《肌紅蛋白測試標(biāo)準(zhǔn)操作流程》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《肌紅蛋白測試標(biāo)準(zhǔn)操作流程（4頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、肌紅蛋白測試標(biāo)準(zhǔn)操作流程 一實(shí)驗(yàn)組成 1實(shí)驗(yàn)儀器及器具： Mini VIDAS全自動(dòng)分析儀一臺、潔凈工作臺、低速離心機(jī)、20~200科l加樣器 2試劑盒組成: 3D MYO流條 STR 即用型： 30MYOSPR1 k30 SPR 即用型：SPR內(nèi)部用小鼠單克蛙抗肌紅蛋白免疫球蛋白涂層。 MYO質(zhì)控1 X 1 凍千） C1 用裝國水重新組成.靜置熱10分鐘.然后混合，在2.印C下重新 蛆成后14天內(nèi)穩(wěn)定.或者在-25 ±f匕下.在試劑盒上的有敕期之 前穩(wěn)定?可以蹴,溶四個(gè)周期〃 人血清?+人肌紅蛋白+防腐劑， 以用/I為單位的范圍指示在小瓶標(biāo)簽上. MYO校正液1

2、乂 1 ml （凍干） S1 用1間蒸涵水重新組成.靜置生10分鐘.然后混合，在2-8^C下重新 組成后14天內(nèi)穩(wěn)定,或者在-25 ± &C下.在試制盒上的有效期之 前穩(wěn)定：可以凍/海四個(gè)周期「 人血清?十人肌紅蛋白+防腐劑. 以由/1為單位的施國指示在小瓶標(biāo)簽上. MYO旗理劑1 x 5 ml］液體） R1 即用型：蛋白質(zhì)緩沖液（BSA） +防腐劑， MLE卡 需要含有工廠主校正數(shù)據(jù)的規(guī)格單來校正試胎上 一份說明書 MYO：齊IJ條說明：試齊IJ條上有 10個(gè)孔，用貼有標(biāo)簽的鋁箔密封 孔號 試劑 1 樣品孔a 2-3-4 空孔口 5 共桅物：緘性磷酸酹

3、標(biāo)記的多克隆抗肌紅蛋白免疫球蛋白（羊》+Q.9g/I疊氮化鈉（400 6-7-8 清洗緩沖液，Tris (0.01 mol/l, pH 7.6) +NaCl (Q.1 mol/l) + Tween (10%) + 0.9 g/1 疊鼠 化鈉(600 pl). 9 空孔. 10 具有底物的比色皿；磷酸4-甲基-傘形烷(0.6 mmol/l) + - 615^* (DEA) (0.625 mol/l or 6.6 %) pH 9 2 + 1 g/l 烏氮化銅(300 ⑶， 二實(shí)驗(yàn)原理 一步免疫分析夾心方法（sandwich ）和最后熒光檢測（ELFA 樣品被吸取到含有用堿性

4、磷酸酶（共扼物）標(biāo)記的抗肌紅蛋白抗體的孔中。樣品/共扼 物混合物在運(yùn)行中進(jìn)出固相包被針SP曝次。該操作使抗原結(jié)合到固定在固相包被針SPR內(nèi) 壁的免疫球蛋白上，并結(jié)合到共扼物上，以形成“夾心”。沒有結(jié)合的組分在沖洗步驟中清 除。在最后檢測步驟中，將底物（磷酸 4甲基-傘形烷）循環(huán)進(jìn)出固相包被針 SPR。共扼物 酶催化本底物水解成熒光產(chǎn)物（4-甲基傘形酮）。該產(chǎn)物的熒光在 450nm下測量。熒光強(qiáng) 度與樣品中出現(xiàn)的抗原的濃度成正比。分析結(jié)束的時(shí)候，由 正曲線，自動(dòng)計(jì)算結(jié)果，然后打印輸出 VIDASB據(jù)儲存在存儲器中的校 三 標(biāo)本 1 檢測樣本： 150 M血清或血漿（肝素鋰） 由

5、于EDT域檸檬酸鈉引起所測量的數(shù)值的下降，所以不可使用在EDT減檸檬酸鈉上采集 的血漿 2 影響因素 沒有發(fā)現(xiàn)下列因素對分析有顯著影響： （1）溶血（用血紅蛋白形成尖峰樣品（spiking ）之后：0到292科mol/l或0到470 mg/dl） （ 2）脂血癥 （ 在用脂質(zhì)形成尖峰樣品（ spiking ）之后：0到 30 g/ml ，等價(jià)于在三酸甘 油酯中 ） （3）膽血癥（在用膽紅素形成尖峰樣品（spiking ）之后：0到540 dmol/l） （ 4）肝素（最高達(dá)50IU/ml ） 但無論如何 , 建議不要使用明顯溶血、脂血癥、膽血癥的樣本，如可能的話，重新收集 樣

6、本。 四 操作程序 1標(biāo)準(zhǔn)曲線條碼（MLE）輸入 在每使用新一批試劑前，必須用每一試劑盒中都有的ML?。ㄒ?guī)格單）將規(guī)格（或工廠 主校正曲線數(shù)據(jù)）輸入儀器。步驟如下： （ 1）按 Master Lot Menu （2）放入MLE#片 （ 3）按 Read Master Lot （4）按履B 讀取完成后，儀器會(huì)自動(dòng)打印相應(yīng)信息 2 校準(zhǔn)曲線 當(dāng)新一批試劑開啟時(shí)， 在主批次數(shù)據(jù)(MLE卡片)輸入后，應(yīng)用試劑盒中的兩種校準(zhǔn)液執(zhí) 行校準(zhǔn)，然后每14天應(yīng)重新校正一次。 (1)按說明書溶解標(biāo)準(zhǔn)品 S1和質(zhì)控品C1 (2)按 Status Screen ,選擇 A^B (3)鍵盤輸

7、入位置1,按S,再鍵入1,回車(自動(dòng)跳到下一位置) (4)按s,鍵入1,回車 (5)重復(fù)以上步驟輸入C1后，回車 (6)屏幕顯示S1, S1, C1 (7)在機(jī)器中放入相應(yīng)試劑條和SPR并且加入上述校準(zhǔn)品 (8)開始測試 測試大約需要20min,結(jié)束后機(jī)器將自動(dòng)計(jì)算結(jié)果并打印 3標(biāo)本測試 (1)按 Status Screen , 選擇 A^ B (2)鍵盤輸入位置1,按sample id ,再鍵入標(biāo)本編號，回車(自動(dòng)跳到下一位置) (3)重復(fù)以上步驟 (4)輸入完成后，按返回鍵 (5)屏幕顯示已輸入的標(biāo)號 (6)在機(jī)器中放入相應(yīng)試劑條和SPR并且加入對于待測標(biāo)本 (7)開始測試 測試大約需要20min,結(jié)束后機(jī)器將自動(dòng)計(jì)算結(jié)果并打印 五結(jié)果判讀 1性能 檢測范圍5-1000 -g/l 檢測下限＜ 5」g/l 日內(nèi)重復(fù)性 在183因/l , CV 1.6%, 在346ug/l , CV3.2%, 在728 %/l , CV 3.0% 日間重復(fù)性 在183Mg/l , CV 3.3% 在 346ug/l, CV3.8%, 在728 Mg/l , CV 4.4% 2結(jié)果解釋 期望值：10-46.0 .g/l