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2 2動(dòng)物細(xì)胞工程 知識(shí)梳理 一 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1 原理 細(xì)胞增殖 2 操作流程 胰蛋白酶 細(xì)胞懸液 原代培養(yǎng) 胰蛋白酶 3 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件 1 無(wú)菌 無(wú)毒的環(huán)境 殺菌消毒 培養(yǎng)過(guò)程加一定量的 殺菌 定期更換培養(yǎng)液 清除代謝產(chǎn)物 2 充足的營(yíng)養(yǎng)供給 微量元素 無(wú)機(jī)鹽 糖 氨基酸 促生長(zhǎng)因子 等 3 適宜的溫度 4 適宜的pH 培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具 抗生素 血清 血漿 36 5 0 5 7 2 7 4 95 5 二 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1 原理 動(dòng)物細(xì)胞核的 2 供體和受體 1 供體細(xì)胞 一般選優(yōu)良動(dòng)物的傳代 以內(nèi)的細(xì)胞 2 受體細(xì)胞 去核的 全能性 10代 減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞 3 過(guò)程 細(xì)胞培養(yǎng) 重組細(xì)胞 去核 供體 三 動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體1 動(dòng)物細(xì)胞融合 1 原理 2 融合方法 電激等 3 意義 突破了 的局限 克服了不同生物 的障礙 成為研究細(xì)胞遺傳 細(xì)胞免疫 腫瘤和生物新品種培育的重要手段 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 聚乙二醇 PEG 滅活的病毒 有性雜交方法 遠(yuǎn)緣 雜交 2 單克隆抗體的制備 雜交瘤細(xì)胞 單克隆抗體 盲點(diǎn)判斷 1 與植物細(xì)胞一樣 動(dòng)物細(xì)胞也可培養(yǎng)成一個(gè)動(dòng)物體 2 二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的 3 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育 4 克隆動(dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完全相同 5 2010 浙江高考T4B 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變 6 2010 廣東高考T24B 技術(shù) 或儀器 與應(yīng)用匹配正確的是雜交瘤技術(shù) 制備單克隆抗體 盲點(diǎn)判斷點(diǎn)撥 1 動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核 移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中 重組并發(fā)育成胚胎 才能發(fā)育為一個(gè)動(dòng)物體 2 二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的 只有少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變 才能無(wú)限增殖 3 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得早期胚胎 才能進(jìn)一步培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 4 克隆動(dòng)物的性狀主要由提供細(xì)胞核的供體動(dòng)物決定 但由細(xì)胞質(zhì)基因決定的性狀則由受體細(xì)胞決定 5 克隆培養(yǎng)法中細(xì)胞都是由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)有絲分裂而得到的 所以細(xì)胞的基因型相同 多數(shù)不會(huì)發(fā)生改變 6 雜交瘤技術(shù)是指將小鼠的具有無(wú)限增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞與特定B淋巴細(xì)胞結(jié)合 產(chǎn)生大量的單克隆抗體的技術(shù) 網(wǎng)絡(luò)概覽 考點(diǎn)一植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植的比較 1 區(qū)別 2 聯(lián)系 三項(xiàng)技術(shù)都利用到細(xì)胞的培養(yǎng) 涉及有絲分裂 植物組織培養(yǎng)和核移植獲得新個(gè)體本質(zhì)上都屬無(wú)性繁殖 3 相關(guān)概念 1 細(xì)胞貼壁 懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上 2 接觸抑制 細(xì)胞數(shù)目不斷增多 當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí) 細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象 3 原代培養(yǎng) 動(dòng)物組織通過(guò)酶或機(jī)械方法分散成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行的初次培養(yǎng) 4 傳代培養(yǎng) 用胰蛋白酶等處理后進(jìn)行的分瓶擴(kuò)大培養(yǎng) 高考警示 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 1 植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程 但植物細(xì)胞可以先分裂再分化 而動(dòng)物細(xì)胞只分裂不分化 2 植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)成新個(gè)體 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能培養(yǎng)出一團(tuán)細(xì)胞 不能培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體 通關(guān)題組 1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程 2014 亳州模擬 下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述 正確的是 A PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞 經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體B 使用冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi) 以保持細(xì)胞正常的二倍體核型C 在高倍顯微鏡下觀察發(fā)生基因突變的細(xì)胞比例可推知某化學(xué)藥品的毒性D 用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后 可用無(wú)菌水稀釋制成細(xì)胞懸浮液 解題指南 解答本題需關(guān)注以下兩點(diǎn) 1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是獲得細(xì)胞群 2 區(qū)別原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng) 解析 選B PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞 經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞群 為保持細(xì)胞正常的二倍體核型 使用冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi) 細(xì)胞的基因突變不能在高倍顯微鏡下觀察到 用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后 要用特制的培養(yǎng)液稀釋制成細(xì)胞懸浮液 2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植過(guò)程 不同類型的細(xì)胞表達(dá)不同的基因組合 那么不同類型的動(dòng)物細(xì)胞都具有全套基因嗎 科學(xué)家進(jìn)行了如圖所示的克隆研究 代表有關(guān)過(guò)程 a h代表有關(guān)結(jié)構(gòu)或個(gè)體 1 a細(xì)胞的名稱是 過(guò)程 取出的細(xì)胞f是 該細(xì)胞經(jīng)過(guò) 過(guò)程分化成何種h細(xì)胞取決于培養(yǎng)基中加入的 2 對(duì)b的操作方法通常是 若g是能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的羊 則培育g時(shí) 應(yīng)將人生長(zhǎng)激素基因?qū)?讓g進(jìn)行有性生殖會(huì)丟失目的基因 為了盡快獲得大量的生長(zhǎng)激素 你將通過(guò)技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn) 3 如果圖中的細(xì)胞均是人體細(xì)胞 則獲得的h細(xì)胞或器官可用于供體本人組織器官的移植 其優(yōu)點(diǎn)是 4 上述過(guò)程中用到的生物技術(shù)有 列舉兩項(xiàng) 解題指南 解答本題需注意以下三點(diǎn) 1 認(rèn)真識(shí)圖 分清a圖是去核卵母細(xì)胞 小黑點(diǎn)代表細(xì)胞核 2 明確胚胎干細(xì)胞在不同的分化誘導(dǎo)因子的作用下 會(huì)向不同的方向分化 3 識(shí)記將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射技術(shù) 解析 1 圖中a細(xì)胞是去核卵母細(xì)胞 過(guò)程 取出的細(xì)胞f是胚胎干細(xì)胞 胚胎干細(xì)胞具有分化的全能性 但經(jīng)過(guò) 過(guò)程分化成何種h細(xì)胞取決于培養(yǎng)基中加入的不同的分化誘導(dǎo)因子 2 將供體細(xì)胞核注入去核的卵母細(xì)胞 通常用顯微注射技術(shù) 若g是能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的羊 則培育g時(shí) 應(yīng)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胍浦驳墓w細(xì)胞核中 為了克服有性生殖會(huì)丟失目的基因的缺點(diǎn) 可通過(guò)核移植技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn) 即將g羊的體細(xì)胞核或胚胎細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞 經(jīng)過(guò)圖示過(guò)程 再形成轉(zhuǎn)入人生長(zhǎng)激素基因的克隆羊 3 如果圖中的細(xì)胞均是人體細(xì)胞 則獲得的h細(xì)胞或器官可用于供體本人組織器官的移植 由于是自身細(xì)胞克隆培養(yǎng)形成的器官 不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng) 4 上述過(guò)程中用到的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 核移植 胚胎移植 干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化等 答案 1 去核 卵母細(xì)胞胚胎干細(xì)胞不同的分化誘導(dǎo)因子 2 顯微注射技術(shù)移植的供體細(xì)胞核克隆 或核移植 3 不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng) 4 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 核移植 胚胎移植 干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化等 互動(dòng)探究 1 從d中取出細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí) 一般不超過(guò)幾代 為什么 提示 10代 10代以內(nèi)的細(xì)胞其細(xì)胞核型不會(huì)發(fā)生變化 2 此培養(yǎng)過(guò)程與植物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的形態(tài)有何不同 提示 此培養(yǎng)過(guò)程所用培養(yǎng)基一般是液體培養(yǎng)基 并加入動(dòng)物血清 解題金手指 1 防止丟失基因的方法 把目的基因整合到一對(duì)同源染色體上 若目的基因僅位于一條染色體上 在有性生殖中由于存在減數(shù)分裂 目的基因隨同源染色體的分開(kāi)而分離 配子中可能不存在目的基因 若目的基因在一對(duì)同源染色體上 可保證配子中有目的基因 無(wú)性生殖 由于無(wú)性生殖不存在減數(shù)分裂 所以不會(huì)出現(xiàn)目的基因丟失的情況 如克隆 植物組織培養(yǎng) 2 核移植的供體的判斷方法 核移植的供體 理論上是細(xì)胞核 但操作過(guò)程中可以把整個(gè)細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中 原因是體細(xì)胞體積相對(duì)較小 取核難度較大 另外細(xì)胞膜對(duì)核融合的障礙性較小 加固訓(xùn)練 1 下列哪一項(xiàng)屬于克隆 A 將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B 將抗藥菌的某基因?qū)氩萋南x(chóng)的細(xì)胞內(nèi)C 將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的B細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D 將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系 解析 選D A項(xiàng)敘述的是基因工程中DNA 基因 的重組過(guò)程 此過(guò)程中 沒(méi)有涉及DNA分子的復(fù)制 B項(xiàng)中是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過(guò)程 C項(xiàng)中 描述的是細(xì)胞融合的過(guò)程 也沒(méi)有細(xì)胞增殖過(guò)程 D項(xiàng)中 某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系 有細(xì)胞增殖 即屬于細(xì)胞水平上的克隆 2 如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病的過(guò)程圖解 請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題 1 圖中 所示的結(jié)構(gòu)名稱是 2 圖中 所示的生物技術(shù)名稱分別是 3 過(guò)程 通常用 作為受體細(xì)胞的原因是 4 圖示方法與一般的異體核移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是 該種基因治療所屬類型是 解析 1 是從供體 患者 體細(xì)胞分離出的細(xì)胞核 2 表示核移植技術(shù) 表示轉(zhuǎn)基因技術(shù) 3 早期胚胎中的細(xì)胞分化程度低 全能性高 可誘導(dǎo)分化成各種組織器官 4 圖示培育出的細(xì)胞 胰島B細(xì)胞 核遺傳物質(zhì)來(lái)自患者本人 所以移植后不發(fā)生免疫排斥反應(yīng) 圖中所示基因治療是體外轉(zhuǎn)基因 故所屬類型為體外基因治療 答案 1 細(xì)胞核 2 核移植技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù) 或基因工程 DNA重組技術(shù) 基因拼接技術(shù) 3 這些細(xì)胞分化程度極低 具有全能性 可以定向地誘導(dǎo)分化為各類細(xì)胞 4 沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)體外基因治療 考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1 植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 2 單克隆抗體的制備過(guò)程 高考警示 單克隆抗體制備過(guò)程中兩次篩選的目的不同 1 第一次篩選是選出雜交瘤細(xì)胞 篩選對(duì)象 未融合的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞 篩選方法 通過(guò)選擇培養(yǎng)基淘汰 篩選出B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞 即雜交瘤細(xì)胞 2 第二次篩選是選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 篩選方法 通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)選出 篩選原因 從體內(nèi)選取的免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞有很多種 因此形成的雜交瘤細(xì)胞也有很多種 所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 通關(guān)題組 1 單克隆抗體的特點(diǎn) 2014 安慶模擬 以綿羊紅細(xì)胞刺激小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞 再將后者與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞克隆群 由此篩選出的單克隆雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體 A 能識(shí)別綿羊整個(gè)紅細(xì)胞B 只識(shí)別綿羊紅細(xì)胞表面的特定分子C 能識(shí)別綿羊所有體細(xì)胞D 只識(shí)別綿羊所有體細(xì)胞表面的特定分子 解題指南 解答本題需理解單克隆抗體特異性強(qiáng)的含義 只能針對(duì)特定的抗原起作用 解析 選B 單克隆抗體具有特異性強(qiáng)的特點(diǎn) 只能針對(duì)特定的抗原 本題中的抗原是綿羊紅細(xì)胞表面的特定分子 并非整個(gè)紅細(xì)胞 也非其他體細(xì)胞 故B選項(xiàng)正確 2 單克隆抗體的制備過(guò)程 應(yīng)用 2014 徐州模擬 科學(xué)家已分離出H1N1病毒 一種RNA病毒 某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預(yù)防和治療甲型流感的抗體 請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題 1 若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞 則B細(xì)胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的細(xì)胞 促進(jìn)d過(guò)程的常用誘導(dǎo)劑是 2 假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合 則可形成種類型的C細(xì)胞 因此需用培養(yǎng)基篩選出 填特點(diǎn) 的D細(xì)胞用于培養(yǎng) D細(xì)胞的名稱是 3 理論上 注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期對(duì)甲型流感免疫 試分析原因 4 不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合 相比誘變育種和雜交育種方法 具有等突出的特點(diǎn) 5 請(qǐng)說(shuō)明單克隆抗體的主要用途 解題指南 解答本題需關(guān)注以下三點(diǎn) 1 題眼 H1N1病毒 2 解題思路 明確單克隆抗體的制備過(guò)程 3 解題關(guān)鍵 熟知RNA的變異性強(qiáng) 解析 1 由于本題的目的是制備用于預(yù)防和治療甲型流感的單克隆抗體 所以B細(xì)胞只能是取自感染H1N1病毒的動(dòng)物或人體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞 經(jīng)誘導(dǎo)劑聚乙二醇 PEG 或滅活的病毒等誘導(dǎo)融合 得到的雜交瘤細(xì)胞才能用于生產(chǎn)預(yù)防和治療甲型流感的單克隆抗體 2 僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合 則可形成A細(xì)胞 A細(xì)胞 B細(xì)胞 B細(xì)胞 A細(xì)胞 B細(xì)胞3種類型的C細(xì)胞 為了從中篩選出A細(xì)胞 B細(xì)胞 必須用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選 篩選出的D細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 3 因?yàn)閱捂淩NA容易發(fā)生變異 一旦變異后體內(nèi)的記憶細(xì)胞和抗體就不能對(duì)其發(fā)揮作用 4 不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合 相比誘變育種和雜交育種方法 具有目的性強(qiáng) 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性 能有效地打破物種的生殖隔離界限 等突出特點(diǎn) 5 單克隆抗體可用于診斷疾病 治療疾病和運(yùn)載藥物等 答案 1 B淋巴聚乙二醇 PEG 或滅活的病毒 2 3既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細(xì)胞 3 引起甲型流感的病毒不斷發(fā)生變異 意思相同即可 4 目的性強(qiáng) 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 能有效地打破物種的生殖隔離界限 意思相同即可 5 作為診斷試劑 用于治療疾病和運(yùn)載藥物 意思相同即可 互動(dòng)探究 1 若圖中A B細(xì)胞是植物細(xì)胞 則融合前需要如何處理 提示 利用纖維素酶和果膠酶去掉細(xì)胞壁 因?yàn)榧?xì)胞融合利用了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性的原理 細(xì)胞壁是細(xì)胞融合的障礙 2 體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)最后如何才能提取到單克隆抗體 提示 體外培養(yǎng)時(shí)從細(xì)胞培養(yǎng)液中提取 體內(nèi)培養(yǎng)則從小鼠腹水中提取 解題金手指 單克隆抗體的應(yīng)用 生物導(dǎo)彈 中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān) 藥物 單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置 借助其導(dǎo)向作用 在原位殺死癌細(xì)胞 這樣既不損傷正常細(xì)胞 又減少了用藥劑量 因此 生物導(dǎo)彈 可作為一種療效高 毒副作用小的新型藥物 加固訓(xùn)練 1 對(duì)于下面制備單克隆抗體過(guò)程示意圖 不正確的敘述是 A 表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 均是從小鼠的脾臟中提取的B 中的篩選是通過(guò)抗原 抗體反應(yīng)進(jìn)行的C 促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑D 可以無(wú)限增殖 解析 選A B淋巴細(xì)胞也可以從血液中提取 骨髓瘤細(xì)胞從骨髓中提取 而不能從脾臟中提取 如果要篩選 可以通過(guò)檢測(cè)抗原 抗體反應(yīng) 如果有反應(yīng)說(shuō)明表達(dá)了抗體 單克隆抗體是利用B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合得到的 融合方法有物理方法 電激 化學(xué)方法 聚乙二醇 和生物方法 滅活病毒 融合細(xì)胞具有雙親特點(diǎn) 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生單一抗體 2 科學(xué)家對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造 生產(chǎn)出效果更好的鼠 人嵌合抗體 用于癌癥治療 下圖表示形成鼠 人嵌合抗體的過(guò)程 請(qǐng)據(jù)圖回答 1 生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞 主要原因是 2 將注入小鼠體內(nèi) 從小鼠脾臟中獲得B淋巴細(xì)胞 其中至少1個(gè)B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗該抗原的抗體 3 改造鼠源雜交瘤抗體技術(shù) 生產(chǎn)鼠 人嵌合抗體 屬于 生物工程 的范疇 圖示過(guò)程是根據(jù)預(yù)期的 設(shè)計(jì) 最終必須對(duì)進(jìn)行操作 4 經(jīng)過(guò)改造的鼠 人嵌合抗體 與鼠源雜交瘤抗體相比較 突出的優(yōu)點(diǎn)是 解析 1 在體外培養(yǎng)條件下 B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生抗體 不能增殖 因此不能通過(guò)直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體 2 單克隆抗體制備時(shí) 需要先把抗原注入小鼠體內(nèi) 刺激其形成相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞 然后從小鼠的脾臟中把B淋巴細(xì)胞分離出來(lái) 與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞 3 從圖中看改造鼠源雜交瘤抗體技術(shù) 生產(chǎn)鼠 人嵌合抗體 屬于蛋白質(zhì)工程的范疇 4 因鼠 人嵌合抗體減少了鼠源成分 從而降低了鼠源性抗體引起的不良反應(yīng) 答案 1 B淋巴細(xì)胞不能增殖 2 抗原 3 蛋白質(zhì)工程嵌合抗體的功能嵌合抗體的結(jié)構(gòu)基因 4 對(duì)人體的不良反應(yīng) 或過(guò)敏反應(yīng)等副作用 減少 資源平臺(tái) 細(xì)胞株與細(xì)胞系1 含義 能夠傳代到40 50代的細(xì)胞叫做細(xì)胞株 細(xì)胞株細(xì)胞的遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變 當(dāng)細(xì)胞株細(xì)胞傳到50代以后 有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去 此種細(xì)胞叫細(xì)胞系 細(xì)胞系細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 具有癌變的特點(diǎn) 2 圖示 典例1 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中 出現(xiàn)癌變的細(xì)胞是 A 細(xì)胞系B 細(xì)胞株C 原代細(xì)胞D 傳代細(xì)胞 解析 選A 細(xì)胞株是一些分裂能力較強(qiáng)的正常細(xì)胞 其遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化 而細(xì)胞系則是一些具有癌變特征的細(xì)胞 具有無(wú)限增殖的能力 典例2 用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用 A 受精卵B 傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞C 傳代培養(yǎng)50代以后的細(xì)胞D 處于減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞 解析 選B 培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10 50代左右時(shí) 部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化 其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變 而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型 因此 在體細(xì)胞核移植中 為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ) 通常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞 1 2013 全國(guó)卷 關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述 錯(cuò)誤的是 A 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都要用到胰蛋白酶C 煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體 小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖D 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì) 莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒 解題指南 解答本題應(yīng)注意兩個(gè)不同 1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基 需加入動(dòng)物血清 植物組織培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基 2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的結(jié)果不同 植物組織培養(yǎng)既可獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 也可獲得所需個(gè)體 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般不能獲得個(gè)體 能獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 解析 選B 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的條件及有關(guān)細(xì)胞工程的應(yīng)用等知識(shí) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同 如動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基需加入動(dòng)物血清 而植物組織培養(yǎng)則不需要 A正確 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要加入胰蛋白酶 使組織細(xì)胞分散開(kāi)來(lái) 而植物組織培養(yǎng)則不需要胰蛋白酶 B錯(cuò)誤 植物組織培養(yǎng)可產(chǎn)生新個(gè)體 而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般不能得到個(gè)體 而是得到細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 C正確 把一定濃度的有毒物質(zhì)加入培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中 然后觀察染色體的變異情況可確定該有毒物質(zhì)的毒性 植物組織培養(yǎng)可培育脫毒植株 D正確 2 2014 馬鞍山模擬 下列關(guān)于動(dòng)物克隆的敘述 錯(cuò)誤的是 A 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的有限細(xì)胞株大多數(shù)具有異倍體核型B 細(xì)胞克隆可以從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系C 提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率需要以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)及激素刺激等條件D 核移植形成的重組細(xì)胞在初次分裂時(shí)核基因不轉(zhuǎn)錄 解析 選A 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的有限細(xì)胞株是生存期有限的不具有異倍體核型的細(xì)胞 細(xì)胞克隆可以從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系 提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率需要以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)及激素刺激等條件 核移植形成的重組細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備在重組前已完成 在初次分裂時(shí)核基因不轉(zhuǎn)錄 3 2013 浙江高考 實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng) 非克隆培養(yǎng) 的基本過(guò)程如圖所示 下列敘述錯(cuò)誤的是 A 甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B 乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化C 丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D 丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性 解題指南 解答本題需注意以下兩點(diǎn) 1 明確胰蛋白酶的作用 2 理解 異倍體核型 與 異質(zhì)性 的含義 解析 選C 本題綜合考查了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)操作過(guò)程和識(shí)記理解能力 A項(xiàng)中 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)毒 無(wú)菌的環(huán)境 甲過(guò)程指從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織 該過(guò)程需要對(duì)小鼠進(jìn)行消毒處理 故正確 B項(xiàng)中 乙過(guò)程表示將得到的皮膚組織分散成單個(gè)細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液 可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理 故正確 C項(xiàng)中 丙過(guò)程表示原代培養(yǎng) 此時(shí)的細(xì)胞仍能保持正常的二倍體核型 故錯(cuò)誤 D項(xiàng)中 丁過(guò)程表示傳代培養(yǎng) 期間部分細(xì)胞具有異質(zhì)性 故正確 加固訓(xùn)練 某研究小組為測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性 準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞 甲 和正常肝細(xì)胞 乙 進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 下列說(shuō)法正確的是 A 在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí) 也可用胃蛋白酶處理B 甲 乙的遺傳物質(zhì)相同C 甲 乙細(xì)胞在持續(xù)的原代培養(yǎng)過(guò)程中 乙會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D 僅用該培養(yǎng)液也能用來(lái)培養(yǎng)乙肝病毒 解析 選C 胃蛋白酶最適pH接近2 呈酸性 而細(xì)胞培養(yǎng)液的pH接近中性 所以不能用胃蛋白酶處理 腫瘤細(xì)胞的原癌基因和抑癌基因已經(jīng)發(fā)生基因突變 正常肝細(xì)胞由于存在細(xì)胞接觸抑制現(xiàn)象 在原代培養(yǎng)過(guò)程中 會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象 病毒在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖 不能用培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng) 4 2013 重慶高考 下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖 下列有關(guān)敘述 正確的是 A 是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B 中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C 同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D 是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群 解題指南 解答本題的關(guān)鍵是明確圖中各序號(hào)的含義 是效應(yīng)B細(xì)胞 漿細(xì)胞 過(guò)程是動(dòng)物細(xì)胞融合 是雜交細(xì)胞 過(guò)程是篩選雜交瘤細(xì)胞 解析 選D 本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程中的制備單克隆抗體 是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞 漿細(xì)胞 A項(xiàng)錯(cuò)誤 胰蛋白酶可使組織分散為單個(gè)細(xì)胞 B項(xiàng)錯(cuò)誤 為雜交細(xì)胞 若是漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞 才同時(shí)具有 效應(yīng) B淋巴細(xì)胞 可產(chǎn)生抗體 和骨髓瘤細(xì)胞 可無(wú)限增殖 的特性 C項(xiàng)錯(cuò)誤 是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 D項(xiàng)正確 5 2011 江蘇高考 關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述 錯(cuò)誤的是 A 蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B 體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體C 植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培養(yǎng) 解析 選B 克隆動(dòng)物應(yīng)用的是核移植技術(shù) 制備單克隆抗體應(yīng)用的是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) 莖尖分生能力強(qiáng) 病毒極少 甚至無(wú)病毒 以莖尖為外植體 通過(guò)植物組織培養(yǎng)可獲得無(wú)病毒植株 導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞 需通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得早期胚胎 才能進(jìn)一步培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 6 2014 淮南模擬 科研人員將抗癌藥物連接在單克隆抗體上制成 生物導(dǎo)彈 用于癌癥治療 生物導(dǎo)彈 由兩部分組成 一是 瞄準(zhǔn)裝置 二是 殺傷性彈頭 分析下列有關(guān)描述 其中不正確的是 A 瞄準(zhǔn)裝置 由識(shí)別腫瘤的單克隆抗體組成B 彈頭 由放射性同位素 化學(xué)藥物和毒素等物質(zhì)構(gòu)成C 彈頭 中的藥物有選擇殺傷腫瘤細(xì)胞的功能D 生物導(dǎo)彈 的制備應(yīng)用了細(xì)胞工程 解析 選C 藥物可以殺死細(xì)胞 無(wú)特異性與選擇性 但由于這種藥物是結(jié)合在特定抗體上 當(dāng)單克隆抗體與癌細(xì)胞特異性結(jié)合時(shí) 藥物就能夠殺死癌細(xì)胞 故 生物導(dǎo)彈 的選擇性功能是由單克隆抗體決定的 與藥物無(wú)關(guān)