《2017-2018學(xué)年高中生物 專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)優(yōu)化練習(xí) 新人教版選修1 .doc》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2017-2018學(xué)年高中生物 專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)優(yōu)化練習(xí) 新人教版選修1 .doc（6頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 一、選擇題 1．下列關(guān)于培養(yǎng)基的說法，正確的是(　　) A．任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子 B．培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 C．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基 D．配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各種養(yǎng)分的濃度和比例 解析：不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同，如自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不需要加碳源，自生固氮菌的培養(yǎng)基不需要加氮源。按不同的分類標(biāo)準(zhǔn)，培養(yǎng)基可有不同的種類和作用，其中固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基里加入瓊脂等凝固劑配制而成的。配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各種養(yǎng)分的濃度和比例。 答案：D 2．下列操作與消毒滅菌無關(guān)的是(　　) A．接種前用酒精燈火焰灼燒接種環(huán) B．接種前用酒精擦拭雙手 C．將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D．接種在酒精燈的火焰旁完成 解析：接種用具、器皿、空氣中都存在大量微生物，必須嚴(yán)格地消毒滅菌。A、B、D三項(xiàng)都是實(shí)驗(yàn)操作過程中消毒或滅菌的措施。將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)與滅菌無關(guān)。 答案：C 3．培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是(　　) ①化學(xué)消毒?、谧茻郎缇、鄹蔁釡缇、茏贤饩€消毒?、莞邏赫羝麥缇、薨褪舷? A．⑤③②①④⑥ 　　　　　　 B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 解析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底地滅菌的效果；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；為不破壞牛奶中的營養(yǎng)成分，可采用巴氏消毒。 答案：A 4．采用干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照射等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌(　　) A．接種環(huán)、吸管、培養(yǎng)基、接種室 B．吸管、接種環(huán)、培養(yǎng)基、接種箱 C．培養(yǎng)基、吸管、接種環(huán)、接種箱 D．培養(yǎng)皿、吸管、培養(yǎng)基、雙手 解析：干熱滅菌是將滅菌物品放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170 ℃下加熱1～2 h，適用于耐高溫且需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等；灼燒滅菌是利用酒精燈火焰的充分燃燒層滅菌，如接種針、接種環(huán)等；高壓蒸汽滅菌用高壓蒸汽滅菌鍋，一般在壓力為100 kPa，溫度為121 ℃的條件下，維持15～30 min，主要用于培養(yǎng)基滅菌；紫外線照射適用于物體表面滅菌和空氣滅菌，如接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)等，使用前用紫外線照射約30 min。 答案：B 5．做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是(　　) A．高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋 B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D．用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上 解析：在高壓滅菌的操作過程中，加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待壓力表的壓力降到零時(shí)，打開放氣閥，旋松螺栓，打開蓋子。倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后，再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中，一般在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。 答案：D 6．下列有關(guān)平板劃線法操作的敘述，不正確的是(　　) A．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種 C．在每一區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液 D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)胞污染環(huán)境和感染操作者 解析：在用平板劃線法分離大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)中，接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種；劃線結(jié)束后仍需灼燒接種環(huán)，是為了避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線開始，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端。 答案：C 7．為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是(　　) A．對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法 B．臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上 C．臨時(shí)保藏菌種容易被污染或產(chǎn)生變異 D．對于需要長期保存的菌種，可以采用低溫－4 ℃保藏的方法 解析：對于需要長期保存的菌種，可采用甘油管藏法，即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后滅菌，將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20 ℃的冷凍箱中保存。 答案：D 8．將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱的目的是(　　) A．對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用 B．對比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染 C．沒必要放入未接種的培養(yǎng)基 D．為了下次接種時(shí)再使用 解析：對未接種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，起到對照作用，可確定培養(yǎng)基是否被雜菌污染。 答案：B 9．用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)(　　) ①可以用相同的培養(yǎng)基?、诙夹枰褂媒臃N針進(jìn)行接種　③都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種?、芏伎梢杂脕碛?jì)數(shù)活菌 A．①② B．③④ C．①③ D．②④ 解析：平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基；平板劃線法采用接種針或接種環(huán)進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作；進(jìn)行接種操作時(shí)，要進(jìn)行無菌操作，需要在酒精燈火焰旁接種，避免空氣中的微生物污染培養(yǎng)基；平板劃線法一般用于分離菌體而不能計(jì)數(shù)活菌。 答案：C 10．下面是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列敘述正確的是(　　) A．在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌 B．劃線操作時(shí)完全打開皿蓋，劃完立即蓋上 C．接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的 D．第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要連接起來，以便比較前后的菌落數(shù) 解析：在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌；進(jìn)行劃線操作時(shí)，左手將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋；注意接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的；第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連。 答案：C 11．下列關(guān)于倒平板及對菌種純化的說法正確的是(　　) A．倒平板時(shí)左手將滅過菌的培養(yǎng)皿蓋完全打開，右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿(約10～20 mL)，左手立即蓋上培養(yǎng)皿蓋 B．使用已滅菌的接種環(huán)，培養(yǎng)基不需要再滅菌 C．平板冷凝后要將平板倒置，以防皿蓋上的冷卻水倒流入培養(yǎng)基 D．涂布器用火焰灼燒滅菌 解析：倒平板時(shí)用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙而不是直接將蓋完全打開；使用滅過菌的接種環(huán)，培養(yǎng)基仍需進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境或感染操作者；涂布器滅菌時(shí)需沾少量酒精引燃。 答案：C 12．某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理，下列敘述正確的是(　　) A．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌 B．轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線 C．接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D．培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次 解析：在配制培養(yǎng)基的過程中要先滅菌后倒平板；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，殺滅接種環(huán)上殘留的菌種，再進(jìn)行劃線；接種后的培養(yǎng)皿應(yīng)放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；微生物生長、繁殖較快，在培養(yǎng)過程中一般要隔天觀察一次。 答案：B 二、非選擇題 13．請回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與分離的問題： (1)微生物的培養(yǎng)都需要培養(yǎng)基，在配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入的凝固劑一般是________________________________________________________________________。 (2)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般流程包括： ―→―→―→―→ 上述流程中A代表______________，實(shí)驗(yàn)室中這個(gè)步驟常用的方法有________________________________________________________________________； 流程中B代表________，該步驟進(jìn)行的適宜溫度是________ ℃左右。 (3)某微生物純化培養(yǎng)的結(jié)果如下圖甲，在________(填圖中編號(hào))區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生每個(gè)菌落的最初細(xì)菌數(shù)目是________個(gè)，據(jù)圖分析，在培養(yǎng)基上劃線接種時(shí)，劃線的順序依次是________(用編號(hào)表示)。某研究者接種培養(yǎng)后得到的平板如圖乙所示，推測接種時(shí)可能的操作失誤是________________________________________________________________________。 (4)將分離純化的菌種進(jìn)行臨時(shí)保存時(shí)，可在低溫下使用試管斜面保存，但該方法除保存時(shí)間短外，菌種還易________________；若需較長時(shí)間保存菌種，可用的方法是________。 解析：(1)瓊脂是制備固體培養(yǎng)基最常用的凝固劑。(2)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的流程包括：計(jì)算―→稱量―→溶化―→滅菌―→倒平板；灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌是實(shí)驗(yàn)室中常用的滅菌方法。(3)從圖甲可知，②號(hào)區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落；1個(gè)菌落由1個(gè)細(xì)菌繁殖形成；根據(jù)線條數(shù)量可判斷，劃線的順序依次是①―→③―→②。由圖乙可知，菌落分布不均勻，推測接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻。(4)試管斜面保存菌種，菌種易被污染或產(chǎn)生變異，若需較長時(shí)間保存菌種，可采用甘油管藏法。 答案：(1)瓊脂　(2)滅菌　灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌　倒平板　50　(3)②　1?、侉D→③―→②　涂布不均勻　(4)被污染或產(chǎn)生變異　甘油管藏法 14．在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下： ―→―→―→ 請回答下列有關(guān)問題： (1)配制培養(yǎng)基時(shí)，各成分含量確定的原則是________________。不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行的是________________________________________________________________________。 (2)倒平板的適宜溫度是50 ℃左右，原因是__________________。待平板冷凝后，要將平板倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)純化菌株時(shí)，若使用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的________；若使用平板劃線法進(jìn)行接種，應(yīng)選擇的接種工具是圖中的________。 (4)劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有________________________________________________________________________。 (5)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 解析：培養(yǎng)基中各成分含量要根據(jù)微生物的生長需要來確定。微生物生長需要一定的pH，所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調(diào)節(jié)pH。由圖可知，A為接種環(huán)，B為涂布器，C為膠頭滴管，D為接種針，故稀釋平板法應(yīng)選擇的涂布工具應(yīng)是B，平板劃線法應(yīng)選擇的接種工具是A。由題意分析可知，造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個(gè)，一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時(shí)未從第一區(qū)域末端開始。有的大腸桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，因此，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 答案：(1)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量　調(diào)整pH　(2)溫度過高會(huì)燙手，過低培養(yǎng)基又會(huì)凝固　皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染　(3)B　A　(4)①接種環(huán)灼燒后未冷卻?、趧澗€未從第一區(qū)域末端開始　(5)滅菌 15．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。 請回答下列問題： (1)②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基________(填“影響”或“不影響”)細(xì)菌的數(shù)量，如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用________法。 (2)④為對照，微生物在④中不生長，在⑤中生長，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于________________________________________________________________________； 使用________法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是________________________________________________________________________。 (3)試述比較不同菌株降解苯酚能力的大小的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：________________________________________________________________________。 (4)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)根據(jù)微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求，在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質(zhì)以達(dá)到促進(jìn)目的菌生長，抑制或阻止其他雜菌生長的目的，然后用稀釋涂布平板法、平板劃線法或其他方法篩選出單個(gè)目的菌落，再接種培養(yǎng)即可獲得純目的菌。本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，因此實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基應(yīng)是以苯酚為唯一碳源的培養(yǎng)基，②中的培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源；②中不同濃度的碳源影響細(xì)菌數(shù)量；可用稀釋涂布平板法來測定②中活菌數(shù)目。(2)若④是對照組，⑤是實(shí)驗(yàn)組，由于⑤中培養(yǎng)基中苯酚為唯一碳源，④中培養(yǎng)基中沒有加入苯酚做碳源，故微生物在⑤中生長，在④中不生長；獲得單菌落常用的方法是稀釋涂布平板法或平板劃線法。為防止冷凝后形成的水珠落入培養(yǎng)基中污染培養(yǎng)基，要將培養(yǎng)皿倒置。(3)本實(shí)驗(yàn)的目的是比較不同菌株降解苯酚能力的大小，因此本實(shí)驗(yàn)的自變量是不同的菌株，苯酚的起始濃度是無關(guān)變量，因此實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路是：用同樣濃度的苯酚培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后測定培養(yǎng)液中苯酚的含量。(4)在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)中要注意單一變量原則和對照原則，從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實(shí)驗(yàn)過程要嚴(yán)格滅菌，無菌操作可有效防止實(shí)驗(yàn)過程中的雜菌污染。 答案：(1)苯酚　影響　稀釋涂布平板　(2)④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，⑤的培養(yǎng)基加入苯酚作為碳源　稀釋涂布平板法或平板劃線　防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基　(3)用同樣濃度的苯酚培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后測定培養(yǎng)液中苯酚的含量　(4)培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過程無菌操作