《高考生物二輪復(fù)習(xí) 第1部分 專(zhuān)題講練突破 專(zhuān)題9 生物技術(shù)實(shí)踐 第18講 生物技術(shù)實(shí)踐》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高考生物二輪復(fù)習(xí) 第1部分 專(zhuān)題講練突破 專(zhuān)題9 生物技術(shù)實(shí)踐 第18講 生物技術(shù)實(shí)踐（22頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

專(zhuān)題九 生物技術(shù)實(shí)踐 第18講　生物技術(shù)實(shí)踐 [考綱熱度]1.微生物的分離和培養(yǎng)(5年17考)　　　　　 2.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用(5年10考) 3．利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法(5年18考) 4．植物的組織培養(yǎng)(5年13考) 5.從生物材料中提取某些特定的成分(5年11考) [診斷知識(shí)盲點(diǎn)] 1．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害。(√) 2．在配制培養(yǎng)基時(shí)，除滿(mǎn)足營(yíng)養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮pH、O2及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求。(√) 3．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。(√) 4．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則說(shuō)明篩選到分解尿素的細(xì)菌。() 5．條件適宜時(shí)醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸。(√) 6．在果酒發(fā)酵后期，打開(kāi)瓶蓋的間隔時(shí)間可延長(zhǎng)。(√) 7．在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí)，向發(fā)酵裝置通入空氣。() 8．果醋發(fā)酵包括無(wú)氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵。() 9．將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐裝瓶腌制時(shí)，底層和近瓶口處需加大用鹽量。() 10．果酒、果醋和腐乳的制作中，腐乳制作所需要的適宜溫度最高。() 11．在果酒自然發(fā)酵中，需人工添加酵母菌種。() 12．紅葡萄酒中的紅色是紅葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液產(chǎn)生的。(√) 13．變酸的酒的表面的菌膜是酵母菌大量繁殖形成的。() 14．在葡萄酒制作中，采摘的葡萄應(yīng)反復(fù)沖洗，且要先除枝梗再?zèng)_洗。() 15．制作腐乳的菌種只有毛霉。() 16．在腐乳制作過(guò)程中加入香辛料既能調(diào)節(jié)風(fēng)味，還具有防腐殺菌作用。(√) 17．在腐乳制作過(guò)程中，鹽的用量要適宜，酒的含量一般控制在12%左右。(√) 18．泡菜制作的菌種主要是醋酸菌。() 19．泡菜制作的前期通氧，后期應(yīng)嚴(yán)格厭氧。() 20．配制鹽水時(shí)，鹽與水的質(zhì)量比為4∶1。() 21．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞。() 22．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子。() 23．植物組織培養(yǎng)所需的外植體，可以來(lái)自于植物的任何細(xì)胞。() 24．植物組織培養(yǎng)應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行。(√) 25．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株。() 26．以花粉作為外植體可得到單倍體植株。(√) 27．不同階段的培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例不同。(√) 28．在剝離花藥時(shí)，不要損傷花藥，否則接種后不能脫分化形成愈傷組織。() 29．月季花藥培養(yǎng)時(shí)得到的都是單倍體植株。() 30．蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解下來(lái)，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油。() 31．原料易焦糊和有效成分易水解的植物芳香油的提取，不宜采用水中蒸餾法，宜采用壓榨法或萃取法。(√) 32．提煉玫瑰精油的玫瑰花應(yīng)在花開(kāi)的初期采取，因?yàn)榇穗A段的花含玫瑰精油最多。() 33．油水混合物中加入無(wú)水硫酸鈉，有利于分離油層。() 34．乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取。() 35．萃取的效率主要取決于萃取時(shí)的溫度和時(shí)間。() 36．新鮮的胡蘿卜含水量高，干燥時(shí)可采用高溫以節(jié)省時(shí)間。() 　> > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > 考點(diǎn)一　微生物的培養(yǎng)和利用 [高考領(lǐng)航] 1．(2016高考全國(guó)乙卷)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： ①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作無(wú)菌平板； ③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； ④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。 解析：(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來(lái)源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟②，需要進(jìn)行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。(2)該實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照組為不進(jìn)行處理的無(wú)菌平板，實(shí)驗(yàn)組的操作為將各無(wú)菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露相同時(shí)間。(3)若空白對(duì)照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象。空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)變量不唯一，不能確定實(shí)驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實(shí)驗(yàn)組的菌落平均數(shù)。 答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂　(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間　(3)污染　不正確 2．(2014高考新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是________________________；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)________滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 解析：(1)在涂布接種前，隨機(jī)選取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，不能留有雜菌。1 mL水稀釋100倍之后的0.1 mL中3個(gè)平板菌落的平均數(shù)為38，1 L等于1 000 mL，則1 L水中含有38101001 000＝3.8107。(2)用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，從上一次劃線末端開(kāi)始劃線，目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果應(yīng)為圖B。(4)振蕩可以使細(xì)菌分散，更有利于細(xì)菌利用培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且可以使培養(yǎng)液中的溶解氧增多。 答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 (3)B　(4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 3．(2014高考新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成______________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表)： 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無(wú)。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_____________________________________________________________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。用含有剛果紅的纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，由于纖維素被分解，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌菌落為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲未使用瓊脂，為液體培養(yǎng)基，不能用于分離單菌落。含有纖維素和剛果紅(CR)的固體培養(yǎng)基可分離和鑒別纖維素分解菌。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖　(2)紅　透明圈　(3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR—纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 [核心探究] 1．培養(yǎng)基中主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 2．無(wú)菌技術(shù)包括消毒和滅菌 (1)無(wú)菌技術(shù)的選擇原則：考慮效果和被操作對(duì)象的承受能力。 (2)實(shí)驗(yàn)操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 3．選擇微生物接種方法的原則 (1)純化微生物：平板劃線法和稀釋涂布平板法均可。 (2)計(jì)數(shù)微生物：只能選擇稀釋涂布平板法。 4．選擇培養(yǎng)基 對(duì)微生物具有選擇作用的培養(yǎng)基。 5．微生物的鑒定需要配制鑒別培養(yǎng)基 (1)分解尿素的細(xì)菌可使添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基變紅。 (2)纖維素分解菌可在含有剛果紅的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出周?chē)嬖谕该魅Φ木洹? [題點(diǎn)突破] 1．微生物培養(yǎng)與分離技術(shù)是生物學(xué)中重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。根據(jù)有關(guān)微生物的知識(shí)，分析回答問(wèn)題： (1)培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過(guò)計(jì)算、稱(chēng)量、溶化和B：________、A：________等過(guò)程，上述過(guò)程中需要在超凈工作臺(tái)上操作的是________。 (2)純化菌種時(shí)為得到單菌落，常采用的接種方法是平板劃線法和D：____________，其中需用接種環(huán)進(jìn)行操作的是____________。 (3)為達(dá)到篩選土壤中分解尿素細(xì)菌的目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一的________，培養(yǎng)基中加入________指示劑培養(yǎng)后，若變紅則其中含有所需細(xì)菌。若篩選纖維素分解菌，在選擇培養(yǎng)后須進(jìn)行E：________和F：________過(guò)程，一般通過(guò)觀察________的有無(wú)挑選出所需菌種。 解析：(1)培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過(guò)計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、[B]滅菌、[A]倒平板等過(guò)程，其中倒平板需要在超凈工作臺(tái)上操作。(2)常采用的微生物接種方法是平板劃線法和[D]稀釋涂布平板法。其中平板劃線法需用接種環(huán)進(jìn)行操作。(3)欲篩選土壤中分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素作為唯一的氮源，需要在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑進(jìn)行鑒定。若篩選纖維素分解菌，在選擇培養(yǎng)后須進(jìn)行[E]梯度稀釋→[F]涂布平板→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落等過(guò)程。 答案：(1)滅菌　倒平板　倒平板 (2)稀釋涂布平板法　平板劃線法 (3)氮源　酚紅　梯度稀釋　涂布平板　透明圈 2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，經(jīng)微生物分解后能更好地被植物利用。某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并成功篩選到能高效分解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示。將表中物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100 mL。實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO47H2O 0.2 g 葡萄糖 10 g 尿素 1 g 瓊脂 15 g 回答下列問(wèn)題： (1)該培養(yǎng)基能篩選出目的菌的原因是______________________。 (2)圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上接種時(shí)，可采用的方法是_____________。初步篩選出來(lái)的菌種還需要進(jìn)一步的鑒定：在培養(yǎng)基中加入________指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成________色，則可說(shuō)明該菌種能夠分解尿素。 (3)在實(shí)驗(yàn)中，下列材料或用具需要滅菌的是________，需要消毒的是________(填序號(hào))。 ①培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 ②玻棒、試管、錐形瓶和吸管 ③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 (4)在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約50個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約20個(gè)菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有________(填序號(hào))。 ①所取土樣不同　　　　 ②培養(yǎng)基被污染 ③接種操作錯(cuò)誤　　　　 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn) (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后，才能倒掉。 解析：(1)分析該培養(yǎng)基的成分表可知，尿素為該培養(yǎng)基中的唯一氮源，只有能利用尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。(2)接種微生物時(shí)，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法。能分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的pH升高，使酚紅指示劑變紅。所以，欲鑒定初步篩選出來(lái)的菌種，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，說(shuō)明該菌種能夠分解尿素。(3)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，為了防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、玻棒、試管、錐形瓶、吸管等進(jìn)行滅菌處理，即需要對(duì)①和②滅菌；需要對(duì)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手進(jìn)行消毒，即對(duì)③進(jìn)行消毒。(4)在實(shí)驗(yàn)時(shí)，如果取樣不同、培養(yǎng)基污染、操作失誤即①②③等都會(huì)導(dǎo)致分離篩選的菌落數(shù)多。(5)為了防止造成環(huán)境污染，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉。 答案：(1)尿素是唯一的氮源，只有能利用尿素的微生物才能生長(zhǎng) (2)平板劃線法或稀釋涂布平板法　酚紅　紅 (3)①和②　③ (4)①②③ (5)滅菌 考點(diǎn)二　傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 [高考領(lǐng)航] 1．(2016高考全國(guó)甲卷)蘋(píng)果醋是以蘋(píng)果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的。回答下列問(wèn)題： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過(guò)程①和②是蘋(píng)果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的________中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過(guò)程③在酵母菌細(xì)胞的________中進(jìn)行。與無(wú)氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類(lèi)型，該過(guò)程需要在________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過(guò)程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度________(填“低于”或“高于”)第二階段的。 (4)醋酸桿菌屬于____核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中_____(填“含有”或“不含有”)線粒體。 解析：(1)圖中過(guò)程①和②是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乙醇的過(guò)程，無(wú)氧呼吸的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。乙醇可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)，顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。過(guò)程③為有氧呼吸的第二和第三階段，場(chǎng)所為線粒體。在有氧條件下酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，產(chǎn)生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧條件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸桿菌是好氧型細(xì)菌，因此，在醋酸桿菌作用下，將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程需要在有氧條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過(guò)程中，第一階段酵母菌產(chǎn)生乙醇的適宜溫度為18～25 ℃，第二階段醋酸桿菌產(chǎn)生醋酸的適宜溫度為30～35 ℃，第一階段的溫度低于第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，原核細(xì)胞中的細(xì)胞器只有核糖體一種，不含線粒體。 答案：(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)　重鉻酸鉀　線粒體　快　(2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有 2．(2015高考廣東卷)泡菜是我國(guó)的傳統(tǒng)食品之一，但制作過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對(duì)人體健康有潛在危害，某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”，查閱資料得到下圖。 (1)制作泡菜時(shí)，泡菜壇一般用水密封，目的是________。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有________。 (2)據(jù)上圖，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因?yàn)楹笳達(dá)_______；pH呈下降趨勢(shì)，原因是________________。 (3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍)，擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度(4%～10%)，探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定其最適條件。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表，并推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論。 解析：(1)制作泡菜時(shí)，泡菜壇要選擇密封性好的容器，一般用水密封，以創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有丙酮酸、[H]和少量ATP。(2)第3天時(shí)，泡菜中亞硝酸鹽含量達(dá)到最高，在第8天后的泡菜中，亞硝酸鹽含量降到最低，故第8天后的泡菜更適于食用。乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的乳酸會(huì)導(dǎo)致pH下降。(3)設(shè)計(jì)的記錄表中要包含乳酸菌類(lèi)型、食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間等自變量，因變量為亞硝酸鹽的含量。通過(guò)相互對(duì)照確定用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定最適發(fā)酵條件。 答案：(1)創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵　丙酮酸、[H](少量ATP)　(2)亞硝酸鹽含量低　乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生了乳酸　 (3)兩種乳酸菌在泡菜腌制過(guò)程中亞硝酸鹽含量變化表 推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論：與普通乳酸菌相比，“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜時(shí)，相同條件下產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量低。 3．(2016高考全國(guó)丙卷)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)M(jìn)行梯度稀釋的理由是______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有________和________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20 ℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。 解析：(1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)@樣既可避免雜菌污染，又可將乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。(2)乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，加入碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝(無(wú)氧呼吸)過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和分離。(3)對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，裝入1 mL甘油后滅菌。將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20 ℃的冷凍箱中保存。 答案：(1)無(wú)菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落　(2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)　具有透明圈　(3)甘油 [核心探究] 1．傳統(tǒng)發(fā)酵食品的發(fā)酵類(lèi)型 (1)果酒制作和泡菜制作：無(wú)氧發(fā)酵，應(yīng)控制無(wú)氧條件。 (2)果醋制作和腐乳制作：有氧發(fā)酵；腐乳制作后期為無(wú)氧發(fā)酵。 2．發(fā)酵菌種類(lèi)型 (1)果酒制作和腐乳制作的發(fā)酵菌種：真菌。(真菌，細(xì)菌) (2)果醋制作和泡菜制作的發(fā)酵菌種：細(xì)菌。(真菌，細(xì)菌) 3．腐乳發(fā)酵的原理 毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將蛋白質(zhì)和脂肪分解為小分子有機(jī)物。 4．控制雜菌 包括發(fā)酵條件、鹽、酒和香辛料(調(diào)味料)等因素。 [題點(diǎn)突破] 1．根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的相關(guān)問(wèn)題： (1)當(dāng)________時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。 (2)在________條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)________色。 (3)下圖為腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題： ①圖中A代表________，其主要目的是_____________，同時(shí)還能________________。 ②在配制鹵湯中酒的含量一般控制在____________左右，酒精含量過(guò)高腐乳成熟時(shí)間將會(huì)________；酒精含量過(guò)低，________，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。 解析：在氧氣、糖源都充足的條件下，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。在腐乳制作過(guò)程中，在豆腐上長(zhǎng)出毛霉后需加鹽腌制，鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，還能抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中加酒需適量，酒精含量過(guò)高使腐乳成熟時(shí)間延長(zhǎng)，酒精含量低，不足以抑制微生物的生長(zhǎng)。 答案：(1)氧氣、糖源都充足 (2)酸性　灰綠 (3)①加鹽腌制　析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬　抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)　②12%　延長(zhǎng)　不足以抑制微生物的生長(zhǎng) 2．回答下列有關(guān)泡菜制作的問(wèn)題： (1)制作泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是____________。為了縮短制作時(shí)間，有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是________________。 (2)泡菜制作過(guò)程中，乳酸發(fā)酵的過(guò)程即為乳酸菌進(jìn)行________________的過(guò)程，該過(guò)程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的________中。 (3)泡菜制作過(guò)程中影響亞硝酸鹽含量的因素有________、________和________等。 (4)從開(kāi)始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長(zhǎng)規(guī)律是__________________，原因是__________________。 解析：(1)細(xì)菌分布廣泛，制作泡菜時(shí)，需要利用乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵，為防止雜菌污染，所用鹽水需要煮沸；加入陳泡菜液，可以增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸產(chǎn)生。(2)乳酸菌為原核生物，可進(jìn)行無(wú)氧呼吸將葡萄糖分解為乳酸，其無(wú)氧呼吸的過(guò)程發(fā)生在乳酸菌的細(xì)胞質(zhì)中。(3)在泡菜制作過(guò)程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量等。(4)由于乳酸菌比雜菌更為耐酸，所以在酸性環(huán)境中，乳酸菌能夠正常地增殖，而其他雜菌繁殖將受到抑制，所以在此過(guò)程中，乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少。 答案：(1)殺滅雜菌　增加乳酸菌數(shù)量 (2)無(wú)氧呼吸　細(xì)胞質(zhì) (3)溫度　腌制時(shí)間　食鹽用量 (4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少　乳酸菌比雜菌更為耐酸 考點(diǎn)三　植物組織培養(yǎng) [高考領(lǐng)航] (2014高考江蘇卷)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)_______。 (2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細(xì)胞干重在12 d后下降的原因有__________________；培養(yǎng)液中蔗糖的作用是________、________。 (3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)________處理，會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶和________酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞，合理的解釋是______________________、________________。 (4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù)，其原理與酵母細(xì)胞固定化類(lèi)似。下列說(shuō)法正確的有________(填序號(hào))。 ①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋?、诒仨氃诠庹諚l件下培養(yǎng)?、叟囵B(yǎng)過(guò)程中需通空氣　④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢 解析：本題考查植物組織培養(yǎng)、誘導(dǎo)染色體加倍、有絲分裂、細(xì)胞的固定化技術(shù)。(1)外植體在人工、無(wú)菌條件下，經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)由圖蔗糖濃度下降可知，外植體離體培養(yǎng)過(guò)程中需要消耗蔗糖，12天后蔗糖濃度較低；pH下降會(huì)影響酶的活性，愈傷組織細(xì)胞對(duì)物質(zhì)的合成少于分解，細(xì)胞干重下降。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，蔗糖既能維持一定的滲透壓，又能提供植物細(xì)胞生命活動(dòng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(能量)。(3)一定濃度的秋水仙素或低溫都可抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向兩極，從而使細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍。植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，可通過(guò)纖維素酶、果膠酶破壞細(xì)胞壁，從而使愈傷組織細(xì)胞分離。在用秋水仙素或低溫處理后，會(huì)出現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細(xì)胞，4n的細(xì)胞在有絲分裂后期著絲點(diǎn)分裂，染色體數(shù)目加倍至8n；8n的細(xì)胞在有絲分裂中期能清晰看出8n條染色體。(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，應(yīng)選用生長(zhǎng)旺盛的愈傷組織細(xì)胞。愈傷組織不能進(jìn)行光合作用，因此要通入無(wú)菌空氣確保其正常的生命活動(dòng)。細(xì)胞的固定化通常使用包埋法，由于包埋材料的影響，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴(kuò)散都受到一定的限制，所以固定化細(xì)胞生長(zhǎng)速度會(huì)變慢。 答案：(1)脫分化 (2)蔗糖濃度下降，pH降低　提供能源　調(diào)節(jié)滲透壓 (3)秋水仙素(低溫)　果膠　經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期　經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期 (4)①③④ [核心探究] 1．MS培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括 大量元素、微量元素和有機(jī)物，其主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為無(wú)機(jī)鹽。 2．植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié) 脫分化和再分化。 3．生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。 (1)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的使用順序不同，培養(yǎng)物的發(fā)育方向不同。 (2)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的用量比例影響培養(yǎng)物的發(fā)育方向。 4．植物組織培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌技術(shù) (1)培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌。 (2)外植體需要利用酒精和HgCl2消毒。 (3)接種要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 5．產(chǎn)生花粉植株的途徑 可通過(guò)愈傷組織或胚狀體兩種途徑。 6．鑒定花粉發(fā)育期的方法 醋酸洋紅法和焙花青—鉻礬法。 [題點(diǎn)突破] 1．用多倍體育種的方法培育三倍體無(wú)子西瓜，每年都要制種，很麻煩。某活動(dòng)小組同學(xué)們，想到了利用植物組織培養(yǎng)的方法來(lái)解決此難題。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。 (1)離體的組織和細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)基是________，其主要成分包括：大量元素、微量元素、有機(jī)物，還常常需要添加________；對(duì)培養(yǎng)基要進(jìn)行________滅菌。 (2)選取合適的外植體作為實(shí)驗(yàn)材料，接種前還要對(duì)其進(jìn)行________處理。為提高組織培養(yǎng)成功率，常選擇________的材料做外植體。 (3)如果外植體選取的材料為莖段，插入培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意________。培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)通過(guò)________形成愈傷組織，愈傷組織的特點(diǎn)是________________________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素。為了防止雜菌污染，配制好的培養(yǎng)基要采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。(2)為了防止外植體上的雜菌污染，接種前要對(duì)其進(jìn)行消毒處理。由于材料的年齡影響培養(yǎng)的成功率，因此通常選擇幼嫩的材料做外植體。(3)利用莖段做外植體，插入培養(yǎng)基時(shí)要注意不要倒插，否則不易形成愈傷組織。愈傷組織是外植體通過(guò)脫分化形成的，其特點(diǎn)是排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞。 答案：(1)MS固體培養(yǎng)基　植物激素　高壓蒸汽 (2)消毒　幼嫩(或答分裂能力強(qiáng)，分化程度低) (3)不能倒插　脫分化　排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞 2．如圖是花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，回答下列相關(guān)問(wèn)題： (1)通過(guò)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩種途徑，一種是花粉通過(guò)A________階段發(fā)育成植株，另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成B，再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑并沒(méi)有絕對(duì)的界限，主要取決于培養(yǎng)基中________________________________。 (2)誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低，受多種因素影響，其中主要的影響因素是________與________。提高誘導(dǎo)成功率的另一個(gè)重要因素是____________________。 (3)材料消毒過(guò)程中用到的試劑有________、0.1%的氯化汞溶液、無(wú)菌水。 (4)滅菌后的花蕾，要在________條件下接種到培養(yǎng)基上。培養(yǎng)過(guò)程中不需要光照，同時(shí)要控制好溫度。 (5)在花藥培養(yǎng)中，常常會(huì)出現(xiàn)____________的變化，因此需要對(duì)培養(yǎng)出來(lái)的植株做進(jìn)一步的________。 解析：(1)圖中A通過(guò)分化形成叢芽，則A應(yīng)為胚狀體。形成花粉植株兩條途徑的不同主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類(lèi)和濃度的配比。(2)誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低的主要影響因素是材料的選擇和培養(yǎng)基的組成。另外，選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期也是影響誘導(dǎo)成功率的另一個(gè)重要因素。(3)材料消毒用的試劑主要是70%的酒精、0.1%的氯化汞溶液和無(wú)菌水等。(4)植物組織培養(yǎng)的有關(guān)操作均需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。(5)在花藥培養(yǎng)中，常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化，因此需要對(duì)培養(yǎng)出的植株做進(jìn)一步的鑒定和篩選。 答案：(1)胚狀體　激素的種類(lèi)和濃度的配比 (2)材料的選擇　培養(yǎng)基的組成　選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期 (3)70%的酒精 (4)無(wú)菌 (5)染色體倍性　鑒定和篩選 考點(diǎn)四　植物芳香油的提取 [高考領(lǐng)航] 1．(2015高考全國(guó)卷Ⅰ節(jié)選)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問(wèn)題： (1)顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通常可用________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 解析：(1)油脂可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染液染成紅色，因此油脂通常用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染色。不易揮發(fā)的物質(zhì)大多采用萃取法進(jìn)行提取，水蒸氣蒸餾法一般用來(lái)提取易揮發(fā)的物質(zhì)。 答案：(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)　萃取法 2．(2015高考全國(guó)卷Ⅱ)回答與胡蘿卜素有關(guān)的問(wèn)題： (1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是________(填“α胡蘿卜素”、“β胡蘿卜素”或“γ胡蘿卜素”)，該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子________，后者缺乏會(huì)引起人在弱光下視物不清的病癥，該疾病稱(chēng)為_(kāi)_______，胡蘿卜素是________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。 (2)工業(yè)生產(chǎn)上，用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時(shí)，________(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。 (3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應(yīng)選用其中的______作為胡蘿卜素的萃取劑，不選用另外一種的理由是________________。 解析：(1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素有三類(lèi)，其中最主要的是β胡蘿卜素，β胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成維生素A，維生素A缺乏會(huì)導(dǎo)致夜盲癥。胡蘿卜素是非揮發(fā)性物質(zhì)。(2)胡蘿卜素的提取一般采用萃取法，萃取前需要對(duì)材料進(jìn)行干燥處理，以提高萃取的效率。(3)萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有很高的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶，如乙酸乙酯。乙醇是水溶性有機(jī)溶劑，因萃取過(guò)程中能與水混溶而影響萃取效果，所以不用它作萃取劑。 答案：(1)β胡蘿卜素　維生素A　夜盲癥　非揮發(fā)性 (2)需要 (3)乙酸乙酯　萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)不與水混溶，而乙醇為水溶性有機(jī)溶劑 [核心探究] 1．依據(jù)植物有效成分的特性選擇提取方法 (1)提取揮發(fā)性強(qiáng)的植物芳香油：蒸餾法。 (2)提取易溶于有機(jī)溶劑的植物有效成分：萃取法。 (3)提取原料中含量高的植物有效成分：壓榨法。 2．物質(zhì)分離的方法 (1)分離油水混合物可以采用分液的方法。 (2)除去壓榨液中的固體物和殘?jiān)ǔ２捎眠^(guò)濾的方法。 (3)除去液體中質(zhì)量較小的固體殘留物通常采用離心的方法。 (4)除去芳香油中的殘留水分常采用加入無(wú)水硫酸鈉后過(guò)濾的方法。 (5)除去不易揮發(fā)的植物有效成分中的有機(jī)溶劑常采用蒸餾法。 [題點(diǎn)突破] 1．生物組織中存在多種有機(jī)物，不同的有機(jī)物其提取與鑒定方法不盡相同。根據(jù)所學(xué)知識(shí)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)采用蒸餾法提取玫瑰精油時(shí)，向初步提取的乳化液中加入________________，作用是______________________。 (2)采用壓榨法提取橘皮精油時(shí)，提取之前需用________浸泡，以提高出油率。為了使橘皮油易與水分離，還要分別加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的________和5%的________，并調(diào)節(jié)pH至7～8。 (3)采用萃取法從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的主要步驟為粉碎、干燥、萃取、________、________。干燥時(shí)，要注意控制________，否則會(huì)引起胡蘿卜素的分解；萃取的效率主要取決于萃取劑的________，同時(shí)還受原料顆粒的大小、含水量等條件的影響；在對(duì)提取的胡蘿卜素粗品通過(guò)紙層析法進(jìn)行鑒定時(shí)，應(yīng)與____________作對(duì)照。 解析：(1)用蒸餾法提取玫瑰精油時(shí)，獲得的乳化液是油水混合物，需要加入NaCl以增加鹽的濃度，促進(jìn)油水分層。(2)采用壓榨法提取橘皮精油時(shí)，提取之前需用石灰水浸泡，以除去果膠、果蠟，提高出油率。為了使橘皮油易與水分離，還要分別加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，并調(diào)節(jié)pH至7～8。(3)采用萃取法從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的主要步驟為粉碎、干燥、萃取、過(guò)濾、濃縮。干燥時(shí)，由于溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素的分解，因此要注意控制溫度和時(shí)間。萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，同時(shí)還受原料顆粒的大小、含水量等條件的影響；在對(duì)提取的胡蘿卜素粗品通過(guò)紙層析法進(jìn)行鑒定時(shí)，應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照。 答案：(1)NaCl　增加鹽的濃度，有利于油水分層 (2)石灰水　NaHCO3　Na2SO4 (3)過(guò)濾　濃縮　溫度和時(shí)間　性質(zhì)和使用量　標(biāo)準(zhǔn)樣品 2．下列是與芳香油提取相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答： (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有___________的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液________(填“是”或“不是”)純的玫瑰精油，原因是______________ ________________________________________________________________________。 (2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過(guò)程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和________。 (3)如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則精油提取量會(huì)________，原因是______________。 (4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度________的地方，目的是_______。 解析：(1)易揮發(fā)的植物精油能與水蒸氣一起蒸餾，不溶于水的植物精油易與水分離，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的精油才能在蒸餾時(shí)不會(huì)被分解，因此只有易揮發(fā)、難溶于水且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的植物精油才適合用蒸餾法提取。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液是油水混合物，而不是純的玫瑰精油。(2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾時(shí)間和蒸餾溫度是影響精油提取量的主要因素。(3)如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則部分精油會(huì)揮發(fā)掉，從而使提取量下降。(4)由于溫度越高，玫瑰精油的揮發(fā)速度越快，因此密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度較低的地方以減少揮發(fā)。 答案：(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定　不是　玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物 (2)蒸餾溫度 (3)下降　部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失 (4)較低　減少揮發(fā) 限時(shí)規(guī)范訓(xùn)練 (建議用時(shí)：40分鐘) 1．如圖是植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題： 外植體愈傷組織長(zhǎng)出叢芽生根移栽成活 (1)外植體若是菊花莖段組織，則在配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，________(填“必需”或“不必”)添加植物激素。 (2)外植體若是月季的花藥，則圖中的①過(guò)程________(填“需要”或“不需要”)光照，而經(jīng)②③④過(guò)程培養(yǎng)出的植物一般稱(chēng)為_(kāi)_______植株。該植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以是花粉通過(guò)________階段發(fā)育而來(lái)。 (3)外植體若是菊花的根尖組織，則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是________，該過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有________。 (4)植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂和分化的關(guān)鍵性激素，在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中：①若先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是細(xì)胞__________。②當(dāng)同時(shí)使用這兩種激素時(shí)，生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”、“低”或“適中”)時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。 解析：(1)由于菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此在配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，不必添加植物激素。(2)圖中的①過(guò)程表示脫分化，花藥培養(yǎng)的脫分化過(guò)程中不需要光照。通過(guò)花藥離體培養(yǎng)獲得的是單倍體植株。該植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以是花粉通過(guò)胚狀體階段發(fā)育而來(lái)。(3)外植體若是菊花的根尖組織，由于植物細(xì)胞具有全能性，根尖細(xì)胞具有全套的遺傳物質(zhì)，則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是綠色。(4)①植物中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)，分化頻率高。在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，若先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是細(xì)胞既分裂也分化。②生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量，比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化，抑制根的形成；比例適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。 答案：(1)不必　(2)不需要　單倍體(花粉)　胚狀體　(3)綠色　全能性　(4)①既分裂也分化　②適中 2．辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖： (1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的________和________過(guò)程。 (2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時(shí)，有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí)，應(yīng)采取的滅菌方法是____________。 (3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是________。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí)，常用的酶是________和纖維素酶。 (4)提取辣椒素過(guò)程中，萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是_____________。 解析：(1)將外植體培養(yǎng)成愈傷組織，屬于脫分化過(guò)程，再生根、芽為再分化過(guò)程。(2)固體培養(yǎng)基的凝固劑多為瓊脂。利于芽分化的激素比例為生長(zhǎng)素低于細(xì)胞分裂素，高壓蒸汽滅菌可以殺死環(huán)境中的一切細(xì)胞、芽孢、孢子。(3)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精可以殺死外植體表面的微生物。植物細(xì)胞間質(zhì)為果膠和纖維素，可以用果膠酶和纖維素酶使愈傷組織分散為單個(gè)細(xì)胞。(4)冷凝可以防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)。 答案：(1)脫分化(或去分化)　再分化 (2)瓊脂　低　高壓蒸汽滅菌 (3)70%　果膠酶　(4)防止有機(jī)溶劑的揮發(fā) 3．如圖表示金花茶莖段的離體培養(yǎng)過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)金花茶組織培養(yǎng)利用的原理是____________，常用的一種培養(yǎng)基是________。在該培養(yǎng)基配制好后，常需要添加________。 (2)在接種前需要對(duì)金花茶莖段進(jìn)行________。為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，檢測(cè)的方法是將未接種的培養(yǎng)基________。若用金花茶的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)，從花粉粒的選擇上看，應(yīng)選擇________期的花粉粒為宜。 (3)某人在探究植物激素對(duì)細(xì)胞脫分化和再分化的影響實(shí)驗(yàn)時(shí)，得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果：①只有細(xì)胞分裂素時(shí)，組織塊產(chǎn)生愈傷組織；②細(xì)胞分裂素＝生長(zhǎng)素時(shí)，愈傷組織不分化；③細(xì)胞分裂素>生長(zhǎng)素時(shí)，愈傷組織分化出芽；④細(xì)胞分裂素<生長(zhǎng)素時(shí)，愈傷組織分化出根。 由實(shí)驗(yàn)結(jié)果，你能得出的結(jié)論是______________________________________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)利用的原理是植物細(xì)胞的全能性，其常用的一種培養(yǎng)基是MS固體培養(yǎng)基。在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素，其中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。(2)接種前，需要對(duì)莖段(外植體)進(jìn)行消毒處理。為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，可將未接種的培養(yǎng)基在適宜環(huán)境中放置一段時(shí)間，并觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)，若有則證明培養(yǎng)基滅菌不徹底。一般來(lái)說(shuō)，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)，花粉培養(yǎng)成功率最高。單核期以前的花藥質(zhì)地幼嫩，極易破碎；單核期以后的花藥所在植株的花瓣已有些松動(dòng)，材料不易消毒。(3)根據(jù)結(jié)果①，可知細(xì)胞分裂素可調(diào)節(jié)組織塊產(chǎn)生愈傷組織；根據(jù)結(jié)果②③④，可知細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素含量不同，調(diào)節(jié)愈傷組織的分化方向不同。 答案：(1)植物細(xì)胞的全能性　MS固體培養(yǎng)基 　植物激素　(2)消毒　在37 ℃恒溫箱中放置24小時(shí)(或在適宜溫度下放置一段時(shí)間)后，觀察是否有菌落出現(xiàn)　單核　(3)植物激素的種類(lèi)和含量不同，對(duì)愈傷組織的形成和分化的影響不同 4．請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問(wèn)題： (1)提取植物芳香油時(shí)可采用的方法有萃取法、________和________。 (2)玫瑰油被稱(chēng)為“液體黃金”，是世界香料工業(yè)中不可取代的原料，多用于制造高級(jí)香水等化妝品。下圖表示提取玫瑰油的流程，其中A表示________；B表示________，其中加入NaCl的作用是__________________________。 (3)植物芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于________，易溶于________，因此可用其作為提取劑來(lái)提取植物芳香油。 (4)檸檬油是一種廣譜性的殺蟲(chóng)劑，通常以檸檬花與檸檬果皮為原料進(jìn)行提取，但方法不同，其中以檸檬果皮為原料時(shí)常采用________法提取檸檬油。 解析：(1)提取植物芳香油時(shí)可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。(2)因?yàn)樗头枷阌头悬c(diǎn)不同，可利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新分出油層和水層，因此，一般采用的提取玫瑰油的方法是水蒸氣蒸餾法。A表示水蒸氣蒸餾，B表示無(wú)水硫酸鈉，加入NaCl會(huì)增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層。(3)植物芳香油不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑。(4)以檸檬果皮為原料時(shí)常采用壓榨法。 答案：(1)蒸餾法　壓榨法(兩空答案順序可顛倒)　(2)水蒸氣蒸餾　無(wú)水硫酸鈉　增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層　(3)水　有機(jī)溶劑　(4)壓榨 5．回答下列有關(guān)從生物材料中提取某些特定成分的問(wèn)題： (1)薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，因此適合選用________法來(lái)提取。用此方法收集到的液體________(是/不是)純的薄荷油，原因是_________________。在此過(guò)程中，影響薄荷油提取量的主要因素有________和________。 (2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是________法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、萃取、________、________。 (3)如圖是某同學(xué)對(duì)萃取的胡蘿卜素樣品所做的鑒定實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。圖中實(shí)驗(yàn)組是________，實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論是________。 解析：(1)薄荷油和玫瑰精油都是芳香油，易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，因此可用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行提取。由于薄荷油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物，不是純的薄荷油。蒸餾溫度太高、時(shí)間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。(2)胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑，可用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，步驟是：粉碎→干燥→萃取→過(guò)濾→濃縮。(3)胡蘿卜素萃取后溶于有機(jī)溶劑，圖中實(shí)驗(yàn)組是B、C，對(duì)照組是A、D。 答案：(1)水蒸氣蒸餾　不是　薄荷油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物　蒸餾時(shí)間　蒸餾溫度 (2)萃取　過(guò)濾　濃縮 (3)B、C　萃取樣品中不含β胡蘿卜素 6．將植物中的有效成分提取出來(lái)，有很多用途，可顯著提高其利用價(jià)值。請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答： (1)許多植物芳香油的提取在原理和程序上具有相似性，某同學(xué)結(jié)合玫瑰精油的提取，設(shè)計(jì)提取茉莉油的實(shí)驗(yàn)流程如下： 茉莉花＋水→A→油水混合物→B→加C→D→茉莉油 流程圖中的A表示______過(guò)程，B過(guò)程常需要用到的儀器是______，C物質(zhì)是______，加C的目的是____________________________。茉莉油的提取能否采用這一流程進(jìn)行生產(chǎn)，應(yīng)該考慮茉莉油是否像玫瑰油一樣具有較強(qiáng)的________，還應(yīng)考慮茉莉花在水中蒸餾是否會(huì)出現(xiàn)________________________等問(wèn)題。 (2)辣椒素的提取與胡蘿卜素的提取有類(lèi)似之處。可采用萃取法進(jìn)行提取。提取時(shí)若需要加熱，應(yīng)采用水浴加熱的方法，原因是______________________________；加熱時(shí)，還要在瓶口安裝冷凝回流裝置，其目的是____________________。 解析：(1)玫瑰精油的提取方法為水蒸氣蒸餾法。流程圖中的A過(guò)程為水蒸氣蒸餾過(guò)程。蒸餾獲得的油水混合物需借助分液漏斗分離油層和水層。油水分層后需用無(wú)水Na2SO4除水。水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油的原理是利用了植物芳香油所具有的揮發(fā)性，隨水蒸氣一起蒸餾，但是對(duì)原料易焦糊和有效成分易水解的植物芳香油則不能用該方法提取。(2)用有機(jī)溶劑萃取時(shí)，由于有機(jī)溶劑易揮發(fā)，且易燃易爆，因此不能直接使用明火加熱，應(yīng)采用水浴加熱的方法，否則容易引起燃燒、爆炸。萃取時(shí)冷凝回流裝置的作用是防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)。 答案：(1)水蒸氣蒸餾　分液漏斗　無(wú)水Na2SO4　除水　揮發(fā)性　原料焦糊和有效成分水解　(2)有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸　防止有機(jī)溶劑的揮發(fā) 7．自印度科學(xué)家培養(yǎng)曼陀羅花藥獲得單倍體植株后，花藥離體培養(yǎng)技術(shù)迅速發(fā)展，據(jù)記載，現(xiàn)在已經(jīng)有250多種高等植物的花藥培養(yǎng)成功。 (1)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的使用順序和用量會(huì)影響到植物細(xì)胞的發(fā)育方向。如為了有利于細(xì)胞分裂而不分化，兩種激素的使用順序?yàn)椋? ________________________________________________________________________。 花粉植株產(chǎn)生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成___。 (2)進(jìn)行月季花藥離體培養(yǎng)一般選擇在五月初到五月中旬。對(duì)于花粉而言，要采用____期的花粉，為了鑒定該時(shí)期的花粉，常采用醋酸洋紅法進(jìn)行染色鑒定。若是某些植物花粉細(xì)胞不易著色，常采用________法染色，能將花粉的細(xì)胞核染成________色。 (3)消毒后的花蕾，在無(wú)菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時(shí)，盡量不