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高中生物選修一DNA的粗提取與鑒定

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1、會計學1高中生物選修一高中生物選修一 DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定第1頁/共27頁第2頁/共27頁第3頁/共27頁第4頁/共27頁第5頁/共27頁第6頁/共27頁第7頁/共27頁第8頁/共27頁第9頁/共27頁第10頁/共27頁第11頁/共27頁第12頁/共27頁第13頁/共27頁第14頁/共27頁第15頁/共27頁第16頁/共27頁 提取DNA的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料,否則會由于實驗過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;第二步是DNA的釋放和溶解,這一步是實驗成功與否的關鍵,要盡可能使細胞內的DNA全部溶解;第三步是DNA的純化,即根據DNA的溶

2、解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與雜質分開;最后一步是對DNA進行鑒定,這是對整個實驗的結果的檢測。 1、請解釋提取DNA的實驗操作主要步驟的目的練習練習第17頁/共27頁2 2、你認為從細胞中提取某種特定的蛋、你認為從細胞中提取某種特定的蛋白質與提取白質與提取DNADNA一樣容易嗎?一樣容易嗎?答:提取蛋白質比提取DNA的難度大。這是因為,與DNA相比,蛋白質對溫度、鹽濃度、pH等條件要敏感得多,很容易失活;并且蛋白質的空間結構多種多樣,理化性質各不相同,使得蛋白質的提取沒有一種統(tǒng)一的方法,只能根據特定蛋白質的特性摸索提取的條件,設計特定的方法。第18頁/共27頁2

3、.實驗中NaCl的物質的量濃度為2 molL和0.14 molL對DNA有何影響?1.在DNA的粗提取實驗過程中,兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是( )。A.稀釋血液、沖洗樣品B.使血細胞破裂、降低NaCl濃度使DNA析出C.使血細胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血細胞破裂、提取含雜質較少的DNA答:B答:前者是溶解DNA,后者是使DNA析出第19頁/共27頁3.DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成( ) A.磚紅色 B.橘黃色 C.紫色 D.藍色4.提取雞血中的DNA時,為什么要除去血液中的上清液?答:DNA的提取,關鍵是對雜質的去除,由于上清液是血液中的血漿部分,不含DNA,所以要除去上清液(含有

4、蛋白質)。答:D第20頁/共27頁第21頁/共27頁為什么反復地溶解與析出DNA,能夠去除雜質? 1、用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質; 2、用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質。 因此,通過反復溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。 第22頁/共27頁本實驗中有三次過濾 ,分別有什么作用?第23頁/共27頁實驗中有五次用玻璃棒攪拌?分別有什么作用? 第24頁/共27頁方法步驟 加入物質 目的 1.制備雞血細胞液 檸檬酸鈉溶液 2.提取雞血細胞細胞核物質 20 m1蒸餾水 幻燈片 18 3.溶解細胞核內的DNA 2 m1L 的NaCI

5、溶液40mL 幻燈片 18 4.析出含DNA的黏稠物 蒸餾水 5.濾取含DNA的黏稠物 6.將DNA的黏稠物再溶解 2 molL 的NaCl溶液20 mL 7.過濾含DNA的NaCl 溶液 8.提取含有雜質較少的 DNA 冷卻的95的酒精50 mL 幻燈片 18 A:(1)向試管中加入0.015 molL 的NaCl溶液5mL (2)加入DNA (3)4 mL二苯胺試劑 9.DNA的鑒定 B:(1)向試管中加入0.015molL 的NaCl溶液5mL (2)4 mL二苯胺試劑 第25頁/共27頁加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細胞破裂 溶解DNA 使2mol/L的NaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得DNA最大限度地釋出 使含DNA的黏稠物被留在紗布上使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中除去含DNA的濾液中的雜質提取DNA A出現藍色 B無變化第26頁/共27頁

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