《2019屆高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題八 生物技術(shù)實踐學(xué)案.docx》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2019屆高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題八 生物技術(shù)實踐學(xué)案.docx（28頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

專題八　生物技術(shù)實踐 第15講　生物技術(shù)實踐 　1.微生物的分離和培養(yǎng)　2.某種微生物數(shù)量的測定　3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用　4.利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物　5.運用發(fā)酵加工食品的基本方法　6.微生物在其他方面的應(yīng)用　7.從生物材料中提取某些特定的成分 ◎ (1)倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上。() (2)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害。(√) (3)用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時，只要稀釋度足夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。(√) (4)對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法。() (5)醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸。() (6)酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵溫度。() (7)將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大用鹽量。() (8)提煉玫瑰精油的玫瑰花應(yīng)在花開的初期采收，因為此階段的花含玫瑰精油最高。() (9)油水混合物中加入無水硫酸鈉，有利于分離油層。() (10)萃取是利用了芳香油易溶于有機溶劑的特性進(jìn)行提取的一種方法。(√) ,◎ 1．利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)為什么往往比活菌的實際數(shù)目低？ 提示：是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。 2．怎樣準(zhǔn)確鑒定某種細(xì)菌能夠分解尿素？ 提示：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果pH升高，指示劑將變紅。 3．說出利用水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油的原理。 提示：利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層。 1．(2018全國Ⅱ，T37)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}： (1)在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具_(dá)_______(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是________。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________，在照射前，適量噴灑________，可強化消毒效果。 (4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是_________________________________ ______。 解析：(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 (2)煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6 min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30 min或在80℃煮15min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。 (3)因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。 (4)通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。 (5)采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。 答案：(1)可以　(2)在達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少　(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)　消毒液　(4)氯氣　(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 2．(2018全國Ⅰ，T37)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題： (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有_________________________________(答出兩點即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有________________(答出兩點即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是____________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_________________________________。 (4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果： 甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133； 乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。 有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是_________________________________。 解析：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其它微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細(xì)菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)微生物生長需要多種營養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無機鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸。 (3)淀粉遇碘液會變成藍(lán)色，篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。 (4)乙同學(xué)結(jié)果不合理，因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。 答案：(1)細(xì)菌　選擇　(2)碳源、無機鹽　蛋白質(zhì)、核酸　(3)碘液　淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈　(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差 3．(2014全國Ⅱ，T39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是__________________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_________________________________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_______________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 解析：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，通過隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，用來進(jìn)行對照。三個培養(yǎng)基上平均數(shù)為38，所以每升水樣中活菌數(shù)為38101001000＝3.8107。(2)接種環(huán)用灼燒進(jìn)行滅菌。在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。(3)A是平板劃線法，B是稀釋涂布平板法。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長；同時還能使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。 答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板無菌是否合格　3.8107　(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落　(3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì) 4．(2017全國Ⅰ，T37)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列問題： (1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生____________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________________， 但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________________答出兩點即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是___________________________________________________________。 (3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_______________________________(答出兩點即可)。 解析：(1)細(xì)菌分解尿素是由于細(xì)菌體內(nèi)合成脲酶的結(jié)果，尿素是有機物，分解尿素的細(xì)菌是分解者，而不是生產(chǎn)者，只能生產(chǎn)者才能利用CO2作為碳源合成有機物。葡萄糖通常既作為碳源，也可作為能源，作為碳源可轉(zhuǎn)變成其它有機物。 (2)篩選分解尿素的細(xì)菌，通常只能用尿素作為唯一氮源，對于“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”均含有無機氮源。 (3)KH2PO4和Na2HPO4為微生物培養(yǎng)可提供P元素和無機鹽離子如鉀離子和鈉離子。 答案：(1)脲酶　分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物，不能利用CO2來合成有機物　為細(xì)胞生物生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料 (2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用 (3)為細(xì)菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定 5．(2014全國Ⅰ，T39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解，回答下列問題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的____________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)(成分見下表)： 酵母膏 無機鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_________________________________。 解析：(1)葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)纖維素分解菌分離和鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，而培養(yǎng)基甲中沒有瓊脂，是液體培養(yǎng)基，要分離和鑒別纖維素分解菌， 需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基， 培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖　(2)紅　透明圈　(3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR－纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 6．(2016全國Ⅲ，T39)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}： (1)分離純化乳酸菌時，首先需要用____________對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是____________________________________________________________。 (2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有___________和____________。分離純化時應(yīng)挑選出________________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20 ℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的____________________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。 解析：(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋；進(jìn)行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。若直接培養(yǎng)，由于泡菜濾液中菌的濃度高，則很難分離得到單菌落。 (2)由題意可知，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。由此可推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌；根據(jù)產(chǎn)酸菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明圈的原理，分離純化時應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌，然后用平板劃線法進(jìn)一步分離純化。 (3)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。即將1mL培養(yǎng)的菌種轉(zhuǎn)移到已滅菌的盛有1mL甘油的甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20℃的冷凍箱中保存。所以乳酸菌在－20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油。 答案：(1)無菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落　(2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸　具有透明圈　(3)甘油 7．(2015全國Ⅰ，T39)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問題： (1)顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通常可用于________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以________為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用________直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用________法進(jìn)行計數(shù)。 (4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測得相同時間內(nèi)，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個溫度中，________℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞________℃設(shè)計后續(xù)實驗。 解析：(1)油脂可被蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ)染液染成橘黃色(或紅色)。由于微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，故采用萃取法。(2)能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B可以分解脂肪，故可以以脂肪為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，不產(chǎn)生脂肪酶的微生物無法生存。(3)微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)；活菌用稀釋涂布平板法，只有活的菌體才能形成菌落。(4)45℃降解10g油脂所需酶量最大，故酶活性最?。?0℃溫度下，降解10g油脂所需酶量最小，故酶活性最大，由此可知要想探究該酶的最適溫度需要圍繞40℃溫度設(shè)置溫度梯度進(jìn)行實驗。 答案：(1)蘇丹Ⅲ(或者蘇丹Ⅳ)　萃取法　(2)油脂　(3)血細(xì)胞計數(shù)板　稀釋涂布平板　(4)45　40 考點一　微生物的應(yīng)用 1．微生物純化培養(yǎng)的方法比較 (1)平板劃線操作 (2)稀釋涂布平板操作：先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如圖所示： (1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學(xué)實驗一般會設(shè)置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。 (2)觀察菌落需用固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基要添加瓊脂。 (3)倒平板的溫度一般在50 ℃左右適宜，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。 (4)平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成培養(yǎng)基污染。 (5)平板劃線法只適用于微生物的提純，不適合進(jìn)行計數(shù)，并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純。 (6)利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù)：C/VM(稀釋倍數(shù))。 (7)菌種用甘油管藏法長期保存，保存時菌液中常添加一定量的甘油。 2．把握微生物分離與計數(shù)的兩個實例 (1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù) ①篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 ②測定微生物數(shù)量的常用方法：活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)。 ③過程：土壤取樣→樣品稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。 ④鑒定方法：含酚紅指示劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基→細(xì)菌→出現(xiàn)紅色透明圈，則該菌能分解尿素。 (2)分解纖維素的微生物的分離 ①實驗原理： 即：可通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 ②流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。 微生物的分離與計數(shù) (1)篩選微生物的“兩”種選擇培養(yǎng)基 ①以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基：篩選尿素分解菌。 ②富含纖維素的培養(yǎng)基：篩選纖維素分解菌。 (2)鑒別微生物的“兩”種鑒別培養(yǎng)基 ①添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基：尿素分解菌可使該培養(yǎng)基變紅。 ②添加剛果紅的培養(yǎng)基：纖維素分解菌的菌落周圍產(chǎn)生透明圈。 (3)微生物計數(shù)的“兩”種方法 ①直接計數(shù)法：顯微鏡直接計數(shù)法。 ②間接計數(shù)法：稀釋涂布平板法(活菌計數(shù)法)，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。 1．(2016全國Ⅰ，T39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下： ①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作無菌平板； ③設(shè)置空白對照組和若干實驗組，進(jìn)行相關(guān)操作； ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于________________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________________。 (2)步驟③中，實驗組的操作是______________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________________(填“正確”或“不正確”)。 解析：(1)依據(jù)配制培養(yǎng)基的成分可知，該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于牛肉膏、蛋白胨。因為該實驗是 “用平板收集教室空氣中的微生物”，所使用的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，配制時，需加入凝固劑，據(jù)此推知，該培養(yǎng)基中的成分X通常是瓊脂。 (2)依題意可知，該實驗的目的是，用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。所以步驟③中，實驗組的操作是，將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間，以收集教室不同高度空氣中的微生物。 (3)設(shè)置的空白對照組，在整個實驗過程中沒有用來收集空氣中的微生物，若空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，說明培養(yǎng)基的配制是不成功的，在此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，所以若將30(即36－6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法不正確。 答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂　(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間　(3)污染　不正確 2．(2018安徽六校教育研究會聯(lián)考)為解決塑料袋造成的“白色污染”問題，某同學(xué)試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解的目的菌，請根據(jù)有關(guān)知識回答下列問題： (1)為培養(yǎng)該目的菌，需要配制出供其________所需的營養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是________________。在接種前需要檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，方法是_________________________________。 (2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，我們可在接種之前進(jìn)行________培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度。實驗室常用的接種方法有________和________。 (3)該同學(xué)在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)分別為24、23、25，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是________個(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)。用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目________。 解析：(1)培養(yǎng)基可以為目的菌的生長繁殖提供營養(yǎng)物質(zhì)，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基是否被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基在37℃(或適宜溫度)恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成。 (2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，在接種之前用以聚乙烯塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度；實驗室常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。 (3)根據(jù)題意可知，每克樣品中的菌落數(shù)＝平板上菌落數(shù)的平均值體積稀釋倍數(shù)＝(24＋23＋25)0.2104＝1.2106；由于細(xì)菌會相互重疊，因此用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少。 答案： (1)生長繁殖　高壓蒸汽滅菌法　將未接種的培養(yǎng)基在37℃(或適宜溫度)恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間(或1～2天)，觀察是否有菌落生成　(2)選擇　平板劃線法　稀釋涂布平板法　(3)1.2106　少 3．對微生物進(jìn)行分離培養(yǎng)，實驗基本步驟如下： (1)圖中步驟X表示________。 (2)某興趣小組嘗試對家庭飲用水中的大腸桿菌含量進(jìn)行檢測，用濾膜對家庭飲用水過濾后，將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上進(jìn)行檢測，若有大腸桿菌，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上會出現(xiàn)____________色菌落，從功能上看，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基被稱做____________培養(yǎng)基。 (3)分離幽門螺桿菌配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和______________指示劑，這是因為幽門螺桿菌含有______________；若有幽門螺桿菌，則菌落周圍會出現(xiàn)______________色透明圈。臨床上常讓病人喝一定量用14C標(biāo)記的尿素，檢測呼出的氣體中有無14CO2來判斷是否感染了幽門螺桿菌(14C呼氣試驗)，其基本原理是_________________________________。 解析：(1)滅菌、倒平板后的X步驟表示接種。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上，菌液稀釋的目的是為了獲得單一菌落。 (2)測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目的方法：將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。從功能上看，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基被稱做鑒別培養(yǎng)基。 (3)由于幽門螺桿菌在分解尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，pH升高，所以可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑和尿素，若有幽門螺桿菌，尿素被分解后產(chǎn)生氨，pH升高，指示劑變紅，則菌落周圍會出現(xiàn)紅色透明圈。臨床上常讓病人喝一定量用14C標(biāo)記的尿素，檢測呼出的氣體中有無14CO2來判斷是否感染了幽門螺桿菌(14C呼氣試驗)，其基本原理是幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2。 答案：(1)接種　(2)黑　鑒別(培養(yǎng)基)　(3)酚紅　脲酶　紅　幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2 4．(2018安徽滁州期末)科學(xué)家篩選培育良種纖維素分解菌對玉米芯進(jìn)行降解，并進(jìn)一步利用酵母菌發(fā)酵制備乙醇?；卮鹣铝袉栴}： (1)篩選纖維素分解菌時，一般在以________為唯一碳源的培養(yǎng)基中添加染料，通過是否產(chǎn)生________來篩選纖維素分解菌。 (2)請用文字?jǐn)⑹鰣D1中分解玉米芯絲菌用量與還原糖濃度的關(guān)系______________________________________________。 (3)圖2表示酵母菌量與酒精產(chǎn)生量的關(guān)系，酵母菌接種量超過40mL后，酒精產(chǎn)量反而減少的原因是________________。為確定發(fā)酵罐內(nèi)酵母菌的數(shù)量，常用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)量，統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小的原因是__________________________________。 解析：(1)纖維素分解菌具有分解纖維素的能力，因此其培養(yǎng)基中一般添加纖維素作為唯一碳源；剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復(fù)合物就無法合成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 (2)根據(jù)圖1中的曲線變化分析，隨著纖維素分解菌用量的增加，還原糖濃度先增加后降低，即在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當(dāng)菌用量過大時，還原糖含量下降。 (3)圖2顯示，酵母菌接種量超過40mL后，酒精產(chǎn)量反而減少，其主要原因是酵母菌接種量過大導(dǎo)致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動；稀釋涂布平板法統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)量時，由于兩個或多個細(xì)菌形成一個菌落，所以統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小。 答案：(1)纖維素　透明圈　(2)在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當(dāng)菌用量過大時，還原糖含量下降　(3)酵母菌接種量過大導(dǎo)致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動　兩個或多個細(xì)菌形成一個菌落 5．(2018河南中原名校第六次質(zhì)考)多氯聯(lián)苯(PCB)是一種對人體有害的有機物，某科技小組欲從受PCB污染的土壤中分離出能分解PCB的細(xì)菌。請回答下列問題： (1)要從受PCB污染的土壤中分離出能分解PCB的細(xì)菌，應(yīng)配制以____________作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基；配制培養(yǎng)基時用到的玻璃器皿需用____________進(jìn)行滅菌。 (2)分離前可通過選擇培養(yǎng)增加土壤中PCB分解菌的濃度，選擇培養(yǎng)時需要不斷震蕩錐形瓶的目的是_________________________________ ______。 (3)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計PCB分解菌的濃度時，常需同時培養(yǎng)空白培養(yǎng)基，其目的是________________。若實驗中發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上生長有3個菌落，為準(zhǔn)確測定樣液中PCB分解菌的濃度，則需要_________________________________。 (4)在純化土壤中的PCB分解菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是____________，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？_________________________________。 解析：(1)分析題意可知，要從土壤中篩選出能分解PCB的細(xì)菌，應(yīng)采用以PCB作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基；實驗中的玻璃器皿一般采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。 (2)培養(yǎng)PCB分解菌時，需要不斷的震蕩錐形瓶，目的是為了讓PCB分解菌充分與培養(yǎng)液接觸，進(jìn)而充分利用營養(yǎng)物質(zhì)。 (3)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計PCB分解菌的濃度時，為了檢測所用培養(yǎng)基滅菌是否徹底，需要培養(yǎng)空白培養(yǎng)基作為對照。若實驗中發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上生長有3個菌落，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，為準(zhǔn)確測定樣液中PCB分解菌的濃度，則需要重新配制培養(yǎng)基進(jìn)行實驗。 (4)若PCB分解菌的菌落在培養(yǎng)基上連成一片，說明菌液濃度過高，則應(yīng)該對菌液進(jìn)行梯度稀釋。 答案：(1)多氯聯(lián)苯(PCB)　干熱滅菌法　(2)讓PCB分解菌充分利用營養(yǎng)物質(zhì)　(3)檢測所用培養(yǎng)基滅菌是否徹底　重新配制培養(yǎng)基進(jìn)行實驗　(4)菌液濃度過高　對菌液進(jìn)行梯度稀釋(加大稀釋倍數(shù)) 考點二　傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1．果酒和果醋的制作 2．腐乳的制作 (1)制作原理 (2)實驗流程及影響因素 3.泡菜的制作 1．把握控制雜菌的“四大措施” (1)通過發(fā)酵條件控制雜菌。 ①無氧發(fā)酵時的無氧環(huán)境可以抑制好氧菌。 ②乳酸菌發(fā)酵、酒精發(fā)酵形成的酸性環(huán)境抑制雜菌繁殖。 (2)利用鹽控制雜菌：如腐乳的制作。 (3)利用酒精控制雜菌：如果酒、腐乳的制作。 (4)利用香辛料控制雜菌：如腐乳、泡菜的制作。 2．乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量隨時間變化的曲線模型構(gòu)建 1．(2018全國Ⅲ，T37)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題： (1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是_______________________________________。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進(jìn)________(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)________(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。 (3)制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是____________________________________________________________。 解析：(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細(xì)胞增殖快；若進(jìn)行無氧培養(yǎng)，進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，增殖慢。 (3)制作面包時，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔。 答案：(1)麥芽汁瓊脂　高壓蒸汽　由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體　(2)菌體快速增殖　乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟 2．(2016全國Ⅱ，T39)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的。回答下列問題： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的____________中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與____________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗；過程③在酵母菌細(xì)胞的____________中進(jìn)行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在____________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度____________(填“低于”或“高于”)第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于________核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中________(填“含有”或“不含有”)線粒體。 解析：(1)圖示中的過程①和②分別表示無氧呼吸的第一、第二階段，其場所均為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)；橙色的重鉻酸甲溶液在酸性條件下與乙醇(酒精)反應(yīng)變成灰綠色。過程③表示有氧呼吸的第二、第三階段，其場所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜，即過程③在酵母菌細(xì)胞的線粒體中進(jìn)行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度快。 (2)醋酸桿菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進(jìn)行旺盛的生命活動，因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，需要在有氧條件下才能完成。 (3)第一階段即果酒的制作，所控制的溫度范圍是18～25℃，第二階段即果醋的制作，所控制的溫度范圍是30～35℃，所以第一階段的溫度低于第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于原核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器。 答案：(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) 　重鉻酸鉀　線粒體　快　(2)有氧(3)低于　(4)原　不含有 3．(2017全國Ⅱ，T37)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}： (1)該實驗的自變量是________、________。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是________。 (3)如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是____________________________________________________________。 (4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開_______，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開________________________________。 解析：(1)該實驗的自變量是菌種、發(fā)酵時間。 (2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌。 (3)如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間。 (4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视汀? 答案：(1)菌種 發(fā)酵時間　(2)好氧菌　(3)延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間　(4)氨基酸和肽　脂肪酸和甘油 4．(2018安徽江淮十校4月聯(lián)考)下圖為蘋果醋的工業(yè)生產(chǎn)流程，以及實驗室分離、純化發(fā)酵菌的方法步驟。請回答以下問題： ＋―→ 純化發(fā)酵菌的方法步驟：配制培養(yǎng)基→培養(yǎng)基滅菌→接種→培養(yǎng)→挑選符合要求的菌落。 (1)在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是____________，因此需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使破壞DNA的結(jié)構(gòu)，也能使蛋白質(zhì)_________________________________。 (2)上圖中①過程與②過程需要接種的發(fā)酵菌分別是________________。 (3)某同學(xué)計劃統(tǒng)計食醋中該發(fā)酵菌的總數(shù)，他選用10－4、10－5、10－6稀釋液進(jìn)行涂布，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從對照實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照組是____________，設(shè)置對照組的目的是_________________________________。 (4)對同一濃度的發(fā)酵菌稀釋液，分別用血球計數(shù)板計數(shù)和稀釋涂布平板法計數(shù)，若不存在實驗誤操作， 則前者的數(shù)量________(填“多于”、“等于”或“小于”)后者，其原因是_________________________________。 解析：(1)微生物培養(yǎng)時，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵；對于培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要進(jìn)行滅菌處理，人的雙手需要消毒處理；空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能讓蛋白質(zhì)變性，同時還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)。 (2)圖中①過程是制作果酒的過程，使用的微生物菌種是酵母菌；②過程是制作果醋的過程，使用的微生物菌種是醋酸菌。 (3)實驗設(shè)計過程應(yīng)遵循對照原則，該實驗還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，以證明培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染。 (4)血球計數(shù)板計數(shù)法，統(tǒng)計的是直接看到的細(xì)菌，無論死活都會被記錄上。相比之下平板計數(shù)法只能統(tǒng)計活的且能在所使用的平板上生長繁殖的細(xì)菌。此外平板計數(shù)法統(tǒng)計的是菌落數(shù)而不是細(xì)菌的個數(shù)，有些菌落連接在一起，那么只能形成一個菌落，計數(shù)偏小。 答案：(1)防止外來雜菌的入侵　變性(空間結(jié)構(gòu)破壞)　(2)酵母菌和醋酸菌　(3)不接種的空白培養(yǎng)基　證明培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染　(4)多于　有些菌落連接在一起，計數(shù)偏小 5．(2018安徽江南十校檢測)乳酸菌和我們的生活緊密相連，現(xiàn)欲從泡菜濾液中分離乳酸菌。請回答下列相關(guān)問題。 (1)要純化培養(yǎng)乳酸菌，在配制固體培養(yǎng)基時，除了要加入各種營養(yǎng)物質(zhì)外，一般還要加入________。培養(yǎng)基中的碳酸銨________(能/不能)為乳酸菌提供碳源，原因是_________________________________________________________。 (2)純化培養(yǎng)乳酸菌時，可采用________________法進(jìn)行接種。為了能鑒別乳酸菌菌落，往往在配制培養(yǎng)基時加入碳酸鈣，原因是_________________________________。 (3)若要調(diào)查統(tǒng)計泡菜濾液中微生物的濃度，要設(shè)置空白對照組和多個實驗組，若某個實驗組平板上菌落平均數(shù)為46個/平板，而空白對照組中一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結(jié)果說明此次調(diào)查出現(xiàn)了________現(xiàn)象。那么這次調(diào)查數(shù)據(jù)如何處理_________________________________。 解析：(1)純化培養(yǎng)乳酸菌，需要固體培養(yǎng)基。在配制固體培養(yǎng)基時，除了要加入各種營養(yǎng)物質(zhì)外，一般還要加入瓊脂。乳酸菌為異養(yǎng)生物只能利用含碳有機物，而碳酸銨為無機物，乳酸菌不能利用。 (2)純化培養(yǎng)乳酸菌時，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。由于乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈，因此為了能鑒別乳酸菌菌落，往往在配制培養(yǎng)基時加入碳酸鈣。 (3)空白對照組中一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結(jié)果說明此次調(diào)查出現(xiàn)了(雜菌)污染現(xiàn)象，為了避免出現(xiàn)較大誤差，應(yīng)該丟棄本次調(diào)査數(shù)據(jù)，在防止污染情況下重新實驗，獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。 答案：(1)瓊脂　不能　乳酸菌為異養(yǎng)生物只能利用含碳有機物　(2)平板劃線法或稀釋涂布平板　乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈　(3)(雜菌)污染　丟棄本次調(diào)査數(shù)據(jù)，在防止污染情況下重新實驗，獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù) 6．我國利用不同微生物的發(fā)酵作用來制作果酒、果醋、腐乳和酸奶等食品的歷史悠久，一般稱作傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識?；卮鹨韵聠栴}： (1)制作高粱酒和蘋果醋要用到的微生物分別是_________________________________。 (2)果酒和果醋的制作： ①傳統(tǒng)發(fā)酵時發(fā)酵液未經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理，雜菌卻不能正常生長，這是由于果酒發(fā)酵的________條件抑制了雜菌的生長。與果酒發(fā)酵不同，果醋發(fā)酵需要在________條件下進(jìn)行。 ②溫度較高時果酒發(fā)酵時間可縮短，原因是_____________________________。 ③喝剩的葡萄酒放置一段時間后變酸的原因是_________________________________。 (3)腐乳和乳酸發(fā)酵： ①腐乳的色香味主要是由____________決定的。 ②久置變質(zhì)的酸奶不能食用，原因是_________________________________。 泡菜制作過程中常會產(chǎn)生大量的亞硝酸鹽，亞硝酸鹽會________(填“直接”或“間接”)致癌。 解析：(1)制作果酒利用的是酵母菌的無氧呼吸，而制作果醋利用的是醋酸菌的有氧呼吸，所以分別是酵母菌和醋酸菌。 (2)果酒和果醋的制作： ①傳統(tǒng)發(fā)酵時發(fā)酵液未經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理，雜菌卻不能正常生長，這是由于果酒發(fā)酵時需要的無氧和酸性環(huán)境會抑制其它雜菌的生長。果醋發(fā)酵是一定需要氧氣的，且醋酸菌生長的溫度要高于酵母菌的溫度，醋酸菌適宜的溫度在30－35℃。 ②溫度較高時果酒發(fā)酵時間可縮短，原因是溫度較高時發(fā)酵酶活性增強、發(fā)酵速度更快。 ③喝剩的葡萄酒放置一段時間后變酸的原因是在有氧氣的情況下將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿帷? (3)①腐乳的色香味主要是由鹵湯來決定的。 ②久置變質(zhì)的酸奶不能食用，原因是此時其他有害微生物大量繁殖，并產(chǎn)生了對人體有害的物質(zhì)。在泡菜制作過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽，而其可以作為化學(xué)因素直接致癌。 答案：(1)酵母菌和醋酸菌　(2)①無氧、pH呈酸性　供氧充足、溫度較高?、跍囟容^高時發(fā)酵酶活性增強、發(fā)酵速度更快?、劬凭D(zhuǎn)變成了醋酸[C2H5OH＋O2→CH3OOH(醋酸)＋H2O]　(3)①鹵湯　②其他有害微生物大量繁殖，并產(chǎn)生了對人體有害的物質(zhì)　直接 考點三　從生物材料中提取某些特定的成分 1．三種生物成分的提取方法、原理及步驟的比較 提取 物質(zhì) 提取方法 提取原理 步驟 玫瑰 精油 蒸餾法 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來 ①水蒸氣蒸餾；②分離油層(加NaCl)； ③除水過濾(加無水Na2SO4) 橘皮 精油 壓榨法 通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油 ①石灰水浸泡、漂洗； ②壓榨、過濾、靜置； ③再次過濾 胡蘿 卜素 萃取法 使提取物溶解在有機溶劑中，蒸發(fā)后得到提取物 ①粉碎、干燥； ②萃取、過濾； ③濃縮 2．把握物質(zhì)分離的5種方法 (1)分離油水混合物：分液法。 (2)除去固體物和殘渣：過濾法。 (3)除去液體中質(zhì)量較小的固體殘留物：離心法。 (4)除去芳香油中的殘留水分：加入無水硫酸鈉后過濾的方法。 (5)除去萃取液中的有機溶劑：蒸餾法。 3．明確冷凝管的2種用法 (1)冷凝收集油水混合物：如玫瑰精油的提取。 (2)冷凝回流：如胡蘿卜素的提取。 植物有效成分提取應(yīng)注意的五個關(guān)鍵點 (1)水蒸氣蒸餾過程中可用明火加熱，萃取過程應(yīng)該避免明火加熱，采取水浴加熱，這是因為有機溶劑都是易燃物，直接用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。 (2)在用水蒸氣蒸餾法制取玫瑰精油的過程中，油水混合物中要加入NaCl的目的是增大水的密度，有利于玫瑰精油與水的分層。加入無水Na2SO4的目的是吸收精油中殘留的水分。 (3)蒸餾時若溫度太高，時間太短，產(chǎn)品品質(zhì)較差，若提高產(chǎn)品品質(zhì)，可適當(dāng)延長蒸餾時間。 (4)橘皮壓榨前，可在石灰水中浸泡10 h以上，既防止壓榨時滑脫，提高出油率，又不會在過濾時堵塞篩眼。 (5)萃取時一般來說原料顆粒小，萃取溫度高，時間長，則提取的物質(zhì)能夠充分溶解，萃取效果較好。 1．(2017全國Ⅲ，T37)綠色植物甲含有物質(zhì)W，該物質(zhì)為無色針狀晶體，易溶于極性有機溶劑，難溶于水，且受熱、受潮易分解。其提取流程為：植物甲→粉碎→加溶劑→振蕩→收集提取液→活性炭處理→過濾去除活性炭→蒸餾(含回收溶劑)→重結(jié)晶→成品。回答下列問題： (1)在提取物質(zhì)W時，最好應(yīng)選用的一種原料是____________(填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”)的植物甲，不宜選用其他兩種的原因是_________________________________。 (2)提取物質(zhì)W時，振蕩的作用是_________________________________。 (3)活性炭具有很強的吸附能力，在提取過程中，用活性炭處理提取液的目的是_________________________________。 (4)現(xiàn)有丙酮(沸點56 ℃)、乙醇(沸點約78 ℃)兩種溶劑，在提取物質(zhì)W時，應(yīng)選用丙酮作用提取劑，理由是____________________________________________________________。 (5)該實驗操作過程中應(yīng)注意的事項是______________________________________________________(答出兩點即可)。 解析：(1)依據(jù)題干信息(受熱、受潮易分解)，進(jìn)行推斷，即可得知最好應(yīng)選用的一種原料是晾干的植物甲。 (2)振蕩易于溶解，是基本實驗知識。 (3)題干信息，活性炭具有吸附能力，雜質(zhì)色素易被吸附。 (4)根據(jù)題干信息，受熱易分解，所以選擇沸點低的丙酮 (5)根據(jù)題干信息，受熱易分解，所以注意溫度控制；用的丙酮，丙酮揮發(fā)，對人體有害，所以通風(fēng)；減少W分解，所以操作要快。 答案：(1)晾干　高溫烘干過程中，植物甲中的物質(zhì)W易被破壞；新鮮的植物甲含水量高，用于提取的極性有機溶劑會被稀釋，進(jìn)而降低對物質(zhì)W的提取效果　(2)使原料和溶劑充分混勻　(3)去除提取液中的色素　(4)丙酮沸點低于乙醇，蒸餾時物質(zhì)W分解較少　(5)在溫度較低的情況下操作，防火 2．(2015全國Ⅱ，T39)回答與胡蘿卜有關(guān)的問題： (1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是________(填“α－胡蘿卜素”或“β－胡蘿卜素”或“γ－胡蘿卜素”)，該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子________，后者缺乏會引起人在弱光下視物不清的病癥，該疾病稱為________，胡蘿卜素是________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。 (2)工業(yè)生產(chǎn)上，用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時，________(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。 (3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應(yīng)選用其中的________作為胡蘿卜素的萃取劑，不選用另外一種的理由是__________________________________________。 解析：(1)胡蘿卜中含有的主要是β－胡蘿卜素，β－胡蘿卜素可在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變成維生素A。夜盲癥是由于維生素A缺乏導(dǎo)致。胡蘿卜素沒有揮發(fā)性。 (3)作為萃取胡蘿卜素的萃取劑要有較高的沸點、能充分溶解胡蘿卜素且與水不混溶。胡蘿卜素雖可溶于乙醇，但乙醇是水溶性有機溶劑，萃取中能與水混溶而影響萃取效果，所以不能用乙醇做萃取劑。 答案：(1)β－胡蘿卜素　維生素A　夜盲癥　非揮發(fā)性　(2)需要　(3)乙酸乙酯　萃取胡蘿卜素的有機溶劑應(yīng)不與水混溶，而乙醇為水溶性有機溶劑 3．(2018湖北孝感期末)玫瑰精油在玫瑰花瓣中含量最高，工業(yè)上常以玫瑰花瓣為原料，采用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰精油?；卮鹣铝袉栴}： (1)采用水蒸氣蒸餾時，水蒸氣能將玫瑰精油從花瓣中攜帶出來，是因為玫瑰精油具有________的特點。 (2)水蒸氣蒸餾后，能收集到乳白色的油水混合物。向油水混合物中加入________，就會出現(xiàn)明顯的油層與水層。分離出油層，一般可加入一些________，以吸收油層中的水分。 (3)蒸餾時，會存在許多因素影響玫瑰精油的產(chǎn)量。下圖是當(dāng)玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量比為1∶4時，出油率與蒸餾時間的變化關(guān)系，一般蒸餾時間最好控制在________h。 (4)植物芳香油的提取方法有多種，具體采用哪種方法，要根據(jù)植物原料的特點來決定。提取玫瑰精油________(填“可以”或“不可以”)采用有機溶劑萃取法，理由是_________________________________ ______。 解析：(1)玫瑰精油化