
前向熒光脈沖寬度(Flw):染色質(zhì)長度
電阻-電壓:體積 脈沖信號數(shù):細胞數(shù)
(二) 檢測參數(shù)
1. 定量參數(shù)主要包括:紅細胞( RBC/卩I )、白細胞(WBC/yl )、上皮細
5、胞(EC/卩I )、管型(CAST/ 卩I )、細菌(BACT/卩I )。
2. 標記參數(shù)主要包括:病理管型( Path.CAST)、小圓上皮細胞(SRC、類酵母細胞(YLC)、結(jié)晶(X ‘TAL)和精子(sperm)。紅細胞信息主要提示紅細胞的均一性,儀器還提供白細胞平均前向散射強度
(WBC-MFJ和電導率指標。
(三) 臨床應用
1. 紅細胞
尿沉渣紅細胞數(shù)量可幫助血尿有關(guān)疾病的診斷和鑒別診斷; 通過動態(tài)觀察這類患者尿紅細胞數(shù)量的變
化,可以確定患者的治療效果和判斷預后。尿沉渣分析儀提供的紅細胞形態(tài)相關(guān)信息,對鑒別血尿腎性或 非腎性來源具有一定的篩檢鑒別作用。
2. 白細胞
6、與細菌 尿沉渣白細胞數(shù)量可協(xié)助診斷和鑒別診斷泌尿系統(tǒng)的感染、膀胱炎、結(jié)核、腫瘤等疾病 ;動態(tài)觀察患 者尿白細胞數(shù)量的變化,有助于確定患者的治療效果和預后。泌尿系感染時,患者尿液中除了有白細胞數(shù) 量上的增高,常同時存在細菌。因此,白細胞、細菌組合檢查對泌尿系感染的診斷有著重要意義。
3. 上皮細胞 尿沉渣分析儀能給出上皮細胞的定量結(jié)果,并標記出是否含有小圓上皮細胞,但并不能準確區(qū)分腎小 管上皮細胞、中層或底層移行上皮細胞。
4. 管型
管型對診斷腎臟實質(zhì)性病變有重要價值 。但由于管型的種類較多,且形態(tài)特點各不相同,儀器 只能區(qū) 分出透明管型和病理管型 。當儀器標明出現(xiàn)病理管型時,須進一步用
7、顯微鏡檢查尿沉渣進行準確分類。
5. 其他 當儀器提示有酵母細胞、精子細胞和結(jié)晶時,均應離心鏡檢。
方法學評價
(一) 尿干化學分析儀檢查與顯微鏡檢查
1. 尿干化學分析儀
(1) 主要優(yōu)點:標本用量少(10?20ml);檢測速度快、檢測項目多 ,最快10余秒可完成1條多聯(lián) 試帶 11 個項目的檢測; 檢測準確性、重復性好;適用于大批量普查。
( 2)主要不足 :不能替代顯微鏡對病理性尿標本的檢查,特別是管型、結(jié)晶、上皮細胞、淋巴細胞、 單核細胞等其他有形物質(zhì); 尿蛋白試帶以檢測清蛋白為主 ,對球蛋白不敏感,故 不適用于腎病患者 ;易受 多種藥物或其他外源性物質(zhì)或人為因素等因素的干
8、擾,出現(xiàn)假陽性或假陰性。
2. 尿液干化學分析儀與顯微鏡檢查方法 尿液干化學分析儀與傳統(tǒng)顯微鏡檢查是兩種原理不同的檢驗技術(shù),在臨床上中可能出現(xiàn)化學法分析結(jié) 果與鏡檢結(jié)果 不相符的情形 。
( 1 )白細胞:
① 分析儀法(+),鏡檢法(-):可能的解釋為尿液在膀胱貯存時間過長或其他原因致使白細胞破壞, 中性粒細胞酯酶釋放到尿中所致。
② 分析儀法(-),鏡檢法(+):這種情形多發(fā)生在 腎移植患者發(fā)生排異反應時,尿中以淋巴細胞為
主, 另外尿液中以單核細胞為主時也會出現(xiàn)此結(jié)果, 因干化學法檢測的是尿中完整的及溶解的中性粒細胞, 而與淋巴細胞及單核細胞不起反應,此時,應以顯微鏡檢查為準
9、。
(2) 紅細胞:①分析儀法(+),鏡檢法(-):這種情形可由于尿液中紅細胞常被破壞而釋放出血紅
蛋白,多發(fā)生于腎病患者,或某些患者尿液中含有對熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白或菌尿,引起紅細胞干化學法 測定結(jié)果的假陽性。 ②分析儀法(-),鏡檢法(+):這種情形一般很少,但可發(fā)生在尿液中含有大量維
生素C (> 100mg/L)或試帶失效時。
歸納總結(jié):
① 分析儀法(+),鏡檢法(-): 白細胞,尿液在膀胱時間過長使白細胞破壞,中性粒細胞酯酶釋放到尿中所致;
紅細胞 ,由于尿液中紅細胞常被破壞而釋放出血紅蛋白,多發(fā)生于腎病患者,尿中含有對熱不穩(wěn)定酶、 肌紅蛋白或菌尿。
② 分析儀法(-
10、),鏡檢法(+):
白細胞,腎移植排異反應, 尿中以L為主,另外尿液中也可以 M為主;
紅細胞,可發(fā)生在尿液中含有大量維生素 C (> 100mg/L)或試帶失效。
【習題】
尿液干化學試帶 11 項是在 10 項的基礎(chǔ)上加上
A. 白細胞酯酶
B. 比密
C. 維生素 C
D. 亞硝酸鹽
E. pH
『正確答案』 C 『答案解析』尿液干化學試帶 11 項是在 10 項的基礎(chǔ)上加上維生素 C。
尿試帶法是檢測尿中白細胞中哪類細胞的酯酶
A. 單核細胞
B. 中性粒細胞
C. 淋巴細胞
D. 嗜酸性粒細胞
E. 嗜堿性粒細胞
『正確答案』 B 『答案解析』尿試帶
11、法是檢測尿中白細胞中中性粒細胞的酯酶。
維生素C (抗壞血酸)可使下列哪一種測定產(chǎn)生假陽性
A. 酶法葡萄糖測定
B. 班氏法葡萄糖測定
C. 酶法膽固醇測定
D. 酶法三酰甘油測定
E. JG 法測定血清膽紅素
『正確答案』 B 『答案解析』班氏法是基于銅還原的原理,尿液內(nèi)所有還原糖(葡萄糖、乳糖、半乳糖等)和所有還 原性物質(zhì)(如維生素 C等)都起反應。用干化學法測定結(jié)果為陰性的標本,如用班氏法則可能呈現(xiàn)陽 性結(jié)果。
下列不屬于尿有形成分分析儀的定量參數(shù)是
A. 紅細胞
B. 白細胞
C. 上皮細胞
D. 管型
E. 結(jié)晶
『正確答案』 E
『答案解析』定量參數(shù)主要包括:紅細胞( RBC/卩I)、白細胞(WBC/卩I )、上皮細胞(EC/卩I )、 管型(CAST/ I )、細菌(BACT/卩 I )。