《TAHFIA 004-2018 食品中總皂苷含量的測定 分光光度法.doc》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《TAHFIA 004-2018 食品中總皂苷含量的測定 分光光度法.doc（5頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

T/AHFIA 安徽省食品行業(yè)協(xié)會團體標準 T/AHFIA 004—2018 ????? 食品中總皂苷含量的測定 分光光度法 Determination of total saponins in Food Spectrophotometric method 2019 - 01 - 15實施 ??安徽省食品行業(yè)協(xié)會??????發(fā)布 2018 - 12 - 26發(fā)布 T/AHFIA 004—2018 前??言 本標準按照 GB/T 1.1-2009 給出的規(guī)則起草。 本標準由安徽省食品行業(yè)協(xié)會提出并歸口。 本標準起草單位：安徽瑞思威爾科技有限公司、安徽古井貢酒股份有限公司、安徽潤安信科檢測科技有限公司。 本標準主要起草人：李安軍、王錄、劉國英、陸瑋、芮君君、劉智慧、何宏魁、楊恩賀。 I T/AHFIA 004—2018 食品中總皂苷含量的測定 分光光度法 A 1 范圍 本標準規(guī)定了食品中總皂苷含量的測定 分光光度法。 本標準適用于食品中總皂苷含量的測定。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法 3 方法原理 本標準采用香草醛高氯酸分光光度法測定總皂苷含量。皂苷在強氧化性酸的作用下脫氫，再與香草醛加成顯色，形成特征的紫紅色化合物。在一定濃度范圍內(nèi)，吸光度與皂苷類化合物的含量成正比，符合朗伯-比爾定律。 4 試劑與材料 4.1 試劑 4.1.1 無水乙醇：分析純。 4.1.2 香草醛：分析純。 4.1.3 冰醋酸：分析純。 4.1.4 高氯酸：分析純。 4.1.5 XAD-2大孔樹脂：純度≥98%。 4.1.6 無水氧化鋁：分析純。 4.1.7 水為符合 GB/T 6682 規(guī)定的一級水。 4.2 試劑配制 4.2.1 香草醛冰醋酸溶液（5%）：精確稱取5 g（精確至0.0001 g）香草醛，用冰醋酸溶解定容至100 mL。 4.2.2 乙醇溶液（70%）：量取700 mL無水乙醇，用水溶解定容至1000 mL。 4.3 標準品 人參皂苷（Re，CAS號：52286-59-6），純度≥ 99.0%。 4.4 人參皂苷Re標準溶液配制 準確稱取20 mg（精確至0.1 mg）Re標準品，用70%乙醇溶解定容至50 mL，此溶液中人參皂苷含量為400 mg/L。于4℃冰箱中避光保存。 5 儀器與設(shè)備 5.1 紫外可見分光光度計：配1 cm比色皿。 5.2 分析天平：感量0.1 mg。 5.3 電熱恒溫水浴鍋：0℃~100℃。 5.4 玻璃層析柱：10 mm*40 cm（內(nèi)徑*長度）。 6 分析步驟 6.1 試樣制備 6.1.1 固體試樣 稱取粉碎均勻的固體試樣5 g（精確至0.0001 g）于100 mL燒杯中，加入30 mL70%乙醇溶液，超聲30min，用70%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶。離心至澄清，過濾備用。 6.1.2 液體試樣 精確吸取5.0 mL液體試樣于50 mL容量瓶中，用70%乙醇溶液定容，搖勻，備用。當稀釋后的試樣基質(zhì)較復(fù)雜時，需過濾至澄清液備用。 6.2 樣品提取 6.2.1 層析柱的預(yù)處理 取適量樹脂于燒杯中，使用無水乙醇浸泡至覆蓋樹脂2.5 cm~5 cm，緩慢攪拌樹脂1min以充分混合，靜置2 h。倒出乙醇，用蒸餾水沖洗，直至無醇味。然后再用等量的無水乙醇洗滌，充分混合靜置20min，再用蒸餾水洗至無醇味。對活化后的樹脂進行分裝，每份樹脂質(zhì)量為5 g，備用。 6.2.2 樣品純化 精確吸取2.0 mL制備的試樣加入5 g（精確至0.0001 g）活化后的樹脂中，搖勻，靜置30min。將加樣后的樹脂移入層析柱中，上加2 g（精確至0.0001 g）無水氧化鋁，用30 mL水洗柱，棄去洗脫液，再用30 mL70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，于60℃水浴揮干。 6.3 測定 6.3.1 儀器條件 6.3.1.1 測定波長：545 nm。 6.3.1.2 比色皿：1 cm。 6.3.2 標準曲線的制作 準確吸取人參皂苷標準溶液（4.4）0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 mL分別置于蒸發(fā)皿中，于60℃水浴揮干，加入0.4 mL5%香草醛冰醋酸溶液（4.2.1），轉(zhuǎn)動蒸發(fā)皿，使殘渣溶解，再加入1.6 mL高氯酸（4.1.4），混勻后移入10 mL比色管中，70℃水浴上加熱20min，取出，冰浴冷卻2min，準確加入5.0 mL冰醋酸（4.1.3），搖勻后，以1 cm比色皿于545 nm波長處測定其吸光度。以皂苷質(zhì)量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。 6.3.3 試樣溶液的測定 在6.2.2樣品純化后的蒸發(fā)皿中加入0.4 mL5%香草醛冰醋酸溶液（4.2.1），轉(zhuǎn)動蒸發(fā)皿，使殘渣溶解，再加入1.6 mL高氯酸（4.1.4），混勻后移入10 mL比色管中，70℃水浴上加熱20min，取出，冰浴冷卻2min，準確加入5.0 mL冰醋酸（4.1.3），搖勻后，在30min內(nèi)以1 cm比色皿于545 nm波長處測定其吸光度。 7 分析結(jié)果表述 試樣中總皂苷的含量用質(zhì)量分數(shù)X表示，單位為百分率（%），按式（1）計算： ……（1） 式中： m1 ——由標準曲線計算得出的待測液中總皂苷的質(zhì)量，單位為毫克（mg）； V1——制備試樣的體積，單位為毫升（mL）； m2 ——樣品的質(zhì)量，單位為克（g）； V2 ——純化試樣的體積，單位為毫升（mL）。 所得結(jié)果應(yīng)保留至小數(shù)點后一位。 8 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。 B _________________________________ _______________________________ 3